CN106572662A - 抗微生物‑抗生物膜组合物及其作为个人护理产品的使用方法 - Google Patents

抗微生物‑抗生物膜组合物及其作为个人护理产品的使用方法 Download PDF

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Abstract

教导了用作眼部、足部护理、指甲护理或足部医疗溶液的包含螯合剂、金属离子盐、凝胶剂或缓冲剂、抗微生物剂、抗生物膜剂和pH调节剂或缓冲剂的组合物。组合物的抗感染性质包括减少或杀灭在多种微生物的生物膜中出现的厌氧/好氧/兼性革兰氏阴性和革兰氏阳性个人护理产品相关细菌。该组合物可以是乳液、乳膏、油膏、敷料、绷带、洗液、浸泡剂、凝胶、喷雾或其他合适的形式，包括特定产品。另外，本发明提供了一种使用纳米颗粒或其他高效递送系统递送单独含有一种或两种螯合剂或含有螯合剂与金属离子盐的配制组合物的高效方法。

Description

抗微生物-抗生物膜组合物及其作为个人护理产品的使用 方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2014年6月27日提交的题为“抗微生物-抗生物膜组合物及其作为个人护理装置的使用方法”的美国临时申请号62/018,114的权益。
发明领域
本发明可涉及使用用于个人护理产品的抗微生物和抗生物膜组合物的方法。还可涉及配制用于个人护理产品的应用的包含螯合剂、锌盐、抗微生物剂和个人护理可接受的赋形剂的组合物的方法。更具体地，本发明可涉及递送含有两种或更多种螯合剂和锌盐的可接受的制剂用于个人护理的高效方法。
发明背景
越来越多的人使用隐形眼镜作为矫正视力和/或弥补眼睛异常的手段。隐形眼镜必须每天戴入和移去，并且每次佩戴之间需要清洁和消毒，这需要溶液和容器。在隐形眼镜的佩戴和常规操作期间，微生物可粘附于隐形眼镜并且污染储存容器/溶液。然后，在储存容器/溶液中繁殖的微生物可通过隐形眼镜转移到眼睛并且成为可能导致眼睛感染的病原体。已经开发了各种溶液来清洁这些沉积物并对容器进行消毒。
推荐每天使用包含各种表面活性剂和消毒剂的日常清洁剂来去除隐形眼镜上的大部分沉积物和碎片。
隐形眼镜需要在戴入眼睛之前润湿隐形眼镜的溶液。在隐形眼镜戴入眼睛之后，有时通过液滴分散器向眼睛施用用于再润湿、润滑和/或增强隐形眼镜佩戴者舒适感的眼用溶液。通过直接向眼睛中的隐形眼镜添加用以改善佩戴软性隐形眼镜的舒适性的溶液一般含有粘度增强剂、润滑剂、表面活性剂、缓冲剂、防腐剂和盐。
多用(multipurpose)溶液是受欢迎的，这归因于其作为单一溶液却能用于在眼睛中戴入镜片之前的即刻进行清洁、消毒并调节隐形眼镜的方便性。也设计多用溶液用作免漂洗润湿剂，意味着该溶液必须对于眼睛接触而言是眼用上安全的。这在一些程度上同时限制了可用于溶液中作为防腐剂或消毒剂的清洁剂、杀生物剂、抗菌剂和抗生物膜剂的类型和浓度，因为这些往往会对眼睛产生刺激。另外，表面活性剂必须不抑制溶液的润湿或调节功能。
因此，需要具有改善的抗菌和抗生物膜性质，同时保持或增加产品的杀生物功效而就对眼睛组织的毒性水平而言对舒适性或安全性无不良影响的组合物。还需要可用作滴眼液、洗眼溶液、隐形眼镜护理溶液或清洁溶液、储存溶液、消毒剂、清洁-储存溶液、和清洁消毒-储存溶液的组合物。
足部护理(pedicure)器材、指甲护理(manicure)器材和足部医疗(podiatry)器材，如用于清洁和洗涤脚和手的那些，以及用于浸泡脚和手的容器一般针对许多不同的顾客重复使用多次。为了防止细菌和真菌的扩散，杀生物剂，包括抗菌剂和抗生物膜溶液必须足够强以有效抵抗广泛的细菌，而就毒性水平而言对顾客和足病医生或美甲师的舒适性或安全性无不良影响。
发明内容
本发明可提供用于预防、净化或处理个人护理产品的组合物和方法，包括滴眼液、洗眼溶液、隐形眼镜护理溶液、隐形眼镜清洁溶液、隐形眼镜储存溶液、隐形眼镜消毒剂、隐形眼镜清洁-储存溶液、和隐形眼镜清洁消毒-储存溶液、隐形眼镜容器、隐形眼镜、以及足部护理、指甲护理和足部医疗溶液、凝胶、乳膏、冻胶、粉末、糊料、洗液、皂和清洁剂。
本发明的一个实施方式可提供包含(a)一种或多种螯合剂，和(b)一种或两种金属离子盐的组合物。
在另一个实施方式中，本发明的组合物包含：(a)少量的至少2种螯合剂，(b)少量的至少1种金属离子盐，其中各组分(a)和(b)的量对于在个人护理产品中形成针对细菌感染的有效抗感染组合物而言是足够的。
在另一个实施方式中，本发明的组合物包含：(a)少量的至少2种螯合剂，(b)少量的至少一种金属离子盐，和(c)个人护理可接受的赋形剂。
本发明的另一种实施方式可提供包含2种螯合剂和一种或两种金属离子盐的抗感染组合物，其有效抵抗通过个人护理产品造成感染的细菌和真菌。
本发明的组合物可用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)(MRSA)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase negativestaphylococci)(CoNS)、万古霉素耐药性肠球菌(Vancomycin resistant Enterococci)(VRE)、碳青霉烯耐药性肺炎克雷伯氏菌(Carbapenem resistant Klebsiellapneumoniae)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、鲍氏不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcuspseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malasseziapachydermatis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)、白色念珠菌(Candida albicans)、单核细胞增生利斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、芽孢杆菌(Bacillus spp.)、无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)、大肠杆菌(Esherichia coli)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)、嗜麦芽糖寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、奇异变形菌(Proteus mirabilis)、克雷伯氏菌(Klebsiella spp.)、肠杆菌(Enterobacter spp.)和柠檬酸杆菌(Citrobacterspp.)。
本发明的另一种实施方式可提供包含至少2种螯合剂和一种或两种金属离子盐的抗感染组合物，其用于针对伴随个人护理产品或存在于其中的细菌和真菌。
在一个实施方式中，螯合剂为约5000mg/L至约50000/L组合物。在一个实施方式中，金属离子盐为约1000mg/L至约10000mg/L组合物。
螯合剂可选自下组：EDTA、EGTA、DTPA、EDDHA、IDA、CDTA、HEDTA、HEIDA、NTA、柠檬酸钠、柠檬酸钾、卵传铁蛋白(ovotransferrin)和乳铁蛋白。金属离子盐可选自下组：氯化锌、乳酸锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌、硫酸锌、乙酸锌、银离子或磺胺嘧啶银、硫酸银、硝酸银和碳酸银。
在另一个实施方式中，螯合剂是EDTA和柠檬酸钠，并且金属离子盐是氯化锌或硫酸锌。EDTA可以约10mg/ml存在，并且柠檬酸钠可以约10mg/ml存在。氯化锌或乳酸锌可以约1mg/ml存在。
组合物还可包含选自下组的一种或多种成分：水、柠檬酸盐缓冲液、柠檬酸、稳定剂、调味剂、维生素、矿物质、草药、表面活性剂、抗微生物肽、抗微生物剂和pH调节剂。抗微生物防腐剂可选自山梨酸钾、苯甲酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸，并且可具体用于隐形眼镜清洁和消毒溶液。抗微生物防腐剂的浓度范围可以是0.25g/L至3g/L。
本发明还教导了制备以多种方式与个人护理产品联用的合适制剂的方法，例如，以消毒溶液、洗液、乳膏、凝胶、喷雾、热可逆凝胶喷雾、和糊料形式。
本发明还教导了制备用于处理或浸渍个人护理产品，包括隐形眼镜、隐形眼镜容器、以及足部护理工具、指甲护理工具和足部医疗工具和容器的合适制剂的方法。
该制剂还可包括天然或合成调味剂和着色剂。也可向本发明的组合物中加入增稠剂，如瓜尔胶、卡波姆、聚乙二醇、普流罗尼克F-127、藻酸钠、羧甲基纤维素、黄原胶和其他个人护理可接受的增稠剂。
其他制剂将是本领域技术人员显而易见的。本发明的组合物可包括抗生物膜酶(纤维素酶、β-N-乙酰基葡萄糖酶、DispersinB、木瓜蛋白酶、DNA酶1等)、抗微生物肽、抗生素(庆大霉素、环丙沙星、氨苄青霉素、头孢孟多酯钠(cefamendole nafate)、利福平等)、抗微生物剂(三氯生、氯己定、季铵化合物、银、银盐等)和其他抗生物膜化合物。
本发明还教导了使用脂质体或纳米颗粒递送系统增强组合物中抗感染化合物的稳定性和功效。
本发明还教导了用本发明的组合物处理或浸渍的个人护理产品，如隐形眼镜、隐形眼镜容器、洗手容器、手或脚洗涤器、和洗脚容器。
附图的简要说明
图1是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独及其组合对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图2是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独及其组合对甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(MRSP)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图3是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独及其组合对绿脓假单胞菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图4是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.062mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独及其组合对单核细胞增生利斯特氏菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图5是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图6是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(MRSP)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图7是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对绿脓假单胞菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图8是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对猪霍乱沙门氏菌ATCC 10708生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图9是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对大肠杆菌O157：H7生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图10是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独及其组合对大肠杆菌O157：H7生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图11是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对表皮葡萄球菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图12是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS-42)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图13是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对无乳链球菌ATCC 12386生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图14是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对肺炎克雷伯氏菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图15是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对鲍氏不动杆菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图16是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对嗜麦芽糖寡养单胞菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图17是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对万古霉素耐药性肠球菌(VRE)生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图18是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对粪肠球菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图19是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对奇异变形菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图20是显示柠檬酸钠(3mg/ml)、EDTA(0.25mg/ml)和ZnCl2(0.1mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对白色念珠菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图21是显示柠檬酸钠(1.5mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.05mg/ml)单独以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合对皮屑芽孢菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
图22是显示柠檬酸钠(1.5mg/ml)、EDTA(0.125mg/ml)和ZnCl2(0.05mg/ml)单独及其组合对皮屑芽孢菌生长和生物膜形成的抑制作用的柱状图。
发明详述
定义
术语“抗微生物剂”是指杀死或抑制或停止微生物(包括但不限于细菌和酵母)生长的化合物或组合物。
术语“生物膜”是指包封在自己产生的胞外聚合基质中，并且连接到生物或非生物表面的有结构的微生物群落。生物膜中的细菌对抗生素/抗微生物剂的抗性比其浮游(游离存活的)对应物高1000倍。
术语“生物膜形成”是指微生物连接到表面并且随后发展成多层细胞。
术语“抗生物膜”是指抑制微生物生物膜形成并破坏或打散预先形成的生物膜。
术语“感染”是指微生物如正常情况下在体内不存在的细菌、病毒和寄生虫的入侵和增殖。感染可能没有症状或是亚临床的，或者其可引起症状并且是临床上明显的。在身体中天然存活的微生物并不被认为是感染。
术语“个人护理产品”是指眼用产品，包括滴眼液、洗眼溶液、隐形眼镜护理溶液、隐形眼镜清洁溶液、隐形眼镜储存溶液、隐形眼镜消毒剂、隐形眼镜清洁-储存溶液、和隐形眼镜清洁消毒-储存溶液、隐形眼镜容器、隐形眼镜、以及足部护理溶液、指甲护理溶液和足部医疗溶液、凝胶、乳膏、冻胶、粉末、糊料、洗液、皂和清洁剂，以及洗手容器、手和脚洗涤器、外皮浸没溶液、和洗脚容器。
术语“消毒剂”是指应用于非生命物体以破坏该物体上生存的微生物的物质。消毒剂不必杀死所有的生物体，尤其是耐受性细菌孢子；其比灭菌效果差，灭菌是杀死所有类型生命的极端物理和/或化学过程。消毒剂不同于诸如抗生素的破坏体内微生物的其他抗微生物剂，以及破坏活组织上的微生物的防腐剂。消毒剂也与杀生物剂不同，后者往往破坏所有的生命形式，不仅仅是微生物。消毒剂通过破坏微生物的细胞壁/细胞膜或者干扰代谢和生长来发挥作用。
术语“抑制”是指至少降低个人护理产品相关的细菌生长和生物膜形成。
术语“预防或防止”是指至少防止与细菌相关的病症在哺乳动物中发生，尤其是当发现该哺乳动物倾向于患有疾病但还未诊断患有该疾病时。
本文所用的“预防量或防止量”包括预防性量，例如，有效防止或保护个人护理产品的量。在同时给予抗微生物剂与适用于本发明的方法的肽时，所述肽和/或抗微生物剂可以一定剂量给予，该剂量低于当抗微生物剂作为唯一活性成分给予时所需要的剂量。通过给予较低剂量的活性成分，可降低与之相关的副作用。
术语“金属离子盐”是指金属离子的盐，如氯化锌、乳酸锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌、硫酸锌、乙酸锌、银离子或磺胺嘧啶银、硫酸银、硝酸银和碳酸银。
本发明可教导具有抗微生物和抗生物膜活性的抗感染组合物，其含有螯合剂和其他抗微生物剂，例如抗微生物剂/抗生物膜化合物，金属离子盐和胶凝剂，表面活性剂或稳定剂的组合。
新型组合物将螯合剂和金属离子盐组合以使用比抗微生物组合物所需的正常量少的螯合剂和/或金属离子盐的量来实现对细菌生长和生物膜的显著抑制。如果某些应用需要，可使用较高浓度的这些化合物。
待在本发明的抗微生物组合物中使用的螯合剂的量可以是10000至100000mg/L。这一所述范围的上端可用于制备将在使用前稀释的浓缩产品。对于非浓缩产品，本发明中使用的量优选为约5000至10000mg/L。优选地，范围是约1000至5000mg/L。
使用的螯合剂的量应该是约1000至5000mg/L。如果该组合物配制为浓缩物，则可应用该范围的上端。对于非浓缩产品，本发明中使用螯合剂的量优选为约500至5000mg/L。优选地，该范围是约1000至3000mg/L，更优选约2000至3000mg/L。
对于浓度较低的溶液，如针对眼部使用，EDTA二钠可以为约10mg/L-50mg/L组合物，柠檬酸钠可以为约100mg/L-500mg/L组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌可以为约1mg/L-10mg/L。
制备
通过一种方法，如果形成含有一种或两种螯合剂和金属离子盐的双组分组合物，则这些化合物将以以下方式组合：通过充分搅拌，可使螯合剂，随后是金属离子盐溶于水中。然而，应注意到可颠倒添加顺序。
另外，可优选将抗微生物剂/抗微生物肽、抗生素、抗生物膜化合物、季铵化合物和表面活性剂与螯合剂在抗微生物组合物中合并。本发明的组合物包含：(a)少量的至少一种或两种螯合剂；(b)少量的金属离子盐或螯合铁的糖蛋白或抗微生物肽或抗生素或抗生物膜化合物；和(c)保守量的选自下组的至少一种化合物：稳定剂和/或胶凝剂和/或表面活性剂，其中，组分(a)、(b)和(c)各自的量足够组合形成对于个人护理产品而言有效的抗感染组合物。
组合物中活性组分的浓度可随着需要变化以减少使用本发明的组合物用于个人护理产品的时间的量。本领域技术人员可容易地确定活性组分浓度的这些变化。
组合物
本发明可包括用于个人护理产品的包含至少两种螯合剂和一种金属离子盐的独特和强化的抗感染组合物。
在一个实施方式中，含有两种螯合剂和金属离子盐的组合物包含抗微生物化合物。含有螯合剂和金属离子盐的组合物与抗微生物/抗生物膜化合物对个人护理产品相关细菌生长和生物膜形成有强化的抑制作用。在本发明的一个实施方式中，强化的抗微生物-抗生物膜组合物包含至少一种或两种螯合剂，一种金属离子盐和一种或多种抗微生物剂，其包括防腐剂(例如，三氯生、氯己定盐、十六烷基氯化吡啶鎓等)、抗生素和细菌素(例如，乳链菌肽、表皮素、高利丹宁(gallidennin)、肉桂霉素、耐久霉素、乳链球菌素481等)和螯合铁的糖蛋白(卵传铁蛋白、乳铁蛋白和血清铁传递蛋白)。另外，个人护理产品组合物可包含如下成分：如柠檬酸盐(例如，柠檬酸、柠檬酸锌、柠檬酸钠、柠檬酸钾等)、矿物质(例如，矿物盐，如氯化锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、柠檬酸锌、硫酸锌、乙酸锌、银、硫酸银、磺胺嘧啶银、硝酸银、碳酸银等)和三萜类化合物(例如，齐墩果酸和乌索酸)和壳聚糖。
在一个实施方式中，组合物包含抗生素和一种或两种螯合剂以及一种金属离子盐。抗生素是熟知的。抗生素组包括，但不限于β-内酰胺抑制剂(例如，青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林、甲氧西林等)、头孢菌素类(例如，头孢噻吩、头孢霉素等)、氨基糖苷类(例如，链霉素、妥布霉素等)、多烯类(例如，两性霉素、制霉菌素等)、大环内酯类(例如，红霉素等)、四环素类(例如，四环素、多西环素等)、硝基咪唑(例如，甲硝唑)、喹诺酮类(例如，萘啶酸)、利福霉素类(例如，利福平)、和磺酰胺类(例如，磺胺)、硝基芳族化合物(例如，氯霉素)和吡啶类(例如，异烟肼)。
在一个实施方式中，组合物包含防腐剂、一种或两种螯合剂以及一种金属离子盐。防腐剂是杀灭或抑制身体外表面上微生物的生长的试剂。防腐剂包括但不限于，三氯生、氯己定盐和十六烷基氯化吡啶鎓。
在一个实施方式中，组合物包含抗生物膜化合物、一种或两种螯合剂以及金属离子盐。抗生物膜化合物包括但不限于，DisperinB、DNA酶I、蛋白酶K、腺苷三磷酸双磷酸酶、顺式-2-壬烯二酸、藻酸盐裂解酶、乳铁蛋白、镓、纤维素和5-氟尿嘧啶。
在一个实施方式中，组合物有效抑制个人护理产品中的生长和生物膜形成。该组合物也有效破坏或打散预先形成的生物膜，这使得生物膜包埋的细菌更易于被抗微生物剂的杀灭。在合适的环境条件(如湿度和pH)下，可使用本发明的实施方式来调节感染。
本发明的一个实施方式也可包括其他个人护理可接受的载剂、稀释剂和添加剂如抗氧化剂、抗炎化合物、维生素、组织降解酶、赋予制剂在预期接受者中的等渗性的缓冲剂和溶质；和水性和非水性无菌悬浮液，其可包括悬浮剂、表面活性剂和增稠剂。
个人护理制剂
本发明的组合物可添加至适于将该组合物施加/递送至个人护理产品的多种制剂，包括但不限于，消毒溶液、洗液、乳膏、凝胶、喷雾。为了提供这类制剂，本发明的组合物与一种或多种个人护理可接受的赋形剂组合。
可通过任意已知的方法制备包括但不限于包含一种或两种螯合剂和金属离子盐，与防腐剂、抗生素、抗微生物剂、螯合铁的糖蛋白、细菌素、胞外基质或壳聚糖的组合的个人护理可接受的组合物的制剂。
通常，制备抗感染组合物的方法可包括将个人护理可接受的运载体与有效量的两种螯合剂和金属离子盐，与防腐剂、抗生素、细菌素、抗微生物肽或壳聚糖组合。
可使用多种运载体和赋形剂来配制本发明的实施方式，并且多种运载体和赋形剂是熟知的。这类个人护理可接受的载剂包括，但不限于，水、乙醇、润湿剂如聚乙二醇、甘油和山梨糖醇、胶凝剂如纤维素衍生物、聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物、羧甲基纤维素、普流罗尼克F-127、藻酸钠、聚乙二醇、增稠剂如CarbopolTM 934。
处理方法
对于对个人护理产品进行处理或消毒的用途，成分的优选浓度范围可包括：
(i)柠檬酸钠：(a)50,000mg/L-100,000mg/L，(b)25,000mg/L-50,000mg/L，(c)10,000mg/L-25,000mg/L，(d)5,000mg/L-10,000mg/L，和(e)1,000mg/L-5,000mg/L。
(ii)EDTA二钠：(a)10,000mg/L-25,000mg/L，(b)5,000mg/L-10,000mg/L，(c)1,000mg/L-5,000mg/L，(d)500mg/L-1,000mg/L，和(e)100mg/L-500mg/L。
(iii)氯化锌：(a)1,000mg/L-5,000mg/L，(b)500mg/L-1,000mg/L，(c)100mg/L-500mg/L，和(d)10mg/L-100mg/L。
在一个实施方式中，将一种或多种螯合剂和金属离子盐一起配制成本文所述的个人护理可接受的药物，其包含运载体和有效量的包含一种或多种螯合无机和金属离子盐作为活性成分的组合物。
在本发明的另一个实施方式中，强化的个人护理产品并不存在任何抗生素耐药性担忧和生物相容性/安全性问题。同时，包含一种或两种螯合剂(EDTA和柠檬酸钠)和金属离子盐(氯化锌或硫酸锌或乳酸锌)的本发明的组合物具有GRAS(一般认为安全)的状态并且所有这些成分是食物以及饲料添加剂。
参考以下的实施例将更好地理解本发明。这些实施例旨在表示本发明的具体实施方式，并不是对本发明范围的限制。
实施例
实施例1：柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球 菌(MRSA)生长和生物膜形成的抑制作用
金黄色葡萄球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图1)。
实施例2：柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对甲氧西林耐药性伪中间葡萄球 菌(MRSP)生长和生物膜形成的抑制作用
伪中间葡萄球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图2)。
实施例3：柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对绿脓假单胞菌生长和生物膜形 成的抑制作用
绿脓假单胞菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图3)。
实施例4：柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对单核细胞增生利斯特氏菌生长 和生物膜形成的抑制作用
单核细胞增生利斯特氏菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图4)。
实施例5：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2，和EDTA+ZnCl2组合对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)生长和生物膜形成的抑制作用
金黄色葡萄球菌(MRSA)的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA和柠檬酸钠+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图5)。
实施例6：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ，和 EDTA+ZnCl 2 组合对甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(MRSP)生长和生物膜形成的作用
MRSP的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图6)。
实施例7：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ，和 EDTA+ZnCl 2 组合对绿脓假单胞菌生长和生物膜形成的抑制作用
绿脓假单胞菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA和EDTA+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图7)。
实施例8：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、和 EDTA+ZnCl 2 组合对猪霍乱沙门氏菌ATCC 10708的抑制作用
猪霍乱沙门氏菌ATCC 10708的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图8)。
实施例9：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ，和 EDTA+ZnCl 2 组合对大肠杆菌O157：H7的抑制作用
大肠杆菌O157：H7的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图9)。
实施例10：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，及其组合对大肠杆菌O157：H7的抑制作 用
大肠杆菌O157：H7的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图10)。
实施例11：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对表皮葡萄球菌的抑制作用
表皮葡萄球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图11)。
实施例12：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ， 和EDTA+ZnCl 2 组合对凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS-42)的抑制作用
CoNS-42的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图12)。
实施例13：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对无乳链球菌ATCC 12386的抑制作用
无乳链球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图13)。
实施例14：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对肺炎克雷伯氏菌的抑制作用
肺炎克雷伯氏菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图14)。
实施例15：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ， 和EDTA+ZnCl 2 组合对鲍氏不动杆菌的抑制作用
鲍氏不动杆菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图15)。
实施例16：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ， 和EDTA+ZnCl 2 组合对嗜麦芽糖寡养单胞菌的抑制作用
嗜麦芽糖寡养单胞菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图16)。
实施例17：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ， 和EDTA+ZnCl 2 组合对万古霉素耐药性肠球菌(VRE)的抑制作用
VRE的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图17)。
实施例18：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对粪肠球菌的抑制作用
粪肠球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图18)。
实施例19：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对奇异变形菌的抑制作用
奇异变形菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图19)。
实施例20：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 ， 和EDTA+ZnCl 2 组合对白色念珠菌的抑制作用
白色念珠菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图20)。
实施例21：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl 2 、 和EDTA+ZnCl 2 组合对皮屑芽孢菌的抑制作用
皮屑芽孢菌的过夜肉汤培养基在Sabouraud右旋糖肉汤中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2和EDTA+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图21)。
实施例22：单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl 2 ，及其组合对皮屑芽孢菌的抑制作用
皮屑芽孢菌的过夜肉汤培养基在Sabouraud右旋糖肉汤中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37℃下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测：弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33％乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图22)。

Claims (36)

1.一种用于抑制与个人护理产品相关的细菌的生长或生物膜形成的组合物，所述组合物选自下组，包括：
(a)选自下组的一种或多种螯合剂：EGTA、DTPA、EDDHA、IDA、CDTA、HEDTA、HEIDA、NTA、EDTA二钠或四钠盐、柠檬酸钠、柠檬酸钾、卵传铁蛋白、乳铁蛋白和血清铁传递蛋白；和任选的
(b)选自下组的锌盐：氯化锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、柠檬酸锌、硫酸锌和乙酸锌。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述螯合剂是EDTA二钠和柠檬酸钠中的一种或多种。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述锌盐是氯化锌或柠檬酸锌。
4.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物选自下组：
a.EDTA二钠和柠檬酸钠，
b.EDTA二钠和氯化锌，
c.柠檬酸钠和氯化锌，和
d.柠檬酸钠、EDTA二钠和氯化锌。
5.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约2500mg/L至约10000mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约5000mg/L至约10000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约500mg/L至约5000mg/L。
6.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约10000mg/L至25000mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约50000mg/L至100000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约1000mg/L至5000mg/L。
7.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约5000mg/L至10000mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约25000mg/L至50000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约500mg/L至1000mg/L。
8.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约1000mg/L至5000mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约10000mg/L至25000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约100mg/L至500mg/L。
9.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约500mg/L至1000mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约5000mg/L至10000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约10mg/L至100mg/L。
10.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约100mg/L至500mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约1000mg/L至5000mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约10mg/L至100mg/L。
11.如权利要求1-4所述的组合物，其特征在于，EDTA二钠为约10mg/L至50mg/L所述组合物，柠檬酸钠为约100mg/L至500mg/L所述组合物，并且氯化锌或柠檬酸锌为约1mg/L至10mg/L。
12.如权利要求1-11所述的组合物，还包含抗微生物防腐剂。
13.如权利要求12所述的组合物，其特征在于，所述抗微生物防腐剂选自以下的一种或多种：山梨酸钾、苯甲酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸。
14.如权利要求12或13所述的组合物，其特征在于，所述抗微生物防腐剂为0.25g/L至3g/L。
15.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物用于针对与眼睛、足或手感染中的一种或多种相关的细菌和细菌生物膜。
16.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistantStaphylococcus aureus)(MRSA)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase negative staphylococci)(CoNS)、万古霉素耐药性肠球菌(Vancomycin resistant Enterococci)(VRE)、碳青霉烯耐药性肺炎克雷伯氏菌(Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae)、绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus pseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malassezia pachydermatis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)、大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)、单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、芽孢杆菌(Bacillus spp.)、白色念珠菌(Candida albicans)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)、大肠杆菌(Esherichia coli)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonellacholeraesuis)、嗜麦芽糖寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、奇异变形菌(Proteus mirabilis)、克雷伯氏菌(Klebsiellaspp.)、肠杆菌(Enterobacter spp.)和柠檬酸杆菌(Citrobacter spp.)。
17.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含EDTA二钠和柠檬酸钠，并用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)(MRSA)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase negativestaphylococci)(CoNS)、万古霉素耐药性肠球菌(Vancomycin resistant Enterococci)(VRE)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus pseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malassezia pachydermatis)、大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)、嗜麦芽糖寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、奇异变形菌(Proteus mirabilis)和白色念珠菌(Candida albicans)。
18.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含EDTA二钠和氯化锌，并用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcuspseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malassezia pachydermatis)和大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)。
19.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含柠檬酸钠和氯化锌，并用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)(MRSA)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus pseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malassezia pachydermatis)和大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)。
20.如权利要求1-14所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含柠檬酸钠、EDTA二钠和氯化锌，并用于针对一种或多种选自下组的感染相关细菌或酵母：甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)(MRSA)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(Methicillin resistantStaphylococcus pseudintermedius)(MRSP)、皮屑芽孢菌(Malassezia pachydermatis)、大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)和单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)。
21.如权利要求1-20所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自下组的一种或多种成分：水、缓冲剂、稳定剂、胶凝剂、表面活性剂、草药、维生素、矿物质、胞外基质、抗微生物剂、抗生素和pH调节剂。
22.如权利要求1-21所述的组合物，其制备成以下的一种或多种形式：消毒溶液、浸溶液、洗液、乳膏、油膏、凝胶和喷雾。
23.如权利要求1-22所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含脂质体或纳米颗粒或合适的装置递送系统。
24.如权利要求1-23所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自下组的抗感染化合物：DispersinB、藻酸盐裂解酶、乳链菌肽、乳铁蛋白、血清铁传递蛋白、卵传铁蛋白、卵清蛋白、卵类粘蛋白、硫酸鱼精蛋白、氯己定、十六烷基氯化吡啶鎓、三氯生、磺胺嘧啶银、苯扎氯铵、过氧化氢、柠檬酸、柠檬酸钾、5-氟尿嘧啶、顺式-2-壬烯二酸、DNA酶I、蛋白酶K、银、镓、银、细菌素和抗微生物肽。
25.如权利要求1-24所述的组合物，还包含以下的一种或多种：粘度增强剂、润滑剂、表面活性剂、缓冲剂、防腐剂、和盐。
26.如权利要求1-25所述的组合物，其特征在于，所述组合物是眼用溶液。
27.如权利要求26所述的组合物，其特征在于，所述眼用溶液是以下的一种或多种：滴眼液、洗眼溶液、隐形眼镜护理溶液、隐形眼镜清洁溶液、隐形眼镜储存溶液、隐形眼镜消毒剂、隐形眼镜清洁-储存溶液、和隐形眼镜清洁消毒-储存溶液、隐形眼镜容器、和隐形眼镜。
28.如权利要求1-25所述的组合物，其特征在于，所述组合物是足部护理、指甲护理或足部医疗溶液。
29.如权利要求28所述的组合物，其特征在于，所述组合物选自溶液、凝胶、乳膏、冻胶、粉末、糊料、洗液、皂和清洁剂。
30.一种防止或处理眼部生物膜生长的方法，包括权利要求26或27所述的组合物的眼部应用。
31.一种防止或处理手或脚生物膜生长的方法，包括权利要求28或29所述的组合物的足部护理、指甲护理或足部医疗应用。
32.如权利要求26或27所述的组合物用于防止或处理眼部生物膜生长的用途。
33.如权利要求28或29所述的组合物用于防止或处理手或脚相关的生物膜生长的用途。
34.一种用权利要求1-29中任一项所述的组合物处理或浸渍的个人护理装置。
35.如权利要求34所述的个人护理装置，包含以下的一种或多种：隐形眼镜和隐形眼镜容器。
36.如权利要求34所述的个人护理装置，包含以下的一种或多种：洗手容器、洗涤器、和洗脚容器。
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