CN106565588A - 一种从坚果中提取食物源二十烷酸‑5‑羟色胺的方法 - Google Patents

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贺菊萍
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
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Abstract

本发明属于天然物质提取技术领域，具体涉及一种从坚果中提取食物源二十烷酸‑5‑羟色胺的方法。本发明所述从坚果中提取二十烷酸‑5‑羟色胺的方法，以非极性溶剂从坚果中提取食物源的二十烷酸‑5‑羟色胺，扩宽了二十烷酸‑5‑羟色胺的提取途径，同时以乙酸乙酯为提取溶剂，一次提取效率可达90％以上。

Description

一种从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法
技术领域
本发明属于天然物质提取技术领域，具体涉及一种从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法。
背景技术
阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)，又叫老年性痴呆，是一种中枢神经系统退行性疾病，以进行性记忆力损害和认知功能障碍为主要特征，具有起病隐袭、病程呈慢性进行性的特点，多发于65岁以上老人，是老年期痴呆最常见的一种类型。2006年，全世界约有两千六百万名阿兹海默病病患，到2050年时预估全球每85人就有一人罹患此病，尤其随着中国社会老年人比例的增加，该病日趋引起政府和民众的重视，对其发病机理和药物开发也迫在眉睫。
阿尔茨海默病主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状，严重影响社交、职业与生活功能。逐渐发生的记忆障碍或遗忘是AD的重要特征或首发症状，而认知障碍是AD的特征性表现，并随着病情进展逐渐表现明显。
AD的病因及发病机制尚未阐明，其特征性病理改变为β-淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结，以及神经元丢失伴胶质细胞增生等。因此，目前对于AD的治疗尚无特效疗法，均以对症治疗为主，包括药物治疗改善认知功能及记忆障碍、对症治疗改善精神症状、以及良好的护理延缓病情进展。通过药物和康复治有助于改进患者的认知和记忆功能，保持患者的独立生活能力，提高生存质量为目的。
植物资源中天然活性物质含量丰富，目前被证实具有神经保护作用的天然食物包括咖啡、银杏、鼠尾草、红景天、灵芝、钩藤等。美国普林斯顿大学与SIGNUM公司从咖啡中分离获得了二十烷酸-5-羟色胺，(eicosanoyl-5-hydroxytryptamide，EHT)，研究证实，EHT对α-突触核蛋白转基因阿兹海默症小鼠具有保护作用且对神经细胞的有效保护作用剂量为纳摩尔级，为阿兹海默症的药物治疗提供了理论基础。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法。
为解决上述技术问题，本发明所述的从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，包括如下步骤：
(1)取坚果与非极性溶剂混匀，并进行超声提取；
(2)将超声后的料液进行固液分离，取上清液即为含所需二十烷酸-5-羟色胺的提取液。
所述步骤(1)中，所述超声步骤温度为50-70℃、超声频率为30-40Hz，功率为150-200mW/cm2。
所述步骤(1)中，所述非极性溶剂包括乙酸乙酯。
所述步骤(1)中，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比为1-5：30-50，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比关系为g/mL的关系。
优选的，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比为3：40。
所述步骤(2)中，所述固液分离步骤为离心过滤，具体包括先将所述料液于2000-2500rmp低速下离心，再将所得上清液在12000-15000rmp高速下进行离心处理的步骤。
所述步骤(1)中，还包括将所述坚果去皮、粉碎的步骤。
所述坚果包括碧根果、开心果、巴西果。
本发明所述从坚果中提取二十烷酸-5-羟色胺的方法，以非极性溶剂从坚果中提取食物源的二十烷酸-5-羟色胺，扩宽了二十烷酸-5-羟色胺的提取途径，同时以乙酸乙酯为提取溶剂，一次提取效率可达90％以上。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，
图1为实施例1中提取EHT的HPLC谱图。
具体实施方式
实施例1
本实施例所述提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法包括如下步骤：
(1)将巴西果去皮、粉碎，过40目筛，取粉碎后的巴西果1g，并加入40mL乙酸乙酯混匀，将混匀料液于60℃下进行超声提取，控制所述超声频率为30Hz，功率为200mW/cm2，期间不断混匀所述料液；
(2)将超声后的料液进行离心处理并固液分离，将超声处理后的料液于室温下控制2000-2500rmp低速下离心5min，再将所得上清液在12000-15000rmp高速下进行离心处理5min，取上清液即为含二十烷酸-5-羟色胺的提取液。
利用常规HPLC法检测上清液中的二十烷酸-5-羟色胺，其检测谱图见附图1所示，计算二十烷酸-5-羟色胺的含量为71.6ug/mL，计算提取率为90.2％。
实施例2
本实施例所述提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法包括如下步骤：
(1)将开心果去皮、粉碎，过40目筛，取粉碎后的开心果3g，并加入30mL乙酸乙酯混匀，将混匀料液于50℃下进行超声提取，控制所述超声频率为40Hz，功率为150mW/cm2，期间不断混匀所述料液；
(2)将超声后的料液进行离心处理并固液分离，将超声处理后的料液于室温下控制2000-2500rmp低速下离心5min，再将所得上清液在12000-15000rmp高速下进行离心处理5min，取上清液即为含二十烷酸-5-羟色胺的提取液。
利用常规HPLC法检测并计算上清液中的二十烷酸-5-羟色胺的含量为12.5ug/mL，计算提取率为89.7％。
实施例3
本实施例所述提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法包括如下步骤：
(1)将碧根果去皮、粉碎，过40目筛，取粉碎后的碧根果5g，并加入50mL乙酸乙酯混匀，将混匀料液于70℃下进行超声提取，控制所述超声频率为35Hz，功率为180mW/cm2，期间不断混匀所述料液；
(2)将超声后的料液进行离心处理并固液分离，将超声处理后的料液于室温下控制2000-2500rmp低速下离心5min，再将所得上清液在12000-15000rmp高速下进行离心处理5min，取上清液即为含二十烷酸-5-羟色胺的提取液。
利用常规HPLC法检测并计算上清液中的二十烷酸-5-羟色胺的含量为1.9ug/mL，计算提取率为91.0％。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (8)

1.一种从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取坚果与非极性溶剂混匀，并进行超声提取；
(2)将超声后的料液进行固液分离，取上清液即为含所需二十烷酸-5-羟色胺的提取液。
2.根据权利要求1所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述超声步骤温度为50-70℃、超声频率为30-40Hz，功率为150-200mW/cm2。
3.根据权利要求1或2所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述非极性溶剂包括乙酸乙酯。
4.根据权利要求1-3任一项所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比为1-5：30-50，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比关系为g/mL的关系。
5.根据权利要求4所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述坚果与所述非极性溶剂的料液比为3：40。
6.根据权利要求1-5任一项所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述固液分离步骤为离心过滤，具体包括先将所述料液于2000-2500rmp低速下离心，再将所得上清液在12000-15000rmp高速下进行离心处理的步骤。
7.根据权利要求1-6所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，还包括将所述坚果去皮并粉碎的步骤。
8.根据权利要求1-7所述从坚果中提取食物源二十烷酸-5-羟色胺的方法，其特征在于，所述坚果包括碧根果、开心果、巴西果。
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