CN104069068A

CN104069068A - 炔丙基半胱氨酸固体分散体及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN104069068A
Application number: CN201310107350.3A
Authority: CN
Inventors: 朱依谆; 黄澄嵘; 阚君陶; 刘洪瑞
Original assignee: Fudan University
Current assignee: Fudan University
Priority date: 2013-03-29
Filing date: 2013-03-29
Publication date: 2014-10-01
Anticipated expiration: 2033-03-29
Also published as: CN104069068B

Abstract

本发明属化学制药领域，涉及一种化合物炔丙基半胱氨酸固体分散体及其制备方法和用途。本发明采用炔丙基半胱氨酸为药物活性成分，加入载体材料为阻滞剂，采用溶剂法制备炔丙基半胱氨酸固体分散体，可制成胶囊、压片和微丸剂型。本发明解决了炔丙基半胱氨酸（SPRC）在体内溶出快、吸收快、消除快，疗效维持时间较短，须多次给药维持体内有效血药浓度得难题，本发明的炔丙基半胱氨酸缓释固体分散体能够提高心衰大鼠的心功能，减小心肌梗死的面积，对于心衰的保护效果有明显的提高。

Description

炔丙基半胱氨酸固体分散体及其制备方法和用途

技术领域

本发明属化学制药领域，涉及炔丙基半胱氨酸固体分散体及其制备方法以及在制备保护心衰的药物中的用途。

背景技术

现有技术公开了炔丙基半胱氨酸是一种含硫氨基酸，是烯丙基半胱氨酸（SAC）的衍生物，研究显示，SAC在体内和体外模型中具有心肌保护作用，但炔丙基半胱氨酸仍存在如：极性较大，水溶性较大，在体内溶出快、吸收快、消除快，疗效维持时间较短，须多次给药维持体内有效血药浓度等缺陷。

固体分散体系指药物以微粒、微晶或分子状态等形式均匀分散在固态载体物质中的体系。其主要特点是利用不同性质的载体使药物在高度分散状态下，达到不同的用药目的：用水溶性高分子载体，能够增加一些难溶性药物的溶解度和释放速度，提高口服生物利用度；用难溶性高分子载体则不但能够提高药物生物利用度，还能延缓或控制药物释放。

本发明拟解决炔丙基半胱氨酸（SPRC）存在的上述缺陷，拟以不同高分子聚合物为阻滞剂，制备SPRC固体分散体，以探索水溶性药物缓控释的可能性和方法。

发明内容

本发明的目的是为克服现有技术的缺陷，提供炔丙基半胱氨酸固体分散体及其制备方法和用途。

本发明的炔丙基半胱氨酸固体分散体能解决炔丙基半胱氨酸（SPRC）在体内溶出快、吸收快、消除快，疗效维持时间较短，须多次给药维持体内有效血药浓度的难题。

本发明采用炔丙基半胱氨酸为药物活性成分，加入载体材料，采用溶剂法制备炔丙基半胱氨酸固体分散体，进一步制成胶囊、压片和微丸剂型。

本发明中，所述的炔丙基半胱氨酸的分子式和结构如下式所示：

本发明中，所述的载体材料可选自乙基纤维素类辅料，水分散体类辅料以及脂类辅料；

本发明中，以炔丙基半胱氨酸为药物活性成分，以不同高分子聚合物载体材料为阻滞剂，采用溶剂法或熔融法制备SPRC缓释固体分散体；本发明的一个实施例中，优选溶剂法；

本发明中，阻滞剂选自乙基纤维素（EC）；苏丽丝；kolicoa；水分散体尤特奇RS-30D； RL-30D；NE-30D，尤特奇RS-PO，尤特奇 RL-PO，尤特奇RSPO或尤特奇RLPO等载体材料作为阻滞剂，本发明的一个实施例中，优选载体材料尤特奇RS-30D为阻滞剂；

本发明中，所述的载体材料与药物的投料重量比为1:1～10:1。

本发明中，所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体进一步制成缓释片剂。

本发明制得的炔丙基半胱氨酸缓释固体分散体进行了体外释放实验研究。

本发明采用制得的炔丙基半胱氨酸缓释固体分散体进行心衰大鼠的心肌保护作用试验，结果显示，所述的缓释固体分散体能克服现有技术的普通SPRC存在的溶出快、吸收快、消除快，疗效维持时间较短，对慢性疾病如：心力衰竭保护作用有限等的缺陷，所述炔丙基半胱氨酸固体分散体通过缓慢释放药物而达到治疗心衰（慢性疾病）的目的，能够提高心衰大鼠的心功能，减小心肌梗死的面积，对于心衰的保护效果有明显的提高。

附图说明

图1.乙基纤维素类辅料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度图。

图2.水分散体类辅料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度图。

图3.脂类辅料熔融法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度图。

图4.不同尤特奇RS-30D用量固体分散体中SPRC累积释放度图。

图5.三批缓释固体分散体中SPRC的累积释放度图。

图6.SPRC固体分散体对心衰大鼠心功能的影响。

图7. SPRC固体分散体对心衰大鼠心脏梗死面积的影响。

具体实施方式

实施例 1不同种类载体材料对炔丙基半胱氨酸溶出度影响实验

（1）乙基纤维素类载体材料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体

将不同型号的乙基纤维素用溶剂法制备SPRC缓释固体分散体。取适量EC20cp、EC45cp、EC200cp 3种不同黏度的乙基纤维素( EC )，无水乙醇溶解，备用，按药物与辅料量1:4的比例称取SPRC，并以适量水溶解，将药物水溶液缓慢倾入阻滞剂的乙醇溶液中，并不断搅拌，50°C水浴蒸干，置-20°C迅速冷却，粉碎过20目筛。测定SPRC溶出度, 结果显示，从释放效果来看，EC20cp、EC45cp、EC200cp 三种规格的辅料制备的缓释固体分散体均能达到缓释的效果，但释放不完全（如表1所示，其中以释放时间为横坐标，累积释放百分率为纵坐标绘图）。

表1. 乙基纤维素类辅料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度比较

（2）水分散体类辅料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体

将药物以1:4的比例（质量比）溶解于尤特奇、苏丽丝和kolicoat水分散体中，并不断搅拌，于50°C水浴蒸干，置-20°C迅速冷却，粉碎过20目筛，测定SPRC溶出度，结果显示，从释放效果来看,RS30D缓释效果最优，使用苏丽丝作为阻滞剂时，吸光度明显增大，其成分可能对药物稳定性产生影响，因此不采用其为缓释固体分散体的载体， kolicoat作为阻滞剂时缓释效果不理想（如表2所示，以释放时间为横坐标，累积释放百分率为纵坐标绘图）。

表2. 水分散体类辅料溶剂法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度比较

（3）脂类辅料熔融法制备SPRC缓释固体分散体

选十八醇、硬脂酸、石蜡、蜂蜡等脂类辅料熔融法制备SPRC缓释固体分散体。将阻滞剂十八醇、硬脂酸、石蜡、蜂蜡水浴加热使熔融，然后按主药与辅料1:8的比例将药物加入到熔融的蜡质载体中，搅拌均匀后迅速冷却，经放置脆化后粉碎过20目筛，测定SPRC溶出度, 结果显示，十六醇与硬脂酸2h内累积释放可达60%以上，缓释效果不理想，石蜡和蜂蜡有较好的缓释效果，但释放药物不完全（如表3所示，以释放时间为横坐标，累积释放百分率为纵坐标绘图）。

表3. 脂类辅料熔融法制备SPRC缓释固体分散体累积释放度比较

上述SPRC缓释固体分散体按下述溶出度测定方法：

取制得的固体分散体，按照释放度测定法(中国药典2005版二部附录XD第一法)，采用溶出度测定法(中国药典2005版二部附录XC第二法)的装置，以水500mL为释放介质，转速为每分钟50转，依法操作，在第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8小时分别取溶液5mL滤过，并即时在操作容器中补充水5mL，取续滤液lmL，置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，照紫外一可见分光光度法(中国药典2005版二部附录WA)，在220nm的波长处分别测定吸收度，代入溶出度标准曲线，计算出在不同时间的累积释放量。

上述不同载体材料累积释放度结果显示，尤特奇RS-30D，乙基纤维素类和RS-PO等均可达到缓释效果，但RS-30D为水分散体，可将药物直接分散于其中，乙基纤维素类和RS-PO等固体辅料则须将其先溶于无水乙醇中，再将药物溶于适量蒸馏水中，然后将含药水溶液缓慢倾入辅料的乙醇溶液中，并不断搅拌，较使用RS-30D制备固体分散体方法复杂，且存在突释现象，重现性较差；本发明综合制备方法与缓释效果的因素，优选尤特奇RS-30D为阻滞剂。

实施例 2 尤特奇RS-30D用量对SPRC溶出度影响实验

采用药物与阻滞剂尤特奇RS-30D按质量比1:1、1:2、1:4、1:8和1:10的比例制备SPRC缓释固体分散体样品，测定各样品的体外释放度，求出累积释放百分率，考察不同辅料用量对药物体外释放特性的影响，结果如表4，图4所示，当未加阻滞剂时，药物0.5h内释放100%，随着阻滞剂与药物比例增大，药物的释放逐渐变慢，两者比例为1:1 时，几乎没有缓释效果, 比例为1:2时，略有缓释效果，药物与阻滞剂比例1:4以上时，可达到理想的缓释效果，进一步加大药物与阻滞剂的比例，以SPRC与尤特奇RS-30D 1：10 为比例制备的固体分散体明显提高缓释效果，本发明优选主药与尤特奇RS-30D以1:4和1:8的比例（质量比）制备SPRC缓释固体分散体。

表4. 不同辅料用量对SPRC溶出度的影响

实施例 3 建立炔丙基半胱氨酸含量测定标准曲线

（1）检测波长的选择

精密称取2mgSPRC至10ml容量瓶，以蒸馏水稀释至刻度，在200~700nm范围进行扫描。照紫外分光光度法(《中国药典》2010年版二部附录IVA)在200～700 nm波长范围内进行扫描，得到其在307nm处有最大吸收。

（2）标准曲线的建立

取SPRC250mg，置25ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，得10mg/ml的储备液，精密取50ul，0.1,0.5,1.0,2.5,5.0,8.0ml的储备液，得到0.005,0.01,0.05,0.1,0.25,0.5，0.8，1.0mg/ml的标准液。得到回归方程为A=0.1794C-0.0023，相关系数r=0.9999。结果表明在0.005~1mg/mL范围内线性关系良好。

实施例 4 释放机制初步解析实验

采用数学模型对药物释放曲线进行拟合，再根据拟合结果对释药机理进行进行判断，通常采用零级、一级、Higuchi模型进行拟合，并对拟合结果进行分析，采用如下公式：零级方程：Qt=K₀t，一级方程：ln（Q₀/(Q₀-Q_t)）=K₁t和Higuchi方程：Qt=k_Ht^1/2

拟合结果显示，SPRC缓释固体分散体体外释放模型拟合程度为First-order模型> Higuchi模型> Zero-order模型，表明以尤特奇RS-30D为载体的SPRC固体分散体体外释放近似于一级释放模型，但拟合度不高。

表5是拟合结果。

表5

Model	Equation	r
			Zero-order Model	Qt = 0.0952t +0.2169	0.9159
First-order Model	ln（100/(100-Qt)）=0.3512t-0.0949	0.9781
			Higuchi Model	Qt=0.4048*t1/2-0.1162	0.9603

为了进一步分析释放机制，采用Ritger-peppas模型进一步分析：Qt=ktn即lnQt=nlnt+lnk

Equation	r
		lnQt=1.175lnt-1.7956	0.9985

结果显示，Ritger-peppas模型对于SPRC缓释固体分散体中主药的释放拟合度良好，由拟合方程可知，主药的n大于0.89，提示SPRC缓释固体分散体体外释药过程符合骨架溶蚀过程。

实施例 5 处方验证试验

按前述方法制备3批SPRC缓释固体分散体，并进行体外溶出度测定，结果如表6所示，

表6. 3批SPRC缓释固体分散体中SPRC累积溶出百分率/%

从3批制剂的累积溶出度表明，药物与辅料质量比为1:8和1:4的SPRC缓释固体分散体中主药的累积释放均满足缓释制剂体外释放度，实验分别在1、3、5、8 h和0.5、2、4、6h时，累积百分释放度应分别满足10% ~ 30% 、40% ~ 70%、70% ~ 90%、80% ~ 100%的要求，释放效果稳定，结果证实，所制备的SPRC缓释固体分散体能够达到较理想的缓释效果。

实施例 6 采用溶剂法制备固体分散体

将乙基纤维素、Eudragit ®RS PO、Eudragit ®RL PO等辅料在磁力搅拌下缓慢加入甲醇溶液中，待全部溶解后，加入SPRC，其中载体材料与药物的投料质量比为2:1~10:1，于50~70℃磁力搅拌下蒸干有机溶剂，按投料量选择蒸干时间1～4h，待蒸干至黏稠状时，放入-20℃条件下迅速冷却1~2h，再将共沉淀物转移至真空干燥箱中，于50~65℃烘干8~24h，粉碎研磨过40~60目筛；

或，

将SPRC溶于乙基纤维素，丙烯酸树脂的水分散体中，如苏丽斯，Eudragit ®RS-30D，Eudragit ®RL-30D，Eudragit ®NE-30D等，并可加入适量崩解剂，如淀粉、羧甲基淀粉钠等以调节释放速度，于70~80℃磁力搅拌下蒸除水分，按载体材料与药物的投料质量比为2:1~10:1蒸干3～8h，待蒸干至黏稠状时，取出置于-20℃条件下迅速冷却1~2h，再将共沉淀物置于真空干燥箱中，50~65℃烘干8~24h，粉碎研磨过40~60目筛。

制得的SPRC固体分散体，能降低水溶性小分子氨基酸类药物的释放度，溶出速度比原料药降低1～50倍, 能起到显著的缓释作用，可以降低血药浓度波动并减轻药物对胃肠道的刺激性；

所制备的固体分散体可以进一步制备成临床可接受的剂型，如缓释片剂、胶囊剂和微丸等。

实施例7 炔丙基半胱氨酸缓释固体分散体对于心衰大鼠的心肌保护实验

大鼠心衰模型的诱导及给药：

大鼠150只（购自Sippr-bk实验动物中心），体重200-220g，饲养在SPF级，常规方法对大鼠进行心肌梗死造模，24小时后对大鼠进行随机分组：（1）假手术组，（2）模型组，(3)模型+SPRC组，（4）模型+SPRC固体分散体组，（5）模型+SPRC固体分散体+PAG组，（6）模型+PAG组，（7）模型+地高辛组；给药炔丙基半胱氨酸固体分散体（药物比辅料1:10）六周。

六周后的大鼠进行心超检测（如图6所示），使用Vevo770 (Visual Sonics Inc., Toronto, Canada)进行检测，检测LVID d, LVAW s, LVAW d, LVPW s, LVPW d, LV s, LV d, EF, FS等指标，以及对心脏进行TTC染色测梗死面积（如图7所示），使用Image J软件进行分析，结果显示，本发明的SPRC固体分散体能明显减小梗死面积(16.61±2.73% vs. 39.01±1.85%; P <0.01)且优于普通SPRC和地高辛(27.38±3.74% and 34.70±2.08%)；通常正常大鼠经过冠状动脉过左前降支结扎后，心功能有一定的下降，与正常大鼠相比，射血分数明显低(34.20 ± 1.17% vs. 96.40 ± 1.51%; P<0.01)，结果表明，本发明的SPRC固体分散体能够很好地提高心功能，尤其是射血分数(72.56 ± 4.94% vs. 34.20 ± 1.17%; P <0.01)，效果优于普通SPRC以及阳性药地高辛(62.01 ± 2.62% 和 44.59 ± 3.66%)；所述的SPRC固体分散体能显著降低心衰大鼠的左室容积（LV）以及左室直径(87.08 ± 22.06 μl vs. 314.95 ± 26.20 μl和 4.36 ± 0.48 mm vs. 7.68 ± 0.29 mm; P <0.01)。不同于正常组的左室前壁厚度（LVAW）和左室后壁厚度（LVPW），SPRC固体分散体治疗有明显的改善(2.14 ± 0.32 mm vs. 1.17 ± 0.36 mm 和 3.88 ± 0.22 vs. 2.72 ± 0.41 mm; P<0.01)。表明SPRC固体分散体能减小由心衰扩大的左室容积以及增大左室前后壁的厚度。

Claims

1.炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，用炔丙基半胱氨酸为药物活性成分，加入载体材料采用溶剂法或熔融法制备炔丙基半胱氨酸固体分散体；

所述的炔丙基半胱氨酸的分子式和结构如下式所示：

。

2.按权利要求1所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，所述的载体材料为阻滞剂，选自乙基纤维素类辅料，水分散体类辅料以及脂类辅料。

3.按权利要求1或2所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，所述的阻滞剂选自乙基纤维素（EC）；苏丽丝；kolicoa；水分散体尤特奇RS-30D； RL-30D；NE-30D，尤特奇RS-PO，尤特奇 RL-PO，尤特奇RSPO或尤特奇RLPO。

4.按权利要求1所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，所述的载体材料与药物活性成分的投料重量比为1:1～10:1。

5.按权利要求2所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，所述的阻滞剂是尤特奇RS-30D。

6.按权利要求1所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是采用溶剂法制备炔丙基半胱氨酸固体分散体。

7.按权利要求1所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体，其特征是，所述的炔丙基半胱氨酸固体分散体制成缓释片剂。

8.权利要求1的炔丙基半胱氨酸固体分散体在制备治疗心衰的药物中的用途。

9.按权利要求8所述的用途，其特征是，所述炔丙基半胱氨酸固体分散体通过缓慢释放药物提高心衰大鼠的心功能，减小心肌梗死的面积。