CN106668031A - 生育三烯酚衍生物的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的药物中的用途：其中：R1、R2和R3可以相同或者不同，且分别独立地表示H或者C₁-C₃烷基。与临床常用的提高接受化疗的对象中血细胞数量的药物如G-CSF相比，本发明的化合物能够显著提高接受化疗的对象中血细胞，特别是白细胞，尤其是中性粒细胞和单核细胞的数量。本发明的化合物具有良好的临床前景。

Description

生育三烯酚衍生物的用途

技术领域

本发明涉及如本文所述和定义的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的药物中的用途。

背景技术

对于肿瘤性疾病的治疗，已有大量化疗药物被推荐使用。但是，化疗药物往往是非特异性的并且对正常的细胞具有毒性。化疗药物在接受化疗的患者中通常产生各种副作用。

骨髓抑制是化疗药物的主要副作用之一。在临床上，接受化疗的患者的骨髓造血系统极易受到损伤，具体表现为诸如外周血白细胞数量降低，中性粒细胞数量降低和/或血小板减少。目前临床上采用一些化疗保护剂来减轻化疗药物的副作用，特别是化疗导致的中性粒细胞减少症和血小板减少症。临床上常见的化疗保护剂包括诸如粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和血小板生成素(TPO)等。但是，G-CSF和GM-CSF可以增大继发性骨髓病症例如白血病和骨髓异常增生的后期风险(在治疗后＞2年)。TPO在癌症患者中可引起血小板数量的异常升高，致使血栓形成和死亡增加。

考虑到上述方法的这些缺陷，仍然需要开发新的化疗保护剂，特别是能够提高接受化疗的对象中血细胞数量，诸如白细胞、血小板和红细胞数量的化疗保护剂。

发明内容

本发明提供一种能够提高接受化疗的对象中血细胞数量的化合物。

本发明涉及通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的药物中的用途：

其中：

R1、R2和R3可以相同或者不同，且分别独立地表示H或者C₁-C₃烷基。

在一个实施方式中，R1和R3分别独立地表示H或甲基；和R2为H。

在一个实施方式中，所述化合物选自以下组中：

和

在一个实施方式中，所述药学上可接受的盐选自钠盐、钾盐、镁盐、钙盐和铵盐。

在一个实施方式中，血细胞减少为白细胞减少症或血小板减少症。

在一个实施方式中，所述白细胞减少症为粒细胞缺乏症。

在一个实施方式中，所述对象选自患有以下肿瘤的对象：肺部肿瘤、胃肠道肿瘤、鼻咽部肿瘤、泌尿生殖系统肿瘤、头颈部肿瘤癌、甲状腺肿瘤、乳腺肿瘤、肉瘤、白血病和淋巴肿瘤。

在一个实施方式中，所述对象选自患有以下疾病的对象：骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病和自身免疫性疾病。

在一个实施方式中，所述化疗使用选自以下的化疗药物：美法仑(melphalan)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、氧氮磷杂环己烯(oxazaphosphorine)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、沙铂(satraplatin)、四铂(tetraplatin)、异丙铂(iproplatin)、丝裂霉素(mitomycin)、链佐星(streptozocin)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、白消安(busulfan)、异环磷酰胺(ifosfamide)、链佐星(streptozocin)、噻替派(thiotepa)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氮芥、阿糖胞苷(cytarabine)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、培美曲塞(pemetrexed)、替加氟(tegafur)、尿嘧啶(uracil)、尿嘧啶氮芥(uracilmustard)、氟达拉滨(fludarabine)、吉西他滨(gemcitabine)、卡培他滨(capecitabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、克拉屈滨(cladribine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、甲氨喋呤(methotrexate)、喷司他丁(pentostatin)、羟基脲(hydroxyurea)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、泰索帝(taxotere)、诺维本(navelbine)、长春碱(vinblastin)、长春新碱(vincristin)、长春地辛(vindesine)、长春瑞滨(vinorelbine)、秋水仙碱(colchicine)、症登素(maytansine)、柄型菌素(ansamitocin)、根霉素(rhizoxin)、拟茎点霉毒素(phomopsin)、朵拉司他汀(dolastatin)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、斯的甘辛(steganacin)、考布他汀(combretastatin)、安非替尼(amphetinile)、丙卡巴肼(procarbazine)、喜树碱(camptothecin)、依立替康(irinotecan)、干扰素、白介素、瓦他拉尼(vatalanib)、SU-5416、SU-6668、SU-11248、SU-14813、AZD-6474、CI-1033或GW-2016、易瑞沙(iressa)、特罗凯(tarceva)、PKI-166、EKB-569、HKI-272、赫赛汀(herceptin)和阿泊利单抗(apolizumab)。

在一个实施方式中，所述药物通过皮下注射或肌肉注射施用。

在一个实施方式中，所述药物间隔或连续施用，每天施用一次或多次，施用剂量为1～100mg/kg/d，优选5～40mg/kg/d，例如10mg/kg/d。

附图说明

图1rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠化疗后第5天外周血白细胞生成的影响。

图2rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠化疗后第7天外周血白细胞生成的影响。

图3rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠化疗后第10天外周血血小板生成的影响。

图4δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血白细胞数量的影响。

图5δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血中性粒细胞细胞数量的影响。

图6δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血单核细胞数量的影响。

图7δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血血小板数量的影响。

图8δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血红细胞数量的影响。

图9δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血网织红细胞数量的影响。

具体实施方式

第一方面，本发明涉及用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R1、R2和R3可以相同或者不同，且分别独立地表示H或者C₁-C₃烷基。

在本文中所提及的术语优选具有以下含义：

术语“C₁-C₃烷基”是指具有1、2或3个碳原子的直链或支链的、饱和的一价烃基，包括甲基、乙基、正丙基和异丙基。特别地，C₁-C₃烷基选自甲基和乙基，优选甲基。

在一个实施方式中，本发明包括上文所述的通式(I)的化合物，其中R1和R3分别独立地表示H或甲基，且R2为H。

在一个实施方式中，所述化合物选自以下组中：

和

在一个实施方式中，本发明包括上文所述的通式(I)的化合物的药学上可接受的盐，其中所述药学上可接受的盐选自钠盐、钾盐、镁盐、钙盐和铵盐。在一个实施方式中，所述药学上可接受的盐选自钠盐。

在一个实施方式中，本发明包括下述化合物：

本发明的化合物或其药学上可接受的盐具有良好的稳定性和水溶性。

第二方面，本发明涉及第一方面的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的药物中的用途。

术语“对象”是指包括人和非人的哺乳动物，包括但不限于人、猪、狗、兔子、猴子、猫等。本发明的对象选自患有肿瘤的对象，所述肿瘤的定义及分类可参见如由世界卫生组织(WHO)制定的肿瘤组织学分类第二版(1989-2000年)。本发明的对象还包括患有以下疾病的对象：包括但不限于骨髓增生异常综合征(MDS)，如难治性血细胞减少伴单系病态造血(RCUD)、难治性贫血(RA)、难治性中性粒细胞减少(RN)、难治性血小板减少(RT)、难治性贫血伴环状铁粒幼细胞(RARS)、难治性血细胞减少伴多系病态造血(RCMD)、难治性贫血伴原始细胞增多-1(RAEB-1)、难治性贫血伴原始细胞增多-2(RAEB-2)、MDS-未分类(MDS-U)、MDS伴单纯5q-；骨髓增殖性疾病(MPD)，如真性红细胞增多症、慢性粒细胞性白血病(CML)、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化症；和某些自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、系统性血管炎、硬皮病、天疱疮、皮肌炎、混合性结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血、甲状腺自身免疫病、溃疡性结肠炎。在一个实施方式中，对象还包括患有再生障碍性贫血的对象。

术语“血细胞”是指血液中红细胞、白细胞和血小板的统称。红细胞来源于骨髓的造血多能干细胞，网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其在周围血液中的数值可反映骨髓红细胞的生成功能。白细胞主要包括嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，其中嗜中性粒细胞和单核细胞所占的比例较大。健康人群中白细胞的数量通常为4.0～10.0×10⁹/L，其中嗜中性粒细胞的数量通常为2.0～7.5×10⁹/L，单核细胞的数量通常为0.2～0.77×10⁹/L。健康人群中血小板的数量通常为100～300×10⁹/L。

图1-3分别显示了本发明的化合物对接受环磷酰胺化疗的小鼠外周血白细胞数量和血小板数量的影响。图4-9分别显示了本发明的化合物对接受环磷酰胺化疗的猕猴外周血白细胞、中性粒细胞、单核细胞、血小板、红细胞和网织红细胞数量的影响。血细胞减少(hypocytosis)是化疗药物引用的常见不良反应，通常以白细胞减少和/或血小板减少最为明显。成人外周血白细胞数持续低于3.5×10⁹/L，称为白细胞减少症；严重的白细胞减少可导致对象外周血中性粒细胞数量显著下降，当外周血中性粒细胞绝对值在成人低于2×10⁹/L时，可诊断为粒细胞减少症；当外周血中性粒细胞绝对值在成人低于0.5×10⁹/L以下，可诊断为粒细胞缺乏症。目前临床广泛使用的提高化疗后对象血细胞，特别是白细胞数量的药物是重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。实验结果表明与重组人粒细胞集落刺激因子相比，本发明的化合物能够更显著增加化疗后白细胞，特别是中性粒细胞和单核细胞的数量。同时，本发明的化合物对增加化疗后血小板、红细胞和网织红细胞的数量也有一定的作用。

在一个实施方式中，所述血细胞选自白细胞、血小板和红细胞。在一个实施方式中，所述对象患有化疗相关性白细胞减少症或血小板减少症。在一个实施方式中，所述对象患有化疗相关性粒细胞缺乏症。

术语“化疗”是指利用化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移，直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式。常用的化疗药物包括但不限于：美法仑(melphalan)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、氧氮磷杂环己烯(oxazaphosphorine)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、沙铂(satraplatin)、四铂(tetraplatin)、异丙铂(iproplatin)、丝裂霉素(mitomycin)、链佐星(streptozocin)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、白消安(busulfan)、异环磷酰胺(ifosfamide)、链佐星(streptozocin)、噻替派(thiotepa)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氮芥、阿糖胞苷(cytarabine)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、培美曲塞(pemetrexed)、替加氟(tegafur)、尿嘧啶(uracil)、尿嘧啶氮芥(uracilmustard)、氟达拉滨(fludarabine)、吉西他滨(gemcitabine)、卡培他滨(capecitabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、克拉屈滨(cladribine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、甲氨喋呤(methotrexate)、喷司他丁(pentostatin)、羟基脲(hydroxyurea)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、泰索帝(taxotere)、诺维本(navelbine)、长春碱(vinblastin)、长春新碱(vincristin)、长春地辛(vindesine)、长春瑞滨(vinorelbine)、秋水仙碱(colchicine)、症登素(maytansine)、柄型菌素(ansamitocin)、根霉素(rhizoxin)、拟茎点霉毒素(phomopsin)、朵拉司他汀(dolastatin)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、斯的甘辛(steganacin)、考布他汀(combretastatin)、安非替尼(amphetinile)、丙卡巴肼(procarbazine)、喜树碱(camptothecin)、依立替康(irinotecan)、干扰素、白介素、瓦他拉尼(vatalanib)、SU-5416、SU-6668、SU-11248、SU-14813、AZD-6474、CI-1033或GW-2016、易瑞沙(iressa)、特罗凯(tarceva)、PKI-166、EKB-569、HKI-272、赫赛汀(herceptin)和阿泊利单抗(apolizumab)。

放射治疗(简称放疗)也可以治疗肿瘤。放疗利用高能量离子照射肿瘤组织，通过电离激发可直接作用于细胞DNA等靶点或与细胞内水分子等相互作用，产生自由基间接作用于细胞DNA等靶点，导致肿瘤细胞死亡。放疗也会引起以外周血细胞数量减少。但是，放疗辐射防护剂的作用机制与化疗保护剂不同。例如放疗辐射防护剂氨磷汀(WR-2721)等通过预防给药或照后早期给药来消除细胞环境中的活性自由基，以抑制辐射导致的副作用。

术语“治疗”可理解为包括缓解、减轻、逆转和/或消除对象因接受化疗药物而引起的血细胞数量的降低，特别是白细胞和血小板数量的降低。治疗还可理解为包括预防性治疗。

术语“本发明的药物”可理解为包括本发明化合物或其药学上可接受的盐和适合的药物赋形剂和/或辅料的药物组合物。所述药物赋形剂和/或辅料包括但不限于淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等。

第三方面，本发明还涉及预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的方法，包括向所需对象施用治疗有效量的通式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物。

本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物通过皮下注射或肌肉注射施用。因此，本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物可制备为溶液、注射剂或粉剂形式。

本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物通过可间隔或连续施用，每天施用一次或多次，例如2次至5次，优选每天施用一次。本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物可以1～100mg/Kg/天，优选5～40mg/kg/d，例如10mg/kg/d或20mg/kg/d的剂量施用，优选1次至3次/天，更优选1次/天。本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物还可与其它有助于提高化疗后对象血细胞数量，特别是白细胞数量的药物例如G-CSF或GM-CSF联合使用。

在一个实施方式中，本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物通过肌肉注射或皮下注射施用。在另一个实施方式中，本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物间隔或连续施用。在另一个实施方式中，本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物每天施用一次或多次，治疗期不少于3天。在另一个实施方式中，本发明的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物每日施用剂量为1～100mg/Kg/d，优选5～40mg/kg/d，例如10mg/kg/d或20mg/kg/d。

实施例

将参考以下实施例更详细地描述本发明。然而，提供以下实施例仅用于解释本发明，不应被理解为是对本发明的范围和精神的限制。

实施例1：(2,8-二甲基-2R-((3E，7E)-4,8,12-三甲基十三碳-3,7,11-三烯 基)苯并二氢吡喃-6-基氧基)磷酸酯的钠盐(即δ-生育三烯酚磷酸酯的钠盐， 简称δ-T3HP)的制备和确认

结构式：

反应方程式：

步骤a：

取15gδ-生育三烯酚于250ml圆底烧瓶中，加入45ml甲苯溶解，后加入6ml吡啶，搅拌冷却至0～5℃。缓慢滴加4.5ml三氯氧磷。滴加完毕后，移至室温搅拌3h。

步骤b：

后将上述反应体系冷却至0℃以下，缓慢加入60ml蒸馏水。滴加完毕后，加热至回流反应4h。

步骤c：

在上述反应液中加入甲苯和蒸馏水各100ml，摇匀静置分层。有机层转移至旋转蒸发仪内，除去溶剂。剩余物质重溶于15ml异丙醇中，加热搅拌均匀。将溶有2.4g氢氧化钠的25ml甲醇缓慢加入滤液中，剧烈搅拌至有沉淀产生。倾出上清液，并用少量甲醇洗涤。过滤，滤渣重新溶解于400ml甲醇中。过滤，滤液浓缩至100～150ml，滴入300ml丙酮，直到有白色絮状沉淀产生，充分搅拌后，过滤得白色固体11.3g，产率：59.4％。

所得产物的¹H-NMR结果如下：

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)δ＝1.24(s,3H，CH₃-2a),1.49～1.81(m,16H,CH₂-1`,CH<sub>2</sub>-2`,CH₃-4`a,CH<sub>3</sub>-8`a,CH₃-12`a,CH<sub>3</sub>-13),1.94～2.13(m,13H,CH<sub>2</sub>-3,CH<sub>2</sub>-5`,CH₂-6`,CH<sub>2</sub>-9`,CH₂-10`,CH₃-8a),2.78(t,J＝6.6Hz,2H,CH₂-4),6.61(d，J＝2.8Hz,1H，CH-7)，6.66(d，J＝2.8Hz,1H，CH-5)；MS(ESI，m/s)：C₂₇H₃₉O₅P，[M-H⁺]475.26(计算值476.25)。

实施例2：2,2-二甲基-(2R-(4R,8R,12-三甲基十三烷基)苯并二氢吡喃 -6-基氧基)磷酸二钠(即δ-生育酚磷酸酯的钠盐，简称δ-THP)制备与确认

结构式：

反应方程式：

步骤a：

取15gδ-生育酚于250ml圆底烧瓶中，加入45ml甲苯溶解，后加入6ml吡啶，搅拌冷却至0～5℃。缓慢滴加4.5ml三氯氧磷。滴加完毕后，移至室温搅拌3h。

步骤b：

后将上述反应体系冷却至0℃以下，缓慢加入60ml蒸馏水。滴加完毕后，加热至回流反应4h。

步骤c：

在上述反应液中加入甲苯和蒸馏水各100ml，摇匀静置分层。有机层转移至旋转蒸发仪内，除去溶剂。剩余物质重溶于15ml异丙醇中，加热搅拌均匀。将溶有2.4g氢氧化钠的25ml甲醇缓慢加入滤液中，剧烈搅拌至有沉淀产生。倾出上清液，并用少量甲醇洗涤。过滤，滤渣重新溶解于400ml甲醇中。过滤，滤液浓缩至100～150ml，滴入300ml丙酮，直到有白色絮状沉淀产生，充分搅拌后，过滤得白色固体。干燥，得8.8g，产率44.2％。

所得产物的¹H-NMR结果如下：

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)δ：0.85(m，12H，CH₃-4`a,CH<sub>3</sub>-8`a,CH₃-12`a,CH<sub>3</sub>-13a,),1.0-1.6(m，24H，CH<sub>1</sub>-4`,CH₁-8`,CH<sub>2</sub>-1`,CH₂-2`,CH<sub>2</sub>-3`,CH₂-5`,CH<sub>2</sub>-6`,CH₂-7`,CH<sub>2</sub>-9`,CH₂-10`,CH<sub>2</sub>-11`,CH₃-2a`)，1.74(m，2H，CH₂-3)，2.13(s,3H,CH₃-8a),2.71(t，2H，J＝7.2Hz，CH₂-4),6.61(d，J＝2.8Hz，1H，CH-7)，6.66(d，J＝2.8Hz，1H，CH-5)；MS(ESI，m/s)：C₂₇H₄₅O₅P[M-H⁺]481.61(计算值482.81)。

实施例3：δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠外周血象数量的影响

3.1材料与方法

3.1.1主要试剂及仪器

环磷酰胺购于江苏恒瑞医药股份有限公司。MEK-7222K全自动血细胞分析仪及外周血检测稀释液购于日本光电工业株式会社公司。

3.1.2实验动物及分组

实验采用6～8周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠，体重(22.6±0.89)g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。

3.1.3化疗条件

环磷酰胺用作化疗药物：使用前用0.9％生理盐水配置成11.25mg/ml溶液，按每只小鼠100mg/Kg，200μl腹腔给药。

3.1.4分组和给药方法

实验设rhG-CSF对照组和治疗组、δ-T3HP对照组和治疗组，和δ-THP对照组和治疗组，每组7只小鼠。

rhG-CSF 250μg/瓶，用生理盐水配成11μg/ml，按每只小鼠100mg/Kg，200μl皮下给药。

δ-T3HP用生理盐水配成11mg/ml的溶液，按每只小鼠100mg/Kg，200μl皮下给药。

δ-THP用PEG400配成11mg/ml的溶液，按每只小鼠100mg/Kg，200μl皮下给药。

实验小鼠腹腔注射环磷酰胺后2小时开始皮下给予δ-T3HP(100mg/Kg)和δ-THP(100mg/Kg)，每天1次，连续3天。

实验小鼠腹腔注射环磷酰胺后24小时开始皮下给予rhG-CSF(100μg/Kg)，每天1次，连续3天。

化疗对照组小鼠皮下注射相应的溶剂0.2ml/只。

3.1.5外周血象检测

各组动物分别于给药前(0d)和给药后(1、3、5、7、10、14、18、22d)割尾取血20μl，注入2ml血细胞分析仪稀释液中，用MEK-7222K全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)和血小板(PLT)数。

3.1.6统计学处理

实验结果用平均值±标准差表示，GraphPad Prism 5软件进行统计分析。血象检测结果用Student t检验分析，P＜0.05表示有统计学差异。

3.2结果

如表1和图1所示，小鼠化疗后第5天，rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对照组小鼠外周血WBC分别为4.3±1.2×10⁹/L、5.7±1.3×10⁹/L和8.2±1.3×10⁹/L，三组数值均明显低于化疗前正常值(13.7±2.1×10⁹/L)。在化疗后给予rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP治疗后，各治疗组小鼠外周血WBC值均明显升高，分别是其相应对照组的1.4、2.8和1.2倍，统计学分析结果显示p值分别小于0.01、0.001和0.05，其中以δ-T3HP的疗效最好。

小鼠化疗后第7天，rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP各治疗组及其对照组外周血WBC均明显回升，其中rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP各治疗组外周血WBC分别是其相应对照组的0.7、2.7和1.1倍。同对照组相比，只有δ-T3HP治疗组有统计学差异，p值小于0.001，而rhG-CSF治疗组白细胞反而明显低于其对照组。

表1:rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠外周血白细胞生成的影响

如表2和图2所示，环磷酰胺化疗药物对小鼠外周血血小板数影响不显著。化疗后第10天，rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP各治疗组外周血血小板数分别是其相应对照组的0.95、1.4和1.1倍。同对照组相比，只有δ-T3HP治疗组有统计学差异，p值小于0.001。

表2:rhG-CSF、δ-T3HP和δ-THP对环磷酰胺化疗小鼠外周血血小板生成的影响

组别	10天外周血PLT数量
		rhG-CSF对照组	896±38.7
rhG-CSF	847.1±66.4
		δ-T3HP对照组	697.9±47.5
δ-T3HP	979±76.5
		δ-THP对照组	786±102.4
δ-THP	832.1±87.3

实施例4：四种T3HP对环磷酰胺化疗小鼠外周血象数量的影响

4.1化合物的制备

采用前述实施例1的方法分别制备α-T3HP、β-T3HP和γ-T3HP，区别在于分别使用α-生育三烯酚、β-生育三烯酚和γ-生育三烯酚作为原料。产物经¹H-NMR确认。

4.2分组和给药方法

实验设α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP和δ-T3HP治疗组，以rhG-CSF作为对照组，每组7只小鼠。

α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP和δ-T3HP治疗组用生理盐水配成11mg/ml的溶液，按每只小鼠100mg/Kg，200μl皮下给药。

rhG-CSF 250μg/瓶，用生理盐水配成11μg/ml，按每只小鼠100mg/Kg，200μl皮下给药。

采用前述实施例3的方法在实验小鼠注射环磷酰胺后分别施用α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP、δ-T3HP和rhG-CSF。

4.3外周血象检测

采用前述实施例3的方法测定给药前和给药后外周血白细胞(WBC)和血小板(PLT)数量。

4.4结果

结果显示，在分别给予α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP、δ-T3HP和rhG-CSF治疗的化疗小鼠中，在第5天时，小鼠外周血WBC值均明显升高。在α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP、δ-T3HP治疗组中，WBC升高的幅度以δ-T3HP的疗效最好。

化疗后第10天，在α-T3HP、β-T3HP、γ-T3HP、δ-T3HP治疗组中，外周血血小板数量升高的幅度以δ-T3HP的疗效最好。

实施例5：δ-T3HP对环磷酰胺化疗猕猴外周血象数量的影响

5.1材料与方法

5.1.1实验动物

恒河猴14只，雄性，2周龄，体重5.0±1.0kg。购于北京协尔鑫生物资源研究所。

5.1.2实验药物

δ-T3HP，生理盐水溶解，100mg/mL，过滤除菌。rhG-CSF购于杭州九源基因工程有限公司。环磷酰胺购于江苏恒瑞医药股份有限公司。

5.1.3实验分组

14只恒河猴随机分为生理盐水阴性对照组(5只)、δ-T3HP 20mg/Kg组(4只)、δ-T3HP 10mg/Kg组(2只)和rhG-CSF阳性对照组(3只)。

5.1.4猕猴化疗模型

环磷酰胺用作化疗药物，使用0.9％生理盐水配置，按每只猕猴50mg/Kg缓慢静脉推注，每日一次，连续两天。注意现配现用。

5.1.5给药方法

δ-T3HP于最后一次环磷酰胺化疗后2小时开始肌肉注射δ-T3HP，每日1次，连续8天。rhG-CSF于环磷酰胺化疗后第一天开始给药，10μg/Kg皮下注射，每日1次，连续8天。对照组给予生理盐水。

5.1.6外周血象检测

取上肢外周血约1ml于EDTA抗凝试管中，颠倒混匀后使用SYSMEXXE-2100全自动血细胞计数仪进行外周血象检测，包括检测白细胞(WBC)，红细胞(RBC)，血红蛋白(HGB)，血小板(PLT)，中性粒细胞(NE)和网织红细胞(RET)。

5.1.7数据处理

实验结果用平均值±标准差表示，GraphPad Prism 5软件进行统计分析。血象检测结果用Student t检验分析，P＜0.05表示差异有统计。

5.2实验结果

5.2.1δ-T3HP对化疗猕猴外周血白细胞数量的影响

如图4所示，阴性对照组猕猴化疗后外周血白细胞进行性下降，于化疗后5～10天降到最低值，随后缓慢回升，化疗后15天基本恢复到化疗前水平。猕猴化疗后给予δ-T3HP 20mg/Kg，次日白细胞显著升高，之后快速下降，于化疗后5天达到最低值；化疗后第6天WBC开始快速回升，8～13天维持在化疗前水平的2倍，之后缓慢下降并于化疗后20天降到化疗前水平。猕猴化疗后给予δ-T3HP 10mg/Kg，给药后早期对白细胞动员作用不明显，但对WBC的恢复也有显著的促进作用，但恢复效果弱于δ-T3HP 20mg/Kg组。

猕猴化疗后给予rhG-CSF，在给药后早期对白细胞也有明显动员作用，在化疗后恢复期对白细胞的也有明显的促恢复作用。但是，rhG-CSF阴性对照组在10天后对白细胞的促恢复作用快速下降。与rhG-CSF阴性对照组相比，δ-T3HP 20mg/Kg给药组在10天后没有明显的停药反应。

5.2.2δ-T3HP对化疗猕猴外周血中性粒细胞数量的影响

如图5所示，猕猴化疗后中性粒细胞的变化与白细胞非常接近。与rhG-CSF阳性对照组相比，δ-T3HP对中性粒细胞化疗会恢复作用更好，并有剂量效应。

5.2.3δ-T3HP对化疗猕猴外周血中单核细胞数量的影响

如图6所示，猕猴化疗后分别给予δ-T3HP和rhG-CSF治疗，外周血单核细胞于化疗后5～10天有升高，δ-T3HP 20mg/Kg治疗组最为显著。

5.2.4δ-T3HP对化疗猕猴外周血中血小板数量的影响

如图7所示，对照组猕猴化疗后外周血血小板缓慢下降，于化疗后7天降到最低值，随后缓慢回升，化疗后10天基本恢复到化疗前水平。猕猴化疗后给予δ-T3HP治疗，血小板恢复速度加快，并维持在较高水平，δ-T3HP20mg/Kg组略优于10mg/Kg。阳性药rhG-CSF对化疗猕猴血小板恢复没有明显影响。

5.2.5δ-T3HP对化疗猕猴外周血红细胞数量的影响

如图8所示，猕猴化疗后外周血红细胞没有明显降低，δ-T3HP治疗组外周血红细胞有明显降低，于化疗后20天恢复到化疗前水平。在5天时，rhG-CSF阳性对照组中猕猴外周血红细胞数量相比于δ-T3HP治疗组降低更多。

5.2.6δ-T3HP对化疗猕猴外周血网织红细胞数量的影响

如图9所示，阴性对照组猕猴化疗后外周血网织红细胞快速降低，化疗后第6天开始恢复。化疗猕猴给予δ-T3HP或rhG-CSF治疗后，外周血网织红细胞于化疗后9～18天明显高于对照组，其中δ-T3HP 20mg/Kg组最突出。

尽管已用于解释说明的目的公开了本发明的优选实施方式，但本领域技术人员可理解，可做出各种改变、增添和替换，而不脱离如后附权利要求所公开的本发明的范围和精神。

Claims (10)

1.通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗将要、正在或已经接受化疗药物治疗的对象中血细胞减少的药物中的用途：

其中：

R1、R2和R3可以相同或者不同，且分别独立地表示H或者C₁-C₃烷基。

2.如权利要求1所述的用途，其中：

R1和R3分别独立地表示H或甲基；和

R2为H。

3.如权利要求1所述的用途，其中所述化合物选自以下组中：

4.如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中所述药学上可接受的盐选自钠盐、钾盐、镁盐、钙盐和铵盐。

5.如权利要求1-4中任一项所述的用途，其中所述血细胞减少为白细胞减少症或血小板减少症，优选地，所述白细胞减少症为粒细胞缺乏症。

6.如权利要求1-5中任一项所述的用途，其中所述对象选自患有肿瘤的对象，例如患有选自以下肿瘤的对象：肺部肿瘤、胃肠道肿瘤、鼻咽部肿瘤、泌尿生殖系统肿瘤、头颈部肿瘤癌、甲状腺肿瘤、乳腺肿瘤、肉瘤、白血病和淋巴肿瘤。

7.如权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述对象选自患有以下疾病的对象：骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病和自身免疫性疾病。

8.如权利要求1-7中任一项所述的用途，其中所述化疗使用选自以下的化疗药物：美法仑(melphalan)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、氧氮磷杂环己烯(oxazaphosphorine)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、沙铂(satraplatin)、四铂(tetraplatin)、异丙铂(iproplatin)、丝裂霉素(mitomycin)、链佐星(streptozocin)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、白消安(busulfan)、异环磷酰胺(ifosfamide)、链佐星(streptozocin)、噻替派(thiotepa)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氮芥、阿糖胞苷(cytarabine)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、培美曲塞(pemetrexed)、替加氟(tegafur)、尿嘧啶(uracil)、尿嘧啶氮芥(uracilmustard)、氟达拉滨(fludarabine)、吉西他滨(gemcitabine)、卡培他滨(capecitabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、克拉屈滨(cladribine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、甲氨喋呤(methotrexate)、喷司他丁(pentostatin)、羟基脲(hydroxyurea)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、泰索帝(taxotere)、诺维本(navelbine)、长春碱(vinblastin)、长春新碱(vincristin)、长春地辛(vindesine)、长春瑞滨(vinorelbine)、秋水仙碱(colchicine)、症登素(maytansine)、柄型菌素(ansamitocin)、根霉素(rhizoxin)、拟茎点霉毒素(phomopsin)、朵拉司他汀(dolastatin)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、斯的甘辛(steganacin)、考布他汀(combretastatin)、安非替尼(amphetinile)、丙卡巴肼(procarbazine)、喜树碱(camptothecin)、依立替康(irinotecan)、干扰素、白介素、瓦他拉尼(vatalanib)、SU-5416、SU-6668、SU-11248、SU-14813、AZD-6474、CI-1033或GW-2016、易瑞沙(iressa)、特罗凯(tarceva)、PKI-166、EKB-569、HKI-272、赫赛汀(herceptin)和阿泊利单抗(apolizumab)。

9.如权利要求1-8中任一项所述的用途，其中所述药物通过皮下注射或肌肉注射施用。

10.如权利要求1-9中任一项所述的用途，其中所述药物间隔或连续施用，每天施用一次或多次，施用剂量为为1～100mg/kg/d，优选5～40mg/kg/d，例如10mg/kg/d或20mg/kg/d。