CN106590685A - 重金属污染土壤的原位生物修复制剂和修复方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及土壤修复领域，公开了一种用于原位修复重金属污染土壤的制剂，该制剂含有具有重金属降解能力的真菌和/或细菌；所述真菌为黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉中的至少一种；所述细菌为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌中的至少一种。采用本发明提供的制剂对重金属污染的土壤进行原位生物修复，可以克服移出法需要移动土壤的限制和分解法容易造成对耕地的二次化学试剂污染的问题，同时还可以充分利用真菌和/或细菌分解代谢土壤中残留的重金属，解决了土壤中高残留的重金属严重危及食品安全的问题，改善了土壤的微生态，使土壤更加快速的恢复耕作能力，而且该方法成本较低，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及土壤修复领域，具体地，涉及一种重金属污染土壤的原位生物修复制剂和修复方法。
背景技术
目前，我国土壤污染形势十分严峻，2014年4月发布的《全国土壤污染状况调查公报》显示，仅土壤镉超标率就已经达7.0％以上。因此，重金属污染土壤修复是关系到我国农业可持续发展和国民生存健康的重大研究课题之一。
重金属污染土壤修复技术可分为移出法、分解法和钝化法三大类。移出法是将土壤移出重金属污染现场，并在异位进行相应修复后回填。分解法是采用化学氧化的方法在原位对污染物进行分解破坏。钝化法是采用化学吸附剂、植物根部或微生物将重金属污染物转化成为低毒价态并吸附固定在土壤中，减少其生物可利用度及对于地下水的污染。这三种方法各具优缺点，但针对农田土壤重金属污染量大、面广的特征，开发具有不需移动土壤、不破坏耕地土壤微生态、不造成二次化学污染、适用于开放性土壤、操作简单成本低等优点的原位生物钝化技术将在重金属污染土壤修复领域具有极为广阔的推广前景。
发明内容
为了解决农田土壤重金属污染量大、面广，而需要移动土壤的移出法以及需要化学试剂的分解法在重金属污染土壤的修复中，成本高、易破坏耕地土壤微生态，容易造成对耕地的二次化学试剂污染的问题，本发明提出了一种用于原位修复重金属污染土壤的制剂和一种重金属污染土壤的原位生物修复方法。
本发明的发明人在研究中意外地发现，一些真菌(例如黑曲霉、多变根毛霉、灰色小克银汉霉)和细菌(例如解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、简单芽孢杆菌)具有降解重金属的能力，同时培养上述真菌和细菌的培养基也不含对土壤造成有害的化学污染的物质，而且可以在原位对被重金属污染的土壤进行修复，从而避免了移出法需要移动土壤以及分解法中使用的化学试剂对耕地的二次污染问题。而且，发明人还发现，当将真菌和细菌组合使用、或不同的真菌组合使用、以及不同的细菌组合使用时，比单独使用某一种真菌或细菌相比，具有更好的修复效果。此外，发明人还发现，当配合使用微生物生长促进剂和肥料时，能更有利于修复重金属污染土壤，从而完成了本发明。
本发明提供了一种用于原位修复重金属污染土壤的制剂，该制剂含有具有重金属降解能力的真菌和/或细菌；
其中，所述真菌为保藏编号为CGMCC No.保藏编号为CGMCCNo.11113的黑曲霉(Aspergillus niger)、保藏编号为CGMCC No.11114的多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)和保藏编号为CGMCC No.11115的灰色小克银汉霉(Cunninghamella bertholletiae)中的至少一种；
所述细菌为保藏编号为CGMCC No.10126的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、保藏编号为CGMCC No.10852的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)和保藏编号为CGMCC No.10853的简单芽孢杆菌(Bacillussimplex)中的至少一种。
本发明还提供了一种重金属污染土壤的原位生物修复方法，该方法包括使用用于原位修复重金属污染土壤的制剂对重金属污染土壤进行原位修复。
采用本发明提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂对重金属污染的土壤进行原位生物修复时，由于所采用的真菌和/或细菌可以在原位修复受重金属污染的土壤，同时也不采用污染环境的化学试剂，因而克服了移出法需要移动土壤的限制和分解法容易造成对耕地的二次化学试剂污染的问题，同时辅以微生物生长促进剂和肥料，使得可以充分利用真菌和/或细菌分解代谢土壤中残留的重金属，从而解决了土壤中高残留的重金属严重危及食品安全的问题，同时改善了土壤的微生态，使土壤更加快速的恢复耕作能力，而且该方法成本较低，从而具有广阔的应用前景。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物保藏
本发明的菌株如下：
1、黑曲霉(Aspergillus niger)，于2015年7月14日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.11113。
2、多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)，于2015年7月14日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.11114。
3、灰色小克银汉霉(Cunninghamella bertholletiae)，于2015年7月14日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.11115。
4、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，于2014年12月2日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.10126。
5、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，于2015年5月22日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.10852。
6、简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)，于2015年5月22日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.10853。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
根据本发明的第一个方面，本发明提供了一种用于原位修复重金属污染土壤的制剂，该制剂含有具有重金属降解能力的真菌和/或细菌；
其中，所述真菌为：保藏编号为CGMCC No.11113的黑曲霉(Aspergillusniger)、保藏编号为CGMCC No.11114的多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)和保藏编号为CGMCC No.11115的灰色小克银汉霉(Cunninghamellabertholletiae)中的至少一种；
所述细菌为：保藏编号为CGMCC No.10126的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、保藏编号为CGMCC No.10852的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)和保藏编号为CGMCC No.10853的简单芽孢杆菌(Bacillussimplex)中的至少一种。
根据本发明提供的制剂，所述制剂中可以不含细菌，且真菌的总含量可以为20-90mg干重/mL，优选50-80mg干重/mL。
当所述制剂中不含细菌时，所述制剂可以为黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉三者之中的任意一种、任意两种的组合或三种的组合。
在一种优选的实施方式中，所述制剂同时含有黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉，且黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的干重比为1：(0.01-100)：(0.01-100)，优选1：(0.2-5)：(0.2-5)。
根据本发明提供的制剂，所述制剂中可以不含真菌，且细菌的总含量可以为1013-1019个/mL，优选1015-1017个/mL。
当所述制剂中不含真菌时，所述制剂可以为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌三者之中的任意一种、任意两种的组合或三种的组合。
在一种优选的实施方式中，所述制剂同时含有解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌，且解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌的数量比为1：(10-6-106)：(10-6-106)，优选1：(10-2-102)：(10-2-102)。
根据本发明提供的制剂，所述制剂中可以同时含有真菌和细菌，且真菌的总含量可以为10-80mg干重/mL，优选40-50mg干重/mL；细菌的总含量为1010-1018个/mL，优选1014-1015个/mL。
当所述制剂中同时含有真菌和细菌时，所述制剂中的真菌可以为黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉三者之中的任意一种、任意两种或三种；所述制剂中的细菌可以为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌三者之中的任意一种、任意两种或三种。
在一种优选的实施方式中，所述制剂同时含有上述三种真菌和上述三种细菌，且黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的干重比为1：(0.01-100)：(0.01-100)，优选1：(0.2-5)：(0.2-5)；解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌的数量比为1：(10-6-106)：(10-6-106)，优选1：(10-2-102)：(10-2-102)。
所述制剂中还可以含有微生物生长促进剂和/或肥料。
所述微生物生长促进剂可以为葡萄糖、淀粉、酵母膏、酵母粉、蛋白胨和氯化钠中的至少一种。所述微生物生长促进剂可以促进原位修复重金属污染土壤的制剂中的微生物在土壤中的生长。
所述微生物生长促进剂的含量可以为10-80g/mL，优选30-50g/mL。
所述肥料可以为有机肥、尿素、磷酸二铵和硫酸钾中的至少一种。所述肥料可以帮助被污染的土壤恢复肥力，并在一定程度上促进所施加微生物的生长。
所述肥料的含量可以为1-10g/mL，优选4-6g/mL。
根据本发明的第二个方面，本发明提供了一种重金属污染土壤的原位生物修复方法，该方法包括使用上述用于原位修复重金属污染土壤的制剂对重金属污染土壤进行原位修复。
其中，
当所述制剂中不含细菌时，真菌的使用量可以为使得重金属污染土壤中真菌的总含量达到4-18g干重/m3，优选10-16g干重/m3。
当所述制剂中不含真菌时，细菌的使用量可以为使得重金属污染土壤中细菌的总含量达到1015-1021个/m3，优选1017-1019个/m3。
当所述制剂中同时含有真菌和细菌时，真菌的使用量可以为使得重金属污染土壤中真菌的总含量达到2-16g干重/m3，优选8-10g干重/m3，细菌的使用量为使得重金属污染土壤中细菌的总含量达到1012-1020个/m3，优选1016-1017个/m3。
当所述制剂中还含有微生物生长促进剂和/或肥料时，所述微生物生长促进剂的使用量可以为使得重金属污染土壤中微生物生长促进剂的含量达到20-160g/m3，优选60-100g/m3。所述肥料的使用量为使得重金属污染土壤中肥料的含量达到2-20g/m3，优选8-12g/m3。
根据本发明的重金属污染土壤的原位生物修复方法，所述原位修复的过程可以在土壤水份含量为5重量％-30重量％、温度为15-40℃下操作5-30天，优选7-14天。
根据本发明的重金属污染土壤的原位生物修复方法，可以采用灌溉和翻耕操作使得土壤水份含量为5重量％-30重量％。其中翻耕操作的周期可以为1-4周1次。采用翻耕操作可以为土壤中微生物的生长提供充足的氧气。可以采用覆盖多孔地膜的操作保持土壤中的温度为15-40℃，水分含量为5重量％-30重量％，以提供真菌和/或细菌生长所需的温度和湿度，从而为微生物的生长繁殖提供适宜的环境。
以下将通过具体的实施例对本发明进行详细描述。
以下实施例中，土壤中的重金属含量(单位g/kg土壤)按照以下方法测定：
准确称取过100目筛的风干土壤样品0.5g，加入10mL的HNO3，预消解过夜后，用微波消解仪消解土壤样品。消解完成后用ICP-AES法检测重金属镉的含量。
重金属的土壤清除率为：(处理前的土壤中重金属的含量-用本发明提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂处理之后的土壤中的重金属的含量)/处理前的土壤中重金属的含量×100％。
以下实施例中，制剂中各成分的含量均以每mL用于原位修复重金属污染土壤的制剂为基准。
实施例1
本实施例用于说明本发明提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂，以及使用该制剂对重金属污染土壤进行原位修复的方法。
本实施例提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂的组成如下：
保藏编号为CGMCC No.11113的黑曲霉(Aspergillus niger)，含量为13mg干重/mL；
保藏编号为CGMCC No.11114的多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)，含量为13mg干重/mL；
保藏编号为CGMCC No.11115的灰色小克银汉霉(Cunninghamellabertholletiae)，含量为14mg干重/mL；
保藏编号为CGMCC No.10126的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，含量为1015个/mL；
保藏编号为CGMCC No.10852的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，含量为1015个/mL；
保藏编号为CGMCC No.10853的简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)，含量为1015个/mL；
葡萄糖的含量为10g/mL，淀粉的含量为5g/mL，酵母膏的含量为5g/mL，酵母粉的含量为5g/mL，蛋白胨的含量为10g/mL，氯化钠的含量为10g/mL；
有机肥的含量为2g/mL，尿素的含量为1g/mL，磷酸二铵的含量为1g/mL，硫酸钾的含量为1g/mL。
将上述制剂均匀施用于重金属含量为1g/kg土壤的被重金属污染的土壤中，使得土壤中黑曲霉(Aspergillus niger)的含量达到2.6g干重/m3，多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)的含量达到2.6g干重/m3，灰色小克银汉霉(Cunninghamella bertholletiae)的含量达到2.8g干重/m3，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的含量达到1017个/m3，地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)的含量达到1017个/m3，简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)的含量达到1017个/m3，微生物生长促进剂的含量达到90g/m3，肥料的含量达到10g/m3。在土壤表面覆盖多孔地膜，使得土壤温度保持在25±2℃。每周灌溉和翻耕土壤，使得土壤中水份含量保持在20重量％-30重量％。
14天后，测得土壤中重金属含量为0.1046g/kg土壤，重金属的土壤清除率达到89.54％。
实施例2-16
本实施例用于说明本发明提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂，以及使用该制剂对重金属污染土壤进行原位修复的方法。
实施例2-16提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂的组成中，除了表1-1和1-2中的组分的含量外，其余组分(微生物生长促进剂和肥料)的含量均和实施例1相同。
将实施例2-16提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂均匀施用于重金属含量为1g/kg土壤的被重金属污染的土壤中，使得土壤中除了真菌和细菌的含量达到表2-1和2-2中所示的含量外，其它组分(微生物生长促进剂和肥料)的含量均和实施例1相同。
实施例2-16中，使用实施例2-16提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂对被重金属污染的土壤进行处理的方式均和实施例1相同。
14天后，测得的土壤中重金属的含量和重金属的土壤清除率如表3所示。
表1-1制剂中真菌和细菌组分的含量
| 实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 黑曲霉 | 13 | 20 | -- | -- | 35 | -- | -- | 10 |
| 多变根毛霉 | 13 | 20 | 25 | -- | 30 | -- | 75 | - |
| 灰色小克银汉霉 | 14 | -- | 25 | -- | -- | 70 | -- | - |
| 解淀粉芽孢杆菌 | 1015 | 1014 | -- | 1016 | -- | -- | 1010 | 1018 |
| 地衣芽孢杆菌 | 1015 | 1014 | 1012 | -- | -- | 1017 | 1010 | - |
| 简单芽孢杆菌 | 1015 | -- | 1012 | 1016 | -- | 1017 | -- | - |
表1-2制剂中真菌和细菌组分的含量
| 实施例 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
| 黑曲霉 | -- | -- | 60 | -- | -- | -- | -- | -- |
| 多变根毛霉 | 45 | -- | -- | 65 | -- | -- | -- | -- |
| 灰色小克银汉霉 | -- | 80 | -- | -- | 75 | -- | -- | -- |
| 解淀粉芽孢杆菌 | -- | -- | -- | -- | -- | 1015 | -- | -- |
| 地衣芽孢杆菌 | 1011 | -- | -- | -- | -- | -- | 1016 | -- |
| 简单芽孢杆菌 | -- | 1015 | -- | -- | -- | -- | -- | 1017 |
表1-1和1-2中，黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的含量单位为“mg干重/mL”；解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌的含量单位为“个/mL”。
表2-1土壤中真菌和细菌的含量
| 实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 黑曲霉 | 2.6 | 4 | -- | -- | 7 | -- | -- | 2 |
| 多变根毛霉 | 2.6 | 4 | 5 | -- | 6 | -- | 15 | - |
| 灰色小克银汉霉 | 2.8 | -- | 5 | -- | -- | 14 | -- | - |
| 解淀粉芽孢杆菌 | 1017 | 1016 | -- | 1018 | -- | -- | 1012 | 1020 |
| 地衣芽孢杆菌 | 1017 | 1016 | 1014 | -- | -- | 1019 | 1012 | - |
| 简单芽孢杆菌 | 1017 | -- | 1014 | 1018 | -- | 1019 | -- | - |
表2-2土壤中真菌和细菌的含量
| 实施例 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
| 黑曲霉 | -- | -- | 12 | -- | -- | -- | -- | -- |
| 多变根毛霉 | 9 | -- | -- | 13 | -- | -- | -- | -- |
| 灰色小克银汉霉 | -- | 16 | -- | -- | 15 | -- | -- | -- |
| 解淀粉芽孢杆菌 | -- | -- | -- | -- | -- | 1017 | -- | -- |
| 地衣芽孢杆菌 | 1013 | -- | -- | -- | -- | -- | 1018 | -- |
| 简单芽孢杆菌 | -- | 1017 | -- | -- | -- | -- | -- | 1019 |
表2-1和2-2中，黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的含量单位为“g干重/m3”；解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌的含量单位为“个/m3”。
表3处理后土壤中重金属的含量和重金属的土壤清除率
| 处理后土壤中重金属的含量(g/kg土壤) | 重金属的土壤清除率(％) | |
| 实施例1 | 0.1016 | 89.54 |
| 实施例2 | 0.1168 | 88.32 |
| 实施例3 | 0.1179 | 88.21 |
| 实施例4 | 0.1346 | 86.54 |
| 实施例5 | 0.1337 | 86.63 |
| 实施例6 | 0.1165 | 88.35 |
| 实施例7 | 0.1159 | 88.41 |
| 实施例8 | 0.1332 | 86.68 |
| 实施例9 | 0.1343 | 86.57 |
| 实施例10 | 0.1341 | 86.59 |
| 实施例11 | 0.1732 | 82.68 |
| 实施例12 | 0.1814 | 81.86 |
| 实施例13 | 0.1749 | 82.51 |
| 实施例14 | 0.1712 | 82.88 |
| 实施例15 | 0.1831 | 81.69 |
| 实施例16 | 0.1738 | 82.62 |
由实施例1-16和表3可见，使用本发明提供的用于原位修复重金属污染土壤的制剂对重金属污染的土壤进行原位修复，可以高效率地清除土壤中的重金属，不仅解决了土壤中高残留的重金属严重危及食品安全的问题，改善了土壤的微生态，使土壤更加快速的恢复耕作能力，而且不会对耕地造成二次化学试剂污染。同时，当将真菌和细菌组合使用、或不同的真菌组合使用、以及不同的细菌组合使用时，与单独使用某一种真菌或细菌相比，具有更好的修复效果。
Claims (10)
1.一种用于原位修复重金属污染土壤的制剂，其特征在于，所述制剂含有具有重金属降解能力的真菌和/或细菌；
其中，所述真菌为保藏编号为CGMCC No.11113的黑曲霉(Aspergillusniger)、保藏编号为CGMCC No.11114的多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)和保藏编号为CGMCC No.11115的灰色小克银汉霉(Cunninghamellabertholletiae)中的至少一种；
所述细菌为保藏编号为CGMCC No.10126的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、保藏编号为CGMCC No.10852的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)和保藏编号为CGMCC No.10853的简单芽孢杆菌(Bacillussimplex)中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述制剂中不含细菌，且真菌的总含量为20-90mg干重/mL，优选50-80mg干重/mL；
优选地，所述制剂同时含有黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉，且黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的干重比为1：(0.01-100)：(0.01-100)，优选1：(0.2-5)：(0.2-5)。
3.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述制剂中不含真菌，且细菌的含量为1013-1019个/mL，优选1015-1017个/mL；
优选地，所述制剂同时含有伯克霍尔德氏菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌，且伯克霍尔德氏菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌的数量比为1：(10-6-106)：(10-6-106)，优选1：(10-2-102)：(10-2-102)。
4.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述制剂中同时含有真菌和细菌，且真菌的含量为10-80mg干重/mL，优选40-50mg干重/mL；细菌的含量为1010-1018个/mL，优选1014-1015个/mL；
优选地，所述制剂同时含有黑曲霉、多变根毛霉、灰色小克银汉霉、伯克霍尔德氏菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌，且黑曲霉、多变根毛霉和灰色小克银汉霉的干重比为1：(0.01-100)：(0.01-100)，优选1：(0.2-5)：(0.2-5)；解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和简单芽孢杆菌的数量比为1：(10-6-106)：(10-6-106)，优选1：(10-2-102)：(10-2-102)。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的制剂，其中，所述制剂中还含有微生物生长促进剂和/或肥料。
6.根据权利要求5所述的制剂，其中，所述微生物生长促进剂为葡萄糖、淀粉、酵母膏、酵母粉、蛋白胨和氯化钠中的至少一种；
所述肥料为有机肥、尿素、磷酸二铵和硫酸钾中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的制剂，其中，所述微生物生长促进剂的含量为10-80g/mL，优选30-50g/mL；
所述肥料的含量为1-10g/mL，优选4-6g/mL。
8.一种重金属污染土壤的原位生物修复方法，其特征在于，该方法包括使用权利要求1-7中任意一项所述的制剂对重金属污染土壤进行原位修复。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，
当所述制剂中不含细菌时，真菌的使用量为使得重金属污染土壤中真菌的含量达到4-18g干重/m3，优选10-16g干重/m3；
当所述制剂中不含真菌时，细菌的使用量为使得重金属污染土壤中细菌的含量达到1015-1021个/m3，优选1017-1019个/m3；
当所述制剂中同时含有真菌和细菌时，真菌的使用量为使得重金属污染土壤中真菌的含量达到2-16g干重/m3，优选8-10g干重/m3，细菌的使用量为使得重金属污染土壤中细菌的含量达到1012-1020个/m3，优选1016-1017个/m3；
当所述制剂中还含有微生物生长促进剂和/或肥料时，所述微生物生长促进剂的使用量为使得重金属污染土壤中微生物生长促进剂的含量达到20-160g/m3，优选60-100g/m3；所述肥料的使用量为使得重金属污染土壤中肥料的含量达到2-20g/m3，优选8-12g/m3。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其中，所述原位修复的过程在土壤水份含量为5重量％-30重量％、温度为15-40℃下操作5-30天，优选7-14天。
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