CN102423485B - 含有醋酸去氨加压素的口服组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物及其制备方法，其中包括：含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物，含有乳糖和纤维素的组合物，稀释剂、增溶剂、渗透促进剂、矫味剂、抗氧剂以及润滑剂。本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物起效稳定持久，副作用小；适用于片剂、胶囊和微丸等口服剂型。本发明用于治疗遗尿症，夜尿，尿崩症等疾病有良好效果。

Description

含有醋酸去氨加压素的口服组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物及其制备方法。

背景技术

加压素不足导致肾脏产生较大体积非常稀的尿液，其可引起严重脱水。去氨加压素(1-去氨基-8-D-精氨酸加压素，dDAVP)为加压素的类似物，是一种九肽，系对天然激素的化学结构进行两处改动而得，即1-半胱氨酸脱去氨基和以8-D-精氨酸取代8-L-精氨酸。这些结构改变后，使临床剂量的醋酸去氨加压素的作用时间延长，而不产生加压的副作用。用于治疗中枢性尿崩症。服用DDAVP后可减少尿液排出，增加尿渗透压，减低血浆渗透压，从而减少尿频和夜尿；也可用于治疗六岁或以上患者的夜间遗尿症。醋酸去氨加压素采用片剂和鼻喷雾剂两种形式，用于排泄延迟、失禁、原发性夜间遗尿、夜尿症、中枢性尿崩症、儿童原发性夜间遗尿等症状。

迄今为止，采用湿制粒法制备去氨加压素制剂，该方法包括在室温和一定湿度下进行一系列筛分和混合步骤，然后干燥。该方法的一个目的是保持去氨加压素受到最小水平的剪切力，该方法的缺点是，非常耗时且工作量大。

现有的颗粒制备中，使用水和乙醇的混合液作为造粒液，所得片剂不可避免地含有溶剂残留物，通常为5-6％的水和0.1％的乙醇(重量百分比)。干燥不能完全除去溶剂，因为完全除去固体剂型的干燥过程对工业规模来说成本太高，对去氨加压素造成热损伤。加入乙醇的主要目的是通过共沸缩短干燥的时间。

醋酸去氨加压素是一种肽类化合物，为避免被胃肠道酶破坏，按照现有技术制备的口服片剂，往往加大醋酸去氨加压素的用量，依然容易造成加压的副作用，因此，开发使用方便、制备工艺简单、副作用低的含有醋酸去氨加压素的口服组合物是本发明所要解决的问题。

发明内容

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物包括：含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂、含有乳糖和纤维素的组合物，稀释剂、增溶剂、渗透促进剂、矫味剂、抗氧剂以及润滑剂。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物包括：

含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物1-10g，其中醋酸去氨加压素0.01-10mg，高分子辅料0.2-10g，表面活性剂0.01-1g；

含有乳糖和纤维素的组合物20-100g，其中乳糖10-50g、纤维素10-50g，其中乳糖选自α乳糖、β乳糖、无定型乳糖；纤维素选自粒径2-50μm的羟甲基丙基纤维素、微晶纤维素；

稀释剂0.1-50g，其中稀释剂选自玉米淀粉、马铃薯淀粉、红薯淀粉，小麦淀粉、大米淀粉；

增溶剂0.1-50g，其中增溶剂选自多乙氧基醚、聚氧乙基化乙二醇乙醚、聚氧乙基化烷基酚、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯、甘油酯、脱水山梨醇酯和甘油蔗糖酯；

渗透促进剂0.1-5g，其中渗透促进剂选自冰片、薄荷脑、樟脑、月桂醇和肉豆蔻酸异丙酯；

矫味剂0.01-5g，其中矫味剂选自香草提取物，蜂蜜提取物，苹果提取物，柠檬提取物、橙提取物、柚提取物、樱桃提取物、木梅提取物；

抗氧剂0.1-3g，其中抗氧剂选自维生素C、维生素E、儿茶酚、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯、硫代甘油、抗坏血酸钠、甲醛合次硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、BHT、BHA、五子酸丙酯、乙二胺四乙酸二钠、二乙烯三胺五乙酸；以及

润滑剂1-3g，其中润滑剂选自：硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、棕榈油硬脂酰甘油酯和硬脂酰醇富马酸钠以及它们的混合物。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有乳糖和纤维素的组合物的制备方法是：将乳糖和羟甲基丙基纤维素溶解，再结晶，形成混合晶体，真空干燥，粉碎。例如，10-50gα乳糖，加50-300g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10-50g 20μm的羟甲基丙基纤维素，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用0-5℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有β乳糖和羟甲基丙基纤维素的组合物的制备方法是：10-50g β乳糖，加50-300g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10-50g 10μm的羟甲基丙基纤维素，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用0-5℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

含有无定型乳糖和微晶纤维素的组合物的制备方法是：10-50g无定型乳糖，加50-300g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10-50g 25μm的微晶纤维素，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用0-5℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其制备方法为：将含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物制成缓释微球颗粒；然后与含有乳糖和纤维素的组合物、增溶剂、渗透促进剂、矫味剂、抗氧剂、润滑剂混合，制成片剂。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其制备方法为：将含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物，与含有乳糖和纤维素的组合物、增溶剂、渗透促进剂、矫味剂、抗氧剂、润滑剂混合，直接压片，制成片剂。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物的制备方法是：将醋酸去氨加压素、高分子辅料、表面活性剂制备得到缓释微球颗粒组合物。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的长效微球组合物的制备方法是：

(1)将一定量的醋酸去氨加压素、辅料溶解在缓冲溶液中，制成内水相溶液；

(2)将药用高分子聚合物制成油相溶液；

所述的药用高分子辅料选自壳聚糖、聚乙交酯-丙交酯、明胶、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸、聚乙醇酸、聚乙烯醇、聚乙二醇、羟基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸共聚物中的一种或两种以上的混合物；

(3)将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，加入表面活性剂，搅拌混合均匀，制成初乳；

所述的表面活性剂选自聚氧乙烯型表面活性剂和多元醇型表面活性剂，例如，维生素E琥珀酸聚乙二醇酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物、泊洛沙姆、聚山梨酯或单硬脂酸甘油酯、硬酯酸聚氧乙烯酯或聚氧乙烯烷基醚、失水山梨醇酯、硬脂酸聚烃氧基酯，及其组合物；

所述表面活性剂的用量为0.01-5毫克/毫升，(优选地，以所述组合物的总重量计)；

(4)将辅料和锌盐充分溶解于水中，制成外水相溶液；

所述辅料选自：海藻酸钠、乙二醇、1，4-丁二醇、甘油、水溶性聚乙二醇；

所述锌盐包括无机锌盐和有机锌盐，其中无机锌盐选自：碳酸锌、氯化锌、硝酸锌或硫酸锌，有机锌盐选自：醋酸锌、甘氨酸锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、赖氨酸锌或蛋氨酸锌；

(5)将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，制成W/O/W型复乳；

(6)将W/O/W型复乳转移到含盐水溶液中，搅拌均匀，使有机溶剂挥发，过滤，洗涤，冻干，得微球；

步骤(6)所述盐选自：NaCl、CaCl₂。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物的制备方法是：

(1)将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液中，制成内水相溶液，其中醋酸去氨加压素的浓度为20-600μg/毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为0.05-1毫克/毫升，海藻糖的浓度为0.05-5毫克/毫升，甘露醇的浓度为0.05-2毫克/毫升；

(2)将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.1-0.5克/毫升；

(3)将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为20∶1至2∶1，加入泊洛沙姆0.1-1毫克/毫升，在5-30℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，在4-10℃下保存；

(4)将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为0.5-50毫克/毫升，葡萄糖酸锌的浓度为0.1-2毫克/毫升；

(5)将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶50至1∶200，制成W/O/W型复乳，在4-10℃下保存；

(6)将W/O/W型复乳转移到含有1-2毫克/毫升NaCl和1-2毫克/毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀；

(7)使有机溶剂在低压中挥发，过滤，洗涤，真空冻干，得微球。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中：

所述步骤(3)中的搅拌温度为10-25℃，搅拌速度为3000-8000转/分，搅拌时间为0.2-0.5小时；

所述步骤(5)中的搅拌温度为10-25℃，搅拌速度为1000-3000转/分，搅拌时间为0.2-0.5小时；

所述步骤(6)中的搅拌温度为10-25℃，搅拌速度为1000-3000转/分，搅拌时间为0.2-0.5小时。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中微球的制备方法为：将上述复乳移入超临界装置的高压容器中，通入超临界二氧化碳，升压至7.4-10MPa，室温20-60分钟后释放，有机溶剂被超临界二氧化碳带走，微球溶胀沉析而出，过滤，洗涤，真空冻干，得微球。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的制备方法为：

将聚乳酸和1，4-丁二醇、氯仿、聚乙烯吡咯烷酮混合，搅拌，于50℃微波处理，减压蒸馏除去氯仿，用乙酸乙酯将反应粗产物溶解，在不断搅拌下将其加入到蒸馏水中，过滤，并用水多次洗涤，真空干燥，得白色固体酯化聚乳酸，

将上述制得的酯化聚乳酸，加入氯仿及二甲基亚砜、乙酸酐、D101大孔树脂，室温下搅拌反应，用乙醇沉淀并洗涤，真空干燥，得白色固体产物醛化聚乳酸，

将壳聚糖、以上制得的醛化聚乳酸加入二甲基亚砜中，室温下搅拌反应，用乙醇沉淀，沉淀物在索氏抽提器中抽提3天，真空干燥，得浅黄色粉末状固体壳聚糖-聚乳酸的聚合物。

上述的含有醋酸去氨加压素的口服组合物可以制成片剂、胶囊和微丸。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，是用于治疗遗尿症、夜尿、尿崩症的药物。

本发明涉及的一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其中含有20-600μg醋酸去氨加压素，所述片剂重量为50mg-1000mg。

本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物起效稳定持久，副作用小，用于治疗遗尿症，夜尿，尿崩症等疾病有良好效果。

本发明的有益效果

该含有醋酸去氨加压素的口服组合物能够减少醋酸去氨加压素用药次数，用药剂量，减少加压等副作用，是一种理想的抗遗尿的药物，制备工艺简单，应用方便，成本低。本发明采用毒性小，注射安全的分散剂及油相等材料制备颗粒，使醋酸去氨加压素在片剂中均匀分散，成为一种醋酸去氨加压素的长效剂型。

体外实验表明，用醋酸去氨加压素为包裹对象，电镜扫描结果显示，所制得的醋酸去氨加压素微球颗粒形态圆整，粒度分布均匀，粒径分布在20微米以下，包封率在75.6％以上，体外缓释可以达2周释药，符合长效制剂特征。一次口服后能够在较长时间内发挥药效。将醋酸去氨加压素做成微球颗粒，再制成片剂，可以延长药物作用时间，大大提高药物疗效和经济效益。

本发明的口服组合物崩解迅速，释放延长，对药物的长效发挥，具有显著意义。本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物起效稳定，副作用小，用于治疗遗尿症，夜尿，尿崩症等疾病有良好效果。

稳定性试验结论：影响因素试验结果表明，本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物在光照、高温50℃-15℃条件下放置2个月后，含量不下降，有关物质没有增加；在加速试验条件(20℃±5℃，RH60±10％)放置8个月，才出现含量下降、有关物质增加；在长期试验条件(2℃-10℃)放置12个月，各项指标均无明显改变。

本发明涉及用于治疗中枢性尿崩症的药物。服用DDAVP后可减少尿液排出，增加尿渗透压，减低血浆渗透压，从而减少尿频和夜尿；也可用于治疗六岁或以上患者的夜间遗尿症。

具体实施方式

本发明的保护范围包括而不限于本文本所描述的范围。

实施例1

含有乳糖和纤维素的组合物的制备方法：10g α乳糖，加50g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10g 20μm的羟甲基丙基纤维素(HPMC)，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用1℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

实施例2

含有乳糖和纤维素的组合物的制备方法：10g β乳糖，加50g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10g 10μm的羟甲基丙基纤维素(HPMC)，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用3℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

实施例3

含有乳糖和纤维素的组合物的制备方法：10g无定型乳糖，加50g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10g 25μm的微晶纤维素(MCC)，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用5℃的蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎。

实施例4

本发明的乳糖和纤维素的组合物的外观形态、休止角、卡氏指数、充填性、硬度、崩解时限、主药含量的考察

实施例1-3的乳糖和纤维素的组合物，与10g乳糖和10g纤维素的简单混合物相比，在外观形态、休止角、卡氏指数、充填性、硬度、崩解时限、主药含量上都有明显的改变。

在显微镜下，看到实施例1-3的复合辅料中的纤维素紧密附着在乳糖晶体的表面，与乳糖成为一个整体；而简单混合物中的纤维素则与乳糖晶体完全分散，混合不均匀。

休止角的测定：采用固定圆锥底法，即取一定量的待测粉末，在一定振动频率(约100Hz)下使粉末通过漏斗均匀流出，直到获得最高的圆锥体为止，测量圆锥体斜面与平面的夹角即得。重复3次，取其平均值，结果见表1。

卡氏指数的测定：给予一定强度的振动，使粉末均匀流入一个100mL杯子中，用手术刀刮掉杯子上面多余的粉末，称重，重量除以100即得松密度。在粉末均匀流入100mL杯子的同时，对杯子给予一定强度的撞击(3min共210次)，用手术刀刮掉杯子上面多余的粉末，称重，重量除以100即得轻敲密度。卡氏指数通过公式：卡氏指数＝(1-松密度/轻敲密度)×100％计算而得，结果见表1。

表1

结果表明，复合辅料的休止角在32°，显示出良好的流动性，而简单混合物的休止角达46°，流动性很差。复合辅料的卡氏指数为18.7％，显示了较好的直接压片性能，但简单混合物的卡氏指数超过了28％。

充填性的考察：对粉体层进行振荡时，粉体层密度的变化可由振荡次数和体积的变化求得。这种充填速度可由川北方程进行分析，其中的常数可反映粉末的流动性与充填性。计算方程：N/C＝1/ab+N/a，式中，N为振动次数；C为体积减少度，即C＝(V0-Vn)/V0，Vn为轻敲n次后粉体的体积；a为最终体积减少度，b为充填速度常数。考察结果见表2。a值越小，流动性越好，复合辅料的流动性较好，这与前面休止角与卡氏指数的测定结果一致；b值越大，粉体的充填性越好，说明复合辅料的充填性较好，适合直接压片技术。

表2

组合类别	a	b	R
				实施例1的α乳糖和HPMC的组合物	0.1854	0.0519	0.9994
10gα乳糖和10gHPMC的简单混合物	0.2546	0.0502	0.9912
				实施例2的β乳糖和HPMC的组合物	0.1859	0.0526	0.9994
10gβ乳糖和10gHPMC的简单混合物	0.2563	0.0505	0.9981
				实施例3的无定型乳糖和MCC的组合物	0.1831	0.0522	0.9996
10g无定型乳糖和10gMCC的简单混合物	0.2545	0.0502	0.9984

片剂硬度的测定：在压片前，在各辅料中分别加入1％的硬脂酸镁作为润滑剂，选用10mm直径的冲模，在旋转压片机上分别调节不同的压力压片，片剂重量为200mg。

结果表明：在乳糖中加入纤维素后，在相同压力下的片剂硬度远远大于木糖醇、山梨糖醇晶体，说明纤维素的加入改变了乳糖的物理压缩性质，由脆性变型转换成塑性变型，显著增强了乳糖的可压性。复合辅料的片剂硬度大于简单混合物的片剂硬度，说明复合辅料的可压性更好，更适合粉末直接压片。

复合辅料的稀释潜力：按照处方进行组分的混合，在不同压力下制成片剂，测定片剂的硬度，并在200MPa压力下考察片剂的脆碎度。结果表明，加入淀粉可显著改善辅料的崩解性；复合辅料与简单混合物相比，崩解速度更快，并且随着压力的增大，崩解时限几乎不变，因此具有优良的崩解性能。

实施例1-3的乳糖、纤维素的组合物(取100mg组合物，每100mg混入100μg醋酸去氨加压素，压片)，与市售普通醋酸去氨加压素片剂(每片重100mg，含有100μg醋酸去氨加压素)的崩解比较。

溶出度测定：采用转篮法测定，以人工胃液为溶出介质，具体方法参见中国药典。分别测定实施例1-3及普通片的醋酸去氨加压素。结果见表4。可见，普通片在8min内完全崩解，实施例1-3在3min内完全崩解，其崩解速率快于大于普通片，能快速分散。

表4

对比	崩解时间(分钟)
		实施例1的α乳糖和HPMC的组合物	2.5
实施例2的β乳糖和HPMC的组合物	2.7
		实施例3的无定型乳糖和MCC的组合物	3.0

市售普通醋酸去氨加压素片剂

7.8.

实施例5

壳聚糖-聚乳酸的聚合物的制备方法：将分子量为5000的聚乳酸500克和1，4-丁二醇混合，聚乳酸和1，4-丁二醇的摩尔比为1∶4，加入乙酸乙酯500毫升、聚乙烯吡咯烷酮3克，搅拌，50摄氏度，微波反应2小时。减压蒸馏除去乙酸乙酯。用乙醇将反应粗产物溶解，在不断搅拌下将其加入到蒸馏水中，过滤，并用水多次洗涤，真空干燥，得白色固体酯化聚乳酸，产率95％。

将上述制得的酯化聚乳酸50克，加入50毫升乙酸乙酯及200毫升二甲基亚砜、150克乙酸酐、D101大孔树脂5克，室温下搅拌反应12小时，用乙醇沉淀并洗涤，真空干燥，得白色固体产物醛化聚乳酸，产物收率为97％。

将壳聚糖20克、以上制得的醛化聚乳酸50克加入100毫升二甲基亚砜中，室温下搅拌反应48小时。用乙醇沉淀，沉淀物在索氏抽提器中抽提4天，真空干燥，得浅黄色粉末状固体，壳聚糖-聚乳酸的聚合物的产率为95％。

实施例6

含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒的制备方法：

含有醋酸去氨加压素的口服组合物

(1)将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液中，制成内水相溶液(1升)，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg/毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为0.05毫克/毫升，海藻糖的浓度为0.05毫克/毫升，甘露醇的浓度为0.05毫克/毫升；

(2)将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.1克/毫升；

(3)将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为20∶1，加入泊洛沙姆0.1毫克/毫升，在5℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为3000转/分，搅拌时间为0.2小时；在4℃下保存；

(4)将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为0.5毫克/毫升，葡萄糖酸锌的浓度为0.1毫克/毫升；

(5)将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶50，制成，在4℃下保存，搅拌速度为1000转/分，搅拌时间为0.2小时；

(6)将W/O/W型复乳转移到含有1毫克/毫升NaCl和1毫克/毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀，搅拌温度为10℃，搅拌速度为1000转/分，搅拌时间为0.2小时；

(7)使有机溶剂在低压中挥发，过滤，洗涤，真空冻干，得微球。

实施例7

含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒的制备方法：

(1)将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液中，制成内水相溶液(1升)，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg/毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为1毫克/毫升，海藻糖的浓度为5毫克/毫升，甘露醇的浓度为2毫克/毫升；

(2)将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.5克/毫升；

(3)将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为2∶1，加入泊洛沙姆1毫克/毫升，在30℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为8000转/分，搅拌时间为0.5小时；在10℃下保存；

(4)将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为50毫克/毫升，葡萄糖酸锌的浓度为2毫克/毫升；

(5)将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶200，制成W/O/W型复乳，在10℃下保存，搅拌速度为3000转/分，搅拌时间为0.5小时；

(6)将W/O/W型复乳转移到含有2毫克/毫升NaCl和2毫克/毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀，搅拌温度为25℃，搅拌速度为3000转/分，搅拌时间为0.5小时；

(7)使有机溶剂在低压中挥发，过滤，洗涤，真空冻干，得微球。

实施例8

含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒的制备方法：

(1)将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液，制成内水相溶液(1升)，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg/毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为0.08毫克/毫升，海藻糖的浓度为2毫克/毫升，甘露醇的浓度为1毫克/毫升；

(2)将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.4克/毫升；

(3)将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为4∶1，加入泊洛沙姆0.5毫克/毫升，在20℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为5000转/分，搅拌时间为0.4小时，在6℃下保存；

(4)将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为10毫克/毫升，葡萄糖酸锌的浓度为0.5毫克/毫升；

(5)将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶120，制成W/O/W型复乳，在6℃下保存，搅拌速度为2000转/分，搅拌时间为0.4小时；

(6)将W/O/W型复乳转移到含有1.5毫克/毫升NaCl和1.5毫克/毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀，搅拌温度为15℃，搅拌速度为2000转/分，搅拌时间为0.4小时；

(7)将上述复乳移入超临界装置的高压容器中，通入超临界二氧化碳，升压至8MPa，室温40分钟后释放，有机溶剂被超临界二氧化碳带走，微球溶胀沉析而出，过滤，洗涤，真空冻干，得微球。

实施例9

含有醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒的累积溶出度比较

实施例6-8的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒(取100mg颗粒，每100mg含有100μg醋酸去氨加压素)，与市售普通醋酸去氨加压素片剂(每片重100mg，含有100μg醋酸去氨加压素)的累积溶出度比较。

溶出度测定：采用转篮法测定，以人工胃液为溶出介质，具体方法参见中国药典。分别测定实施例6-8及普通片的醋酸去氨加压素。结果见表5。可见，普通片在60min已完全溶出，实施例6-8的组合物颗粒在540min内完全溶出，其溶出速率小于普通片，能起到长效释放的作用。

表5

实施例10

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例6的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒5g，

实施例1的乳糖和纤维素的组合物20g，

玉米淀粉200g，

聚氧乙烯蓖麻油20g，

苹果香精0.1g，

维生素E0.2g，

硬脂酸镁1g。

将上述材料直接压片，制成片剂。具体方法：将上述除了硬脂酸镁之外的组分混合10分钟，加入硬脂酸镁，混合1分钟。压片。压制压力30KN，片剂硬度62N。

实施例11

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例7的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒4g，

实施例2的乳糖和纤维素的组合物25g，

小麦淀粉300g，

聚氧乙烯硬脂酸酯20g，

橘子香精0.1g，

维生素C0.2g，

硬脂酸镁1g。

将上述材料直接压片，制成片剂。具体方法：将上述除了硬脂酸镁之外的其它组分混合10分钟，加入硬脂酸镁，混合1分钟。压片。压制压力34KN，片剂硬度59N。

实施例12

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例8的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒5g，

实施例3的乳糖和纤维素的组合物40g，

马铃薯淀粉300g，

泊洛沙姆30g，

柠檬香精0.15g，

亚硫酸钠0.4g，

硬脂酸钙2g。

将上述材料直接压片，制成片剂。具体方法：将以上除了硬脂酸钙之外的其它组分混合10分钟，加入硬脂酸钙，混合2分钟。压片。压制压力34KN，片剂硬度65N。

实施例10-12的含有醋酸去氨加压素的口服组合物的片剂硬度强于普通含有醋酸去氨加压素的口服组合物。

实施例13

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例6的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒5g，

实施例1的乳糖和纤维素的组合物20g，

玉米淀粉200g，

聚氧乙烯蓖麻油20g，

苹果香精0.1g，

维生素E0.2g，

硬脂酸镁1g。

将上述材料制粒后，压片，制成片剂。具体方法：将实施例6的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒、含有乳糖和纤维素的组合物、玉米淀粉、聚氧乙烯蓖麻油混合15分钟，加入90％乙醇，制粒后，加入苹果香精、维生素E、硬脂酸镁，混合2分钟。压片。压制压力29KN，片剂硬度54N。

实施例14

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例7的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒4g，

实施例2的乳糖和纤维素的复合物25g，

小麦淀粉300g，

聚氧乙烯硬脂酸酯20g，

橘子香精0.1g，

维生素C0.2g，

硬脂酸镁1g。

将上述材料制粒后，压片，制成片剂。具体方法：将实施例7的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒、含有乳糖和纤维素的组合物、小麦淀粉、聚氧乙烯硬脂酸酯混合20分钟，加入95％乙醇，制粒后，加入橘子香精、维生素C、硬脂酸镁，混合1分钟。压片。压制压力31KN，片剂硬度56N。

实施例15

含有醋酸去氨加压素的口服组合物的制备方法：

实施例8的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒5g，

实施例3的乳糖和纤维素的组合物40g，

马铃薯淀粉300g，

泊洛沙姆30g，

柠檬香精0.15g，

亚硫酸钠0.4g，

硬脂酸钙2g。

将上述材料制成颗粒后，压片，制成片剂。具体方法：将实施例8的醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒、含有乳糖和纤维素的组合物、马铃薯淀粉、泊洛沙姆混合20分钟，加入95％乙醇，制粒后，加入柠檬香精、亚硫酸钠、硬脂酸钙，混合1分钟。压片。压制压力29KN，片剂硬度53N。

实施例13-15的含有醋酸去氨加压素的口服组合物的片剂硬度强于普通含有醋酸去氨加压素的口服组合物。

实施例16

本发明含有醋酸去氨加压素的口服组合物的血药浓度特点

通过检测本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物的血药浓度经时过程，估算相应的药代动力学参数，并以市售的含有醋酸去氨加压素的口服组合物为标准参比制剂，进行生物利用度和生物等效性评价，为临床用药提供参考依据。

研究方法：

1、采用单剂量双交叉试验设计方法，两周期间隔时间为1周。每组每次分别服用含有醋酸去氨加压素的口服组合物受试制剂或参比制剂。用RIA测定其血药浓度-时间数据，在计算机上进行各项药代动力学参数的计算。

2、给药剂量：单剂量一次口服醋酸去氨加压素参比制剂和受试制剂，醋酸去氨加压素均为100μg，用200ml水送服。

3、血样采集时间：分别于服药前及服药后0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，5，6，8h，静脉采血各5.0ml。血样肝素抗凝，4500转离心5分钟，分离血浆，置-20℃储存至测定。

按照临床研究方案筛选和录取符合要求的受试者，随机分组，按实验方案服药，受试者服药后在I期临床病房停留至少24小时。在临床医生的监护下，观察受试者的耐受性和不良反应发生情况并记录在CRF上。一旦出现严重的不良反应，应采取相应的急救措施和治疗。受试者在服药后禁止剧烈活动，也不可躺卧。

受试者数(计划的和分析的)：本试验计划入选的受试者例数为20例。

入选标准：18～40周岁的健康男性20人，在标准体重±10％范围或体重指数在19-24范围内，同一批受试者体重(kg)不宜悬殊过大；身体健康，无心、肝、肾、消化道、神经系统、精神异常及代谢异常等病史；体格检查示血压、心率、呼吸状况、肝脾等无异常；理化检查示血常规，尿常规，肝功能(AST、ALT)，肾功能(BUN、Cr)，心电图无异常；无药物过敏史，无体位性低血压史；试验前两周内、试验期间不服用其它任何药物；无烟酒嗜好；知情同意，志愿受试。获得知情同意书过程符合GCP规定。

排除标准：有药物过敏史。试验前接受过其他药物，并在清洗期内。受试者服用违禁药物，或有滥用药物和酒精史。受试者有胃肠道异常、消化道溃疡，心血管、肝、肾、肺或代谢异常神经系统等病史，或现有上述疾病。属于说明书中列出的禁忌范围。

淘汰标准：未能按试验方案要求进行合作，依从性差。因各种原因在试验结束前退出。试验期间服用其他药物。不符合既定试验条件。

受试制剂：实施例10的含有醋酸去氨加压素的口服组合物，规格：每片含100μg；用量：1片/1次/天。

参比制剂：市售普通醋酸去氨加压素片剂，规格：每片含100μg；用量：2片/2次/天。

给药方案：要求隔夜空腹，即服药试验的当天早晨不吃早饭，并由专人在受试者的前臂静脉放置留置针。然后在研究人员指导下服药(或进餐)。试验期间禁烟、酒、茶及含咖啡因的饮料。按以上研究方法给药。

评价标准：完成人体相对生物利用度及其生物等效性试验过程受试者的血药浓度数据，用BAPP软件计算药代动力学参数，参照SFDA颁布的药物制剂人体生物利用度和生物等效性标准进行生物等效性评价。用末端相浓度取自然对数后对时间回归计算，求得表观消除速率常数λn；Cmax及Tmax均为实测值；并求得末端相消除半衰期(T1/2)、曲线下面积(AUC)、CL/F，用双向单侧t检验对AUC受试药、AUC参比药、达峰时间Tmax及峰浓度Cmax四个参数进行生物等效性检验。

统计方法：将所有完成药代动力学试验过程受试者血药浓度数据经BAPP软件计算药代动力学参数，所有程序及原始资料均留档，计量资料描述统计采用均数、标准差，将采用双单侧t检验、方差分析等方法进行统计推断，并利用相应统计图、表的形式将结果呈现。

试验结果：

(1)建立了人血浆中醋酸去氨加压素RIA测定法，血浆中杂质不干扰样品测定，在该实验条件下，最低定量浓度为2pg/ml，方法回收率大于82.19％，批间和批内的变异系数小于15％；血浆中醋酸去氨加压素冻融稳定，质量控制亦符合要求。该方法符合生物样品分析的要求。

(2)20名健康受试者随机交叉口服本发明具体实施例10的含有醋酸去氨加压素的口服组合物(T)和市售的含有醋酸去氨加压素的口服组合物(R)，测定血浆中醋酸去氨加压素的浓度。

以市售的含有醋酸去氨加压素的口服组合物为标准对照，用面积法估算(AUC0-τ)的本发明具体实施例10的含有醋酸去氨加压素的口服组合物相对生物利用度以醋酸去氨加压素计为103.1％±22.9％。20名健康受试者口服受试制剂后，估算的醋酸去氨加压素消除半衰期为9.97±1.21h，达峰时间和达峰浓度分别为7.2±0.3h和98.23±21.7pg·ml^-1。

口服参比制剂后，估算的醋酸去氨加压素消除半衰期为1.63±0.2h，达峰时间和达峰浓度分别为1.7±0.4h和37.24±12.5pg·ml^-1。

因此，与现有的片剂相比，本发明的具体实施例10能实现长效缓释的结果。

实施例17

本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物的疗效

在该研究中评价40名长期遗尿的成年受试者，男女各半。体重45-89kg，平均重量为67kg，随机分为4组。

实施例10，规格：每片含100μg；用量：1片/1次/天，连续14天，10名；

实施例11，规格：每片含100μg；用量：1片/1次/天，连续14天，10名；

实施例12，规格：每片含100μg；用量：1片/1次/天，连续14天，10名；

参比制剂：市售普通醋酸去氨加压素片剂，规格：每片含100μg；用量：2片/2次/天，连续14天，10名。

观察指标及疗效判断标准：四组均于治疗前、治疗后，随访结束时分别记录遗尿次数，监测血压，检测尿常规、晨尿渗透压、肾功能和电解质。显效；遗尿次数减少不少于90％；有效：遗尿次数减少程度在30％-90％范围内；无效：遗尿次数减少不足30％；复发：显效或有效疗程结束后重新出现遗尿，每周次数不少于2次。

临床疗效：结果见下表6。

表6

类别	显效(人)	有效(人)	无效(人)	高血压(人)	头痛(人)	水肿(人)
							实施例10	7	3	0	0	0	0
实施例11	8	1	1	0	0	0
							实施例12	8	2	0	0	0	0
市售普通醋酸去氨加压素片剂	7	1	2	2	1	2

本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物三组疗效与参比制剂相比有显著性差异(P＜0.01)。市售普通醋酸去氨加压素片剂在服用过程中，出现了高血压、头痛、水肿等不良反应，而本发明的含有醋酸去氨加压素的口服组合物无不良反应。市售普通醋酸去氨加压素片剂复发的3人，都出现血压升高的不良反应。

Claims (4)

1.一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其特征在于，含有乳糖和纤维素的组合物20-40克，醋酸去氨加压素、高分子辅料、表面活性剂组合物4-5克和稀释剂、增溶剂、渗透促进剂、矫味剂、抗氧剂以及润滑剂；

其中含有乳糖和纤维素的组合物的制备方法为：10gα乳糖或β乳糖或无定型乳糖，加50g水，在90℃下搅拌溶解，降温到40℃，过滤，在滤液中加入10g20μm的羟甲基丙基纤维素，搅拌，在20℃结晶，抽滤脱除母液后，用蒸馏水洗涤，真空干燥，粉碎即得；

其中醋酸去氨加压素、高分子辅料和表面活性剂的组合物颗粒制备方法为：

1)壳聚糖-聚乳酸的聚合物的制备方法：将分子量为5000的聚乳酸500克和1，4-丁二醇混合，聚乳酸和1，4-丁二醇的摩尔比为1∶4，加入乙酸乙酯500毫升、聚乙烯吡咯烷酮3克，搅拌，50摄氏度，微波反应2小时，减压蒸馏除去乙酸乙酯；用乙醇将反应粗产物溶解，在不断搅拌下将其加入到蒸馏水中，过滤，并用水多次洗涤，真空干燥，得白色固体酯化聚乳酸，产率95％；

将上述制得的酯化聚乳酸50克，加入50毫升乙酸乙酯及200毫升二甲基亚砜、150克乙酸酐、D101大孔树脂5克，室温下搅拌反应12小时，用乙醇沉淀并洗涤，真空干燥，得白色固体产物醛化聚乳酸，产物收率为97％，将壳聚糖20克、以上制得的醛化聚乳酸50克加入100毫升二甲基亚砜中，室温下搅拌反应48小时；用乙醇沉淀，沉淀物在索氏抽提器中抽提4天，真空干燥，得浅黄色粉末状固体，壳聚糖-聚乳酸的聚合物的产率为95％；

2)将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液中，制成内水相溶液1升，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg／毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为0.05毫克／毫升，海藻糖的浓度为0.05毫克／毫升，甘露醇的浓度为0.05毫克／毫升；将上述壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.1克／毫升；

将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为20∶1，加入泊洛沙姆0.1毫克／毫升，在5℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为3000转／分，搅拌时间为0.2小时；在4℃下保存；

将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为0.5毫克／毫升，葡萄糖酸锌的浓度为0.1毫克／毫升；

将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶50，制成，在4℃下保存，搅拌速度为1000转／分，搅拌时间为0.2小时；

将w／O／w型复乳转移到含有1毫克／毫升NaCl和1毫克／毫升CaC12的水溶液中，搅拌均匀， 搅拌温度为10℃，搅拌速度为1000转／分，搅拌时间为0.2小时；

使有机溶剂在低压中挥发，过滤，洗涤，真空冻干，即得；

其中稀释剂含量为0.1-50g，选自玉米淀粉、马铃薯淀粉、红薯淀粉，小麦淀粉、大米淀粉；

增溶剂含量为0.1-50g，选自多乙氧基醚、聚氧乙基化乙二醇乙醚、聚氧乙基化烷基酚、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯、甘油酯、脱水山梨醇酯和甘油蔗糖酯；

渗透促进剂含量为0.1-5g，选自冰片、薄荷脑、樟脑、月桂醇和肉豆蔻酸异丙酯；

矫味剂含量为0.01-5g，选自香草提取物、蜂蜜提取物、苹果提取物、柠檬提取物、橙提取物、柚提取物、樱桃提取物、木梅提取物；

抗氧剂含量为0.1-3g，选自维生素C、维生素E、儿茶酚、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯、硫代甘油、抗坏血酸钠、甲醛合次硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、BHT、BHA、五子酸丙酯、乙二胺四乙酸二钠、二乙烯三胺五乙酸；

以及润滑剂含量为1-3g，其中润滑剂选自：硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、棕榈油硬脂酰甘油酯和硬脂酰醇富马酸钠以及它们的混合物。

2.根据权利要求1所述一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其特征在于，所述步骤2)采用以下方法替换：

将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液中，制成内水相溶液1升，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg／毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为1毫克／毫升，海藻糖的浓度为5毫克／毫升，甘露醇的浓度为2毫克／毫升；

将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.5克／毫升；

将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为2∶1，加入泊洛沙姆1毫克／毫升，在30℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为8000转／分，搅拌时间为0.5小时；在10℃下保存；

将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为50毫克／毫升，葡萄糖酸锌的浓度为2毫克／毫升；

将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶200，制成W／O／w型复乳，在10℃下保存，搅拌速度为3000转／分，搅拌时间为0.5小时；

将w／O／w型复乳转移到含有2毫克／毫升NaCl和2毫克／毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀， 搅拌温度为25℃，搅拌速度为3000转／分，搅拌时间为0.5小时；

使有机溶剂在低压中挥发，过滤，洗涤，真空冻干，即得。

3.根据权利要求1所述一种含有醋酸去氨加压素的口服组合物，其特征在于，所述步骤2)采用以下方法替换：

将一定量的醋酸去氨加压素、乙二胺四乙酸钠、海藻糖、甘露醇溶解在磷酸盐缓冲溶液，制成内水相溶液1升，其中醋酸去氨加压素的浓度为100μg／毫升，乙二胺四乙酸钠的浓度为0.08毫克／毫升，海藻糖的浓度为2毫克／毫升，甘露醇的浓度为1毫克／毫升；

将壳聚糖-聚乳酸的聚合物用大豆油溶解制成油相溶液，其中壳聚糖-聚乳酸的聚合物的浓度为0.4克／毫升；

将上述含醋酸去氨加压素的内水相溶液加入到油相溶液中，油相溶液与内水相溶液的比例为4∶1，加入泊洛沙姆0.5毫克／毫升，在20℃的温度下搅拌混合均匀，制成初乳，搅拌速度为5000转／分，搅拌时间为0.4小时，在6℃下保存；

将海藻酸钠和葡萄糖酸锌充分溶解于水中，制成外水相溶液，其中海藻酸钠的浓度为10毫克／毫升，葡萄糖酸锌的浓度为0.5毫克／毫升；

将上述初乳加入到外水相溶液中搅拌均匀，初乳与外水相溶液的比例为1∶120，制成w／O／W型复乳，在6℃下保存，搅拌速度为2000转／分，搅拌时间为0.4小时；

将W／O／w型复乳转移到含有1.5毫克／毫升NaCl和1.5毫克／毫升CaCl2的水溶液中，搅拌均匀，搅拌温度为15℃，搅拌速度为2000转／分，搅拌时间为0.4小时；

将上述复乳移入超临界装置的高压容器中，通入超临界二氧化碳，升压至8MPa，室温40分钟后释放，有机溶剂被超临界二氧化碳带走，微球溶胀沉析而出，过滤，洗涤，真空冻干，即得。

4.权利要求1-3任一所述的口服组合物在制备遗尿症、夜尿、尿崩症的药物中的应用。