CN106668131A - 一种地龙组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物剂型和制剂技术领域，涉及一种保护地龙组合物中蚓激酶活性的配方，以重量份计算，包括地龙干粉10份、磷酸钙0.01‑1份，以及含有川芎、黄芪、牛膝的中药浸膏粉20‑40份和滑石粉1‑3份，其中磷酸钙的孔隙率在20％以上，其制备方法包括以下步骤：称取重量份地龙干粉、磷酸钙，用水溶解；将溶液浓缩干燥，得含有磷酸钙的地龙干粉；上述混合物与川芎、黄芪、牛膝的浸膏粉、辅料滑石粉混合，灌装胶囊，得复方地龙胶囊。本发明方法保护辅料用量低，保护蚓激酶活性效果显著，方法简单且可使所得复方地龙胶囊制剂质量提高，稳定性好。

Description

一种地龙组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于药物剂型和制剂技术领域，涉及一种地龙组合物及其制备方法。

背景技术

中风即脑血管意外，常见脑溢血和脑栓塞，是中老年人常发病状，尤其是高血压、高血脂、冠心病患者，并呈逐年升高趋势。它的发病原因主要包括：在高血压及动脉粥样硬化基础上，脑动脉血管壁增厚，管腔狭窄；或者随着中老年人体内胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白与极低密度脂蛋白增高，高密度脂蛋白下降，血液粘度增高，引起血流速度减慢，导致血栓形成。脑血栓形成的好发部位为大脑中动脉、颈内动脉虹吸段和基底动脉中、下段，脑血栓形成后，病变血管所供应的脑组织即发生梗塞、局部水肿、缺血性坏死和软化，甚至出现脑溢血和脑栓塞，危及生命，并出现精神呆滞、舌质发硬、言语迟涩、发音不清、口眼歪斜、肢体麻木或半身不遂等症状。目前治疗脑血栓症是以积极预防和治疗动脉硬化为主，药物多用尿激酶、链激酶静脉滴注和扩张血管治疗。但由于患者体内脂质紊乱未得到调理，易发生脑血栓后遗症装，患者达不到标本兼治，利用中药组方开发既能扩张血管、又能改善脂质紊乱、并具有溶栓作用的中成药有着广泛的应用市场。

地龙是一平肝熄风中药，已有数千年的使用历史。1983年Mihara等首次发现Lumbricidae科蚯蚓水提物有直接溶解纤维蛋白及激活纤溶酶原的作用，并命名为“蚓激酶”。健康人口服本品后，纤维蛋白平板法测得外周血优球蛋白的纤溶活性明显增高，优球蛋白溶解时间明显缩短，认为该提取物有望发展为新型溶栓剂。此后，国内外蚓激酶的研究论文陆续发表，蚓激酶药品于1992年投入临床研究，主要用于治疗脑血栓性疾病。目前中国市场上有关蚓激酶的保健品有龙舒泰、龙寿丹、龙津、龙福地龙胶囊等，国家批准的药品有复方地龙胶囊、博洛克、溶栓胶囊等，这些产品含蚓激酶纯度不一，对改善微循环，防治血栓性疾病均有一定疗效。

复方地龙胶囊是由蚓激酶粗酶和中药浸膏粉制成的中药三类新药，有活血化瘀、温经通络，同时有益气扩血管、改善脂质紊乱之功效。有效治疗脑血栓，消除肢体偏瘫、言语蹇涩或不语、心悸气短、流涎自汗、口眼歪斜、肢体麻木、半身不遂等症状。复方地龙胶囊的处方由清·王清任《医林改错》中的补阳还五汤化裁而来，含有地龙、川芎、黄芪和牛膝。

蚓激酶是一类酸性蛋白水解酶，易降解失活或降活。复方地龙胶囊在制备过程中，由于生产、贮存等条件的变化，会造成蚓激酶生物活性下降，从而降低了复方地龙胶囊的质量，进而影响其疗效。

现有技术中糖类常作为水解蛋白多肽类的稳定剂。据文献报道，有人考察了蔗糖、葡聚糖10400、葡聚糖41000以及葡聚糖20000分别与乳糖、精氨酸、谷氨酸组合使用、葡聚糖20000加入量及pH对蚓激酶稳定性的影响，发现以加入50g/L葡聚糖20000和控制pH9为最佳配方(王茵，陆直.以药物稳定性为指标考察蚓激酶粉针剂的工艺[J].江西中医院学报，1999，11(1)：31-32。然而该方法所得制剂中保护性辅料存在着用量较大，单位重量辅料保护效率低的缺点，且该方法所得制剂室温3个月蚓激酶残留活性仅为73.1％，保护效果有待提高。

磷酸钙在食品工业中用作抗结剂、酸度调节剂、营养增补剂、增香剂、水分保持剂。在制药行业中用作填充剂和稀释剂，在本发明中我们发现磷酸钙能很好的延缓蚓激酶的降解速度。可能是由于磷酸钙能对蚓激酶进行适当的吸附包裹，减少蚓激酶的氧化降解发生。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种配方和方法，起到更好的保护蚓激酶活性的效果。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

一种地龙组合物，以重量份计算，由地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份组成。

本发明所述的地龙组合物，磷酸钙的孔隙率优选在20％以上，进一步优选20％-80％。

本发明所述的组合物在制备含地龙的药物中的应用。

本发明所述的地龙组合物，以重量份计算，包含地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份、中药浸膏粉20-40份，滑石粉1-3份。

本发明所述的地龙组合物，优选包含地龙干粉10份、磷酸钙0.2-0.5份、中药浸膏粉、20-40份，滑石粉1-3份。

本发明所述的地龙组合物，磷酸钙的孔隙率优选在20％以上，进一步优选20％-80％。

所述中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1～2:1～2的质量比制得，其制备方法为本领域的现有技术。

本发明所述的地龙组合物的制备方法，包括如下步骤：

a、称取配方量的地龙干粉、磷酸钙，用水溶解；

b、将上述溶液浓缩干燥，得含有磷酸钙的地龙干粉；

c、将含有磷酸钙的地龙干粉与川芎、黄芪、牛膝的浸膏粉、辅料滑石粉混合，灌装胶囊，得复方地龙胶囊。

其中，步骤b所述干燥方法优选冷冻干燥、减压干燥或喷雾干燥。

本发明通过采用加入特定辅料磷酸钙对蚓激酶进行保护，减少了蚓激酶的活性下降，相对于现有技术具有以下优点：

1.将保护辅料磷酸钙与地龙干粉混合溶解，干燥过程中保护辅料磷酸钙将蚓激酶吸附至孔隙中，对蚓激酶进行了包裹，减少了蚓激酶与外界的接触，可以达到保护的目的。

2.磷酸钙的用量低，加入少量即可有效保护蚓激酶活性，且存放周期未见活性下降。

3.磷酸钙的加入可降低干燥时间与能耗，减少蚓激酶的受热时间，提高其稳定性。

4.磷酸钙为无机物，可经人体代谢后排出，使用安全，对人体基本无害。

具体实施方式

以下是实施例及实验数据等，但本发明的内容并不局限于这些实施例的范围。

以下实施例中提及的地龙干粉制备方法、磷酸钙孔隙率的测定方法、中药浸膏粉制备方法、蚓激酶效价的测定方法分别为：

地龙干粉制备方法为：取中药材地龙用10倍量纯化水40-60℃提取4-6小时，过滤，滤液用减压干燥或冷冻干燥得到干燥物，干燥物粉碎过80目筛，即得地龙干粉。

磷酸钙孔隙率的测定方法为：氮气静态吸附容量法测定。

中药浸膏粉制备方法为：中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1～2:1～2的质量比加至提取罐中，加入8倍量的纯化水，煮沸提取2次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液用多效浓缩罐浓缩至相对密度1.1-1.2，浓缩液采用减压干燥，干燥物粉碎过80目筛，即得中药浸膏粉。

蚓激酶效价的测定方法采用尿激酶琼脂糖-纤维蛋白平板法测定制品的效价，方法参照卫生部颁发的蚓激酶〔W S-303(X-258)-95〕试行质量标准。具体测定方法如下：

效价测定

(1)试剂

0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8)取磷酸氢二钠3.58g，加水使溶解并稀释至1000ml为A液；取磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·2H₂O)0.78g，加水使溶解并稀释至500ml为B液；将A、B两液混合至pH值为7.8。

工作溶液取0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8)与0.9％氯化钠溶液(1:17混合)。

1.5％琼脂糖溶液取琼脂糖1.5g，加工作溶液100ml加热溶解。

纤维蛋白原溶液取纤维蛋白原适量，加工作溶液制成每1ml中含1.5mg的可凝蛋白溶液。

凝血酶溶液取凝血酶，加0.9％氯化钠溶液制成每1ml中1BP单位的溶液。

标准品溶液的制备取蚓激酶标准品，用0.9％氯化钠溶液制成浓度分别为每1ml中含10000、8000、6000、4000、2000蚓激酶单位的溶液。

供试品溶液的制备取本品适量，加0.9％氯化钠溶液使溶解并稀释成标准曲线范围内的浓度。

(2)测定法取纤维蛋白原溶液39ml，置烧杯中，边搅拌边加入55℃琼脂糖溶液39ml、凝血酶溶液3.0ml，立即混匀，快速倒入直径14cm塑料培养皿中，室温水平放置1小时，打孔。精密量取不同浓度的蚓激酶标准品溶液及供试品溶液各10μl，分别点在同一平皿中，加盖，置37℃恒温箱中反应18小时。取出后用卡尺测量溶圈垂直两直径，以蚓激酶标准品单位数的对数为横坐标，垂直两直径乘积的对数为纵坐标，计算回归方程，将供试品垂直两直径乘积的对数代入回归方程，计算供试品效价单位数。标准品与供试品应各做两点，以平均值计算。

实施例1不同保护剂对地龙组合物中蚓激酶活性的影响

按照表1中处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，测定蚓激酶效价，列于下表：

称取地龙干粉和保护辅料，将地龙干粉和保护辅料溶解于水中；混合均匀，冻干除水，得到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、其他辅料混合，所述其他中药浸膏粉由川芎、黄芪、牛膝按1:1:1的质量比制得，所述中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的2倍，其他辅料中为滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分之一，得地龙组合物，将地龙组合物置于25℃保存，测定1周、2周后蚓激酶的效价。

表1不同保护剂对地龙组合物蚓激酶活性的影响

研究发现不加保护剂的实验组，地龙组合物在放置过程中蚓激酶活性下降严重，加入0.1-10％重量比的磷酸钙能很高程度的提高蚓激酶的残留活性。

实施例2磷酸钙孔隙率对复方地龙胶囊蚓激酶活性的影响

按照表2中处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，测定蚓激酶效价，列于下表：

称取地龙干粉和不同孔隙率的磷酸钙，溶解在水中；混合均匀，减压干燥除水，得到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、其他辅料混合，所述其他中药浸膏粉由川芎、黄芪、牛膝按1:2:2的质量比制得，所述中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的4倍，其他辅料为滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分之三，灌装胶囊，得复方地龙胶囊，将复方地龙胶囊置于25℃保存，测定1周、2周、5周后蚓激酶的效价。

表2不同孔隙率的磷酸钙对复方地龙胶囊蚓激酶活性的影响

研究发现，随着保护剂磷酸钙孔隙率提高，蚓激酶的残留活性也有提高，优选孔隙率在20％以上的磷酸钙。

实施例3磷酸钙加入量对复方地龙片蚓激酶活性的影响

按照表3中处方和下述工艺制备复方地龙片，测定蚓激酶效价，列于下表：

称取地龙干粉和磷酸钙，溶解于水中；混合均匀，喷雾干燥除去水，得到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、辅料混合，所述其他中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:2:2的质量比制得，所述中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的4倍，其他辅料为滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分之三，压片，得复方地龙片，将复方地龙片置于25℃保存，测定1周、2周、5周后蚓激酶的效价。

表3磷酸钙加入量对复方地龙片蚓激酶活性的影响

研究发现，随着保护剂磷酸钙比例提高，蚓激酶的残留活性也有提高，但投入比例0.01～1份之间差别不大，均能很好的对蚓激酶进行保护。优选磷酸钙的用量为0.1～0.5份。

实施例4含保护辅料的复方地龙胶囊稳定性研究

按照表4的处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，放置稳定性，于取样点测定蚓激酶效价，稳定性数据列于下表：

称取地龙干粉和磷酸钙，溶于水中；混合均匀，减压干燥除去分散剂，得到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、辅料混合，所述其他中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1:1的质量比制得，所述中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的4倍，辅料中包括滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分之一，灌装胶囊，得复方地龙胶囊，将复方地龙胶囊置于25℃3个月，于1月、2月、3月测定蚓激酶效价。

表4含保护辅料的复方地龙胶囊稳定性研究

研究发现，地龙浓度在2～12g/100ml范围内，加入0.5份磷酸钙，复方地龙胶囊在室温保存3个月，蚓激酶残留活性均＞84％，说明该方法能有效保护蚓激酶活性。

Claims (10)

1.一种地龙组合物，其特征在于，以重量份计算，由地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份组成。

2.如权利要求1所述的一种地龙组合物，其特征在于，所述磷酸钙的孔隙率在20％以上。

3.如权利要求2所述的一种地龙组合物，其特征在于，所述磷酸钙的孔隙率为20％-80％。

4.权利要求1-3中任一项所述的组合物在制备含地龙的药物中的应用。

5.一种地龙组合物，其特征在于，以重量份计算，所述的地龙组合物包含地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份、中药浸膏粉20-40份，滑石粉1-3份。

6.如权利要求5所述的一种地龙组合物，其特征在于，以重量份计算，所述的地龙组合物包含地龙干粉10份、磷酸钙0.2-0.5份、中药浸膏粉20-40份，滑石粉1-3份。

7.如权利要求6所述的一种地龙组合物，其特征在于，所述磷酸钙的孔隙率在20％以上。

8.如权利要求5-7中任一项所述的一种地龙组合物，其特征在于所述中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1～2:1～2的质量比制得。

9.权利要求5-7中任一项所述的地龙组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a、称取配方量的地龙干粉、磷酸钙，用水溶解；

b、将上述溶液浓缩干燥，得含有磷酸钙的地龙干粉；

c、将含有磷酸钙的地龙干粉与川芎、黄芪、牛膝的浸膏粉、辅料滑石粉混合，灌装胶囊，得复方地龙胶囊。

10.如权利要求9所述的地龙组合物的制备方法，其特征在于，步骤b所述干燥方法为冷冻干燥、减压干燥或喷雾干燥。