CN106645675A - 尿素氮的检测试剂及尿素氮的检测试纸 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了尿素氮的检测试剂及尿素氮的检测试纸。该检测试剂包含50~65KU/L的脲酶、1.0~1.5g/L的海藻糖和20~30g/L显色物质。本发明尿素氮的检测试剂,其含有多种特定酶进行特定配比,能达到快速和较为准确检测尿素氮的含量的目的。本发明尿素氮的检测试纸包括反应基层、反应层、滤血层和吸样层,这些层叠加构成一个虹吸体系,抗干扰能力更强,有效的消除了内源性物质的干扰,进一步保证了快速和较为准确检测尿素氮的含量。
Description
技术领域
本发明涉及尿素氮检测的技术领域,具体而言,涉及尿素氮的检测试剂及尿素氮的检测试纸。
背景技术
目前,用于检测血液中是否存在某种成分或该成分的含量的方法包括液体试剂检测和干化学试纸检测。干化学试纸具有使用方便、操作简单、快速出结果的特点。
根据检测液体样本在干化学试纸上的流动路程,可以将干化学试纸分为多种类型,纵向垂直检测试纸是干化学试纸的一种。纵向垂直检测试纸包括将带有反应试剂的载体相互叠加在一起,液体样本自上而下的流经各个反应试剂层,最终显示检测结果。例如美国专利US4816224采用纵向垂直检测试纸的方法。
纵向垂直检测试纸其反应试剂载体的面积都较小,因此只需要较少的液体样本用量就可以完成检测。因为个体差异,在指尖采血的过程中,采集的样本量是很难控制的,例如,欧美人的指尖采血量往往会比亚洲人多。而反应试剂载体对液体的吸收有一定的饱和度,当滴加在试纸上的血样过多时,现有的干化学检测试纸没办法及时处理多余的血样。如现有技术中的纵向垂直检测试纸,该试纸包括:底板粘附并支撑着反应层,反应层上覆盖有样本分离层、玻纤层和网格层。当液体滴加到网格层后垂直流经玻纤和样本分离层,最终达到反应层发生化学反应。若加入的血液样本量较多,达到液体饱和的反应层不能再吸收多余的样本时,这些多余的血样就会溢出检测试纸,污染环境或者接触到检测者。多余的血液还会聚集在反应试剂层上形成液滴,不仅影响光学等检测仪器对结果的判读,还会严重的污染检测仪器。
专利CN 102128918A采用了一种锁液结构,此结构试纸包括:底板上粘附并支撑着反应层,在反应层相对于底板的另一侧覆盖有加样层,加样层上有一加样口。反应层沿着底板方向的至少一侧搭接着锁液部件,锁液部件被固定在底板上。在底板相对于反应层处有一用于读取反应结果的检测窗。所有结构通过粘合片更牢固的固定他们之间的位置。当液体样本加到加样层时,先垂直流入反应层并被反应层所吸收。当反应层液体饱和时,液体通过横向测流的方式扩散到与反应层搭接的锁液部件中。由于锁液部件吸收液体的速度小于或等于反应层的吸收液体速度,所以当多余液体扩散到锁液部件时,反应层上的液体已经足够进行相关的检测反应,从而并不影响检测反应所需的有效用量。当加入过量的样本时,多余的样本被锁液部件所吸收,因此多余的样本不会形成液滴溢出试纸之外。但此种锁液结构工艺复杂,要求锁液部件吸收液体的速度小于或等于反应层吸收液体的速度,对锁液部件的材料要求较高,且在试纸生产工艺上增加了工序,使试纸生产工艺更为复杂。
另外,以上现有技术中,检测准确度有待提高,检测不够快速。
发明内容
有鉴于此,本发明一方面在于提供一种尿素氮的检测试剂及尿素氮的检测试纸,该检测试纸可快速检测尿素氮的含量,具有操作简单、检测快速、检测准确度较高和方便测试的优点。
一种尿素氮的检测试剂,其包含50~65KU/L的脲酶、1.0~1.5g/L的海藻糖和20~30g/L显色物质。
进一步地,其还包含0.15~0.35g/L的牛血清白蛋白。
进一步地,其还包含0.1~0.15g/L氯化钠。
进一步地,所述显色物质为TOOS、TODB、DAOS、MOAS、酚类、TMB、甲基橙、甲基红、溴百里香酚蓝中的一种或多种。
进一步地,包括反应基层、设置于所述反应基层一表面的反应层、设置于反应层一表面的滤血层,和设置于所述滤血层一表面的吸样层;所述反应基层设有通孔;所述反应层覆盖所述通孔,所述反应层由上述任意一项所述的检测试剂涂覆在膜材料上所形成。
进一步地,所述反应基层的材质为聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚酰胺酯或聚酯。
进一步地,所述反应基层与反应层之间设有一双面胶。
进一步地,所述亲水层和滤血层之间设有一双面胶。
进一步地,所述亲水层为亲水膜或网纱。
进一步地,所述反应基层与反应层之间的双面胶设有与所述通孔对应的孔。
与现有技术相比,本发明的尿素氮的检测试剂及尿素氮的检测试纸的有益效果是:
本发明尿素氮的检测试剂,其含有多种特定酶进行特定配比,能达到快速和较为准确检测尿素氮的含量的目的。本发明尿素氮的检测试纸包括反应基层、反应层、滤血层和吸样层,这些层叠加构成一个虹吸体系,抗干扰能力更强,有效的消除了内源性物质的干扰,进一步保证了快速和较为准确检测尿素氮的含量。
附图说明
图1为本发明实施例检测试纸的分解结构示意图。
主要元件符号说明:
1 检测试纸
100 反应基层
110 通孔
200,500 双面胶
210 孔
300 反应层
310 检测试剂
320 膜材料
400 滤血层
600 亲水层
具体实施方式
除非另有限定,本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时,以本说明书中的定义为准。
如本文所用之术语:
“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形,意在覆盖非排它性的包括。例如,包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素,而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中,此短语将使权利要求为封闭式,使其不包含除那些描述的材料以外的材料,但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时,其仅限定在该子句中描述的要素;其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时,这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围,而不论该范围是否单独公开了。例如,当公开了范围“1~5”时,所描述的范围应被解释为包括范围“1~4”、“1~3”、“1~2”、“1~2和4~5”、“1~3和5”等。当数值范围在本文中被描述时,除非另外说明,否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位,1份可表示任意的单位质量,如可以表示为1g,也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份,B组分的质量份为b份,则表示A组分的质量和B组分的质量之比a:b。或者,表示A组分的质量为aK,B组分的质量为bK(K为任意数,表示倍数因子)。不可误解的是,与质量分数不同的是,所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。
“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生,例如,A和/或B包括(A和B)和(A或B);
此外,本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个,并且单数形式的要素或组分也包括复数形式,除非所述数量明显旨指单数形式。
本发明尿素氮的检测试剂310,其包含50~65KU/L的脲酶、1.0~1.5g/L的海藻糖和20~30g/L显色物质。
具体地,脲酶(又称为寡聚酶)的含量可以列举为50KU/L、52.5KU/L、55KU/L、57.5KU/L、60KU/L、62.5KU/L或65KU/L等;海藻糖的含量可以为1.0g/L、1.1g/L、1.2g/L、1.3g/L、1.4g/L或1.5g/L等;显色物质的含量可以为20g/L、22g/L、25g/L、28g/L、29g/L或30g/L等。
此处,显色物质可以列举出TOOS、TODB、DAOS、MOAS、酚类、TMB、甲基橙、甲基红、溴百里香酚蓝中的一种或多种。这里,TOOS即N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐,其CAS号为82692-93-1;TODB即N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐,其CAS号为127544-88-1;DAOS即N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺钠盐,其CAS号为83777-30-4;TMB即3,3',5,5'-四甲基联苯胺,其CAS号为54827-17-7;酚类即酚类显色剂。
优选地,本发明尿素氮的检测试剂310,除了可以包含上述原料,还可以包含牛血清白蛋白(BSA)。牛血清白蛋白,其又称第五组分,是牛血清中的一种白蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430kDa,等电点为4.7,在本发明中主要起维持体系的渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。牛血清白蛋白缓冲液的含量以0.15~0.35g/L为佳,如0.15g/L、0.18g/L、0.20g/L、0.22g/L、0.25g/L、0.28g/L、0.30g/L、0.33g/L或0.35g/L等。
优选地,本发明尿素氮的检测试剂310,还可进一步地包含0.1~0.15g/L氯化钠,例如氯化钠的含量可以列举为0.1g/L、0.11g/L、0.12g/L、0.13g/L、0.14g/L或0.15g/L等。
本发明的尿素氮的检测试纸1,包括反应基层100、设置于所述反应基层100一表面的反应层300、设置于反应层300的一表面的滤血层400,和设置于所述滤血层400一表面的亲水层600;所述反应基层100设有通孔110;所述反应层300覆盖所述通孔110,所述反应层300由上述检测试剂310涂覆在膜材料320上所形成。
需要理解的是,上述反应基层100的作用是支撑整个检测试纸1。反应基层100的材质可列举为聚氯乙烯(PVC)、聚碳酸酯(PC)、聚酰胺酯(PA)或聚酯(PBT和PET的统称),优选为聚酯,进一步优选为PET基板。
反应基层100的形式可以为薄膜或薄板,反应基层100上设有通孔110,以作为光反射检测之用。
优选地,反应层300与反应基层100之间可设置一双面胶200。该双面胶200的面积可以小于反应基层100,可大于反应层300。反应层300通过双面胶200粘结在所述反应基层100上,反应层300与反应基层100的粘结处避开通孔110。该双面胶200也可以设置与所述通孔对应的孔210。
所述膜材料320可列举为聚丙烯纤维素膜或、乙烯纤维膜硝酸纤维素膜、尼龙膜、羧化纤维素膜或纯纤维素膜中的一种。较佳地,膜材料320为聚丙烯纤维素膜或聚乙烯纤维膜。所述膜材料的表面用来滴附上述检测试剂310。
作为本发明的检测试纸1,滤血层400的形式可以为薄膜。滤血层400的面积可大于反应层,这样滤血层400覆盖在反应层300上时其两端粘贴在双面胶200。滤血层400的面积可小于粘合其的双面胶200的大小。
亲水层600和滤血层400之间可以设有一双面胶500。该双面胶可以为U型双面胶或方形双面胶,并分别粘贴在滤血层400的上下两端。需要说明的是,亲水层600和双面胶400的U型口构建的虹吸槽到达滤血层400。
优选地,亲水层600可以为亲水膜或网纱。
以上未述及之处适用于现有技术。
实施例1
一种尿素氮的检测试纸1,其制作方法包括以下步骤:
步骤一、在一定的硬度的PET材质的反应基层100贴上双面胶200打通孔110后备用。
步骤二、撕掉反应基层100上双面胶200的油纸,将膜材料320粘贴在PET板的双面胶200上,膜材料320需要完全覆盖住PET基板上的通孔110。
步骤三、先配制检测试剂310:包含50KU/L的脲酶、1.0g/L的海藻糖、20g/L显色物质、0.15g/L BSA、0.1g/L的氯化钠。将配制好的检测试剂310用点胶机滴加到膜材料320对应通孔110处,每孔滴加量为6mg,滴完液的膜板放入烘道干燥,干燥温度:37℃,干燥时间20min,得反应层300。
步骤四、在反应层300上贴上滤血膜,并将滤血膜完全覆盖住反应层300。
步骤五、再在滤血膜上围绕通孔110贴上U型双面胶,利用虹吸原理,用U型双面胶和亲水层600(亲水膜或网纱)组成一个微量吸样装置,可以固定吸样的量。
实施例2
本实施例尿素氮的检测试纸1的制作方法中,检测试剂310包含55KU/L的脲酶、1.2g/L的海藻糖、22g/L显色物质、0.20g/L BSA、0.12g/L的氯化钠。其它步骤均同实施例1。
实施例3
本实施例尿素氮的检测试纸1的制作方法中,检测试剂310包含57.5KU/L的脲酶、1.3g/L的海藻糖、25g/L显色物质、0.15g/L BSA、0.13g/L的氯化钠。其它步骤均同实施例1。
实施例4
本实施例尿素氮的检测试纸1的制作方法中,检测试剂310包含60KU/L的脲酶、1.4g/L的海藻糖、28g/L显色物质、0.15g/L BSA、0.14g/L的氯化钠。其它步骤均同实施例1。
实施例5
本实施例尿素氮的检测试纸1的制作方法中,检测试剂310包含62.5KU/L的脲酶、1.5g/L的海藻糖、30g/L显色物质、0.15g/L BSA、0.15g/L的氯化钠。其它步骤均同实施例1。
对比例
某医院测试样本。
评价方法:
将实施例5的尿素氮的检测试纸1直接插入自制干式化学分析仪中,6分钟后结果在仪器上显示出来。表1为自制干式化学分析仪的测试结果跟对比例测试结果对比图,其相关性达到0.998。可直接用于临床上测试。
表2、医院测试样品的测试结果与本发明尿素氮测试结果相比
本发明尿素氮的检测试纸1具有以下优势:抗干扰能力更强,有效的消除了红细胞及内源性物质的干扰,并且能在6分钟内能准确的测试全血的尿素氮的浓度,测试结果与传统的方法相比测试结果更准确。与公司自制的便携式干式化学分析仪一起使用,更符合临床旁边的要求,适合医院急诊、病房、社区医院、家庭用户等使用。
由于本发明中所涉及的各工艺参数的数值范围在上述实施例中不可能全部体现,但本领域的技术人员完全可以想象到只要落入上述该数值范围内的任何数值均可实施本发明,当然也包括若干项数值范围内具体值的任意组合。此处,出于篇幅的考虑,省略了给出某一项或多项数值范围内具体值的实施例,此不应当视为本发明的技术方案的公开不充分。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明本发明的详细工艺设备和工艺流程,但本发明并不局限于上述详细工艺设备和工艺流程,即不意味着本发明必须依赖上述详细工艺设备和工艺流程才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅料组分成分的添加、具体方式选择等,落在本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.一种尿素氮的检测试剂,其特征在于:其包含50~65KU/L的脲酶、1.0~1.5g/L的海藻糖和20~30g/L显色物质。
2.根据权利要求1所述的尿素氮的检测试剂,其特征在于:其还包含0.15~0.35g/L的牛血清白蛋白。
3.根据权利要求1所述的尿素氮的检测试剂,其特征在于:其还包含0.1~0.15g/L氯化钠。
4.根据权利要求1所述的尿素氮的检测试剂,其特征在于:所述显色物质为TOOS、TODB、DAOS、MOAS、酚类、TMB、甲基橙、甲基红、溴百里香酚蓝中的一种或多种。
5.一种尿素氮的检测试纸,其特征在于:包括反应基层、设置于所述反应基层一表面的反应层、设置于反应层一表面的滤血层,和设置于所述滤血层一表面的亲水层;所述反应基层设有通孔;所述反应层覆盖所述通孔,所述反应层由权利要求1~4任意一项所述的检测试剂涂覆在膜材料上所形成。
6.根据权利要求5所述的尿素氮的检测试纸,其特征在于:所述反应基层的材质为聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚酰胺酯或聚酯。
7.根据权利要求5所述的尿素氮的检测试纸,其特征在于:所述反应基层与反应层之间设有一双面胶。
8.根据权利要求5所述的尿素氮的检测试纸,其特征在于:所述亲水层和滤血层之间设有一双面胶。
9.根据权利要求5所述的尿素氮的检测试纸,其特征在于:所述亲水层为亲水膜或网纱。
10.根据权利要求7所述的尿素氮的检测试纸,其特征在于:所述反应基层与反应层之间的双面胶设有与所述通孔对应的孔。
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