CN106546692A - 一种成像法检测有机磷类农药残留的方法及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明为解决现有技术中有机磷类农药检测中存在的问题,提出了一种新的通过测定有机磷类农药成像的光强度并建立标准曲线从而快速检测和计算有机磷类农药含量的方法。本发明的方法可以准确、经济的测定蔬菜中有机磷类农药的含量,尤其是适用于测定乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷的含量,因此本发明同时也提供了一种准确、经济、高效、快捷、便携式测定蔬菜中有机磷类农药残留的用途。
Description
技术领域
本发明涉及农药残留分析技术领域,特别涉及有机磷类农药残留的快速测定方法。
背景技术
有机磷类农药是目前使用最广,用量最大的一类杀虫剂,具有杀虫范围广、杀虫方式多、害虫抗性产生慢、对作物安全等优点。有机磷类农药的使用使有害生物得到了有效的控制,促进了农业生产的发展。但是大量使用后产生的环境危害也日益严重。研究发现,在特定的环境条件下,有机磷类农药能够存在较长时间。因此,研究有机磷类农药在蔬菜中的快速检测方法非常必要。
现行有机磷类农药残留主要定量测定方法主要是气相色谱、气相色谱-质谱联用等技术。此类方法准确、灵敏,重复性好,但样品前处理麻烦,并且需昂贵的仪器设备,不易于在蔬菜生产与销售的基层单位应用。
发明内容
本发明为解决现有技术中有机磷类农药检测中存在的问题,提出了一种新的通过测定有机磷类农药成像的光强度并建立标准曲线从而快速检测和计算有机磷类农药含量的方法。本发明的方法可以准确、经济的测定蔬菜中有机磷类农药的含量,尤其是适用于测定乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷的含量,因此本发明同时也提供了一种准确、经济、高效、快捷、便携式测定蔬菜中有机磷类农药残留的用途。
一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法,包括以下步骤:
步骤A,建立标准曲线方程和标准曲线,
步骤A1,选取有机磷类农药标准品,然后用丙酮溶解摇匀并定容制取有机磷类农药标准溶液,然后用吸量管精确吸取不同量的有机磷类农药标准溶液制取若干梯度浓度的有机磷类农药标准溶液;
步骤A2,用微量进样器分别抽取步骤A1制备的各梯度浓度的有机磷标准溶液20 μL在硅胶薄层色谱G板上按照浓度从小到大顺序点样,在展开剂中展开并吹干,使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤A3,使用ImageJ2x软件测定步骤A2中拍摄的黑白照片反片处理后测定显色斑点的总积分强度,然后以标准溶液浓度为纵坐标,总积分强度为横坐标,计算标准曲线方程,从而建立标准曲线;
步骤B,待测品的有机磷类农药的定性检测,
步骤B1,待测品的预处理,
将待测蔬菜样品匀质化处理,准确称取5.0 g匀质化处理后的待测蔬菜样品于离心管中,然后加入5 mL丙酮再加入3g硫酸铵,震荡、涡旋混匀10 min后,再按照5000 r·min-1离心处理10 min,然后萃取上层有机层溶液,得待测品溶液;
步骤B2,待测品的薄层色谱分离成像,
将步骤B1中制备的待测品溶液和步骤A1中制取的有机磷类农药标准溶液平行点样于同一块硅胶薄层色谱G板,在展开剂中展开并吹干,使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤B3,待测品的有机磷类农药定性,
步骤B2中拍摄的黑白照片中有机磷类农药标准溶液为显色斑点,待测品溶液在其展开的相应位置如果出现显色斑点,则说明检测出待测品中含有有机磷类农药;
步骤C,待测品的有机磷类农药定量检测
若步骤B2拍摄的黑白照片中待测品溶液在其展开的相应位置出现显色斑点,则使用ImageJ2x软件测定其显色斑点的总积分强度,然后将测定的待测品显色斑点的总积分强度代入步骤A3建立的标准曲线方程计算出待测品中的有机磷类农药含量;
其中,该方法中使用的展开剂为丙酮、氯仿和油醚按照体积比2:1:1比例配制。
优选,步骤A1中用吸量管精确吸取不同量的有机磷类农药标准溶液制取不少于4种浓度的有机磷类农药标准溶液。
优选,该方法中使用的相机为索尼 DSC-W830 数码照相机或尼康 COOLPIX A10相机。
优选,该方法中的有机磷类农药为乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷的任意一种。
一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法可以用于蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测和有机磷类农药残留含量计算的用途,尤其适用于蔬菜中乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷等含硫有机磷类农药的检测和含量计算的用途。
优选,该方法的用途所述蔬菜为白菜或芹菜。
该发明的色谱成像可通过价廉物美的微型电脑或手机即可实现,因此该方法操作方便、快速,适合在蔬菜生产与销售过程中进行现场检测。
同时该发明在操作时由于受试验条件等因素的影响,因此标准曲线方程也并不完全相同,本发明通过提过一种检测方法来快速的对有机磷类药物进行检测。
该发明的方法和用途具有突出的实质性特点和显著的进步。
1.检测费用低。本方法需要的检测设备简单,没有大型设备,可以便携,相较于高效液相色谱,液-质联用的技术需要的设备较为昂贵,很难在基层配备,而且需要专业人员才能操作,不易检测,本方法很好的解决了这个问题。
2.样品前处理简单,不需要提取液净化等复杂步骤,节省提取溶剂,降低了对环境的危害。
3.检测限低。测定检出限0.2 μg/g-0.5 μg/g之间。
4.回收率高,精密度良好,达到检测标准。薄层色谱成像法在测定白菜、芹菜中有机磷类农药残留回收率范围为53.7%-87.0%之间。此方法的准确度可以达到有机磷类农药残留的检测要求。
5.本发明与现有蔬菜中的药物残留检测技术相比,具有样品前处理步骤快速简单,测定设备体积小,便于携带,检测灵敏度高的优点。
附图说明
图1是本发明中实施例1的薄层色谱成像法测定有机磷类农药标准曲线及检出限薄层色谱图。
图2是本发明中实施例2的薄层色谱成像法测定有机磷类农药在白菜中的回收率薄层色谱图。
图3是本发明中实施例3的薄层色谱成像法测定有机磷类农药在芹菜中的回收率薄层色谱图。
具体实施方式
以下实施例中使用的黑白照片均为索尼 DSC-W830 数码照相机拍摄或尼康COOLPIX A10拍摄,以上两种相机携带方便,适用于本发明方法的成像。
实施例1 一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法的标准曲线方程的建立
步骤A,建立标准曲线方程和标准曲线,
步骤A1,选取有机磷类农药标准品,然后用丙酮溶解摇匀并定容制取有机磷类农药标准溶液,然后用吸量管精确吸取不同量的有机磷类农药标准溶液制取5份梯度浓度的有机磷类农药标准溶液;
步骤A2,用微量进样器分别抽取步骤A1制备的各梯度浓度的机磷类农药标准溶液20 μL在硅胶薄层色谱G板上按照浓度从小到大顺序点样,在展开剂中展开并吹干,其中,使用的展开剂为丙酮、氯仿和油醚按照体积比2:1:1比例配制,然后使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤A3,使用ImageJ2x软件测定步骤A2中拍摄的黑白照片反片处理后测定显色斑点的总积分强度,然后以标准溶液浓度为纵坐标,总积分强度为横坐标,计算标准曲线方程,从而建立标准曲线。
通过上述同样的方法,分别对乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷进行操作,其中,乙酰甲胺磷按照浓度分别为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μg/g点样,乐果、甲拌磷按照浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 μg/g点样,并建立三种有机磷类农药的标准曲线方程,如表1所示。
表1乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷的标准曲线方程
拍摄的照片如图1所示,图1中点1、2、3、4、5乙酰甲胺磷的浓度分别为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μg/g,乐果、甲拌磷的浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 μg/g。a、b、c分别为乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷,如图1所示,根据检出限定义,即可以与背景相区别的最小浓度估计值为检出限,从而得出乙酰甲胺磷的检出限为0.5μg/g,乐果和甲拌磷的检出限为0.2μg/g。
实施例2 本发明对白菜样品加标回收率的检测试验
待测品的制备,
取无污染的白菜匀质化处理,分别准确称取2份10.0 g白菜样品于50 mL聚四氟乙烯管中,然后分别加入实施例1中制备的不同浓度的机磷类农药标准溶液,震荡、混匀后静置10min,从而制取2份不同浓度的有机磷混标溶液,即得到2份含有机磷的白菜待测品;
步骤B,白菜待测品的有机磷类农药的定性检测,
步骤B1,白菜待测品的预处理,
准确称取5.0 g匀质化处理后的白菜待测品于离心管中,然后加入5 mL丙酮再加入3g硫酸铵,震荡、涡旋混匀10 min后,再按照5000 r·min-1离心处理10 min,然后萃取上层有机层溶液,得白菜待测品溶液;
步骤B2,白菜待测品的薄层色谱分离成像,
将步骤B1中制备的白菜待测品溶液和实施例1中步骤A1中制取的有机磷类农药标准溶液平行点样2次分别于2块硅胶薄层色谱G板,在展开剂中展开并吹干,使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将2块硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤B3,白菜待测品的有机磷类农药定性,
步骤B2中拍摄的黑白照片中有机磷类农药标准溶液为显色斑点,白菜待测品溶液在其展开的相应位置如果出现显色斑点,则说明检测出白菜待测品中含有有机磷类农药;
步骤C,白菜待测品的有机磷类农药定量检测
若步骤B2拍摄的黑白照片中白菜待测品溶液在其展开的相应位置出现显色斑点,则使用ImageJ2x软件测定其显色斑点的总积分强度,然后将测定的白菜待测品显色斑点的总积分强度代入实施例1中步骤A3建立的标准曲线方程(见表1)计算出白菜待测品中的有机磷类农药含量,并计算回收率。
通过上述同样的方法,分别对乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷进行操作,其中,含乙酰甲胺磷的2份白菜待测品的浓度分别为3.0、4.0μg/g,含甲拌磷的2份白菜待测品的浓度分别为1.5、2.0μg/g,含乐果的2份白菜待测品的浓度分别为1.5、2.0μg/g。
拍摄的照片如图2所示。a、b、c分别为乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷。结果显示,如图2所示,待测品白菜中含上述浓度的乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷均为显色斑点,可以被检测出,其含量也均被检测出,根据计算结果表明本方法应用于白菜中的回收率在53.7-87.0%之间,结果如表2所示。
表2三种有机磷类农药在白菜中含量的检测结果
实施例3 本发明对芹菜样品加标回收率的检测试验
待测品的制备,
取无污染的芹菜匀质化处理,分别准确称取2份10.0 g芹菜样品于50 mL聚四氟乙烯管中,然后分别加入实施例1中制备的不同浓度的机磷类农药标准溶液,震荡、混匀后静置10min,从而制取2份不同浓度的有机磷混标溶液,即得到2份含有机磷的芹菜待测品。
该实施例中其他步骤按照实施例2的操作步骤进行,并采用同样的方法,分别对乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷进行操作,其中,含乙酰甲胺磷的2份芹菜待测品的浓度分别为3.0、4.0μg/g,含甲拌磷的2份芹菜待测品的浓度分别为1.5、2.0μg/g,含乐果的2份芹菜待测品的浓度分别为1.5、2.0μg/g。
拍摄的照片如图3所示。a、b、c分别为乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷。结果显示,如图3所示,待测品芹菜中含上述浓度的乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷均为显色斑点,可以被检测出,其含量也均被检测出,根据计算结果表明本方法应用于芹菜中的回收率在56.2-81.7%之间,结果如表3所示。
表3 三种有机磷类农药在芹菜中含量的检测结果。
Claims (6)
1.一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法,其特征在于包括以下步骤:
步骤A,建立标准曲线方程和标准曲线,
步骤A1,选取有机磷类农药标准品,然后用丙酮溶解摇匀并定容制取有机磷类农药标准溶液,然后用吸量管精确吸取不同量的有机磷类农药标准溶液制取若干梯度浓度的有机磷类农药标准溶液;
步骤A2,用微量进样器分别抽取步骤A1制备的各梯度浓度的有机磷标准溶液20 μL在硅胶薄层色谱G板上按照浓度从小到大顺序点样,在展开剂中展开并吹干,使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤A3,使用ImageJ2x软件测定步骤A2中拍摄的黑白照片反片处理后测定显色斑点的总积分强度,然后以标准溶液浓度为纵坐标,总积分强度为横坐标,计算标准曲线方程,从而建立标准曲线;
步骤B,待测品的有机磷类农药的定性检测,
步骤B1,待测品的预处理,
将待测蔬菜样品匀质化处理,准确称取5.0 g匀质化处理后的待测蔬菜样品于离心管中,然后加入5 mL丙酮再加入3g硫酸铵,震荡、涡旋混匀10 min后,再按照5000 r·min-1离心处理10 min,然后萃取上层有机层溶液,得待测品溶液;
步骤B2,待测品的薄层色谱分离成像,
将步骤B1中制备的待测品溶液和步骤A1中制取的有机磷类农药标准溶液平行点样于同一块硅胶薄层色谱G板,在展开剂中展开并吹干,使用0.01%氯化钯溶液作为显色剂,均匀喷涂在薄层色谱G板上,然后150℃下烘干20分钟后将硅胶薄层色谱G板置于LED灯箱下检视,并使用相机拍摄黑白照片;
步骤B3,待测品的有机磷类农药定性,
步骤B2中拍摄的黑白照片中有机磷类农药标准溶液为显色斑点,待测品溶液在其展开的相应位置如果出现显色斑点,则说明检测出待测品中含有有机磷类农药;
步骤C,待测品的有机磷类农药定量检测,
若步骤B2拍摄的黑白照片中待测品溶液在其展开的相应位置出现显色斑点,则使用ImageJ2x软件测定其显色斑点的总积分强度,然后将测定的待测品显色斑点的总积分强度代入步骤A3建立的标准曲线方程计算出待测品中的有机磷类农药含量;
其中,该方法中使用的展开剂为丙酮、氯仿和油醚按照体积比2:1:1比例配制。
2.根据权利要求1所述的一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法,其特征在于,步骤A1中用吸量管精确吸取不同量的有机磷类农药标准溶液制取不少于4种浓度的有机磷类农药标准溶液。
3.根据权利要求2所述的一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法,其特征在于,该方法中使用的相机为索尼 DSC-W830 数码照相机或尼康 COOLPIX A10相机。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法,其特征在于,该方法中的有机磷类农药为乙酰甲胺磷、乐果、甲拌磷的任意一种。
5.根据权利要求4所述的一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法的用途,其特征在于该方法可以用于蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测和有机磷类农药残留含量计算的用途。
6.根据权利要求5所述的一种便携式成像法检测有机磷类农药残留的方法的用途,其特征在于该方法的用途所述蔬菜为白菜或芹菜。
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PB01 | Publication | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170329 |
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