CN104721153A - 注射用氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及注射用氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂药物组合物。具体地说，一方面，本发明涉及一种冻干粉针剂药物组合物，其中包含氨甲苯酸、冻干赋形剂例如甘露醇、和任选的酸碱调节剂。所述冻干赋形剂选自蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、山梨醇、甘氨酸，氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～500。另一方面，本发明还涉及制备所述氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂药物组合物的方法，该方法使用常规的冷冻干燥粉针剂制备方法进行。本发明注射用氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂可用于因原发性纤维蛋白溶解过度所引起的出血，包括急性和慢性、局限性或全身性的高纤溶出血，后者常见于癌肿、白血病、妇产科意外、严重肝病出血等，并且具有令人期待的良好性质。

Description

注射用氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂药物组合物

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及一种可用于因原发性纤维蛋白溶解过度所引起的出血，包括急性和慢性、局限性或全身性的高纤溶出血，后者常见于癌肿、白血病、妇产科意外、严重肝病出血等的冻干粉针剂药物组合物，特别是涉及一种包含氨甲苯酸的冻干粉针剂药物组合物。本发明的冻干粉针剂药物组合物具有期望的良好性质。

背景技术

氨甲苯酸(Aminomethylbenzoic Acid)，为对氨甲基苯甲酸一水合物，又名抗血纤溶芳酸、对羧基苄胺、4-(氨基甲基)苯甲酸、4-氨甲基苯甲酸、对氨甲基苯甲酸；4-(Amino metmyl)benzoic acid、4-(Aminomethyl)benzoic acid，CAS号56-91-7。适用于肺、肝、胰、前列腺、甲状腺、肾上腺等手术时的异常出血，妇产科和产后出血及肺结核咯血、痰中带血、血尿，前列腺肥大出血、上消化道出血等。氨甲苯酸的分子式为C8H9NO2·H2O，分子量为169.18，其化学结构式为：

氨甲苯酸为白色或类白色的鳞片状结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。氨甲苯酸在沸水中溶解，在水中略溶，在乙醇、氯仿、乙醚或苯中几乎不溶。

氨甲苯酸为氨甲苯酸类抗纤维蛋白溶解药。具有与6-氨基乙酸、氨甲环酸相同的作用机理。其立体构形与赖氨酸相似，能竞争性地抑制纤溶酶与纤维蛋白的吸附，保护纤维蛋白，使其不被纤溶酶降解，从而达到止血作用。其抗纤溶活性比6-氨基已酸强4-5倍。氨甲苯酸为促凝血药。血循环中存在各种纤溶酶(原)的天然拮抗物，如抗纤溶酶素等。正常情况下，血液中抗纤溶物质活性比纤溶物质活性高很多倍，所以不致发生纤溶性出血。但这些拮抗物不能阻滞已吸附在纤维蛋白网上的激活物(如尿激酶等)所激活而形成纤溶酶。纤溶酶是一种肽链内切酶，在中性环境中能裂解纤维蛋白(原)的精氨酸和赖氨酸肽链，形成纤维蛋白降解产物，并引起凝血块溶解出血。纤溶酶原通过其分子结构中的赖氨酸结合部位而特异性地吸附在纤维蛋白上，赖氨酸则可以竞争性地阻抑这种吸附作用，减少纤溶酶原的吸附率，从而减少纤溶酶原的激活程度，以减少出血。本品的立体构型与赖氨酸(1,5-二氨基己酸)相似，能竞争性阻抑纤溶酶原吸附在纤维蛋白网上，从而防止其激活，保护纤维蛋白不被纤溶酶降解而达到止血作用。

氨甲苯酸静注后有效血药浓度可维持3-5小时。服药24小时，36％±5％以原形随尿排出，静注则排出63％±17％，其余为乙酰化衍生物。氨甲苯酸口服后胃肠道吸收率为69％士2％。体内分布浓度依次为肾>肝>心>脾>肺>血液等。服药后3小时血药浓度即达峰值，口服按体重7.5mg/kg，峰值一般为4～5ug/ml。口服8小时血药浓度已降到很低水平；静注后有效血药浓度可维恃3～5小时。服药24小时，36％±5％以原形随尿排出，静注则排出63％±17％，其余为乙酰化衍生物。

氨甲苯酸通过化学合成法制得，例如CN102718673A中公开了一种合成制备氨甲苯酸的工艺，其包括以下两步：

(1)对氰基氯苄的水解反应：在搅拌下将80毫升浓硫酸滴加到80毫升水中，然后加入38克对氰基氯苄，升温至120度左右，搅拌反应2-3小时，直至原料完全反应，补加120毫升纯化水，冷却降至室温，再搅拌一小时后过滤析出的白色固体，将所得水解产物重新悬浮于5-6倍量的纯化水中打浆1小时，过滤，水洗抽干得对氯甲基苯甲酸粗品，称湿重48.9克，HPLC检测纯度约为96％，不需精制，直接投入下一步氨化反应；

(2)对氯甲基苯甲酸的氨化：在500毫升三颈瓶中依次加入乌洛托品40克和80毫升纯化水，常温搅拌使溶解澄清，水浴冷却至20度以下加入上步得到的对氯甲基苯甲酸，搅拌半小时，然后开始滴加浓氨水，滴加过程中控制内温不超过25度，氨水滴完后撤去水浴，内温在15-30度搅拌反应2-3小时，薄层监测反应原料对氯甲基苯甲酸完全消失，其中展开条件为二氯甲烷/甲醇＝3/1；然后加入活性炭，搅拌15-30分钟，过滤，脱色处理后，40-50度减压旋蒸去除绝大部分氨和一小部分水分，蒸至pH值在7-8.5之间，有大量白色晶体析出，静止放冷至室温下，过滤析出的晶体，母液投入下一批套用；过滤后称湿品重量为30克左右，然后重新用120毫升氨水溶解，减压蒸氨浓缩，能得到18克左右的氨甲苯酸白色晶体，纯度99％以上，收率在50-60％之间。

周雪萍等(周雪萍，等，氨甲苯酸注射液及其有关物质的HPLC法测定，中国医药工业杂志，2014，45(10)：956；在本发明中该HPLC法可简称为周雪萍法)在其研究著述中，详细研究了分析氨甲苯酸注射液的有关物质的方法，其中开发出的HPLC法可以有效地用于检测合成工艺中间体对氯甲基苯甲酸，即该文献的图1中的峰2。该文献记载的注射液色谱图(该文献图1之B)显示在对氯甲基苯甲酸处并未检出该工艺杂质(相对保留时间RRT约1.4)；该文献记载的原料药色谱图(该文献图2之B)同样地显示在对氯甲基苯甲酸处并未检出该工艺杂质；但是，在注射液、原料粗品、原料中均在相对保留时间RRT约1.7处，即保留时间约27min处，显示出一个未知的杂质，即图2中指出的RRT1.7杂质。可见，原料中存在的该未知RRT1.7杂质在制剂中仍然明显地存在。本发明人在制备氨甲苯酸冻干粉针过程中采用市售的原料，使用周雪萍法，已经同样地发现所用原料以及制得的粉针剂中同样地存在这个未知的RRT1.7杂质。

目前临床上广泛使用的氨甲苯酸制剂包括其片剂、小容量水针剂、大容量输液剂和冷冻干燥粉针剂。将氨甲苯酸制成注射剂型是有利的，其可以克服口服用药所固有的某些缺陷，例如生物利用度等。在注射剂型中，冷冻干燥粉针剂比之于溶液型的注射液具有显著的稳定性，可以稳定地维持常规药物期待的2-3年的有效期。

然而，本领域技术人员仍然期待为临床提供具有良好药学性能的氨甲苯酸制剂例如注射用氨甲苯酸冷冻干燥粉针剂。

发明内容

本发明目的在于提供一种具有某些/某种良好性质的包含氨甲苯酸的冻干粉针剂，期待其具有一种或多种良好的药学性能。本发明人令人意外地发现，具有特定配方的包含氨甲苯酸的冻干粉针剂具有令人期望的良好特征。本发明因此而得以完成。

在本发明中，对活性成分氨甲苯酸计量时，均是以对氨甲基苯甲酸一水合物即C8H9NO2·H2O计。

因此，本发明第一方面提供了一种冻干粉针剂，其中包含氨甲苯酸和冻干赋形剂。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述冻干赋形剂选自蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、山梨醇、甘氨酸。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～500。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～250。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～200。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～150。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述酸碱调节剂的用量是，使该冻干粉针剂用注射用水溶解成含氨甲苯酸以氨甲苯酸计浓度为10mg/ml的溶液时，该溶液的pH值在3.0～5.0范围内的量，例如该溶液的pH值在3.5～4.5范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含右旋糖酐。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述右旋糖酐选自右旋糖酐-20、右旋糖酐-40、右旋糖酐-70。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为100：1～25。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为200：2～20。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为200：2～10。已经出人意料地发现，当在粉针剂使用甘露醇并且添加微量的右旋糖酐时，可以显著地在配液过程中除去原料中夹带的未知的RRT1.7杂质。

众所周知，经低温冷冻-真空干燥而获得的冷冻干燥粉针剂(通常简称为冻干粉针剂或冻干粉针)，其是首先将各物料用溶剂溶解(通常而言是用水溶解)，配制成一溶液，然后使该溶液进行低温冷冻，再进行抽真空、升华、干燥而获得的一种基本无水(通常而言水含量低于5％，特别是通常低于3％)的粉末状物或块状物。因此，该固体冻干物的酸碱度通常通过配制过程调节溶液的pH值来控制；或者可以通过处方调整以使获得的固体冻干物在规定的溶解/稀释程度下控制该溶解/稀释液的pH值来控制(此称为控制固体冻干物的酸碱度)；后一方式通常更为普遍使用，例如药典中所载的诸多冻干粉针剂均以此方式控制制品的酸碱度，而这种方式控制产品的酸碱度通常可以不具体规定酸碱调节剂的处方量，而仅规定终产品的酸碱度即可。同样适用于本发明的是，根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述任选的酸碱调节剂的量是，使所制得的冻干粉针剂用注射用水溶解成含氨甲苯酸以氨甲苯酸计浓度为10mg/ml的溶液时，，该溶液的pH值在3.0～5.0范围内的量，例如该溶液的pH值在3.5～4.5范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的氨甲苯酸和冻干赋形剂以及任选的右旋糖酐，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，根据药液pH值的偏离情况用酸碱调节剂调节至pH3.0～5.0，优选pH3.5～4.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.02％～0.2％。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是氨甲苯酸重量的10-100倍，例如20-75倍，例如约30-60倍。此注射用水的量可通过步骤(c)中所述固形物含量而容易地控制。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10％，例如2％～5％。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(d)中除去水分后所得冷冻干燥物料中水分含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的氨甲苯酸和冻干赋形剂以及任选的右旋糖酐，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，根据药液pH值的偏离情况用酸碱调节剂调节至pH3.0～5.0，优选pH3.5～4.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.02％～0.2％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是氨甲苯酸重量的10-100倍，例如20-75倍，例如约30-60倍。此注射用水的量可通过步骤(c)中所述固形物含量而容易地控制。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10％，例如2％～5％。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(d)中除去水分后所得冷冻干燥物料中水分含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。

在本发明上述制备方法的步骤中，虽然其描述的具体步骤在某些细节上或者语言描述上与下文具体实施方式部分的制备例中所描述的步骤有所区别，然而，本领域技术人员根据本发明全文的详细公开完全可以概括出以上所述方法步骤。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

根据本发明的冻干粉针剂，其中的活性成分是具有下式结构的化合物：

根据本发明，术语“赋形剂”亦可称为辅料、填充剂等。

本文所用的“药学可接受的赋形剂”指的是可用于配制药物的赋形剂，其对生物体基本上没有不良影响，并且通常是生物体可耐受的。

在本发明中，优选的本发明冻干粉针剂在用水制成每1ml中含活性成分以氨甲苯酸计100mg的溶液后，再根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法即pH值测定法测定。

虽然本领域技术人员理解，本发明的赋形剂可以是任一种可用于冷冻干燥的赋形剂，特别是甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸及其组合，然而在本发明中，特别优选的赋形剂是甘露醇、乳糖等。

冷冻干燥粉针剂的制备过程是本领域技术人员公知的制药工艺，例如如下冻干曲线A和冻干曲线B所示的两种示意性的冻干曲线：

在下文制备冷冻干燥粉针剂中的具体实例中，如未另外特别说明，所用的冻干曲线是冻干曲线A。

冷冻干燥粉针剂中的水含量是一般在8％以下，优选低于5％，更优选低于3％。水分控制可通过适当调整冷冻干燥程序来控制。该冷冻干燥粉针剂中的水分含量可根据许多已知方法来测定，例如干燥失重法。

在本发明中，为了在必要时调节药液的pH值，可以向组合物中加入适当的pH调节剂(在本发明中亦称为酸碱调节剂)。尽管本发明人仅用不具缓冲能力的强酸或强碱溶液例如氢氧化钠水溶液和盐酸水溶液进行调节，然而，本领域技术人员理解，如果用这种不具缓冲能力的pH调节剂处理能满足体系的pH要求，则具有缓冲能力的pH调节剂将更加能够实现本发明目的，因此这些缓冲剂不但能够调节pH值，而且能稳定pH值。因此本发明所列任一pH调节剂或其组合均包括在本发明精神和范围内。

在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中，固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。由于冻干粉针剂通常是在管状西林瓶中进行冷冻干燥得到，本领域技术人员理解这种产品在获得成品甚至在供医生使用之前，通常均呈现一个圆饼状，尽管该圆饼的体积理论上讲会比原有水溶液的体积少(稍有缩小)，然而通常这种缩小通常不会缩小到原水溶液体积50％，通常会在原水溶液体积的80-120％之间，更通常在原水溶液体积的90-100％之间，而从终产品西林瓶内可观察到原水溶液液面痕迹(主体饼状物因冻干缩小后残留在瓶壁上的液面痕迹，即便西林瓶中的冻干品因各种原因例如碰撞等原因而呈粉末状，通常仍然可以保留原有的液面痕迹)，据此痕迹亦可估计出该冷冻干燥组合物在冷冻干燥之前的水溶液体积。因此，虽然本发明提供的是一种基本无水的冷冻干燥粉针剂，然而根据该粉针剂仍然可以大致估计出其在配制时，至少在冷冻干燥开始之前的药液体积，根据该估计出的体积以及西林瓶中的干燥终产物的重量，亦可计算到在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中的固形物的含量。因此，根据本发明第一方面的冻干粉针剂，其在配制时的药液的固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

术语“固形物含量”是指固体物质(例如本发明活性化合物及所用的全部赋形剂，重量/克)加入到溶剂(例如注射用水)中，溶解后得到一个溶液，所述固体物质的重量除以终溶液体积的百分数(重量/体积百分数，例如g/100ml)。例如在本发明中，如果原料药物和全部固体辅料总计5g加适量注射用水溶液，配制成终体积为100ml的溶液，则该药液的固形物含量即为5％。

在本发明中，符号％，根据其所使用的语境，可以具有本领域技术人员容易理解的含义。例如在提及固形物含量时，该符号表示重量/体积的百分数(w/v，例如g/100ml)；又例如在提及冷冻干燥粉针剂中的“水含量”时，例如水含量在8％以下，此时该符号％表示重量/重量的百分数(w/w，g/100g)。一般而言，在固体分散在液体中时，％表示重量/体积百分数；在固体分散在固体中或者液体分散在固体中(例如粉针的含水量)时，％表示重量/重量百分数。在其它情况下，如无另外说明，符号％表示重量/重量百分数。

在配制本发明的药液时，本领域技术人员公知，可使用例如约0.45um的微孔滤膜进行粗滤过滤，在将药液灌装到西林瓶中之前，可以使用例如约0.22um的微孔滤膜进行精滤过滤以除菌，必要时可以过滤多次。

根据本发明的冻干粉针剂，其为冷冻干燥粉针剂。在一个实施方案中，该冷冻干燥粉针剂为单剂量制剂(例如西林瓶装的粉针剂)，每一单位剂量中活性化合物的量(其在本发明中如未另外说明，均折算成以氨甲苯酸计)可以例如但不限于约20mg、约50mg、约100mg、约150mg、约200mg。

根据本发明的冻干粉针剂，其用注射用水复溶，通常而言复溶时间在60秒内，优选在50秒内，更优选在40秒内。

根据本发明的冻干粉针剂，其在用水制成每1ml中含活性成分氨甲苯酸100mg的溶液后，该溶液的pH值为3.0～5.0。在一个实施方案中，pH值为3.5～4.5。

本发明提供的冻干粉针剂可以在在25℃以下干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。

本发明所得冻干粉针剂特别是冷冻干燥粉针剂通常为白色或类白色的冻干块状物或其碎块或其粉末，无臭、味苦，易溶于水。

氨甲苯酸粉针剂，主要用于因原发性纤维蛋白溶解过度所引起的出血，包括急性和慢性、局限性或全身性的高纤溶出血，后者常见于癌肿、白血病、妇产科意外、严重肝病出血等。通常而言氨甲苯酸冻干粉针剂每瓶中的活性成分含量为0.1g。氨甲苯酸冻干粉针剂通常通过静脉注射或滴注，一次0.1～0.3g(1支～3支),一日不超过0.6g(6支)；或遵医嘱。在使用氨甲苯酸冻干粉针剂时，患者要监护血栓形成并发症的可能性。对于有血栓形成倾向者(如急性心肌梗死)宜慎用。氨甲苯酸冻干粉针剂一般不单独用于弥散性血管内凝血所致的继发性纤溶性出血,以防进一步血栓形成,影响脏器功能,特别是急性肾功能衰竭。如有必要,应在肝素化的基础上才应用本品。如与其他凝血因子(如因子Ⅸ)等合用,应警惕血栓形成。一般认为在凝血因子使用后8小时再用本品较为妥善。由于氨甲苯酸冻干粉针剂可导致继发肾盂和输尿管凝血块阻塞,血友病或肾盂实质病变发生大量血尿时要慎用。宫内死胎所致低纤维蛋白原血症出血,肝素治疗较本品为安全。慢性肾功能不全时用量酌减,给药后尿液浓度常较高。治疗前列腺手术出血时,用量也应减少。使用氨甲苯酸冻干粉针剂期间,如出现任何不良事件和/或不良反应,请咨询医生。

氨甲苯酸为氨甲苯酸类抗纤维蛋白溶解药。具有与6-氨基乙酸、氨甲环酸相同的作用机理。其立体构形与赖氨酸相似，能竞争性地抑制纤溶酶与纤维蛋白的吸附，保护纤维蛋白，使其不被纤溶酶降解，从而达到止血作用。其抗纤溶活性比6-氨基已酸强4-5倍。氨甲苯酸在临床上通常可用于因原发性纤维蛋白溶解过度所引起的出血，包括急性或慢性、局限性或全身性的高纤溶出血，后者常见于癌症、白血病、妇产科意外、严重肝病出血等。药代动力学方面，氨甲苯酸静注后有效血药浓度可维持3-5小时。服药24小时，36％±5％以原形随尿排出，静注则排出63％±17％，其余为乙酰化衍生物。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。在下面的例子中，使用的pH调节剂(在本发明中亦即酸碱调节剂)，如无另外说明，是1M氢氧化钠溶液或者1M盐酸溶液，其用量是使制备粉针剂时，使冷冻干燥前所配制的溶液的pH值调节至某一规定值或范围，该规定值或范围是使所制得的冻干粉针剂用注射用水溶解成含氨甲苯酸浓度为10mg/ml的溶液所测定的pH值的值或范围。下文制备步骤为了举例的目的，并基于各举例的可比较性而作了某些具体描述，本领域技术人员根据已有知识完全可以从中概括得到本发明制备冻干粉针剂的方法。在下面配液制备各种组合物中，如未另外说明，每批的总配液量为1000瓶的量，但是列明配方时，均以每瓶含氨甲苯酸100mg的量阐明。

以下各实例，使用同一批市售原料药来制备制剂。该批原料药照周雪萍法检测，其中RRT1.7杂质的含量(相对于氨甲苯酸)为0.261％。

一、粉针剂制备例部分

制备例1、制备包含氨甲苯酸的粉针剂

配方：

氨甲苯酸	100mg，
		甘露醇	95mg，
右旋糖酐-20	5mg，
		pH调节剂	至pH4.0，
注射用水	适量，加至4ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分10mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装含活性成分100mg的药液于适宜大小的西林瓶中(药液约占西林瓶满口体积的约1/3～1/4)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex1；其它制备例的样品亦可类似表示。

制备例2、制备包含氨甲苯酸的粉针剂

配方：

氨甲苯酸	100mg，
		甘露醇	50mg，
右旋糖酐-20	10mg，
		pH调节剂	至pH4.5，
注射用水	适量，加至6ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分10mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装含活性成分100mg的药液于适宜大小的西林瓶中(药液约占西林瓶满口体积的约1/3～1/4)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex2；其它制备例的样品亦可类似表示。

制备例3、制备包含氨甲苯酸的粉针剂

配方：

氨甲苯酸	100mg，
		甘露醇	150mg，
右旋糖酐-40	2mg，
		pH调节剂	至pH3.5，
注射用水	适量，加至5ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分10mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装含活性成分100mg的药液于适宜大小的西林瓶中(药液约占西林瓶满口体积的约1/3～1/4)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex3；其它制备例的样品亦可类似表示。

制备例4、制备包含氨甲苯酸的粉针剂

配方：

氨甲苯酸

100mg，

甘露醇	200mg，
		右旋糖酐-70	5mg，
pH调节剂	至pH3.0，
		注射用水	适量，加至3ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料，置于不锈钢桶中，加入处方量约70％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.02％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分10mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装含活性成分100mg的药液于适宜大小的西林瓶中(药液约占西林瓶满口体积的约1/3～1/4)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex4；其它制备例的样品亦可类似表示。

制备例5、制备包含氨甲苯酸的粉针剂

配方：

氨甲苯酸	100mg，
		甘露醇	75mg，
右旋糖酐-20	5mg，
		pH调节剂	至pH5.0，
注射用水	适量，加至9ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料，置于不锈钢桶中，加入处方量约90％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.2％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分10mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装含活性成分100mg的药液于适宜大小的西林瓶中(药液约占西林瓶满口体积的约1/3～1/4)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线B进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex5；其它制备例的样品亦可类似表示。

在上述制备例1至制备例5制备粉针剂的过程中，使用周雪萍法检测，发现终产物粉针剂中的活性成分含量与理论投料量完全吻合，表明本发明方法中(特别是涉及步骤(1)炭处理)活性成分不会有损失。

在上述制备例1至制备例5制备粉针剂的过程中，使用周雪萍法检测，通过测定原料药、步骤(1)所得药液、步骤(5)所得粉针剂中RRT1.7杂质(相对于氨甲苯酸)的含量，结果显示，步骤(1)所得药液和步骤(5)所得粉针剂中RRT1.7杂质(相对于氨甲苯酸)的含量均远远低于原料药中RRT1.7杂质(相对于氨甲苯酸)的含量，并且步骤(1)所得药液和步骤(5)所得粉针剂二者中RRT1.7杂质(相对于氨甲苯酸)的含量基本相同，这表明，经过步骤(1)处理，可以有效地降低原料药中混杂的RRT1.7杂质。这种RRT1.7杂质降低的量，在本发明中可以用RRT1.7杂质残余量表征，该RRT1.7杂质残余量(％)可用下式计算：

RRT1.7杂质残余量＝[粉针剂RRT1.7杂质含量÷原料药RRT1.7杂质含量]×100％

上述RRT1.7杂质残余量(％)越接近于100％表示经历步骤(1)处理后原料药中RRT1.7杂质除去得越少，当低于100％并且离100％越远时，表明RRT1.7杂质除去得越多。

已经发现，上述制备例1至制备例5制备的全部粉针剂，它们的RRT1.7杂质残余量均小于15％，均在4.6％～12.1％范围内。

在另外的补充试验中，参照上述制备例1至制备例5的配方和制法，不同的仅是不添加右旋糖酐，结果制得的5批粉针的RRT1.7杂质残余量均82.8％～97.2％范围内。

在另外的补充试验中，参照上述制备例1、制备例2、或制备例3的配方和制法，不同的仅是将其中的甘露醇替换为等量的蔗糖、葡萄糖、乳糖、山梨醇、或甘氨酸，得到15批粉针，经测定，它们的RRT1.7杂质残余量均84.5％～96.7％范围内。

二、考察试验例部分

1、性能考察试验例：

本试验例考察粉针剂的外观和溶解性。已经发现，上文制备例1至制备例5所得全部七批粉针剂的外观均呈结实、完整的圆饼状、无裂块、无喷瓶等异常情况。

分别取制备例1至制备例5所得全部批次的粉针剂，揭开瓶盖塑料顶，用注射器从瓶塞穿刺注入注射用水(用量约为相应样品冷冻干燥前溶液体积的2倍)，用秒表记录复溶时间，每批样品测试5次，取平均值。结果，全部七批粉针剂试样的复溶时间均在15～43秒的范围内，例如Ex1的复溶时间为24秒，表明这些试样具有较快的临床上可接受的复溶性能；但是，当向制备例1的粉针中添加的甘露醇的量大于300mg或者当向制备例1的粉针中添加的右旋糖酐的量大于20mg(均相对于每100mg氨甲苯酸计)时，粉针剂的复溶时间显著地延长，都会达到130秒以上，因此在粉针剂中添加的甘露醇或者右旋糖酐过量时是不合适的。

2、粉针剂质量检测例：

针对上文制备例1至制备例5所得各批粉针剂以及市售品注射用氨甲苯酸(H20050339，北大高科华泰产，每瓶含氨甲苯酸0.1g)，照以下方法检测它们的酸度、溶液的澄清度与颜色、有关物质、干燥失重、无菌、热原、可见异物、不溶性微粒、含量等质量/性质指标：

酸度：取供试品1瓶，加水10ml使溶解，依法测定(中国药典2010年版二部附录VI H)，本领域通常要求pH值应为3.5～4.5。

溶液的澄清度与颜色：取供试品5瓶，分别加水5ml使溶解，依法检查(中国药典2010年版二部附录ⅨB及ⅨA)，本领域通常要求溶液应澄清无色。

有关物质：取装量差异项下的内容物，精密称取适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.16mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，加流动相稀释并制成每1ml中含1.6μg的溶液，作为对照溶液；照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高为记录仪满量程的10％～15％，再取上述两种溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍；供试品溶液色谱图如显杂质峰(辅料峰除外)，量取各杂质峰面积之和，本领域通常要求不得大于对照溶液主峰面积的0.8倍(0.8％)。

干燥失重：取供试品适量，在105℃干燥至恒重(中国药典2010年版二部附录ⅧL)，，本领域通常要求减失重量不得过3.5％。

热原：取供试品适量，加0.9％氯化钠溶液溶解并制成每1ml中含10mg的溶液，依法检查(中国药典2010年版二部附录Ⅺ D)，剂量按家兔体重每1kg注射5ml，本领域通常要求应符合规定。

无菌：取供试品加0.9％无菌氯化钠溶液使溶解，依法检查(中国药典2010年版二部附录Ⅺ H)，本领域通常要求应符合规定。

可见异物：取供试品，依法检查(中国药典2010年版二部附录ⅨH)，本领域通常要求应符合规定。

不溶性微粒：取供试品，依法检查(中国药典2010年版二部附录ⅨC)，本领域通常要求应符合规定。

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L的醋酸铵-冰醋酸(100∶1)为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为230nm；理论板数按氨甲苯酸峰计算应不低于3000；

测定法：取供试品装量差异项下的内容物，精密称取适量(约相当于氨甲苯酸32mg)置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液；另准确称取氨甲苯酸对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含32μg的溶液，作为对照品溶液，分别取上述两种溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本领域通常要求按平均装量计算，含氨甲苯酸(C8H9NO2·H2O)应为标示量(理论投料量)的95.0％～105.0％。

待测各粉针剂照上述方法检测，各项指标均在上述各指标所通常规定的范围内。

3、长期稳定性试验例：

针对上文制备例1至制备例5所得五批粉针剂以及市售品注射用氨甲苯酸(H20050339，北大高科华泰产，每瓶含氨甲苯酸0.1g)，使这些样品在40±2℃的室温条件下放置6月，参考上文“2、粉针剂质量检测例”的方法，考察这些粉针剂在0月时以及在6月时的各指标。结果显示全部六批粉针剂在经40℃放置6月后，各项检测指标仍然在上述各指标所通常规定的范围内。表明本发明粉针剂具有优异的稳定性。此外，还使用周雪萍法检测这些经40℃放置6月的粉针剂中RRT1.7杂质含量的增长情况，结果发现这些粉针剂的该RRT1.7杂质基本未见增加(相对于0月时的增加幅度<10％)。

4、安全性试验例：

本试验例对本发明组合物粉针进行安全性试验考察

本发明所得试样Ex1粉针、Ex2粉针、Ex3粉针，以及市售粉针(注射用氨甲苯酸，H20050339，北大高科华泰产)，照现行的药品注册法规要求(《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则课题》研究组；化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则，药物研究技术指导原则，北京：中国医药科技出版社，2006：124)，进行血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验，结果显示这些试样均符合血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验的规定。显示本发明组合物具有良好的安全性。例如，在刺激性方面，全部检测的粉针剂样品注射部位皮肤、静脉均呈现相似的变化，未见充血、水肿、硬结及坏死等异常现象。

Claims (10)

1.一种冻干粉针剂，其中包含氨甲苯酸和冻干赋形剂。

2.根据权利要求1的冻干粉针剂，其特征在于：

所述冻干赋形剂选自蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、山梨醇、甘氨酸；

其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～500；

其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～250；

其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～200；

其中氨甲苯酸与冻干赋形剂的重量比为100：50～150。

3.根据权利要求1的冻干粉针剂，其特征在于：

其中还包含酸碱调节剂；

其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合；

所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液；和/或

所述酸碱调节剂的用量是，使该冻干粉针剂用注射用水溶解成含氨甲苯酸以氨甲苯酸计浓度为10mg/ml的溶液时，该溶液的pH值在3.0～5.0范围内的量，例如该溶液的pH值在3.5～4.5范围内的量。

4.根据权利要求1的冻干粉针剂，其特征在于：

其中还包含右旋糖酐；

其中所述右旋糖酐选自右旋糖酐-20、右旋糖酐-40、右旋糖酐-70；

其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为100：1～25；

其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为200：2～20；和/或

其中氨甲苯酸与右旋糖酐的重量比为200：2～10。

5.根据权利要求1的冻干粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的氨甲苯酸和冻干赋形剂以及任选的右旋糖酐，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，根据药液pH值的偏离情况用酸碱调节剂调节至pH3.0～5.0，优选pH3.5～4.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

6.根据权利要求5的冻干粉针剂，其特征在于：

其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％；

其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.02％～0.2％；

步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是氨甲苯酸重量的10-100倍，例如20-75倍，例如约30-60倍；和/或

步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。

7.根据权利要求5的冻干粉针剂，其特征在于：

步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％；和/或

步骤(d)中除去水分后所得冷冻干燥物料中水分含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。

8.制备权利要求1-7任一项的冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的氨甲苯酸和冻干赋形剂以及任选的右旋糖酐，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，根据药液pH值的偏离情况用酸碱调节剂调节至pH3.0～5.0，优选pH3.5～4.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

9.根据权利要求8的方法，其特征在于：

步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％；

步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.02％～0.2％；

步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是氨甲苯酸重量的10-100倍，例如20-75倍，例如约30-60倍；和/或

步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。

10.根据权利要求8的方法，其特征在于：

步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是为2～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％；和/或

步骤(d)中除去水分后所得冷冻干燥物料中水分含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。