CN106568884A - 油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种油脂脂肪酸和主要伴随成分的样品制备及检测，具体的说是针对植物油的脂肪酸和油的伴随成分甾醇、角鲨烯、维生素E等测定时处理方法各不相同，需要分别处理后才可进行气相色谱检测，所需时间较长等问题，根据油脂和油的伴随成分甾醇、角鲨烯、维生素E性质，确定了一种即可提取皂化物（脂肪酸）也可提取伴随成分（非皂化物甾醇、角鲨烯、维生素E等）的样品处理方法，为企业提供一种能够采用气相色谱快速检测脂肪酸和伴随成分的可靠方法。

Description

油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测

技术领域

本发明涉及油脂行业脂肪酸和伴随成分的测定及分析领域，具体的说是涉及油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测。

背景技术

植物油的脂肪酸是由碳、氢、氧三种元素组成的一类化合物，是磷脂、中性脂肪和糖脂的主要组成成分。油中脂肪酸组成成分主要有亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸等。评价植物油的质量常常用不饱和脂肪酸的多少为指标，因此，油中脂肪酸成分采用了气相色谱和气质联用检测方法来鉴定脂肪酸种类和含量，样品处理也较成熟。大量研究表明，植物油中非皂化物成分主要有甾醇、角鲨烯、维生素E、磷脂、茄尼醇、胡萝卜素、脂溶性色素等油的伴随成分，深海鲨鱼肝油主要成分就是角鲨烯。 植物甾醇中主要含有菜籽甾醇、β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇四种成分。植物甾醇可以阻碍人体吸收胆固醇的含量,可以有效的预防和治疗冠心病、溃疡、动脉粥样硬化、宫颈癌、同时还有抗炎作用，天然维生素E广泛存在于油料作物。维生素 E可以抑制脂质过氧化、防止细胞膜氧化损伤、降血压、增强机体免疫力、抗癌、抗不育、抗衰老等。总之，油脂的伴随成分就是人体所需的功能成分，可广泛应用于医药、饲料、食品、化妆品等行业。植物油脂中伴随成分含量低，成分复杂，结构相似，所以分离纯化困难。目前检测植物油中伴随成分含量常用的检测方法为高效液相色谱法、气相色谱法、气质联用检测法等。气相色谱检测植物油中伴随成分和脂肪酸的样品处理方法比较繁琐，很难得到一种快速处理方法同时分离得到油的脂肪酸及主要伴随成分待测样品。企业在研究和开发一种新的油种时，必须对其脂肪酸组成和油的伴随成分有一个较为准确的定性和定量，亟需一种简便、快速、准确的样品处理及检测方法。

发明内容

本专利研究一种油脂脂肪酸和主要伴随成分的制备及检测是依据油脂和油的伴随成分（甾醇、角鲨烯、维生素E等）的理化性质，采用皂化处理，在碱性条件下用石油醚或正己烷进行萃取，非皂化物（甾醇，角鲨烯，维生素A、D、E、K，磷脂，茄尼醇，胡萝卜素，脂溶性色素等）即油伴随成分被有机相萃取，可作为伴随成分样品进行气相色谱分析。而皂化物脂肪酸的盐存在于水相，并含有游离甘油。皂化处理后的下层物经甲酯化反应后，再用石油醚或正己烷萃取，即可获得甲脂化脂肪酸，可作为脂肪酸样品进行气相色谱分析。

本发明一种油脂脂肪酸和主要伴随成分的制备及检测，其特征在于按下述步骤操作：

1、取植物油0.5克至10 mL具塞试管中，同时取标准品0.05克至另一10 mL具塞试管中，各加入0.5 mol/L KOH-甲醇溶液3 mL，轻轻振荡摇匀，置于65℃水浴中皂化45min后取出，加入3 mL石油醚或正己烷进行萃取，静止1小时吸取上清液于样品瓶中，即为伴随成分（甾醇，角鲨烯，V生素A、D、E、K等）待测样品。去除多余的石油醚后，下层物加入BF₃-乙醚溶液0.4 mL，置于65℃水浴中，轻轻振荡摇匀，甲酯化10 min，取出后立刻用自来水冲洗冷却，加入3 mL石油醚或正己烷萃取，吸取上清液于样品瓶中，即为甲脂化脂肪酸待测样品。标准品具塞试管样用于制作标准曲线进行定量分析。

2、气相色谱检测脂肪酸成分条件为：FFAP色谱柱(25m× 0.25mm×0.25μm)，进样口260℃，检测器260℃，流速0.8 mL/min，柱温为梯度升温，140℃保持0.5 min，以8℃升温至165℃保持2 min，以2℃升为至185℃保持10min。进样量0.6μL，分流比20:1。

3、气相色谱检测伴随成分条件为：DB-5柱(30m× 0.32mm×0.25μm)，进样口290℃，检测器290℃，流速1.5 mL/min，柱温为梯度升温 130 ℃保持2 min，以20℃升温至290℃保持5 min。进样量1 μL，分流比100:1。

本发明具有以下优点：

本发明研究利用油脂脂肪酸和伴随成分的理化性质，采用皂化处理，在碱性条件下萃取出非皂化物（即为伴随成分）后，再加入BF₃-乙醚溶液进行甲酯化，萃取出甲酯化脂肪酸。该方法克服了分别对脂肪酸和各伴随成分进行样品处理时所耗时间长及方法不同一的缺点，具有操作简单、所需时间短、安全、快速、重复性好等优点。

附图说明

图1 本发明工艺流程示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但它并不是对本发明的限定。

实施例1：

一种油脂脂肪酸和主要伴随成分制备及检测，具体按下述步骤操作：

1、取栀子油0.5克至10 mL具塞试管中。

2、加入3 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液，轻轻振荡摇匀，置于65℃水浴中皂化45min后取出。

3、加入3 mL石油醚或正己烷进行萃取，静止1小时吸取上清液于样品瓶中，用于伴随成分测定（按权利要求3进行）。结果检测出维生素E 含量为0.05%、甾醇含量为0.2%和角鲨烯含量为4%。

4、去除多余的石油醚后，下层物加入0.4 mL BF₃-乙醚溶液，置于65℃水浴中，轻轻振荡摇匀，甲酯化10 min，取出后立刻用自来水冲洗冷却。

5、加入3 mL石油醚或正己烷萃取，吸取上清液于样品瓶中，用于甲脂化脂肪酸测定（按权利要求2进行），结果检测出主要脂肪酸为软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸等，不饱和脂肪酸的含量为73.637%，饱和脂肪酸为26.362%。

实施例2：

一种油脂脂肪酸和主要伴随成分制备及检测，具体按下述步骤操作：

1、取沙棘籽油0.5克至10 mL具塞试管中。

2、加入3 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液，轻轻振荡摇匀，置于65℃水浴中皂化45min后取出。

3、加入3 mL石油醚或正己烷进行萃取，静止1小时吸取上清液于样品瓶中，用于伴随成分测定（按权利要求3进行）结果检测出0.08%维生素E和0.5%甾醇。

4、去除多余的石油醚后，下层物加入BF₃-乙醚溶液0.4 mL，置于65℃水浴中，轻轻振荡摇匀，甲酯化10 min，取出后立刻用自来水冲洗冷却。

5、加入3 mL石油醚或正己烷萃取，吸取上清液于样品瓶中，用于甲脂化脂肪酸测定（按权利要求2进行）。结果检测出主要脂肪酸为软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸等，不饱和脂肪酸的含量为88.063%，饱和脂肪酸为11.938%。

Claims (4)

1.油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测，其特征在于所述方法为：取一定质量的油脂样品，经皂化处理后用石油醚或正己烷萃取，上清液即为油脂伴随成分（包括甾醇，角鲨烯，V生素A、D、E、K等）待测样品，下层物继续甲酯化处理后，经石油醚或正己烷萃取，上清液即为油脂脂肪酸待测样品（脂肪酸甲酯），分别利用FFAP色谱柱和DB-5柱在一定的气相色谱检测条件下即可测定油脂中脂肪酸及伴随成分的含量。

2.根据权利要求1所述油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测，其特征在于所述样品制备方法为：取油脂样品0.5克至10 mL具塞试管中，加入3 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液，轻轻振荡摇匀，置于65℃水浴中皂化45分钟后取出，加入3 mL石油醚或正己烷进行萃取，静止1小时，吸取上清液于样品瓶中，即为油脂伴随成分（包括甾醇，角鲨烯，V生素A、D、E、K等）待测样品，去除多余的石油醚后，下层物加入0.4 mL BF₃-乙醚溶液，置于65℃水浴中，轻轻振荡摇匀，甲酯化10分钟，取出后立刻用自来水冲洗冷却，加入3 mL石油醚或正己烷萃取，吸取上清液于样品瓶中，即为油脂脂肪酸待测样品（脂肪酸甲酯）。

3.根据权利要求1所述油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测，其特征在于所述脂肪酸的气相色谱检测条件为：FFAP色谱柱(25 m× 0.25 mm×0.25 μm)，进样口260℃，检测器260℃，流速0.8 mL/min，柱温为梯度升温 140 ℃保持0.5 min，以8℃升温至165℃，保持2 min以2℃升为至185℃保持10 min；进样量0.6 μL，分流比20:1。

4.根据权利要求1所述油脂脂肪酸和伴随成分的样品制备及检测，其特征在于所述伴随成分的气相色谱检测条件为：DB-5柱(30 m× 0.32 mm×0.25 μm)，进样口290℃，检测器290 ℃，流速1.5 mL/min，柱温为梯度升温 130 ℃保持2 min，以20℃升温至290℃保持5min；进样量1 μL，分流比100:1。