CN106551961A

CN106551961A - 一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺

Info

Publication number: CN106551961A
Application number: CN201510619001.9A
Authority: CN
Inventors: 魏吉城; 孔伶俐; 史德胜; 伊惠贤; 魏熙然; 李梓楠
Original assignee: Tianjin Danxi Guoyao Institute
Current assignee: Tianjin Danxi Guoyao Institute
Priority date: 2015-09-25
Filing date: 2015-09-25
Publication date: 2017-04-05

Abstract

本发明涉及一种超临界CO₂法萃取金花葵总黄酮的工艺。该工艺方法包括以下步骤：将干燥的金花葵原料粉碎成粗粉，置于超临界萃取机的萃取釜中，加入70％～95％的乙醇作为夹带剂，夹带剂量为2～5ml/g，调节萃取参数：控制萃取釜压力、温度及CO₂流量，二级分离，控制分离釜压力及温度，萃取2～4次，得金花葵总黄酮提取物，减压浓缩，将稠膏置于真空干燥箱中干燥，粉碎，即得金花葵总黄酮提取物。采用以上技术参数制得的金花葵总黄酮提取物总黄酮含量高达70％以上，金丝桃苷含量大于7％。该工艺方法操作简单、可控性强，适合工业化生产。

Description

一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺

技术领域

生物医药。

背景技术

金花葵又名菜芙蓉、也叫野芙蓉，为一年生草本锦葵科秋葵属植物，金花葵学名为Aurea HELIANTHUS。2003年8月，中国农科院在河北邢台地区发现濒临绝种的金花葵。

近代研究金花葵最具食用、药用、营养以及美容瘦身等保健功能，是具有较高的经济价值的植物。金花葵是金花葵种群中的1种，与同科属植物黄蜀葵、秋葵属相同的金花葵种。金花葵极易栽培，从北到南我国大部分地区都能种，收获颇丰。金花葵味甘、无毒，具有通淋、清热之功效，现代药理学研究表明：金花葵具有抗炎、利尿、减少血小板聚集的作用。

金花葵的花、果、叶、茎、根、种子全身是宝，被誉为“植物大熊猫”，金花葵植物中含有多种生物活性物质，主要成分是植物黄酮，有研究表明6g金花葵花含总黄酮384mg，相当于96g银杏叶的含量，金花葵还含有大量的VE，是橙汁的3000倍，还含有丰富的不饱和脂肪酸、油酸、亚油酸、亚麻酸，这些是心脑血管的保护神，同时含有丰富的雄激素，有“植物伟哥”之美称，是补肾的良药，还含有高聚糖胶、膳食纤维、微量元素硒、锌、钙及多种不皂化物等。这些营养物质是人体必需但又不能自行合成的必须靠饮食摄入的，其中以植物黄酮类活性物质最为重要。

金花葵黄酮对人体急性心肌缺血、缺氧具有保护作用，可降低急性心肌梗塞的梗塞面积，对心肌损伤有一定的保护作用；金花葵黄酮能显著抑制血清中胆固醇、甘油三脂及低密度脂蛋白的升高，降低血清游离脂肪酸水平，进一步降低血脂水平；金花葵黄酮有显著的镇痛作用，其作用效价强度约为吗啡的1/20，且无依赖性；金花葵黄酮还有改善微循环的作用，对原发性高血压有治疗作用。

生物黄酮是一大类天然产物，广泛存在于自然界，是许多中药的有效成分，在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇。黄酮的提取方法有热水提取法、稀乙醇提取法、丙酮提取法、微波提取法、超滤法等，这些方法的缺点是费时、费工且收率较低。应用超临界二氧化碳萃取技术提取黄酮类化合物，具有速度快、收率高等优点，特别是选择合适的夹带剂，增加了提取的选择性，由于操作参数易于控制，溶剂可循环使用，节能减排，对环境友好的方法，其具有广泛的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种超临界CO₂法萃取金花葵总黄酮的工艺，利用该方法制得的金花葵总黄酮提取物总黄酮含量高达70％以上。

这个方法具体为：1）将干燥的金花葵原料粉碎成粗粉；2）将金花葵粗粉置于超临界萃取机的萃取釜中；3）加入70％～95％的乙醇作为夹带剂，夹带剂量为2～5ml/g；4）调节萃取参数：萃取压力控制在20～40MPa、温度40～60℃，CO₂流量控制在15～30L/h，萃取时间为1.5～3h，萃取次数为2～4次，分离釜Ⅰ的温度为30～40℃、压力为5～10MPa，分离釜Ⅱ的温度为30～40℃、压力与储罐平衡，得深黄色至棕黄色金花葵总黄酮提取物，浓缩，得稠膏，在70℃以下、0.09MPa的条件下真空干燥，粉碎，即得金花葵总黄酮提取物。

用比色法测定含总黄酮在70％以上。

用HPLC测定单体黄酮金丝桃苷含量为7％以上，金丝桃苷苷元为槲皮素，具有很好得镇痛作用，强于阿司匹林，但无依赖性，还具有较强得抗炎、解痉、利尿、止咳、降压、降低胆固醇、抗凝血、蛋白固化及局部和中枢镇痛作用，对心脑血管有很好得保护作用。此外总黄酮提取物中还含有多种黄酮类及异黄酮类成分。

本发明的优点在于采用超临界CO₂萃取技术，无污染、无毒、操作条件温和、成本低、提取的黄酮收率高。

实施实例

采集金花葵花（尚未脱落前），置真空干燥箱中，于70℃、0.09MPa条件干燥24小时，粉碎，粒度控制在10～60目，取粗粉5Kg，置于超临界萃取机的萃取釜中，加入95％的乙醇作为夹带剂，夹带剂量为4ml/g；调节萃取参数：萃取压力控制在25MPa、温度40℃，CO₂流量控制在25L/h，萃取时间2h，萃取3次，分离釜Ⅰ的温度40℃、压力8MPa，分离釜Ⅱ的温度40℃、压力与储罐平衡，得棕黄色金花葵总黄酮提取物，减压（70℃以下、0.09MPa）浓缩，得稠膏，在70℃以下、0.09MPa的条件下真空干燥，称重，得提取物242g，粉碎，得棕黄色粉末，味苦。

HPLC法测定金丝桃苷含量：

对照品溶液的制备：取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加80％甲醇制成每1ml含45μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品粉末20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加80％甲醇40ml，超声处理10分钟，放冷，加80％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

色谱条件：以迪马C18反相柱（4.6×250mm，5μ）为色谱柱；以乙腈-0.1％磷酸溶液（16:84）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于5000。

结果：本品总黄酮提取物含金丝桃苷8.69％。

总黄酮含量的测定：

对照品溶液的制备：取芦丁对照品18mg，精密称定，置100ml量瓶中，加60％乙醇适量溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含芦丁0.18mg）。

标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml量瓶中，分别加1.5％的AlCl₃溶液8ml，再加入醋酸-醋酸钠缓冲液（PH值5.5）4ml，并用60％乙醇溶液定容，静置0.5h，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅴ A），在398nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法：取本品粉末20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇40ml，超声处理10分钟，放冷，加60％乙醇至刻度，摇匀，精密量取2.0ml，置25ml量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加1.5％的AlCl₃溶液8ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的重量（mg），计算，即得。

结果：本品总黄酮提取物含总黄酮以芦丁计为78.45％。

Claims

1.一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺，其特征在于：采用这种工艺方法萃取分离得到的金花葵总黄酮提取物含量达70％以上，这种工艺方法具体如下：

将干燥、粉碎成粗粉的金花葵原料，置于超临界萃取机的萃取釜中，加入70％～95％的乙醇作为夹带剂，加入夹带剂量为2～5ml/g，调节萃取参数：萃取压力控制在20～40MPa、温度控制在40～60℃，CO₂流量控制在15～30L/h，萃取时间为1.5～3h，萃取次数为2～4次，分离釜Ⅰ的温度为30～40℃、压力为5～10MPa，分离釜Ⅱ的温度为30～40℃、压力与储罐平衡，得深黄色至棕黄色金花葵总黄酮提取物，在70℃以下、0.09MPa条件下减压浓缩，得稠膏，在70℃以下、0.09MPa的条件下真空干燥至干，粉碎，得深黄色至棕黄色总黄酮提取物。

2.根据权利要求1所述的一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺，其特征在于：金花葵原料包括其种子、花、茎杆、叶、根和果实的一种或两种或多种混合物，粉碎的粒度为10～60目，其含水量低于5％。

3.根据权利要求1所述的一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺，其特征在于：所制得的总黄酮提取物采用HPLC法测定金丝桃苷的含量不低于7％。

4.根据权利要求1所述的一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺，其特征在于：所制得的金花葵总黄酮提取物采用比色法测定总黄酮含量不低于70％。

5.根据权利要求1所述的一种采用超临界二氧化碳法萃取金花葵总黄酮的工艺，其特征在于：所制得的金花葵总黄酮提取物为深黄色到棕黄色粉末，味微苦，含水量低于5％。