CN106543158A

CN106543158A - 一种从芒果叶中提取芒果苷的方法

Info

Publication number: CN106543158A
Application number: CN201610965106.4A
Authority: CN
Inventors: 王密治
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2016-11-05
Filing date: 2016-11-05
Publication date: 2017-03-29

Abstract

本申请涉及一种从芒果叶中提取芒果苷的方法，采用醇溶液回流提取，并在提取过程中加入抗氧化剂，并采用凝胶柱层析与大孔吸附树脂层析联用，提高了芒果苷的提取率和纯度，有利于进行大量制备。

Description

一种从芒果叶中提取芒果苷的方法

技术领域

本发明属于从植物中提取天然产物领域，具体涉及从芒果叶中提取芒果苷的方法。

背景技术

芒果苷(mangiferin)，分子式C₁₉H₁₈O₁₁，分子量：422.34，属于双苯吡酮类化合物。芒果苷存在于漆树科植物芒果Mangifera indica L的叶子、果实、树皮中。近年研究表明芒果苷具有较强的止咳、化痰、抗炎作用，此外芒果苷还有抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤作用（广西中医学院学报，2003, 6 (2) :44）。芒果苷的结构式如下：

由于芒果苷具有良好的医药用途，人们从天然植物中进行了大量提取尝试。专利CN200610079234.5报道了用90%乙醇提取、大孔树脂脱色的方法来从芒果叶中提取芒果苷，纯度达到90%，还不能直接使用。专利CN200910194672.X公开了一种从芒果叶中经碱水提取、凝胶柱层析、然后重结晶得到纯度达到98%的芒果苷，但芒果苷在碱性条件下易被氧化，提取率偏低。此外，专利CN201210053385.9公开了一种通过大孔树脂与高速逆流色谱联用从芒果果皮中提取芒果苷的方法，但操作较复杂，且不利于大量制备。

为了克服现有方法的缺陷，发明人在现有方法基础上，采用醇提取、并在提取过程中加入抗氧化剂，采用凝胶柱层析联用大孔吸附树脂分离纯化，得到芒果苷，该方法收率和纯度高，适合工业化生产。

发明内容

本发明目的在于提供一种从芒果叶中提取芒果苷的方法，本方法提取产物纯度高、收率高。

为了实现本发明目的，发明人采用如下方法：

一种从芒果叶中提取芒果苷的方法：

（1）将芒果叶干燥粉碎后，加入60-95%乙醇和抗氧化剂，回流提取1-3次，合并提取液，减压浓缩得粗提物；

（2）将步骤（1）的粗提物溶于70-80%乙醇中，静置，取上清液过凝胶柱，先用去离子水洗脱，再用70-90%乙醇水溶液洗脱，TLC监测，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩得浓缩液；

(3)将步骤（2）所得浓缩液，用大孔吸附树脂吸附纯化，用乙醇水溶液洗脱，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩，静置析晶，过滤干燥，得芒果苷；

作为本发明优选的方案，所述抗氧化剂包括：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠。

进一步，所述大孔吸附树脂为AB-8、HPD100、D101、D301、D296、H-20。

进一步，所述凝胶柱层析优选Sephadex LH-20柱。

进一步地，步骤（3）中乙醇水溶液洗脱采用梯度洗脱，按50%、60%、70%、80%、90%乙醇逐步洗脱。

进一步地，每次回流提取时间为1-3h。

本发明通过在提取过程中加入抗氧化剂，有效抑制了芒果苷在提取过程中被氧化，从而提高了提取率。

本发明与现有技术相比，有益效果在于，在提取过程中加入抗氧化剂，有效提高提取率（80%以上），采用凝胶柱层析与大孔吸附树脂层析联用，提高了芒果苷的纯度（99%以上），有利于大量制备。

下面将结合具体的实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取500g干燥的芒果叶，粉碎，加入2500ml 70%乙醇，并加入10g亚硫酸钠，回流提取2h，过滤得提取液，减压浓缩得粗提物，将其溶于70%乙醇中，静置1h，取上清液过Sephadex LH-20凝胶柱，先用3倍柱体积去离子水洗脱后，用5倍柱体积80%乙醇洗脱，TLC监测，收集含有芒果苷的流分，合并流分，减压浓缩得浓缩液；浓缩液过大孔吸附树脂AB-8，采用50%、60%、70%、80%、90%乙醇梯度洗脱，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩，静置析晶，过滤干燥，得浅黄色芒果苷5.70g，提取率达85%，HPLC：99.12%。

实施例2

取300g干燥的芒果叶，粉碎，加入900ml 80%乙醇，并加入5g亚硫酸氢钠，回流提取2h，过滤得提取液，重复提取一次，合并提取液，减压浓缩得粗提物，将其溶于80%乙醇中，静置2h，取上清液过Sephadex LH-20凝胶柱，先用2倍柱体积去离子水洗脱后，用5倍柱体积70%乙醇洗脱，TLC监测，收集含有芒果苷的流分，合并流分，减压浓缩得浓缩液；浓缩液过大孔吸附树脂HPD100，采用50%、60%、70%、80%、90%乙醇梯度洗脱，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩，静置析晶，过滤干燥，得浅黄色芒果苷3.25g，提取率达82%，HPLC：99.35%。

实施例3

取500g干燥的芒果叶，粉碎，加入1000ml 90%乙醇，并加入10g亚硫酸钠，回流提取3h，过滤得提取液，重复提取一次，合并提取液，减压浓缩得粗提物，将其溶于80%乙醇中，静置1h，取上清液过Sephadex LH-20凝胶柱，先用3倍柱体积去离子水洗脱后，用4倍柱体积90%乙醇洗脱，TLC监测，收集含有芒果苷的流分，合并流分，减压浓缩得浓缩液；浓缩液过大孔吸附树脂AB-8，采用50%、60%、70%、80%、90%乙醇梯度洗脱，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩，静置析晶，过滤干燥，得浅黄色芒果苷5.45g，提取率81%，HPLC：99.23%。

实施例4

按照实施例1的方法对不同大孔吸附树脂进行筛选，结果如下：

从上表可以看出，大孔吸附树脂的选择对提取率有较大影响，对纯度有一定影响，优选AB-8和HPD100柱，提取率和纯度均较高。

实施例5

按照实施例1的方法进行提取，但不加入抗氧化剂亚硫酸钠，最终提取率为74%，纯度HPLC：98.56%。可见，本发明通过加入抗氧化剂能够有效抑制提取过程中芒果苷被氧化，从而提高提取率和产品纯度。

尽管本发明已进行了一定程度的描述，明显地，在不脱离本发明的精神和范围的条件下，可进行各个条件的适当变化，各类等价形式变换同样落入本申请权利要求书所限定的范围内。

Claims

1.一种从芒果叶中提取芒果苷的方法，包括如下步骤：

(3) 将步骤（2）所得浓缩液，用大孔吸附树脂吸附纯化，用乙醇水溶液洗脱，收集含有芒果苷的流分，减压浓缩，静置析晶，过滤干燥，得芒果苷。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述抗氧化剂选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠。

3.根据权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自AB-8、HPD100、D101、D301、D296、H-20，优选AB-8、HPD100。

4. 根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于所述凝胶柱为Sephadex LH-20柱。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于步骤（3）中乙醇水溶液洗脱采用梯度洗脱，按50%、60%、70%、80%、90%乙醇逐步洗脱。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于步骤（1）中，每次回流提取时间为1-3h。