CN106581737B - 一种止血组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种止血组合物及其制备方法,其中,止血组合物包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液。本发明的有益效果在于,本发明的止血组合物,能够在体温范围内迅速成胶、粘性较强、滞留时间较长且对人体皮肤及细胞无刺激性,能够达到快速止血的功效。
Description
技术领域
本发明涉及医疗技术领域,尤其涉及一种止血组合物及其制备方法。
背景技术
外科手术几乎都涉及到出血和止血,随着科技的发展,一些新型的止血材料出现了很多。
大多数的止血药物多以泊洛沙姆407作为主体物质,由于泊洛沙姆407具有反向凝胶的性质,在常温和低温状态下是液体,注入到人体血管后上升至37度左右,就会形成凝胶塞,从而阻止血液流动。目前,科研工作者常通过添加一些温度敏感型材料、或者大分子聚合物来提高泊洛沙姆407的止血性能,但是现有的这些止血组合物无论是在成胶时间,热稳定性,还是在体内滞留时间、生物相容性方面都有重大的缺陷,严重影响术后止血的功效。
鉴于上述缺陷,本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本发明。
发明内容
为解决上述问题,本发明采用的技术方案在于,一方面提供一种止血组合物,包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液。
进一步,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸或谷氨酸或者两组的组合。
进一步,所述的促渗剂为羟丙基-β-环糊精、冰片、薄荷油或橄榄油中的一种或两种以上的混合物。
进一步,所述的水溶性高分子辅料为壳聚糖、透明质酸、透明质酸钠、胶原蛋白或明胶中的一种或两种以上的混合物。
进一步,所述的聚乙二醇为聚乙二醇400-1000中的一种或两种以上的混合物。
进一步,所述的生理平衡液为生理盐水、超纯水或磷酸盐缓冲液。
进一步,所述的止血组合物,还包括甘油作为相稳定剂。
进一步,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
另一方面,提供一种止血组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)冰浴条件下,将所述泊洛沙姆407和所述泊洛沙姆188溶解于生理平衡液中,在搅拌条件下先后加入所述聚乙二醇和所述苯扎氯铵,溶解得到溶液A;
(2)将所述水溶性高分子辅料溶于所述生理平衡液中,加入活性炭和所述促渗剂,溶解循环0.5-1h后过滤,得到澄清液B;
(3)冰浴条件下,将所述溶液A和所述澄清液B混合后,真空脱气,将混合后的溶液用微孔滤膜过滤,得到溶液C;
(4)在所述溶液C中添加所述酸性氨基酸后,将得到的溶液装入Mw 350Da的透析袋在pH 3.5的磷酸盐缓冲溶液中透析20-24h,在pH 3.0的NaCl溶液中透析20-24h;
(5)将所述步骤(4)得到的溶液先降温至-20℃保存24h,再降温至-70℃保持12h,后缓慢升温至-20℃保持10h,再升至4℃保持6h,如此反复3-4次,密封后于4℃冰箱保存备用。
进一步,所述步骤(3)中,在溶液混合后,加入甘油,再进行真空脱气。
与现有技术比较本发明的有益效果在于:本发明的止血组合物,能够在体温范围内迅速成胶、粘性较强、滞留时间较长且对人体皮肤及细胞无刺激性,能够达到快速止血的功效。
具体实施方式
以下结合实施例,对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。
实施例一
一种止血组合物:包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液。本实施例中,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸,所述的水溶性高分子辅料为壳聚糖,所述的促渗剂为羟丙基-β-环糊精,所述的聚乙二醇为聚乙二醇400,所述的生理平衡液为生理盐水。
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
泊洛沙姆188能够通过氢键和离子间作用增强它与其他成分的结合,来提高胶凝速度,水溶性高分子辅料能够增加生物的黏附性,所以将水溶性高分子辅料和泊洛沙姆188混合,能够进一步提高成胶的速率。此处设定5≤N≤30是在实验的基础上得出的,当N低于5时,随着N的减小,止血组合物的粘性几乎不变,反而成胶速率会相应的减慢,当5≤N≤30时,随着N的增大,止血组合物的粘性和成胶速率呈线性增长,当N>30时,止血组合物的成胶速率几乎不变。
另外,聚乙二醇能够增加泊洛沙姆188的氢键作用力,使泊洛沙姆188的成胶速率更高,此外,聚乙二醇还能够改变止血组合物相转变的温度也是因为其氢键作用,所以,聚乙二醇和泊洛沙姆188之间互相影响,P(聚乙二醇)和M(泊洛沙姆188)的量越接近时,止血组合物越能够迅速在人体温度范围内成胶,但由于影响成胶速率的主体物质是泊洛沙姆188,因此,M(泊洛沙姆188)的量要多于P(聚乙二醇)的量,即M>P,否则,成胶速率会急速下降,严重影响止血组合物的止血效果。因此,通过上述公式可提前设定M、N和P的值,能够得到在体温范围内迅速成胶且粘性较强的的止血组合物,达到快速止血的功效。
本实施例中,选定M=60,N=13,P=52,通过实验方法对该止血组合物的相转变温度、胶凝时间、成胶后的滞留时间以及细胞刺激性进行测定。
相转变温度:利用倒管法测定该止血组合物的相转变温度,在某温度下倒置样品管180°,观察30s内是否有流动现象,如样品没有明显流动,则认为形成凝胶,此温度即为相转变温度,经测定得到该止血组合物的相转变温度为28℃。
胶凝时间:利用倒管法测定该止血组合物的成胶时间,在相转变温度或相转变温度以上选择某一特定温度,本实施例中,选择37℃,当样品管置于30℃时开始计时,在不同的时间内倒置样品管180°,观察是否有流动现象,如样品没有明显流动,则认为形成凝胶,此时间即为成胶时间,经测定得到的该止血组合物的成胶时间为25s。
滞留时间:以硫酸钡为造影剂,在小白鼠伤口处涂抹该止血组合物,采用数字化X射线摄影系统检测止血组合物在伤口处0日、1日、2日、3日、5日、7日的滞留情况,结果表明,0-3日内滞留的止血组合物的量几乎不变,3日后滞留量随时间减少,到第7日几乎全部消失,可见,该止血组合物不仅止血效果好,而且还易被皮肤所吸收。
细胞刺激性:将此止血组合物注入小白鼠一处皮肤处,另一处皮肤处注入生理盐水作为对照,在5日后切取注入处的皮肤,置于10%的中性甲醛溶液中固定,石蜡包埋,常规切片,并进行苏木精伊红(HE)染色,并进行浸泡处理,晾干后中性树胶封片,置于光镜下观察,发现注入止血组合物的组织结构和注入生理盐水的组织结构基本无产别,注入止血组合物的组织结构清晰,黏膜上皮呈柱状,未见慢性炎症细胞浸润。
实施例二
如上所述的一种止血组合物,本实施例与其不同之处在于,止血组合物包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液。其中,所述的酸性氨基酸为谷氨酸,所述的水溶性高分子辅料为透明质酸或透明质酸钠或者两者的组合,所述的促渗剂为冰片,所述的聚乙二醇为聚乙二醇600,所述的生理平衡液为超纯水。
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
通过上述公式可提前设定M、N和P的值,能够得到在体温范围内迅速成胶且粘性较强的的止血组合物,达到快速止血的功效。
本实施例中,选定M=65,N=5,P=55,利用实施例一所述的测试方法,测定本实施例中的止血组合物的相转变温度为31℃,在37℃下的成胶时间为30s,成胶后的滞留时间为4日,对细胞无刺激性,生物相容性好。
实施例三
如上所述的一种止血组合物,本实施例与其不同之处在于,止血组合物包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液。其中,所述的酸性氨基酸为谷氨酸,所述的水溶性高分子辅料为胶原蛋白,所述的促渗剂为薄荷油,所述的聚乙二醇为聚乙二醇600,所述的生理平衡液为磷酸盐缓冲液。
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
通过上述公式可提前设定M、N和P的值,能够得到在体温范围内迅速成胶且粘性较强的的止血组合物,达到快速止血的功效。
本实施例中,选定M=56,N=19,P=50,利用实施例一所述的测试方法,测定本实施例中的止血组合物的相转变温度为33℃,在37℃下的成胶时间为21s,成胶后的滞留时间为6日,对细胞无刺激性,生物相容性好。
实施例四
如上所述的一种止血组合物,本实施例与其不同之处在于,止血组合物包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵、生理平衡液和甘油。其中,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸和谷氨酸的混合物,所述的水溶性高分子辅料为明胶,所述的促渗剂为橄榄油,所述的聚乙二醇为聚乙二醇800,所述的生理平衡液为磷酸盐缓冲液。本实施例中,在止血组合物中加入甘油,能够起到相稳定性的作用。
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
通过上述公式可提前设定M、N和P的值,能够得到在体温范围内迅速成胶且粘性较强的的止血组合物,达到快速止血的功效。
本实施例中,选定M=51,N=27,P=47,利用实施例一所述的测试方法,测定本实施例中的止血组合物的相转变温度为32℃,在37℃下的成胶时间为18s,成胶后的滞留时间为7日,对细胞无刺激性,生物相容性好。
实施例五
如上所述的一种止血组合物,本实施例与其不同之处在于,止血组合物包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵、生理平衡液和甘油。其中,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸,所述的水溶性高分子辅料为壳聚糖、胶原蛋白和明胶的混合物,所述的促渗剂为薄荷油和橄榄油的混合物,所述的聚乙二醇为聚乙二醇1000,所述的生理平衡液为磷酸盐缓冲液。
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
通过上述公式可提前设定M、N和P的值,能够得到在体温范围内迅速成胶且粘性较强的的止血组合物,达到快速止血的功效。
本实施例中,选定M=53,N=24,P=48,利用实施例一所述的测试方法,测定本实施例中的止血组合物的相转变温度为30℃,在37℃下的成胶时间为20s,成胶后的滞留时间为5日,对细胞无刺激性,生物相容性好。
实施例六
如上所述的一种止血组合物,本实施例与其不同之处在于,其制备方法为:
(1)冰浴条件下,将泊洛沙姆407和泊洛沙姆188溶解于生理平衡液中,在搅拌条件下先后加入聚乙二醇和苯扎氯铵,溶解得到溶液A;
(2)将水溶性高分子辅料溶于生理平衡液中,加入活性炭和促渗剂,溶解循环0.5-1h后过滤,得到澄清液B;
(3)冰浴条件下,将所述溶液A和所述澄清液B混合后,真空脱气,将混合后的溶液用微孔滤膜过滤,得到溶液C;
(4)在所述溶液C中添加酸性氨基酸后,将得到的溶液装入Mw 350Da的透析袋在pH3.5的磷酸盐缓冲溶液中透析20-24h,在pH 3.0的NaCl溶液中透析20-24h;
(5)将所述步骤(4)得到的溶液先降温至-20℃保存24h,再降温至-70℃保持12h,后缓慢升温至-20℃保持10h,再升至4℃保持6h,如此反复3-4次,密封后于4℃冰箱保存备用。
本发明中,通过此制备方法制备得到的止血组合物,不仅成胶速率快、成胶后滞留时间长而且生物相容性好。
所述步骤(3)中,在溶液混合后,加入甘油,再进行真空脱气,能够增加相稳定效果。
本实施例中,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸或谷氨酸或者两组的组合;所述的促渗剂为羟丙基-β-环糊精、冰片、薄荷油或橄榄油中的一种或两种以上的混合物;所述的水溶性高分子辅料为壳聚糖、透明质酸、透明质酸钠、胶原蛋白或明胶中的一种或两种以上的混合物;所述的聚乙二醇为聚乙二醇400-1000中的一种或两种以上的混合物;所述的生理平衡液为生理盐水、超纯水或磷酸盐缓冲液。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明方法的前提下,还可以做出若干改进和补充,这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种止血组合物,其特征在于,包括:泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液;
其中,泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、酸性氨基酸、水溶性高分子辅料、促渗剂、聚乙二醇、苯扎氯铵和生理平衡液的重量份比分别为300:M:10:N:0.3:P:0.2:600,其中,所述M、N和P符合下列关系:
其中,5≤N≤30,50≤M≤70。
2.根据权利要求1所述的止血组合物,其特征在于,所述的酸性氨基酸为天冬氨酸或谷氨酸或者两组的组合。
3.根据权利要求1所述的止血组合物,其特征在于,所述的促渗剂为羟丙基-β-环糊精、冰片、薄荷油或橄榄油中的一种或两种以上的混合物。
4.根据权利要求1所述的止血组合物,其特征在于,所述的水溶性高分子辅料为壳聚糖、透明质酸、透明质酸钠、胶原蛋白或明胶中的一种或两种以上的混合物。
5.根据权利要求4所述的止血组合物,其特征在于,所述的聚乙二醇为聚乙二醇400-1000中的一种或两种以上的混合物。
6.根据权利要求1所述的止血组合物,其特征在于,所述的生理平衡液为生理盐水、超纯水或磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求1所述的止血组合物,其特征在于,还包括甘油作为相稳定剂。
8.如权利要求1-7任一所述的止血组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)冰浴条件下,将所述泊洛沙姆407和所述泊洛沙姆188溶解于生理平衡液中,在搅拌条件下先后加入所述聚乙二醇和所述苯扎氯铵,溶解得到溶液A;
(2)将所述水溶性高分子辅料溶于所述生理平衡液中,加入活性炭和所述促渗剂,溶解循环0.5-1h后过滤,得到澄清液B;
(3)冰浴条件下,将所述溶液A和所述澄清液B混合后,真空脱气,将混合后的溶液用微孔滤膜过滤,得到溶液C;
(4)在所述溶液C中添加所述酸性氨基酸后,将得到的溶液装入Mw 350Da的透析袋在pH3.5的磷酸盐缓冲溶液中透析20-24h,在pH3.0的NaCl溶液中透析20-24h;
(5)将所述步骤(4)得到的溶液先降温至-20℃保存24h,再降温至-70℃保持12h,后缓慢升温至-20℃保持10h,再升至4℃保持6h,如此反复3-4次,密封后于4℃冰箱保存备用。
9.根据权利要求8所述的止血组合物的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,在溶液混合后,加入甘油,再进行真空脱气。
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体温敏感眼用凝胶的设计;魏刚;《中国博士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》;20040131;第51-52页1.2.1体温敏感凝胶的制备、54-59页 |
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CN106581737A (zh) | 2017-04-26 |
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