CN106806853A - 一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物、其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种中药组合物，尤其涉及一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物及其制备方法。本发明所述的一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物由生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物组成，其中所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为(1.5～4.5)：(0.5～2.5):1本发明所提供的中药组合物具有缓解体力疲劳、提高缺氧耐受力、缓解慢性疲劳综合症的保健功能；组方合理，效果显著，无遗传毒性。

Description

一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物、其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，尤其涉及一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物、其制备方法和应用。

背景技术

现代医学认为，疲劳是机体过用(超限)而引起的功能降低并出现机体不适的状态，主要表现为疲劳困倦，可出现头晕、健忘、睡眠质量下降等伴随症状。疲劳的产生与能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等因素关系密切。体力疲劳又称运动性疲劳，是指由机体运动本身所引起的“机体生理过程不能持续其机能在一个特定水平上和(或)不能维持预定的运动强度”的机体运动能力下降的现象。

缺氧是高原、航空、潜水等特殊环境最普遍的应激因素。研究表明，持续稳定的缺氧环境可使体建立缺氧适应，这对机体维护自身平衡和内环境稳定是有益的，但是过强或长期的缺氧应激则会给机体带来严重危害，最终可导致机体心、脑等重要脏器由于能量供应不足而死亡。

缺氧对运动能力的影响与缺氧的程度和时间有关，海拔越高缺氧程度越重，运动能力的损害越明显。急性缺氧时骨骼肌持续做功的时间和总的做功量显著降低。中度缺氧时，运动能力的降低主要是由于Ⅲ/Ⅳ类纤维对中枢和α运动神经元的抑制所致，而重度缺氧时，脑供氧降低对中枢的直接抑制可能起着更为重要的作用。

目前中国专利文献已公开了许多抗疲劳、提高缺氧耐受力的保健食品，其中部分产品选用了红景天及其提取物、黄芪及其提取物作原料。如200610170948.7公开了一种增强体质、消除疲劳的中药制剂，由中药冬虫夏草、灵芝、雄蚕娥、黄芪、红景天等22味药材组成，采用或水提、或醇提、或超临界CO₂萃取法提取、制剂而成，具有提高免疫力、增强体质作用。94110098.7公开了一种名为红宝丹生命核能的保健制品。201210506240.X公开了以红景天、川芎、天麻、三七为主要原料，辅以常用辅料经加工制成的保健食品。上述保健品的配方有的太过复杂、几十味原料组方，原料配伍机理不清；有的制法粗放、一般采用简单的粉碎或提取工艺，服用量偏大；有的功能验证方法不科学、疗效不够确切；因而推广使用受到一定的限制。201110318847.0公开了一种缓解疲劳和提高缺氧耐受力的中药组合物及其制备方法，该中药组合物由红景天、黄芪、红花制成。本发明提供的缓解疲劳和提高缺氧耐受力的中药组合物通过益气、活血、固表来调节人体气血虚弱以及脏腑功能失调，从而达到缓解体力疲劳和提高缺氧耐受力的功效，该发明提供的中药组合物无遗传毒性，具有较好的预防和治疗效果。

针对上述局限及现实需要，本发明人以中医基础理论为指导，提供了一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物及其制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物，其中，所述的中药组合物由生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物组成，其中所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为(1.5～4.5)：(0.5～2.5):1。

优选，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为(1.8～4.2)：(0.9～2.2):1。

更优选，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为(2.0～3.0)：(1.5～2.0):1。

最优选，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为2.5：1.8:1。

中医学认为“诸血者皆属于心，诸气者皆属于肺”，“寒则血凝”血凝则“喘出于肺”、“食气入胃，蚀气归心，脉气流经，经气归于肺。气虚者，肺虚也”、“肺为气之母，肾为气之根，肺主出气，肾主纳气，阴阳相交，呼吸乃合，肾不纳气则动则气喘、呼吸表浅”等理论，这些理论清晰地阐述了高寒地区人、动物机体为什么易产生缺氧症候，而致心、肺、肾、脑等人体重要器官产生缺氧、功能减退等疲劳症候的发生。中医认为，人入高原则清气不足，宗气虚弱，难以司呼吸贯心脉；寒盛易伤人阳气，令人气血凝滞筋脉收引；干燥多风则易伤人阴津。当上述因素超过人体调节范围时，就会产生高原病。因此，防治应以益气、温通活血、养阴生津为基本大法，其次参以豁痰、开窍、利水等治标之法。

方中红景天为景天科多年生草本或灌木植物，被誉为“高原人参”，具有活血止血、清肺止咳的功能。近年来，红景天的多种药理作用吸引了许多国内外学者。研究表明，红景天具有抗肿瘤、抗衰老、抗缺氧、抗疲劳、抗寒冷、抗辐射等多种显著功能。生姜为姜科植物姜的新鲜根茎。生姜为临床常用中药，具有解表散寒、化痰止咳等功效。生姜的化学成分复杂，已发现的有100多种，可分为挥发油、姜辣素和二苯基庚烷三大类，研究表明，生姜具有很强的抗缺氧、抗疲劳、抗氧化作用和显著的清除自由基的能力，生姜中姜辣素具有显著的活血功能，被誉为“食品中的阿司匹林”，也具有优良的抗晕动病作用。黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。具有补气固表、利水消肿、托毒排脓、生肌等功能。含有黄芪皂苷、多糖、黄酮、氨基酸等多种成分。现代药理研究表明黄芪具有增强机体免疫、保肝、抗疲劳、抗缺氧的功能。上述三味药材组合共奏温阳益气、活血通脉、豁痰平喘之功效。

本发明所述的中药组合物可制备成药学上可接受的口服制剂。

本发明所述的口服制剂为胶囊、颗粒、丸剂、片剂、口服液或软胶囊。

本发明所述的口服制剂优选胶囊。

本发明还进一步提供所述的中药组合物的制备方法，所述的制备方法为：将红景天或其提取物、生姜或其提取物、黄芪或其提取物按所述配比混合，得到所述的药物组合物。

进一步的，所述的药物组合物加入药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的口服制剂，优选胶囊、颗粒、丸剂、片剂、口服液或软胶囊。

具体地说，本发明所述的中药组合物可以以红景天、生姜、黄芪为原料，也可以以红景天提取物、生姜提取物、黄芪提取物为原料，加入药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的口服制剂。

本发明中药组合物中的红景天提取物、生姜提取物和黄芪提取物可以分别用适宜的溶剂和方法单独提取加工得到提取物，再加入药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的口服制剂。所述的“单独提取”是指红景天、生姜和黄芪每一味药材分别通过不同的工艺单独提取得到提取物。

上述红景天提取物、生姜提取物和黄芪提取物的提取制备方法中，所用的溶剂是指药学上常用的溶剂，可以是水或乙醇等；所用的方法是指中药提取的一般方法，可以是煎煮法、回流提取法、浸渍法、渗漉法或连续提取法等。例如，红景天可以用乙醇回流提取或水提醇沉的方法提取制备得到红景天提取物，生姜可以用乙醇回流提取制备得到生姜提取物，黄芪可以用水提醇沉的方法提取制备得到黄芪提取物。本发明提供了红景天提取物、生姜提取物和黄芪提取物的优选提取制备工艺，具体如下：

所述的红景天提取物的优选提取制备工艺如下：

取所述重量份的红景天，加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃下相对密度为1.08-1.12，得浸膏液，喷雾干燥，干膏粉碎，过80目筛，得红景天提取物。

所述的生姜提取物的优选提取制备工艺如下：

取所述重量份的生姜片，加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃下相对密度为1.25-1.30，得浸膏液，低温真空干燥，干膏粉碎，过80目筛，得生姜提取物。

其中，所述的低温真空干燥为在40～50℃，-0.06～-0.08Mpa下进行。

所述的黄芪提取物的优选提取制备工艺如下：

取所述重量份的黄芪，加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并提取液，滤过，浓缩至60℃下相对密度为1.25-1.30的浸膏液，真空干燥，粉碎，过80目筛，得黄芪提取物。

更具体地说，本发明还提供了所述的中药组合物的另一种制备方法，包括如下步骤：

1)原料准备：按配方备好所有原料，生姜切片，黄芪、红景天破碎成粗段；

2)提取浓缩：取步骤1)中的红景天，加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.08-1.12(60℃)，得浸膏液，喷雾干燥，干膏粉碎，过80目筛，得红景天提取物。另取步骤1中的生姜片，加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.25-1.30(60℃)，得浸膏液，低温真空干燥(40～50℃，-0.06～-0.08Mpa)，干膏粉碎，过80目筛，得生姜提取物。最后取步骤1中的黄芪，加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并提取液，滤过，浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)的浸膏液，真空干燥，粉碎，过80目筛，得黄芪提取物。

3)制备中药组合物：将步骤2)中的红景天提取物、生姜提取物和黄芪提取物按所述配比混合，得到所述的药物组合物。加入药学上可接受的辅料，采用药剂学上常规工艺制成所需的口服制剂，。

进一步说明，本发明也可以通过将上述步骤2)所得到的红景天提取物、生姜提取物、黄芪提取物按所述配比混合得到所述的药物组合物后，加如药学上可接受的辅料制成药学意义的口服制剂，如胶囊剂、颗粒、丸剂、片剂、口服液、软胶囊等。

本发明所述中药组合物的口服制剂，可采用现有制药领域中的常规方法制得，必要时可以添加各种药学上可接受的辅料，包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂等。

本发明还提供了所述中药组合物在制备治疗缓解体力疲劳、提高缺氧耐受力或缓解慢性疲劳综合症方面的药物或保健品中的应用。

本发明所提供的中药组合物具有如下优点：

(1)本发明所提供的中药组合物具有缓解体力疲劳、提高缺氧耐受力、缓解慢性疲劳综合症的保健功能；

(2)本发明所提供的中药组合物组方合理，效果显著，无遗传毒性。

具体实施方式

以下为本发明的具体实施方式，所述的实施例是为了进一步描述本发明，而不是限制本发明。

实施例1、本发明的全方粉末

取生姜1675g、红景天850g、黄芪600g，生姜切片，黄芪、红景天破碎成粗粒。红景天加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至适量，浸膏液干燥，粉碎，过筛，得红景天提取物。生姜片加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至适量，浸膏液干燥，粉碎，过筛，得生姜提取物。黄芪加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并，滤过，浓缩适量，干燥，粉碎，过筛，得黄芪提取物。取上述红景天提取物、生姜提取物和黄芪提取物，混合得到本发明的全方粉末。

实施例2、本发明的全方粉末

取生姜1050g、红景天350g、黄芪700g，其他同实施例1。

实施例3、本发明的全方粉末

取生姜2250g、红景天1250g、黄芪500g，其他同实施例1。

实施例4、本发明的全方粉末

取生姜1600g、红景天1200g、黄芪800g，其他同实施例1。

实施例5、本发明的全方粉末

取生姜1800g、红景天1200g、黄芪600g，其他同实施例1。

实施例6、本发明的全方粉末

取生姜提取物1500g、红景天提取物1080g、黄芪提取物600g，混合得到本发明的全方粉末，其中生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物为按照现有技术的方法提取得到。

实施例7、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天850g、黄芪600g，生姜切片，黄芪、红景天破碎成粗粒。红景天加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至适量，浸膏液干燥，粉碎，过筛，得红景天提取物。生姜片加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至适量，浸膏液干燥，粉碎，过筛，得生姜提取物。黄芪加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并，滤过，浓缩适量，干燥，粉碎，过筛，得黄芪提取物。取上述红景天提取物、生姜提取物、黄芪提取物，加入胶囊剂常用的辅料，混匀，充填，制成胶囊1000粒。

实施例8、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天1067g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例9、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天711g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例10、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天1067g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例11、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天1067g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例12、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天850g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例13、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天711g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例14、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天711g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例15、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天711g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例16、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天850g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例17、姜素红景天胶囊

取生姜1675g，红景天850g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例18、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天1067g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例19、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天1067g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例20、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天850g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例21、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天850g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例22、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天850g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例23、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天711g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例24、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天711g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例25、姜素红景天胶囊

取生姜2000g，红景天711g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例26、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天1067g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例27、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天1067g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例28、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天1067g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例29、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天850g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例30、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天850g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例31、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天850g、黄芪480g，其他同实施例7。

实施例32、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天711g、黄芪800g，其他同实施例7。

实施例33、姜素红景天胶囊

取生姜1428g，红景天711g、黄芪600g，其他同实施例7。

实施例34、姜素红景天片的制备

处方：

制备工艺：

将生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛备用；按照处方量称取原料和辅料；将羟丙基纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；将生姜提取物、红景天提取物、黄芪提取物、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC50乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60℃的条件下干燥；干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀；取样，半成品检验；按照检验确定的片重压片；成品全检，包装入库。

该实施例中所述的生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物按照实施例1的提取制备工艺得到。

实施例35、姜素红景天颗粒的制备

处方：

制备工艺：

将蔗糖粉碎过100目筛备用，生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛备用；按照处方量称取原料和辅料；将生姜提取物、红景天提取物、黄芪提取物与糖粉、矫味剂以等量滴加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60℃的条件下烘干；干颗粒过18目筛整粒；取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量；包装，成品检验，包装入库。

该实施例中所述的生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物按照实施例1的提取制备工艺得到。

实施例36、姜素红景天丸剂的制备

取生姜1675g、红景天850g、黄芪600g，生姜切片，黄芪、红景天破碎成粗粒，混匀后按照中药丸剂的制备方法将其制备成中药丸剂。

实施例37、姜素红景天软胶囊的制备

取生姜提取物1675g、红景天提取物850g、黄芪提取物600g，混匀后按照中药软胶囊的制备方法将其制备成中药软胶囊。

实施例38、姜素红景天口服液的制备

取生姜1675g，红景天850g、黄芪600g，生姜切片，黄芪、红景天破碎成粗粒，混匀后按照中药口服液的制备方法将其制备成中药口服液。

试验例1

1、材料与方法

1.1样品来源与处理：本发明中药组合物复合粉(实施例1制得)，样品内容物为棕色粉末，临用前用蒸馏水配制成所需浓度。

1.2实验动物及环境：雄性健康ICR小鼠，体重18-22g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供(合格证号：SCXK(沪)2012-0002号)。实验动物环境设施合格证号：SYXK(苏)2012-0037。实验期间全部动物给予清洁级全价鼠颗粒饲料和灭菌水自由食用。

1.3实验方法

1.3.1剂量与分组：游泳试验及各项生化指标(血清尿素氮、肝糖原)所用动物均各按体重随机分成4组，每组12只，设100、200和600mg/Kg/d 3个剂量组(相当于成人每日每千克体重推荐摄入量的5、10、30倍)和溶剂(纯净水)对照组。

1.3.2受试物的给予：分别取样品500、1000和3000mg加纯净水至100ml配制成各组受试液，溶液对照组给予纯净水，各组受试液以每日20ml/Kgb.wt的量经口灌胃，连续32d。

1.3.3实验方法：

1.3.3.1游泳时间测定：末次经口灌胃给予受试物30min后，置尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠于游泳箱中，水深大于30cm，水温25℃±1.0℃，记录小鼠从游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。

1.3.3.2血清尿素氮(BUN)含量的测定：末次经口灌胃给予受试物30min后，在温度为30℃的水中游泳90min，休息60min后采血，分离血清按有关试剂盒要求检测。

1.3.3.3肝糖原含量测定：末次给予受试物30min后处死动物，取肝脏100mg，按程序匀浆，离心，95％乙醇沉淀糖原，蒽酮法测定肝糖原含量。

1.4统计方法：实验数据用spss软件进行统计分析。

2、结果

2.1动物体重增重情况：本发明中药组合物复合粉各剂量组小鼠体重与空白对照组比较差异无显著性，见表1-a、表1-b和表1-c。

表1-a、本发明中药组合物复合粉对游泳组小鼠体重增长的影响

组别	动物数(只)	初始体重(g)	终末体重(g)
				对照组	12	19.3±0.8	36.2±3.2
低剂量	12	19.0±1.0	34.5±2.5
				中剂量	12	19.5±1.0	36.9±1.9
高剂量	12	19.3±0.9	35.7±2.4

注：游泳组初始体重和终末体重经ANOVA得P值分别为0.618和0.151。

表1-b、本发明中药组合物复合粉对肝糖原组小鼠体重增长的影响

组别	动物数(只)	初始体重(g)	终末体重(g)
				对照组	12	19.4±0.9	36.7±2.0
低剂量	12	19.4±1.2	36.6±1.5
				中剂量	12	19.1±0.9	36.7±1.4
高剂量	12	19.2±1.0	37.2±2.1

注：肝糖原组初始体重和终末体重经ANOVA得P值分别为0.836和0.853。

表1-c、本发明中药组合物复合粉对尿素氮组小鼠体重增长的影响(±s)

组别	动物数(只)	初始体重(g)	终末体重(g)
				对照组	12	19.2±1.1	36.0±2.1
低剂量	12	19.3±0.7	35.3±2.5
				中剂量	12	19.7±1.0	34.9±2.0
高剂量	12	19.4±1.0	35.2±2.9

注：BUN组初始体重和终末体重经ANOVA得P值分别为0.671和0.699。

2.2本发明中药组合物复合粉低、中、高剂量组小鼠游泳时间均延长，高剂量组明显高于空白对照组(P＜0.01)，见表2。

表2、本发明中药组合物复合粉对小鼠负重游泳时间的影响

2.3本发明中药组合物复合粉低、中、高剂量组小鼠游泳90min后，各剂量组小鼠血清尿素氮含量均低于对照组值，高剂量组明显高于空白对照组(P＜0.01)，高剂量组小鼠肝糖原含量增加，明显高于对照组(P＜0.05)，见表3。

表3、本发明中药组合物复合粉对小鼠肝糖元的影响

3、结论

缓解体力疲劳动物试验结果表明，本发明中药组合物复合粉负重游泳试验结果阳性，肝糖原测定和血清尿素氮测定结果阳性，根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》中缓解体力疲劳的结果判定标准，据此认为本发明中药组合物复合粉具有缓解体力疲劳功能。

对本发明其它实施例的全方粉末和制剂也进行了上述试验，其获得的结果相似。

试验例2

本发明所述中药组合物经动物试验证明，具有提高氧耐受力功能，且无毒副作用。具体实验如下：

1、材料与方法

1.1样品来源与处理：本发明中药组合物复合物粉(实施例1制得)，样品内容物为棕色粉末，临用前用蒸馏水配制成所需浓度。

1.2实验动物及环境：选用健康雌性ICR小鼠144只，清洁级，体重18-22g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供(合格证号：0152899，生产许可证号：SCXK(沪)2012-0002号，SPF级实验动物环境设施合格证号：SYXK(苏)2012-0037)。动物分批按体重随机各分为4组，每组12只小鼠，共分3批分别进行常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验、急性脑缺血性缺氧实验。实验期间全部动物给予清洁级灭菌鼠饲料和灭菌水自由食用。

1.3实验方法

1.3.1剂量与分组：每项实验均各设100、200和600mg/Kg(相当于成人每日每千克体重推荐摄入量的5、10、30倍)三个剂量组和溶剂(纯净水)对照组。

1.3.2受试物的给予：分别取样品200、400和1200mg加纯净水至40ml配制成各组受试剂量，当日配制，每日经口灌胃一次，灌胃容量20ml/Kg体重，连续给予受试物30d。溶剂对照组每日灌胃等量纯净水。

1.3.3实验方法：

1.3.3.1常压耐缺氧实验：各组动物于实验前后称量体重，连续灌胃30天。末次灌胃1h后将小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250ml磨口瓶内(每瓶1只)，涂凡士林密封瓶口，并立即计时，以停止呼吸为指标，观察并记录小鼠常压耐缺氧存活时间。各组动物实验前后体重及存活时间见表4，实验前和实验后动物体重无组间差异(P＞0.05)。与溶剂对照组相比，各剂量组小鼠存活时间均延长，低、中剂量组差异有显著性(P＜0.05，P＜0.01)。见表4。

表4、本发明中药组合物复合粉对小鼠常压耐缺氧的影响

1.3.3.2亚硝酸钠中毒存活实验：各组动物于实验前后称量体重，连续灌胃30天。末次经口灌胃1h后将小鼠按200mg/Kgb.wt剂量逐只腹腔注射亚硝酸钠(注射量为0.1ml/10gb.wt)，立即计时，以呼吸停止为指标，记录小鼠存活时间。实验前和实验后动物体重无组间差异(P＞0.05)。与溶剂对照组相比，各剂量组小鼠亚硝酸钠中毒后存活时间均无统计学差异差(P＞0.05)见表5。

表5、本发明中药组合物复合粉对小鼠亚硝酸中毒的影响

1.3.3.3急性脑缺血性缺氧实验：各组动物于实验前后称量体重，连续灌胃30天。末次经口灌胃1h后将小鼠从颈部逐只断头，用秒表记录每只小鼠断头后至张口喘气停止时间。各组动物实验前后体重及存活时间见表3，实验前和实验后动物体重无组间差异(P＞0.05)。与溶剂对照组相比，各剂量组小鼠断头后至张口喘气停止时间均延长，低、中剂量组差异有显著性(P＜0.05)。见表6。

表6、本发明中药组合物复合粉对小鼠急性脑缺血性缺氧的影响

1.4统计方法：实验数据用spss软件进行统计分析。本实验所得数据均为计量资料，原始数据先进行正态性检验和方差齐性检验，满足“方差齐”和“正态分布”的要求，用单因素方差分析法(ANOVA)进行统计，对P＜0.05的数据用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。

2.3.3、结论

提高缺氧耐受力功能动物试验结果表明，本发明中药组合物复合粉提高小鼠常压耐缺氧存活时间结果阳性，延长小鼠急性脑缺血性缺氧断头后至张口喘气停止时间结果阳性，根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》中提高缺氧耐受力的结果判定标准，据此认为本发明中药组合物复合粉具有提高缺氧耐受力功能的作用。

对本发明其它实施例的全方粉末和制剂也进行了上述试验，其获得的结果相似。

试验例3

本发明所述中药组合物经动物试验证明，具有缓解慢性疲劳综合症的功能，证明实验如下：

1、材料与方法

1.1样品来源与处理：本发明中药组合物复合为粉(实施例1制得)，样品内容物为棕色粉末，临用前用蒸馏水配制成所需浓度。批号：20140916。

1.2实验动物及环境：SPF级昆明种雄性小鼠，体重18～22g；清洁级WISTAR大鼠，体重180～220g，均由广西医科大学医学实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：SCXK桂2014-0002。

1.3实验方法

1.3.1剂量与分组：每项实验均各设400和800mg/Kg(相当于成人每日每千克体重推荐摄入量的20、40倍)两个剂量组和溶剂(纯净水)对照组、阳性对照组(红景天组)、模型组。

1.3.2受试物的给予：分别取样品400和800mg加纯净水至40ml配制成各组受试剂量，当日配制，每日经口灌胃两次，灌胃容量20ml/Kg体重，连续给予受试物30d。溶剂对照组每日灌胃等量纯净水。

1.3.3试验方法：

1.3.3.1慢性疲劳综合症模型建立：给予两个剂量组受试物后到第28天下午，将除空白对照组外的各组小鼠放入6mm水深塑料饲养笼内，每笼3只小鼠，自由摄食和饮水，小鼠可以在饲养笼内自由活动，当小鼠进入快速动眼睡眠时相，全身肌张力降低、肌肉松弛和节律性垂头，小鼠头部会触及水面而觉醒，使其处于清醒状态，如此反复，从而造成小鼠睡眠被剥夺。18h后即次日上午将小鼠从水中取出，用滤纸和纱布轻柔擦干小鼠全身，然后用低温风筒将小鼠吹干，放入垫有干燥垫料的饲养笼中，同时给予充足的食物和饮水，期间禁止打扰，让其恢复6h后再进入第2次睡眠剥夺。空白对照组小鼠不给予任何干预，正常饲养。与模型对照组进行比较，各剂量组结果见表7。

表7、本发明对慢性疲劳综合症小鼠体重的影响

与空白对照组进行组间T检验，***P<0.001

与模型组进行组间T检验，△P<0.05；△△P<0.01；△△△P<0.001

由表7可见，小鼠经睡眠剥夺后形成慢性疲劳综合症，其体重显著减轻，低、高剂量组均可使体重减轻；与模型组比较，低剂量组有显著性差异(P<0.05)，高剂量组有非常显著性差异(P<0.01)。

1.3.3.2自主活动观测实验：测定时间分别为(1)开始进行睡眠剥夺之前的当天上午(基底值)；(2)第二次睡眠剥夺完成后用滤纸和纱布轻柔擦干小鼠全身，然后用低温风筒将小鼠吹干，放入垫有干燥垫料的饲养笼中立即测定；(3)第二次睡觉剥夺结束休息2h后；(4)休息24h后，即次日上午再次测定。测定小鼠自主活动时，先让其在小鼠自主活动记录仪中适应3min，然后测定3min内小鼠的自主活动情况。测定过程中保持环境安静，每次测定结束后以干纱布擦干净自主活动记录仪各个反应箱以清除上只小鼠遗留下来的气息，以避免影响测定结果的准确性。与模型对照组进行比较，各剂量组结果见表8。

表8、本发明对慢性疲劳综合症小鼠自主活动的影响

由表7可见，小鼠经睡眠剥夺后形成慢性疲劳综合症，疲劳后自主活动时间明显减少。与模型组比较，疲劳后0小时、2小时、24小时均有显著性差异。结果表明，低剂量、高剂量组均能恢复慢性疲劳综合症小鼠自主活动的能力。

1.3.3.3负重游泳时间测定：完成第2次睡眠剥夺、末次给予受试物后30min，置小鼠在游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25℃±1.0℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。计算各组平均游泳时间，各剂量组结果见表9。

表9、本发明对慢性疲劳综合症小鼠负重游泳时间的影响

与空白对照组进行组间T检验，***P<0.001

与模型组进行组间T检验，△P<0.05

由表9可见，小鼠经睡眠剥夺后形式慢性疲劳综合症，其负重游泳死亡时间显著缩短，全方组低、高剂量给药可延长其死亡时间(P<0.05)。结果表明，全方组具有提高慢性疲劳综合症小鼠力竭运动的能力。

2.3.3、结论

小鼠慢性疲劳综合症试验结果表明，本发明中药组合物复合粉具有缓解慢性疲劳综合症功能。

对本发明其它实施例的全方粉末和制剂也进行了上述试验，其获得的结果相似。

实验例4、本发明所述中药组合物经拆方动物试验证明，在缓解体力疲劳作用方面，优于红景天单方，其详细说明如下：

1、材料与方法

1.1样品来源与处理：本发明中药组合物复合粉全方(实施例1制得)、红景天提取物粉、黄芪提取物粉、生姜提取物粉、红景天黄芪提取物粉、红景天生姜提取物粉、生姜黄芪提取物粉均由桂林金可保健品有限公司提供，临用前用蒸馏水配制成所需浓度。

1.2实验动物及环境：SPF级昆明种雄性小鼠，体重18～22g；清洁级WISTAR大鼠，体重180～220g，均由广西医科大学医学实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：SCXK桂2014-0002。

1.3实验方法

1.3.1剂量与分组：实验各组各设两个剂量组，分别为400、800mg/kg体重(相当于人体推荐用量的20、40倍)，每天经口给予受试物2次(20ml/kg体重)，空白对照组、模型组给予等容量蒸馏水，连续灌胃30天。

1.3.2受试物的给予：分别取样品400和800mg加纯净水至40ml配制成各组受试剂量，当日配制，每日经口灌胃两次，灌胃容量20ml/Kg体重，连续给予受试物30d。溶剂对照组每日灌胃等量纯净水。

1.3.3实验方法：

1.3.3.1游泳时间测定：末次给予受试物后30min，置小鼠在游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25℃±1.0℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。计算各组平均游泳时间，各剂量组结果与空白对照组进行比较。

1.3.3.2血清尿素氮(BUN)含量的测定：末次给予受试物后30min，小鼠不负重游泳90min，水温30℃，休息60min，眼内眦采血，按试剂盒进行血清尿素氮测定。

1.3.3.3肝糖原含量测定：末次给予受试物后30min，小鼠不负重游泳90min，水温30℃，休息60min，处死取肝，经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏75mg，依试剂方法测定肝糖原含量。

1.3.3.4乳酸测定：末次给予受试物后30min，小鼠在30℃水中不负重游泳10min。于游泳前、游泳后立即及游泳后休息20min，分别眼球采血，测定全血血乳酸含量。各剂量组以血乳酸曲线下面积为指标与空白对照组进行比较。

血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0mIn的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)

1.4统计方法：实验数据用spss软件进行统计分析。

2、结果

2.1本发明中药组合物复合粉低、高剂量全方组、生姜黄芪组、黄芪组小鼠游泳时间明显高于空白对照组(P＜0.01)；黄芪红景天组、生姜组、生姜红景天组小鼠游泳时间明显高于空白对照组(P＜0.05)，见表10。

表10、本发明中药组合物复合粉及拆方各组样对小鼠负重游泳时间的影响

与空白对照组进行组间T检验，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

2.2本发明中药组合物复合粉高剂量全方组、黄芪红景天组、黄芪组血清中尿素氮明显低于空白对照组(P＜0.01)；复合粉低剂量全方组、红景天组、生姜黄芪组、生姜组、生姜红景天组血清中尿素氮明显低于空白对照组(P＜0.05)；复合粉高剂量全方组血清中尿素氮明显低于单方红景天组、生姜组(P＜0.05)。见表11。

表11、本发明中药组合物复合粉和拆方各组样对小鼠尿素氮的影响

与空白对照组进行组间T检验，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

2.3本发明中药组合物复合粉高剂量全方组、黄芪红景天组、黄芪组、生姜黄芪组、生姜红景天组小鼠肝组织中肝糖元含量明显高于空白对照组(P＜0.01)；复合粉低剂量全方组、红景天组、生姜黄芪组、生姜组血清中小鼠肝组织中肝糖元含量明显高于空白对照组(P＜0.05)；复合粉高剂量全方组血清中小鼠肝组织中肝糖元含量明显高于单方红景天组(P＜0.05)。见表12。

表12、本发明中药组合物复合粉及拆方各组样对小鼠肝糖元的影响

与空白对照组进行组间T检验，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

2.4本发明中药组合物复合粉高剂量全方组、红景天组、生姜组、黄芪组、黄芪+红景天组、生姜+红景天组、生姜+黄芪组都能降低疲劳小鼠血清中乳酸的含量，均低于空白对照组(P＜0.05)；复合粉高、低剂量全方组疲劳小鼠血清中乳酸的含量，与单方红景天组、黄芪组、生姜组无显著性差异(P＞0.05)。见表13。

表13、本发明中药组合物复合粉和拆方各组样对疲劳小鼠血清乳酸的影响(mmol/L)

与空白对照组进行组间T检验，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

3、结论

动物试验表明，在延长小鼠游泳时间、降低血清中尿素氮、提高肝组织中肝糖元量方面，本发明中药组合物复合粉高剂量组、生姜黄芪组均高于单方红景天组(P＜0.05)，拆方实验表明，本发明中药组合物有明显的增效作用。

对本发明其它实施例的全方粉末和制剂也进行了上述试验，其获得的结果相似。

实验例5、本发明不同配比的中药组合物全方粉末对抗疲劳作用的影响。

1、材料及方法

1.1动物健康

清洁级昆明种小鼠110只[(由解放军总医院医学动物实验中心提供，许可证编号SCXK(京)2007-0015]，6周龄，体质量(22.1±2.7)g，雌雄各半。

1.2药品与试剂

将生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物按不同配比(生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的总质量为3000g，各提取物的提取方法同实施例1，各配比见表14所示)制得各不同配比的中药组合物全方粉末。

1.3动物分组及给药方法

将小鼠随机分为生理盐水对照组(NS)、抗疲劳中药复方高、中、低剂量组，共计11组，每组10只，设600mg/Kg/d剂量(相当于成人每日每千克体重推荐摄入量的30倍)的不同配比组和生理盐水对照组。

受试药的给予：分别取不同配比的样品3000mg加纯净水至100ml配制成各组受试药，生理盐水对照组给予生理盐水，各组受试液以每日20ml/Kgb.wt的量经口灌胃，连续32d。

1.4爬竿试验

爬竿架及其规格为:直径0.7cm，长120cm的玻璃棒，上端垂直固定于爬竿架上，下端悬空，距地面大约40cm。小鼠从第1周开始适应性训练，以后每周3次，每次5min训练，经1周适应性训练后，无运动功能异常的小鼠进入测试实验。各组小鼠在末次灌胃30min后，置于已设置好的爬竿下段，记录从放置开始至小鼠因疲劳无力从上端滑落的时间，为小鼠爬竿时间。连续滑落3次后将时间累加即为最终爬竿时间。

1.5力竭性游泳运动试验

小鼠游泳池选用大小为80cm×60cm×60cm的玻璃水槽，训练时注水深约40cm，水温(22±1)℃，各实验组小鼠置于水中同池游泳且不互相接触，从第1周开始予以适应性训练，每次游泳20min。小鼠末次灌胃30min后，放入水槽内进行游泳实验，每鼠尾部负重为体重的4％，记录每只小鼠游泳持续时间。小鼠游泳时间:小鼠置于水中后立即计时，当小鼠头部沉入水面10s不能浮出，即刻计时为小鼠游泳时间。

1.7统计学分析

采用SPSS12.0统计软件进行分析，各组数据分别以平均数±标准差表示，组间差异比较用单因素方差分析，差异有统计学意义时再用最小显著差值法(LSD)进行两两比较。

2结果

2.1抗疲劳中药对对小鼠体质量、一般情况的影响

实验初始、中期、终末的体质量与对照组相比，差异均无显著性(P＞0.05)。实验期间生理盐水组和抗疲劳中药复方红景天复方高、中、低剂量组饮食好，毛发光泽，体格较强悍，动作敏捷。

2.2各组对小鼠负重游泳时间、爬竿时间的影响

抗疲劳中药复方能延长小鼠负重游泳的时间以及爬竿时间；随着抗疲劳中药复方给药剂量增加，小鼠负重游泳时间逐渐延长，大剂量组的负重游泳时间、爬竿时间明显延长，与生理盐水组比较差异性显著(P＜0.05)，见表14。

表14、抗疲劳中药对小鼠负重游泳时间、爬竿时间的影响(n＝10，)

分组	游泳时间(s)	爬杆时间(s)
			对照组	331±71	216±67
1.2:0.2:1	332±70	217±68
			1.5:0.5:1	387±67	251±61
1.8:0.9:1	405±64	282±61
			2.0:1.5:1	412±71	290±68
2.5:1.8:1	423±63	301±65
			3.0:2.0:1	413±68	291±72
3.5:2.1:1	410±69	289±63
			4.2:2.2:1	407±68	285±67
4.5:2.5:1	390±65	253±61
			4.8:2.8:1	333±69	218±69

从上述实验结果可以看出，在生姜、红景天和黄芪的总质量一定的情况下，生姜、红景天和黄芪以不同配制组成的中药组合物全方粉末具有不同的抗疲劳作用。较对照组相比，当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为1.5～4.5：0.5～2.5:1时具有明显的抗疲劳作用；当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为1.8～4.2：0.9～2.2:1时抗疲劳作用增强；当生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为2.0～3.0：1.5～2.0:1时抗疲劳作用更加明显；当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为2.5：1.8:1时抗疲劳作用最强。

3讨论

疲劳是机体在一定环境条件下，由于长时间或过于繁重、紧张的劳动(包括脑力和体力)而引起的工作效率暂时降低的一种生理心理现象。游泳是全身消耗性运动，剧烈的运动消耗大量的能量。本实验以生理盐水作为对照，观察到本发明的不同配比的全方复合粉末对小鼠负重游泳时持续时间、鼠爬杆时间有不同的影响。当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为1.5～4.5：0.5～2.5:1时小鼠负重游泳持续时间、鼠爬杆时间加长；当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为1.8～4.2：0.9～2.2:1时小鼠负重游泳持续时间、鼠爬杆时间明显加长；当生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为2.0～3.0：1.5～2.0:1时小鼠负重游泳持续时间、鼠爬杆时间加长更加显著；当生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物的质量比为2.5：1.8:1时小鼠负重游泳持续时间、鼠爬杆时间最长。说明不同配比的生姜提取物、红景天提取物和黄芪提取物对小鼠具有不同的抗运动型疲劳的作用。

Claims (10)

1.一种缓解体力疲劳和/或提高缺氧耐受力的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物由生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物组成，其中所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为1.5～4.5：0.5～2.5:1。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为1.8～4.2：0.9～2.2:1。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为2.0～3.0：1.5～2.0:1。

4.根据权利要求3所述的中药组合物，其特征在于，所述的生姜或其提取物、红景天或其提取物和黄芪或其提取物的质量比为2.5：1.8:1。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物可制备成药学上可接受的口服制剂。

6.根据权利要求5所述的中药组合物，所述的口服制剂为胶囊、颗粒、丸剂、片剂、口服液或软胶囊。

7.一种权利要求1-6任意一项所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为：

将红景天或其提取物、生姜或其提取物、黄芪或其提取物按所述配比混合，得到所述的药物组合物。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的药物组合物加入药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的口服制剂，优选胶囊、颗粒、丸剂、片剂、口服液或软胶囊。

9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其特征在于，所述的红景天提取物采用如下方法提取得到：取所述重量份的红景天，加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃下相对密度为1.08-1.12，得浸膏液，喷雾干燥，干膏粉碎，过80目筛，得红景天提取物；

所述的生姜提取物采用如下方法提取得到：取所述重量份的生姜片，加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃下相对密度为1.25-1.30，得浸膏液，低温真空干燥，干膏粉碎，过80目筛，得生姜提取物；

所述的黄芪提取物采用如下方法提取得到：取所述重量份的黄芪，加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并提取液，滤过，浓缩至60℃下相对密度为1.25-1.30的浸膏液，真空干燥，粉碎，过80目筛，得黄芪提取物。

10.一种权利要求1-5任意一项所述的中药组合物在制备治疗缓解体力疲劳、提高缺氧耐受力或缓解慢性疲劳综合症方面的药物或保健品中的应用。