CN106814059B - Sers活性液滴、制备方法及分子检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种SERS活性液滴、制备方法及分子检测方法，具体地说是一种基于烛灰纳米颗粒结构的SERS活性液滴、SERS活性液滴的制备方法及利用所述SERS活性液滴的分子检测方法，属于SERS检测的技术领域。按照本发明提供的技术方案，所述SERS活性液滴，包括液滴体以及由所述液滴体富集的若干具有SERS活性的金属纳米复合颗粒，所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒位于液滴体内或附着于液滴体的表面；所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒包括金属纳米颗粒体。本发明能实现吸收、富集金属纳米颗粒的能力，能避免现有SERS分子检测时对聚焦的苛刻要求，可以方便进行转移，提高测试的便捷性，制备工艺简单，可控性强，适用范围广，安全可靠。

Description

SERS活性液滴、制备方法及分子检测方法

技术领域

本发明涉及一种活性液滴及利用活性液滴的分子检测方法，尤其是一种SERS活性液滴、制备方法及分子检测方法，具体地说是一种基于烛灰纳米颗粒结构的SERS活性液滴、SERS活性液滴的制备方法及利用所述SERS活性液滴的分子检测方法，属于SERS检测的技术领域。

背景技术

拉曼散射光谱的检测技术是一种不需要对待检测样品进行标记的物质结构分析手段，具有非破坏性、无需接触等特点。随着激光技术和弱信号探测接收技术的发展，作为一种可实现物质结构分子水平检测的手段，拉曼散射光谱检测技术有望在生物检测、疾病诊断、食品安全检测、环境监测、化学分析等领域获得实际和广泛的应用。

表面增强拉曼散射（SERS）是指在激光作用下，使用贵金属纳米结构来增强局域电磁场强度，使得贵金属纳米结构表面附近所附着分子的拉曼散射光谱信号强度得到放大，从而实现对痕量分子的探测的一种技术。

目前，多采用基于纳米粗糙表面或纳米结构的SERS基底，以增强拉曼散射信号的强度。已报道的SERS基底的制备方法主要有溶胶颗粒法、金属电极的电化学湿法腐蚀技术、金属纳米小球蚀刻技术、自催化VLS化学合成生长技术、电子束光刻、聚焦离子束刻蚀以及其它物理化学刻蚀法等等，这些技术在工艺复杂性或工艺可控性等方面或多或少都存在问题，难以实现大规模的商业化生产。

另外，采用上述SERS基底进行分子检测时，被测试剂溶液在基底上首先需要完成蒸发，使被测试剂以固态的形式遗留在基底表面，才可以顺利完成测试。而当被测试剂以液态形式附着于基底表面时，入射激光需要精确聚焦在液体-基底的界面上才可以实现测量。然而液体有着一定的高度，且其轮廓呈特定的弧度变化，所以激光的精确聚焦存在较大的难度。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种SERS活性液滴、制备方法及分子检测方法，其能实现吸收、富集金属纳米颗粒的能力，能避免现有SERS分子检测时对聚焦的苛刻要求，可以方便进行转移，提高测试的便捷性，制备工艺简单，可控性强，适用范围广，安全可靠。

按照本发明提供的技术方案，所述SERS活性液滴，包括液滴体以及由所述液滴体富集的若干具有SERS活性的金属纳米复合颗粒，所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒位于液滴体内或附着于液滴体的表面；所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒包括金属纳米颗粒体。

所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒还包括包覆在金属纳米颗粒体内的烛灰纳米颗粒，所述金属纳米颗粒体的材料包括金、银、铜或铂。

所述液滴体包括水滴、油滴，或以水、油为溶剂的溶液液滴。

一种SERS活性液滴的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

步骤1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底以及位于所述液滴衬底上的金属纳米层；

步骤2、在液滴衬底上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层上包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴。

所述步骤1中，具体包括如下步骤：

步骤1.1、提供液滴衬底，并在所述液滴衬底上制备具有超疏水和超疏油特性的烛灰纳米颗粒层；

步骤1.2、在上述液滴衬底上设置金属纳米层，所述金属纳米层位于烛灰纳米颗粒层上，烛灰纳米颗粒层上与金属纳米层接触的烛灰纳米颗粒与金属纳米层内的金属纳米颗粒体配合形成具有SERS活性的金属纳米复合颗粒，其中，烛灰纳米颗粒包裹在金属纳米颗粒体内。

所述液滴衬底包括硅片、玻璃片、载玻片、塑料或柔性衬底；金属纳米层的材料包括金、银、铜或铂，金属纳米层通过溅射、蒸发或喷涂方式淀积得到。

所述烛灰纳米颗粒层利用蜡烛的火焰熏镀制备在液滴衬底上，或收集烛灰纳米颗粒，并将收集的烛灰纳米颗粒设置于液滴衬底上。

在所述液滴衬底上设置用于控制液滴体滚动方向以及滚动距离的液滴滚动控制结构，所述液滴滚动控制结构包括凸起或凹槽。

一种利用SERS活性液滴的分子检测方法，所述检测方法包括如下步骤：

步骤S1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底以及位于所述液滴衬底上的金属纳米层；

步骤S2、在液滴衬底上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层上包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴；

步骤S3、利用所述SERS活性液滴以及拉曼测试台对待测试样品进行测试，测试时，将激光焦点落于SERS活性液滴内部，以得到所述待测试样品的SERS谱线。

步骤S3中，若待测试样品为液态时，利用所述液态的待测试样品直接形成SERS活性液滴，在得到SERS活性液滴后，将具有SERS活性液滴的液滴衬底置于拉曼测试台上，或将SERS活性液滴转移至测试衬底上，将测试衬底置于拉曼测试台上，以利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒对待测试样品直接进行测试，得到待测试样品的SERS谱线；

若待测试样品为固态时，将得到的SERS活性液滴转移至放置待测试样品的测试衬底上，并将测试衬底置于拉曼测试台上，SERS活性液滴摊开在待测试样品上，利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒对待测试样品进行测试，以得到待测试样品的SERS谱线。

本发明的优点：SERS活性液滴通过液滴体收集并富集大量的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒形成，SERS活性液滴的适用面广，且具有多方面的灵活性，利用所述SERS活性液滴进行测试时，无需精准的聚焦过程，继而降低了对测试设备在光路设置上的高要求和对测试人员在经验上的高要求。另外，利用SERS活性液滴的测试时，可以方便选择液滴衬底，且可以通过设置液滴体滚动的路径，使得液滴体每次仅沿设定路线滚动不影响其余位置的表面具有SERS活性的金属纳米复合颗粒的分布，继而SERS活性基底可以重复使用，从而测试成本可以进一步降低。此外，通过在SERS活性基底上设置所需长度的液滴滚动路径以及控制液滴的大小，可以对被收集的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒数量进行有效控制，且可以通过选择设定接触角的测试衬底，实现对测试数据的进一步调控，提高测试的便捷性和测试结果的准确性，制备工艺简单，可控性强，适用范围广，安全可靠。

附图说明

图1为本发明在液滴衬底上制备得到烛灰纳米颗粒层的示意图。

图2为本发明制备得到金属纳米层的结构示意图。

图3为本发明液滴体在金属纳米层上滚动后形成SERS活性液滴的示意图。

图4为本发明对SERS活性液滴进行转移的示意图。

图5为本发明将SERS活性液滴转移至测试衬底上的示意图。

图6为本发明SERS活性液滴在测试衬底上摊开后的俯视图。

图7为本发明SERS活性液滴在测试衬底上摊开后的剖面示意图。

附图标记说明：1-液滴衬底、2-烛灰纳米颗粒层、3-焰芯、4-蜡烛、5-金属纳米颗粒体、6-烛灰纳米颗粒、7-测试剂液滴、8-具有SERS活性的金属纳米复合颗粒、9-辅助液滴、10-测试衬底以及11-金属纳米层。

具体实施方式

下面结合具体附图和实施例对本发明作进一步说明。

为了能避免现有SERS分子检测时对聚焦的苛刻要求，降低分子检测过程的操作难度，本发明包括液滴体以及由所述液滴体富集的若干具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8，所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8位于液滴体内或附着于液滴体的表面；所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8包括金属纳米颗粒体5。

具体地，所述液滴体包括水滴、油滴，或以水、油为溶剂的溶液液滴。具有SERS活性的金属纳米负荷颗粒8位于液滴体内或附着于液滴体的表面，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8包括金属纳米颗粒体5，即在液滴体内或表面具有金属纳米颗粒体5，从而能利用具有金属纳米颗粒体5的液滴体实现对待测试样品的SERS测试，且在进行SERS测试时，无需精确聚焦到液滴和支撑基底之间的界面上，提高SERS测试的便捷性，降低测试难度，安全可靠。

进一步地，所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8还包括包覆在金属纳米颗粒体5内的烛灰纳米颗粒6，所述金属纳米颗粒体5的材料包括金、银、铜或铂。

本发明实施例中，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8由金属纳米颗粒体5与烛灰纳米颗粒6配合形成，烛灰纳米颗粒6包裹在金属纳米颗粒体5内。在制作SERS活性液滴时，主要利用烛灰纳米颗粒6的超疏水和超疏油特性。

上述的SERS活性液滴，可以通过下述工艺步骤制备得到，具体地，SERS活性液滴的制备方法，包括如下步骤：

步骤1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底1以及位于所述液滴衬底1上的金属纳米层11；

本发明实施例中，步骤1中，具体包括如下步骤：

步骤1.1、提供液滴衬底1，并在所述液滴衬底1制备上具有超疏水和超疏油特性的烛灰纳米颗粒层2；

具体地，所述液滴衬底1包括硅片、玻璃片、载玻片、塑料或柔性衬底；液滴衬底1的具体类型可以根据需要进行选择，此处不再赘述。本发明实施例中，得到的烛灰纳米颗粒层2具有超疏水和超疏油特性，同时，所述烛灰纳米颗粒层2中的烛灰纳米颗粒6相互之间形成链状链接结构，因此链接脆弱，在微弱机械力作用下容易发生断裂。

所述烛灰纳米颗粒层2利用蜡烛4的火焰熏镀制备在液滴衬底1上，或可收集的烛灰纳米颗粒，并将收集的烛灰纳米颗粒设置于液滴衬底1上。具体地，蜡烛4在燃烧时具有焰芯3，蜡烛4燃烧的火焰能在液滴衬底1上熏镀得到烛灰纳米颗粒层2，如图1所示。此外，还可以先收集烛灰纳米颗粒，然后将收集的烛灰纳米颗粒与水、油或其他溶液等混合，也可以直接在水或油或其它液体中通过超声清洗的方法收集烛灰纳米颗粒，并在混合后旋涂或喷涂在液滴衬底1上，以在液滴衬底1上得到烛灰纳米颗粒层2。与收集的烛灰纳米颗粒混合的溶液可以包括光刻胶。具体实施时，烛灰纳米颗粒层2的厚度为40nm~200μm。

步骤1.2、在上述液滴衬底1上设置金属纳米层11，所述金属纳米层11位于烛灰纳米颗粒层2上，烛灰纳米颗粒层2上与金属纳米层11接触的烛灰纳米颗粒6与金属纳米层11内的金属纳米颗粒体5配合形成具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8，其中，烛灰纳米颗粒6包裹在金属纳米颗粒体5内。

如图2所示，金属纳米层11的材料包括金、银、铜或铂，金属纳米层11通过溅射或蒸发或喷涂方式淀积得到。金属纳米层11包括若干金属纳米颗粒体5，由上述烛灰纳米颗粒层2的特性可知，在设置金属纳米层11的过程中，由于淀积工艺的保型性，所述烛灰纳米颗粒6除了相互链接处，其余部分可包裹在金属纳米颗粒体5内，以得到具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8。

步骤2、在液滴衬底1上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层11上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层11包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴。

本发明实施例中，液滴体为水滴、油滴，或以水或者油为溶剂的溶液液滴，液滴体的体极为0.1微升到1毫升。在液滴体滴到液滴衬底1上方时，液滴体与金属纳米层11上，由于烛灰纳米颗粒层2的超疏水和超疏油特性，液滴体在液滴衬底1上具有较大的接触角和较小的滚动角，以使得液滴体能在金属纳米层11上滚动，在液滴体滚动时，与所述液滴体接触的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8能富集在所述液滴体内或液滴体的表面，以形成SERS活性液滴。

具体实施时，在所述液滴衬底1上设置用于控制液滴体滚动方向以及滚动距离的液滴滚动控制结构，所述液滴滚动控制结构包括凸起或凹槽。利用所述凸起或凹槽能对液滴体在液滴衬底1上的滚动方向和滚动距离进行控制，从而能控制液滴体内富集的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8的数量。本发明实施例中，在利用液滴滚动控制结构对液滴体的滚动方向以及滚动距离控制后，可以实现多次或多个SERS活性液滴的制备，提高液滴衬底1的利用率，降低成本。在液滴衬底1上可以采用常规的技术手段，能实现凸起或凹槽的液滴滚动控制结构，具体方式可以根据需要进行选择，此处不再赘述。

根据上述的SERS活性液滴、SERS活性液滴的制备方法，得到，本发明利用SERS活性液滴的分子检测方法，所述检测方法包括如下步骤：

步骤S1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底1以及位于所述液滴衬底1上的金属纳米层11；

本发明实施例中，制备得到金属纳米层11的具体过程可以参考上述说明，此处不再赘述。

步骤S2、在液滴衬底1上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层11上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层11包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8，具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴；

本发明实施例中，在滴入液滴体时，将液滴体滴在设定的区域位置，所述设定的区域位置可以是液滴衬底1上烛灰纳米颗粒层2厚度较大的区域位置。由于烛灰纳米颗粒层2的超疏水和超疏油特性，液滴体2在液滴衬底1表面形成较大的接触角；当液滴体被滴在烛灰纳米颗粒层2厚度较大的区域位置时，则液滴体会向着烛灰纳米颗粒层2的厚度较小的位置滚动；如果所述烛灰纳米颗粒层2在液滴衬底1上的厚度相同，也即液滴衬底1表面所有位置的高度相接近，则倾斜液滴衬底1至所需角度，使液滴体在液滴衬底1表面滚动；液滴体沿着设定方向滚动一定距离后，在烛灰纳米颗粒层2较薄的位置停顿，此时，液滴体富集了若干具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8，且所述具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8位于液滴体的内部以及表面。

具体实施时，待测试样品可以为呈固态或试剂溶液的液态，当待测试样品呈试剂溶液的液态时，所述液滴体可以是直接利用待测试样品的试剂溶液得到，如图3所示，所述得到的SERS活性液滴即为测试剂液滴7。当待测试样品呈固态时，所述液滴体可以为水滴或油滴，如图4所示，得到辅助液滴9。无论液滴体采用何种形式，通过上述的工艺步骤，能够得到对应的SERS活性液滴。

步骤S3、利用所述SERS活性液滴以及拉曼测试台对待测试样品进行测试，测试时，将激光焦点落于SERS活性液滴内部，以得到所述待测试样品的SERS谱线。

本发明实施例中，若待测试样品为液态时，利用所述液态的待测试样品直接形成SERS活性液滴，在得到SERS活性液滴后，将具有SERS活性液滴的液滴衬底1置于拉曼测试台上，或将SERS活性液滴转移至测试衬底10上，将测试衬底10置于拉曼测试台上，以利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8对待测试样品直接进行测试，得到待测试样品的SERS谱线。具体实施时，由于SERS活性液滴为测试剂液滴7，从而可以直接利用测试剂液滴7实现对待测试样品的测试，得到待测试样品的SERS谱线，利用拉曼测试台测试得到SERS谱线的具体过程为本技术领域人员所熟知，此处不再赘述。

若待测试样品为固态时，将得到的SERS活性液滴转移至放置待测试样品的测试衬底10上，并将测试衬底10置于拉曼测试台上，SERS活性液滴摊开在待测试样品上，利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8对待测试样品进行测试，以得到待测试样品的SERS谱线。具体实施时，当待测试样品为固态时，得到的SERS活性液滴为辅助液滴9，无法利用辅助液滴9直接进行测试，需要将辅助液滴9转移至测试衬底10上，如图4和图5所示。待测试样品置于测试衬底10上，测试衬底10可以为用于测试的置物基底或待测试样品本身。利用辅助液滴9能在液滴衬底1上滚动的特性，将辅助液滴9转移到测试衬底10上，由于测试衬底10的亲水性较大，辅助液滴9会摊开在测试衬底10的待测试样品上，即具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8会摊开在待测试样品上，如图6和图7所示。在利用拉曼测试台进行测试时，只需要将激光焦点聚焦于测试衬底10上的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8上即可，具体测试得到SERS谱线的过程为本技术领域人员所熟知，此处不再赘述。

当然，具体实施时，当待测试样品为试剂溶液时，也可以将得到的测试剂液滴7转移至测试衬底10上，具体转移过程以及对应的测试过程均可以参考上述说明，具体测试的方式可以根据需要进行选择，此处不再赘述。本发明实施例中，所述待测试样品为液态时，包括溶于溶剂的农药、添加剂、色素、食品成分、果蔬成分、生物医学样品；所述待测试样品为固态时，包括果蔬、肉等食物以及组织和细胞的切片等。

本发明SERS活性液滴通过液滴体收集并富集大量的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8形成，SERS活性液滴的适用面广，且具有多方面的灵活性，利用所述SERS活性液滴进行测试时，无需精准的聚焦过程，继而降低了对测试设备在光路设置上的高要求和对测试人员在经验上的高要求。另外，利用SERS活性液滴的测试时，可以方便选择液滴衬底1，且可以通过设置液滴体滚动的路径，使得液滴体每次仅沿设定路线滚动不影响其余位置的表面具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8的分布，继而SERS活性基底可以重复使用，从而测试成本可以进一步降低。此外，通过在SERS活性基底上设置所需长度的液滴滚动路径，可以对被收集的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒8数量进行有效控制，且可以通过选择设定接触角的测试衬底10，实现对测试数据的进一步调控，提高测试的便捷性，制备工艺简单，可控性强，适用范围广，安全可靠。

Claims (6)

1.一种SERS活性液滴的制备方法，其特征是，所述制备方法包括如下步骤：

步骤1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底（1）以及位于所述液滴衬底（1）上的金属纳米层（11）；

所述步骤1中，具体包括如下步骤：

步骤1.1、提供液滴衬底（1），并在所述液滴衬底（1）上制备具有超疏水和超疏油特性的烛灰纳米颗粒层（2）；

步骤1.2、在上述液滴衬底（1）上设置金属纳米层（11），所述金属纳米层（11）位于烛灰纳米颗粒层（2）上，烛灰纳米颗粒层（2）上与金属纳米层（11）接触的烛灰纳米颗粒（6）与金属纳米层（11）内的金属纳米颗粒体（5）配合形成具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8），其中，烛灰纳米颗粒（6）包裹在金属纳米颗粒体（5）内；

步骤2、在液滴衬底（1）的金属纳米层（11）上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层（11）上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层（11）上包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8），具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8）由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴。

2.根据权利要求1所述SERS活性液滴的制备方法，其特征是，所述液滴衬底（1）包括硅片、玻璃片或柔性衬底；金属纳米层（11）的材料包括金、银、铜或铂，金属纳米层（11）通过溅射、蒸发或喷涂方式淀积得到。

3.根据权利要求1所述SERS活性液滴的制备方法，其特征是，所述烛灰纳米颗粒层（2）利用蜡烛（4）的火焰熏镀制备在液滴衬底（1）上，或收集烛灰纳米颗粒（6），并将收集的烛灰纳米颗粒（6）设置于液滴衬底（1）上。

4.根据权利要求1所述SERS活性液滴的制备方法，其特征是，在所述液滴衬底（1）上设置用于控制液滴体滚动方向以及滚动距离的液滴滚动控制结构，所述液滴滚动控制结构包括凸起或凹槽。

5.一种利用SERS活性液滴的分子检测方法，其特征是，所述检测方法包括如下步骤：

步骤S1、提供所需具备超疏水和超疏油特性的SERS活性基底，所述SERS活性基底包括液滴衬底（1）以及位于所述液滴衬底（1）上的金属纳米层（11）；

所述步骤S1中，具体包括如下步骤：

步骤S1.1、提供液滴衬底（1），并在所述液滴衬底（1）上制备具有超疏水和超疏油特性的烛灰纳米颗粒层（2）；

步骤S1.2、在上述液滴衬底（1）上设置金属纳米层（11），所述金属纳米层（11）位于烛灰纳米颗粒层（2）上，烛灰纳米颗粒层（2）上与金属纳米层（11）接触的烛灰纳米颗粒（6）与金属纳米层（11）内的金属纳米颗粒体（5）配合形成具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8），其中，烛灰纳米颗粒（6）包裹在金属纳米颗粒体（5）内；

步骤S2、在液滴衬底（1）的金属纳米层（11）上滴入所需的液滴体，所述液滴体能在金属纳米层（11）上滚动，并在滚动时，能收集与所述液滴体相接触的金属纳米层（11）上包含具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8），具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8）由液滴体富集后形成所需的SERS活性液滴；

步骤S3、利用所述SERS活性液滴以及拉曼测试台对待测试样品进行测试，测试时，将激光焦点落于SERS活性液滴内部，以得到所述待测试样品的SERS谱线。

6.根据权利要求5所述利用SERS活性液滴的分子检测方法，其特征是：步骤S3中，若待测试样品为液态时，利用所述液态的待测试样品直接形成SERS活性液滴，在得到SERS活性液滴后，将具有SERS活性液滴的液滴衬底（1）置于拉曼测试台上，或将SERS活性液滴转移至测试衬底（10）上，将测试衬底（10）置于拉曼测试台上，以利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8）对待测试样品直接进行测试，得到待测试样品的SERS谱线；

若待测试样品为固态时，将得到的SERS活性液滴转移至放置待测试样品的测试衬底（10）上，并将测试衬底（10）置于拉曼测试台上，SERS活性液滴摊开在待测试样品上，利用SERS活性液滴中含有的具有SERS活性的金属纳米复合颗粒（8）对待测试样品进行测试，以得到待测试样品的SERS谱线。