CN106489798A - 一种中华沙鳅人工繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中华沙鳅人工繁殖方法,包括如下步骤:1)野生亲鱼收集及驯养2)亲鱼培育;3)人工催产;4)人工授精;5)人工孵化。该方法简单,可操作性强,实践应用性好,可以实现中华沙鳅苗种的规模化和工厂化生产,促进中华沙鳅养殖业的发展,有效保护中华沙鳅野生资源。试验表明,中华沙鳅在循环水系统中培育的成活率为80‑85%、催产率为70‑75%、受精率为40‑50%、孵化率为70‑80%。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域,具体涉及一种中华沙鳅的人工繁殖方法。
背景技术
中华沙鳅(学名:Botia superciliaris)南方俗称“穿金妹”,为鳅科沙鳅属的鱼类,是中国的特有物种。小型鱼类,体长9~18cm,体态纤细,体色艳丽,体表有美丽的斑纹;吻长而尖,须3对,颐下具1对钮状突起;眼后有倒刺,末端超过眼后缘;无鳞,腹鳍末端不达肛门,肛门靠近臀鳍起点,尾柄较低。中华沙鳅分布于温州永嘉楠溪江、澜沧江、四川东部盆地和盆周低山区江段,湖北宜昌、甘肃文县亦有分布,观赏价值高、食用价值高,肉质细嫩、味道鲜美,营养价值和药用价值兼备;市场价格达到400~500元/千克,是长江中上游特产优质的名贵珍稀鳅科鱼类,也是中国的特有物种。
目前中华沙鳅在四川省内有少量人工养殖,但规模不大,人工繁殖技术也很不成熟,尤其是循环水系统中培育成熟并人工催产繁殖成功的案例未见报道,主要原因在于雄鱼精量很少,往往在人工授精前会先对雄鱼进行挤精检查,等到授精时雄鱼往往只能挤出1-2滴精液或更本就挤不出精液,造成受精率很低或完全不受精,致使人工繁殖失败,这是造成不能规模化生产的重要原因之一。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中华沙鳅人工繁殖方法,该方法简单,操作方便,可以实现野生中华沙鳅的驯养和规模化的人工繁殖,促进中华沙鳅养殖业的发展,从而达到有效保护中华沙鳅野生资源的目的。
为了实现上述的目的,本发明采用以下技术措施:
一种中华沙鳅人工繁殖方法,其步骤是:
1)野生亲鱼的收集:
将收集的野生中华沙鳅连同氧气袋一起放入养殖缸中先进行水温过渡30分钟,然后筛选体质强壮、受伤较轻的亲鱼或后备亲鱼,先用青霉素和食盐混合水溶液浸泡20-30分钟,浸泡浓度为每千克水含青霉素20万IU及食盐20-30克,再转入亲鱼培育缸中用20ppm的恩诺沙星或盐酸土霉素浸泡24小时后换水,用0.5ppm的亚甲基蓝溶液浸泡24小时,防止水霉滋生;
2)野生亲鱼的驯养:
2-3天后,开始投喂活鲜的水蚯蚓,日投喂量从鱼体体重的0.3%逐渐增加到3%;此时开始进行转食,最初的饲料比例为:水蚯蚓占日投喂量的80%,人工配合饲料占日投喂量的20%,人工饲料为蛋白含量在40%以上的甲鱼料或鳗鱼料;一周后逐渐减少水蚯蚓投喂量,增加人工饲料的投喂量,最后逐步变成人工配合饲料占日投喂量80%、水蚯蚓活饵占日投喂量20%的饲料比例,日投喂总量为鱼体体重的2-3%;
3)亲鱼培育:
A、选择体表无伤、体重40-100g、经过驯化的野生中华沙鳅作为后备亲鱼;
B、将后备亲鱼投放到循环水养殖系统中进行培育,养殖密度≤3kg/m3,控制亲鱼池的进水量为0.2-0.9L/s,培育用水的pH为7.2-7.9、溶解氧为5-10mg/L、水温为13-26℃,每日投喂量为亲鱼体重的1-3%,每天投喂二次,蛋白质含量大于40%的甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的80%,水蚯蚓活饵占日投喂量的20%;
C、选择无病、无伤、无畸形的中华沙鳅作为繁殖亲鱼,雌、雄鱼体重大于50g/尾,将繁殖亲鱼投放到亲鱼培育缸中进行强化培育,初始养殖密度≤2kg/m3,亲鱼培育池的进水量为0.5-0.9L/s,强化培育用水的pH为7.5-7.9、溶解氧为5-10mg/L、水温为17-23℃,每日投喂量为亲鱼体重的2-4%,每天投喂三次,水蚯蚓占日投喂量的50%,蛋白质含量大于40%的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的50%;
4)人工催产:
A、选择性成熟的繁殖亲鱼,雌、雄数量比例为1:2-3,雌、雄亲鱼放入不同的网箱中;
B、在性成熟的亲鱼胸鳍基部注射催产剂,每尾鱼每次注射量为0.1-0.3mL,如果雌鱼的催产剂A一次性注射,则雄鱼的催产剂为A,注射量为雌鱼的1/2;如果雌鱼的催产剂分2次注射,两次注射的间隔时间为8-10小时,第一针注射催产剂B、第二针注射催产剂C,B和C的成分部分相同,且所述的相同成分在C中的剂量为B中的2-5倍,雄鱼注射催产剂C,注射量为雌鱼第二针注射量的1/2,在雌鱼注射第二针时一次性注射;所述催产剂A、B、C为催产剂1、催产剂2、绒毛膜促性腺激素中的任意二或三种混合,所述催产剂1为鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮中任意一种,所述催产剂2为促黄体素释放激素类似物A2或A3中任意一种,雌鱼催产剂总注射剂量为鲤鱼脑垂体4-10mg/kg或马来酸地欧酮5-10mg/kg,促黄体素释放激素类似物A2或A3 6-20μg/kg,绒毛膜促性腺激素500-1200国际单位/kg;将注射了催产剂的亲鱼放入催产池中,雌雄同池,同时用流水刺激,观察亲鱼的活动情况;
5)人工授精:
当发现雄鱼追逐雌鱼,雌鱼有产卵现象时,捕捞亲鱼,先检查雌鱼排卵是否顺畅,如果顺畅,再将雌雄鱼放入200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉,此时先将雄鱼捞出,擦去亲鱼体表和肛门部位的水分,轻轻挤压腹部并用干燥的吸管吸取精液备用,按雌雄数量比为1:2-3进行配比,然后将麻醉好的雌鱼捞出擦去体表水分,将鱼卵和精液挤入盆中,用羽毛搅拌1-2分钟使精卵充分混合,再加入2-3倍体积的质量百分浓度为0.4-0.5%的生理盐水搅拌1-2分钟,并用清水漂洗2-3次,转入孵化桶中孵化,孵化桶事先采用20ppm的高锰酸钾消毒和清洗;
6)人工孵化:
受精卵在孵化桶中的孵化密度为30-40万粒/m3,进水量为0.05-0.2L/s,进水量的大小以受精卵在孵化桶内均匀翻滚为度,孵化期间保持孵化桶内水体溶氧量大于6mg/L,pH值在7.5-7.9,孵化水温为19-23℃,其他理化因子符合国家养殖用水标准;7-10天后鳔充气,即可转到鱼苗培育缸或网箱内用蛋黄或丰年虫或轮虫开口并进入鱼苗培育阶段。
作为优选,所述步骤4)中,雌鱼的催产剂一次性注射时,催产剂A为促黄体素类似物释放激素A2或A3 8-16μg/kg,马来酸地欧酮6-8mg/kg或鲤鱼脑垂体6-10mg/kg、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意两种或三种药物的混合物。
作为优选,所述步骤4)中,雌鱼的催产剂分2次注射时,第一次注射的催产剂B为促黄体素类似物释放激素A2或A3 2-4μg/kg、马来酸地欧酮或鲤鱼脑垂体1-2mg/kg的混合物,第二次注射的催产剂C为促黄体素类似物释放激素A2或A3 6-15μg/kg、鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮5-8mg/kg、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意两种或三种药物的混合物。
作为优选,人工授精后对产后中华沙鳅亲鱼进行康复培育,注射硫酸庆大霉素或青霉素1-2次,每次每公斤鱼体注射剂量为硫酸庆大霉4000-5000国际单位或青霉素1-2万国际单位;并再用0.2-0.3ppm的二氧化氯浸泡8-24小时,预防烂鳃病和腐皮病。
作为优选,对人工受精后的中华沙鳅亲鱼用0.2-0.5ppm的水霉净或2-4ppm的五倍子药粉浸泡8-12小时。
作为优选,所述步骤6)中,在受精卵在进入孵化器之前,将孵化器用浓度为10-20ppm的高锰酸钾浸泡10-30分钟。
本发明与现有技术相比,具有以下优点及有益效果:
该方法简单,可操作性强,实践应用性好,可以实现一种中华沙鳅的规模化繁殖和养殖,其驯养成活率大于80%、催产率大于70%、受精率和孵化率分别大于40%和75%。中华沙鳅雄鱼的精液量很少,就1-2滴,我们在检查雄鱼发育状况时都会挤压雄鱼腹部,看是否能挤出精液,到进行人工授精时往往都挤不出精液。所以在人工繁殖过程中选好雌鱼后,挑选雄鱼的时候将本来就少的精液用干燥吸管吸到吸管里保存,避免了浪费,保证了鱼卵的受精率,防止了因雄鱼无精液造成的人工繁殖失败。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1:
中华沙鳅人工繁殖方法,其步骤是:
1、中华沙鳅的驯养方法:
1)野生亲鱼驯化
A、2013年8-12月在四川攀枝花境内金沙江水域以网捕的方式收集野生中华沙鳅亲本500多尾,运往大唐观音岩水电站鱼类增殖站内循环水系统中进行暂养;
B、到站后先进行水温过渡,即将收集的野生中华沙鳅连同氧气袋一起放入养殖缸中,当时缸内水温22℃,装鱼的氧气袋水温15℃左右,在浸泡过渡30分钟后氧气袋内水温上升至21℃左右时,将鱼从氧气袋内倒入一方形盒内,筛选体质强壮、受伤较轻的亲鱼,放入循环水系统亲鱼培育缸内进行暂养并隔离治疗,治疗方法为先用2%质量浓度的食盐加200ppm的青霉素浸泡20-25分钟,然后换水用20ppm的恩诺沙星溶液浸泡24小时后换水,再用0.5ppm的亚甲基蓝溶液浸泡24小时,防止细菌感染和水霉滋生。
C、2-3天后,待鱼体伤口和活动恢复正常后即可开始投饵,刚开始投喂活鲜的水蚯蚓,投喂量为鱼体重的0.3%左右,投喂量逐渐增加到3%;待中华沙鳅摄食正常后开始进行转食,同时添加投喂蛋白含量在40%以上的甲鱼料或鳗鱼料,投喂方法是先将饲料加水和成面团,搓成长条形投喂,投喂饲料比例为:水蚯蚓占日投喂量的80%,人工配合饲料占日投喂量的20%;一周后逐渐减少水蚯蚓投喂量,增加人工饲料的投喂量,最后逐步变成人工配合饲料占日投喂量80%,水蚯蚓活饵占日投喂量20%,日投喂量为鱼体体重的2-3%;经过15天左右的投喂,亲鱼全部转食成功。
2)亲鱼培育
待鱼体完全康复、转食成功、摄食正常后即进入循环水系统中进行培育,循环水系统配备了2台进水泵、2台1次回水泵、2台2次回水泵、2台增氧风机、1套滚筒过滤机、1套生物过滤器、1台紫外线消毒器和20口直径3米的圆形培育缸和2套冷热机组,实行封闭式内循环水养殖模式,系统水循环量为8次/日,补水量0.5m3/日,每口缸的进水量为0.3-0.5L/s,水温稳定在21℃左右,DO大于7mg/L,pH 6.9-7.8,NH4 +小于0.2mg/L,NO2 -0.1mg/L,其他各项理化指标符合国家养殖水标准。500条鱼分2口3米直径的圆形养殖缸内培育,每口缸放养250尾,重15kg左右,养殖密度2.5kg/m3左右。每天投喂2次,投喂量为体重的1-4%。到2014年4月检查,成活425尾,成活率达85%。
2、中华沙鳅的人工繁殖方法:
1)亲鱼培育
A、选择体表无伤、体重40-100g的300尾经过驯化的野生中华沙鳅作为后备亲鱼;
B、2014年2月将挑选的中华沙鳅后备亲鱼投放到循环水养殖系统3米圆形亲鱼培育缸中进行培育,养殖密度≤3kg/m3,亲鱼池的进水流量为0.2-0.5L/s,培育用水的pH为7.2-7.9,溶解氧为5-10mg/L,水温为13-23℃,每日投喂量为亲鱼体重的1-3%,每天投喂二次,分别为上午9点、下午5点,人工配合饲料为甲鱼料或鳗鱼料(蛋白质含量大于40%,粉料揉成面团投喂)占日投喂量的80%,水蚯蚓活饵占日投喂量的20%,培育时间为1年;培育过程中除加强营养管理外,还要加强冲水、吸污排污管理,保证充足的溶氧,定期检测水温水质,定期进行药物预防疾病等日常管理。
C、到2015年1月,从后备亲鱼中,选择无病、无伤、无畸形的中华沙鳅作为繁殖亲鱼,雄鱼体重为50-150g/尾、雌鱼体重为50-120g/尾,将繁殖亲鱼投放到亲鱼培育缸中进行强化培育,养殖密度≤2kg/m3,亲鱼培育池的进水流量为0.5-0.9L/s,强化培育用水的pH为7.5-7.9,溶解氧为5-10mg/L,水温为17-22℃,每日投喂量为亲鱼体重的2-4%,每天投喂三次,水蚯蚓占日投喂量的50%,蛋白质含量大于40%的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的50%。
2)人工催产
A、2015年5月20日,开始检查繁殖亲鱼的性成熟情况,每周检查2次,检查方法为:①性成熟雌鱼:将雌鱼鱼体向上,稍露水面,两侧明显看到卵巢轮廓,肛门突起,再用手轻压腹部,柔软富有弹性;②性成熟雄鱼:腹部扁平,肛门无突起,轻压腹部两侧,有少量乳白色的浓稠精液流出;5月28日挑选性成熟的亲鱼60尾,即雌鱼20尾,雄鱼40尾,雌雄比例为1:2,将雌鱼和雄鱼暂时分别放入两个网箱中,同时将用于受精卵孵化的孵化桶用20ppm的高锰酸钾药水进行消毒处理10-20分钟,然后用水清洗干净,晾干。
B、在性成熟的雌鱼胸鳍基部注射催产剂药物,催产剂药物分1次或者2次注射,每尾鱼每次催产剂药物的注射量为0.1-0.3mL,如果催产剂药物采用1次注射,催产剂药物为混合催产剂A药液;如果催产剂药物采用2次注射,第一次注射时催产剂药物为混合催产剂B药液,第二次注射时催产剂药物为混合催产剂C药液,混合催产剂C和混合催产剂B中的部分催产剂组分是相同的(催产剂B和C的组分至少有一种相同且至少有一种不相同),对于各相同催产剂组分,其在混合催产剂C中的剂量为在混合催产剂B中的2-5倍,两次注射时间间隔为8-10小时;
对选出性成熟的雄鱼,在其胸鳍基部注射一次催产剂药物,当雌鱼采用一次注射催产剂药物A时,催产剂采用混合催产剂A药液,但注射剂量为雌鱼的一半;当雌鱼采用两次注射催产剂药物时,催产剂药物采用混合催产剂B和C药液,第一针雌鱼用混合催产剂B,雄鱼不注射,第二针雌雄鱼都注射混合催产剂C,但雄鱼注射剂量为雌鱼的一半,两针的时间间隔为8-10小时;
所述催产剂A、B、C为催产剂1、催产剂2、绒毛膜促性腺激素中任意二或三种混合,所述催产剂1为鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮中任意一种,所述催产剂2为促黄体素释放激素类似物A2或A3中任意一种,雌鱼催产剂总注射剂量为鲤鱼脑垂体4-10mg/kg或马来酸地欧酮5-10mg/kg,促黄体素释放激素类似物A2或A3 6-20μg/kg,绒毛膜促性腺激素500-1200国际单位/kg,将注射了催产剂的亲鱼放入催产池中,雌雄同池,同时不停地用流水刺激,并观察亲鱼的活动情况。
3)人工授精
当发现雄鱼追逐雌鱼,雌鱼往前急游,突然停下,身体左右摆动,并且发现有产卵现象时,立即捕捞雌鱼进行检查,轻压雌鱼腹部,看是否有鱼卵流出。如有即进行全面筛选,选出能顺利挤出卵粒的雌鱼,同时按雌雄比为1:2的比例挑选雄鱼。第一批选择了10尾雌鱼和20为雄鱼,将它们放入准备好的200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉,先将雄鱼捞出,擦去亲鱼体表和肛门部位的水分,轻轻挤压腹部慢慢挤出精液,用干燥的吸管吸取精液备用,1尾雌鱼准备2尾雄鱼的精液,然后将麻醉好的雌鱼捞出擦去体表水分,将鱼卵挤入盆中,然后将精液挤入盆中,用羽毛轻轻搅拌1-2分钟,接着加入2-3倍质量百分浓度为0.4%的鱼用生理盐水,再搅拌1-2分钟后,用清水洗受精卵2-3次,加水,再将受精卵放到事前准备好的孵化桶中进行流水孵化。人工授精的整个过程应避免阳光和灯光直射;然后进行下一组的人工授精操作,方法同样,2小时后再次进行筛选,看是否有成熟的雌鱼,用同样方法进行人工授精。到最后进行统计,共顺产雌鱼15尾,产卵量为30000粒左右,催产率达75%;人工授精后可以对产后中华沙鳅亲鱼进行康复护理,注射硫酸庆大霉素或青霉素1-2次,每次每公斤鱼体注射剂量为硫酸庆大霉素4000-5000国际单位或青霉素1-2万国际单位;再转入亲鱼护理池用0.2-0.3ppm的二氧化氯浸泡8-24小时,预防烂鳃病和腐皮病。
4)人工孵化
先将孵化器用浓度为10-15ppm的高锰酸钾浸泡消毒20-30分钟,再用清水彻底清洗干净加水,然后再将30000粒卵移入一口孵化桶内孵化,孵化桶规格为高1.2m,上口直径为80cm、锥形,孵化密度为30-35万粒/m3,孵化桶从底部进水,流量控制在0.05-0.2L/s之间,大小可以受精卵能在桶内均匀滚动程度作适当调整,孵化用水必需符合渔业水质GB11607-89的规定,溶解氧大于6mg/L,pH值为7.1-7.9,孵化温度为19-21℃,8小时后达到原肠中期,随机捞取200粒左右鱼卵进行受精率统计,受精率为41%;经过30小时的孵化鱼苗开始脱膜,再经过6天左右的孵化鱼苗腰点全部出齐,转入水花培育阶段,并计数,共出苗9220尾,孵化率为75%。
实验结果为,中华沙鳅在循化水系统中驯养成活率尾85%、催产率达75%、受精率41%、孵化率75%。
实施例2:
中华沙鳅人工繁殖方法,其步骤是:
1、中华沙鳅的驯养方法:
A、2014年3-6月在四川攀枝花境内金沙江水域以网捕的方式收集野生中华沙鳅亲本200多尾,运往大唐观音岩水电站鱼类增殖站内循环水系统中进行暂养;
B、到站后先进行水温过渡,即将收集的野生中华沙鳅连同氧气袋一起放入养殖缸中,当时氧气袋内水温12℃,养殖缸内水温16℃,进行水温过渡30分钟后,氧气袋内水温升至15℃左右,此时将袋内亲鱼倒入一方形塑料盒中,筛选体质强壮、受伤较轻的亲鱼180尾,放入一口直径为2米的亲鱼培育缸内进行暂养并隔离治疗,治疗方法为先用2.5-3%质量分数的食盐加200ppm的青霉素浸泡25-30分钟,然后换水并用20ppm的盐酸土霉素浸泡24小时后换水,再用0.5ppm的亚甲基蓝溶液浸泡24小时,防止水霉滋生;
C、2-3天后,鱼体伤口和活动恢复正常后可开始投饵,刚开始每天投喂少量的活鲜的水蚯蚓,投喂量为鱼体重的0.3%,投喂量逐渐增加到3%;待中华沙鳅摄食正常后开始进行转食,并添加蛋白含量在40%以上的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料,投喂方法为:先加水将其和成面团,再将其搓成长条形直接投喂,人工配合饲料投喂量占日总投喂量的20%,水蚯蚓占日总投喂量的80%;一周后逐渐减少水蚯蚓投喂量,增加人工饲料的投喂量,最后逐步变成人工配合饲料占日总投喂量80%,水蚯蚓活饵占日总投喂量20%,日投喂量为鱼体体重的2-3%;
D、待鱼体完全康复活动、摄食正常后即进入循环水系统中进行培育。循环水系统主要条件为:进水泵2台、1次回水泵2台、2次回水泵2台、增氧风机2台、滚筒过滤机1套、生物过滤器1套、紫外线消毒器1台、直径3米的圆形培育缸20口和冷热机组2套。系统水循环量为8次/日,流量0.5L/s左右,水温稳定在21℃左右,DO大于7mg/L,pH6.9-7.8,NH4 +小于0.2mg/L,NO2 -0.1mg/L,其他各项理化指标符合国家养殖水标准。180尾鱼在1口3米直径的圆形养殖缸内培育,养殖密度2kg/m3左右。每天投喂2次,早上8:00、晚上18:00各投喂一次,日投喂量为体重的2-4%。到2014年10月检查,成活152尾,成活率达84.4%。
2、中华沙鳅的人工繁殖方法:
1)亲鱼培育
A、选择体表无伤、体重40-100g的经过驯化的野生中华沙鳅120尾作为后备亲鱼;
B、2014年10月将中华沙鳅后备亲鱼投放到循环水养殖系统中进行培育,养殖密度≤3kg/m3,亲鱼池的进水流量为0.5-0.9L/s,培育用水的pH为7.2-7.9,溶解氧为5-10mg/L,水温为18-26℃,每日投喂量为亲鱼体重的1-3%,,每天投喂二次,分别为上午9点、下午5点,人工配合饲料为甲鱼料或鳗鱼料(蛋白质含量为40%-45%,粉料揉成面团投喂)占日投喂量的80%,水蚯蚓活饵占日投喂量的20%,培育时间为15个月;培育过程中除加强营养管理外,还要加强冲水、吸污排污管理,保证充足的溶氧,定期检测水温水质,定期进行药物预防疾病等日常管理;
C、到2016年1月,从后备亲鱼中,选择无病、无伤、无畸形的中华沙鳅作为繁殖亲鱼,且雄鱼体重为50-150g/尾、雌鱼体重为50-120g/尾,将繁殖亲鱼投放到亲鱼培育缸中进行强化培育,养殖密度≤2kg/m3,亲鱼培育池的进水流量为0.5-0.9L/s,强化培育用水的pH为7.5-7.9、溶解氧为5-10mg/L、水温为20-23℃,每日投喂量为亲鱼体重的3-4%,每天投喂三次,水蚯蚓占日投喂量的50%,蛋白质含量大于40%的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的50%;
2)人工催产
A、2016年5月26日,开始检查繁殖亲鱼的性成熟情况,每周检查2次,检查方法为:①性成熟雌鱼:将雌鱼鱼体向上,稍露水面,两侧明显看到卵巢轮廓,肛门突起再用手轻压腹部,柔软富有弹性;②性成熟雄鱼:腹部扁平,肛门无突起,轻压腹部两侧,有少量乳白色的浓稠精液流出;5月28日将挑选的性成熟的亲鱼120尾,即雌鱼30尾,雄鱼90尾,雌雄数量比例为1:3,将雌鱼和雄鱼暂时分别放入两个网箱中,同时准备供受精卵孵化的孵化桶用20ppm的高锰酸钾药水进行消毒处理10-20分钟,然后用水清洗干净,晾干;
B、上午10:00在性成熟的亲鱼胸鳍基部注射催产剂,每尾鱼每次注射量为0.1-0.3mL,雌鱼的催产剂分2次注射,第一次注射的催产剂B为促黄体素类似物释放激素A2或A3(二选一)2-4μg/kg、马来酸地欧酮或鲤鱼脑垂体(二选一)1-2mg/kg的混合物,第二次注射的催产剂C为促黄体素类似物释放激素A2或A3(二选一)6-15μg/kg、鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮(二选一)5-8mg/kg、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意两种或三种药物的混合物,催产剂B和C的成分部分相同(催产剂B和C的成分至少有一种相同且至少有一种不同),两次注射时间间隔为8-10小时;雄鱼仅在雌鱼进行第二次注射时才进行注射,雄鱼的注射剂量为雌鱼第二针注射量的1/2。
3)人工授精
注射催产剂15小时后,发现雄鱼追逐雌鱼,雌鱼往前急游,突然停下,身体左右摆动,并且发现有产卵现象时,立即捕捞雌鱼进行检查,如果轻压雌鱼腹部,有鱼卵流出,将雌雄鱼放入200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉。第一批选择15尾雌鱼和45为雄鱼放入200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉,此时先将雄鱼捞出,擦去亲鱼体表和肛门部位的水分,轻轻挤压腹部慢慢挤出精液,用干燥的吸管吸取精液备用,然后将麻醉好的雌鱼逐条捞出擦去雌鱼体表水分,将鱼卵挤入盆中,然后将精液挤入盆中,用羽毛搅拌1-2分钟进行人工授精,接着加入2-3倍质量百分浓度为0.5%的鱼用生理盐水,搅拌1-2分钟,用清水洗受精卵2-3次,加水,再将受精卵放到事先准备好的孵化桶中进行流水孵化,人工授精的整个过程应避免阳光和灯光直射。接着挑选第二批、第三批,用上述方法进行人工授精。此次催产的30尾雌鱼,其中顺产21尾,产卵量为40000粒左右,催产率达70%;
在进行人工取精的过程中发现有很多雄鱼根本就挤不出精液或者就1滴精液,如果采取直接挤精卵的盆内进行授精的话可能受精率会很低或受精失败。所以这种授精方法在中华沙鳅的人工授精过程中尤为重要。
人工授精后对产后的中华沙鳅亲鱼用0.2-0.5ppm的水霉净或2-4ppm的五倍子药粉浸泡8-12小时。
4)人工孵化
孵化器用浓度为15-20ppm的高锰酸钾浸泡10-20分钟,并彻底清洗再加入清水。将40000粒卵移入经过消毒的两口高1.2m,上口直径为80cm的锥形孵化桶内孵化,孵化密度为35-40万粒/m3,打开孵化桶底进水阀并调节进水量,流速控制在0.05-0.5L/s的范围,流水量以受精卵能在桶内均匀滚动为度,孵化用水必需符合渔业水质GB11607-89的规定,溶解氧大于6mg/L,pH值为7.2-7.9,孵化温度为20-23℃,8小时后达到原肠中期,随机捞取200粒左右鱼卵进行受精率统计,受精率为50%;经过40小时左右的孵化,受精卵就开始破膜孵出鱼苗,鱼苗孵出后3-4天,仔鱼发育至鳔一室期,鳔充气后一天,将鱼苗捞出进行计数,共出苗15200尾,孵化率为76%,计数完成后将鱼苗转入培苗池中设置的网箱中开口,进入苗种培育阶段。
实验结果为,中华沙鳅在循化水系统中驯养成活率尾84.4%、催产率达70%、受精率50%、孵化率76%。
实施例3:
中华沙鳅人工繁殖方法,其步骤是:
1)野生亲鱼驯化
A、2015年8-11月在云南丽江境内金沙江水域以网捕的方式收集野生亲本100多尾,运往汉能金安桥水电站鱼类增殖站内循环水系统中进行暂养。
B、到站后现进行水温过渡,然后筛选,将体质强壮、受伤较轻的个体挑选出来,放到一口亲鱼培育缸内进行暂养并隔离治疗。治疗方法为先用2-3%的食盐加200ppm的青霉素洗浴20-30分钟,然后换水使用20ppm的恩诺沙星溶液浸泡24小时后换水,再用0.5ppm的亚甲基蓝溶液浸泡24小时防止水霉滋生。
C、待鱼体伤口和活动开始恢复正常后开始投饵。刚开始每天投喂少量的活鲜的水蚯蚓,投喂量为鱼体重的0.3%,之后逐渐将投喂量增加到3%;待中华沙鳅摄食正常后开始增加饲料投喂量,并添加蛋白含量在40%以上的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料,投喂方法为:先加水将人工饲料和成面团,再将其搓成长条形直接投喂,人工饲料投喂量占日总投喂量的20%,水蚯蚓占日总投喂量的80%;一周后逐渐减少水蚯蚓投喂量,增加人工饲料的投喂量,最后逐步变成人工配合饲料占日总投喂量80%,水蚯蚓活饵占日总投喂量20%,日投喂量为鱼体体重的2-3%;最后完全投喂人工饲料,这一方面是因为水蚯蚓太脏,会带进许多有害病菌和寄生虫,另一方面人工饲料来源简单,操作方便,并能添加一些药物可进行有效的预防疾病。
D、待鱼体完全康复、摄食正常后即进入循环水系统中进行培育,完成驯养过程。到2016年2月检查,成活81尾,成活率达81%。
2)亲鱼培育
A、选择体表无伤、体重40-100g、经过驯养的野生中华沙鳅作1200尾作为后备亲鱼;
B、将选择好的中华沙鳅后备亲鱼投放到车间循环水系统中进行培育,养殖密度≤4kg/m3,亲鱼池的进排水流量为0.2-0.9L/s,培育用水的pH为7.2-7.9,溶解氧为5-10mg/L,水温为13-26℃,培育饲料为甲鱼料或鳗鱼料(粉料揉成面团投喂),培育饲料中蛋白质的质量百分含量大于40%,培育饲料的每日投喂量为所有亲鱼体重的1-3%,每天投喂二次,分别为上午9点、下午5点,培育时间为1个月;培育过程中除加强营养管理外,还要加强冲水、吸污排污管理,保证充足的溶氧,定期检测水温水质,定期进行药物预防疾病等日常管理。
C、到2016年2月,从经过后备培育的中华沙鳅后备亲鱼中,选择无病、无伤、无畸形的中华沙鳅作为繁殖亲鱼100尾,雄鱼体重为50-150g/尾、雌鱼体重为50-120g/尾,将繁殖亲鱼投放到亲鱼培育缸中进行强化培育,初始养殖密度≤2kg/m3,亲鱼培育池的进排水流量为0.5-0.9L/s,强化培育用水的pH为6.8-7.9、溶解氧为5-10mg/L、水温为17-23℃,强化培育饲料为甲鱼料或鳗鱼料和水蚯蚓,甲鱼料和水蚯蚓的投喂比例为1:1,强化培育饲料中蛋白质的质量百分含量为42-45%,强化培育饲料每日投喂量为亲鱼体重的2-4%,每天投喂二次,分别为上午9点、下午5点;
3)人工催产
A、2016年5月18日,开始检查繁殖亲鱼的性成熟情况,每周检查2次,检查方法为:①性成熟雌鱼:将雌鱼鱼体向上,稍露水面,两侧明显看到卵巢轮廓,肛门突起再用手轻压腹部,柔软富有弹性;②性成熟雄鱼:腹部扁平,肛门无突起,轻压腹部两侧,有少量乳白色的浓稠精液流出。5月28日将挑选的性成熟的亲鱼80尾,即雌鱼22尾,雄鱼58尾。选择好的雌鱼和雄鱼暂时分别放入两个网箱中,同时准备供受精卵孵化的孵化桶用重量百分浓度为20ppm的高锰酸钾药水进行消毒处理10-20分钟,然后用水清洗干净,晾干。
B、性成熟繁殖亲鱼全部选择完毕后,上午10:00在性成熟的亲鱼胸鳍基部注射催产剂,每尾鱼每次注射量为0.1-0.3mL,雌鱼的催产剂一次性注射,催产剂A为促黄体素类似物释放激素A2或A3(二选一)8-16μg/kg、马来酸地欧酮6-8mg/kg或鲤鱼脑垂体6-10mg/kg(二选一)、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意二种或三种的混合物,雄鱼的催产剂同样为A,但是雄鱼的注射量仅为雌鱼注射剂量的1/2。
4)人工授精
注射催产剂20小时后,发现雄鱼追逐雌鱼,雌鱼往前急游,突然停下,身体左右摆动,并且发现有产卵现象时,立即捕捞雌鱼进行检查,轻压雌鱼腹部,如有鱼卵流出,就放到一方形盒中暂养准备做人工授精。第一批我们挑选了5尾雌鱼、10尾雄鱼。具体操作方法为:将挑好的15尾亲鱼(雌鱼5尾、雌鱼10尾)放入200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉,这时先将雄鱼逐条捞出,擦去亲鱼体表和肛门部位的水分,轻轻挤压腹部慢慢挤出精液,用准备好的干燥的吸管吸取备用。10尾雄鱼中只有6尾能吸出很少量的精液,每尾只有1-2滴精液,其余4尾挤不出精液;接着将雌鱼逐条捞出,擦去雌鱼体表水分,将鱼卵挤入盆中,然后迅速将精液挤入盆中,用羽毛搅拌1-2分钟,加入2-3倍质量百分浓度为0.4-0.5%的鱼用生理盐水,再搅拌1-2分钟,然后用清水洗卵2-3次,加入少量清水,最后倒入事先准备好的孵化桶中进行流水孵化,人工授精的整个过程应避免阳光和灯光直射;2小时后进行第二次挑选,共挑选了雌鱼10尾、雄鱼20尾,用同样的方法进行人工授精。又过2小时进行第三次筛选,只挑选了1尾雌鱼、3尾雄鱼,用同样的方法进行了人工授精。此次催产雌鱼22尾,顺产16尾,产卵量为30000粒左右,催产率达72.7%。
5)人工孵化
将30000粒卵移入一口高1.2m,上口直径为80cm的锥形孵化桶内孵化,孵化桶从底部进水,流量0.2-0.5L/s,以受精卵能在桶内均匀滚动为度,孵化用水必需符合渔业水质GB11607-89的规定,溶解氧应在6mg/L以上,pH值为7.5-7.9,孵化温度为20-23℃,8小时后达到原肠中期,随机捞取200粒左右鱼卵进行受精率统计,受精率为41%,即获受精卵12300粒左右。
经过40小时左右的孵化,受精卵开始破膜孵出鱼苗,在鱼苗孵出后1-5天的早期培育期间,溶解氧应为6mg/L以上,鱼苗孵出后3-4天,仔鱼发育至鳔一室期,鳔充气后一天,将鱼苗捞出进行计数,共出苗8850尾,孵化率为72%。计数后将水花转入培苗池中,进入水花鱼苗培育阶段。
实验结果为,中华沙鳅在循化水系统中驯养成活率尾81%、催产率达72.7%、受精率41%、孵化率72%。
Claims (6)
1.一种中华沙鳅人工繁殖方法,其步骤是:
1)野生亲鱼的收集:
将收集的野生中华沙鳅连同氧气袋一起放入养殖缸中先进行水温过渡30分钟,然后筛选体质强壮、受伤较轻的亲鱼,用青霉素和食盐混合水溶液浸泡20-30分钟,浸泡浓度为每千克水含青霉素20万IU、食盐20-30克,再转入亲鱼培育缸中用20ppm的恩诺沙星或盐酸土霉素浸泡24小时后换水,用0.5ppm的亚甲基蓝溶液浸泡24小时;
2)野生亲鱼的驯养:
2-3天后,开始投喂活鲜的水蚯蚓,日投喂量从鱼体体重的0.3%逐渐增加到3%;此时开始进行转食,刚开始投喂饲料的比例为:水蚯蚓占日投喂量的80%,人工配合饲料占日投喂量的20%,一周后逐渐减少水蚯蚓投喂量,增加人工饲料的投喂量,最后逐步变成人工配合饲料占日投喂量80%、水蚯蚓活饵占日投喂量20%的饲料比例,日投喂总量为鱼体体重的2-3%,所述的人工饲料为蛋白质含量大于40%的甲鱼料或鳗鱼料;
3)亲鱼培育:
A、选择体表无伤、体重40-100g、经过驯化的野生中华沙鳅作为后备亲鱼;
B、将后备亲鱼投放到循环水养殖系统中进行培育,养殖密度≤3kg/m3,控制亲鱼池的进水量为0.2-0.9L/s,培育用水的pH为7.2-7.9、溶解氧为5-10mg/L、水温为13-26℃,每日投喂量为亲鱼体重的1-3%,每天投喂二次,蛋白质含量大于40%的甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的80%,水蚯蚓活饵占日投喂量的20%;
C、选择无病、无伤、无畸形的中华沙鳅作为繁殖亲鱼,雌、雄鱼体重大于50g/尾,将亲鱼投放到亲鱼培育缸中进行强化培育,初始养殖密度≤2kg/m3,亲鱼培育池的进水量为0.5-0.9L/s,强化培育用水的pH为7.5-7.9,溶解氧为5-10mg/L,水温为17-23℃,每日投喂量为亲鱼体重的2-4%,每天投喂三次,水蚯蚓占日投喂量的50%,蛋白质含量大于40%的人工配合饲料甲鱼料或鳗鱼料占日投喂量的50%;
4)人工催产:
A、选择性成熟的繁殖亲鱼,雌、雄数量比例为1:2-3,雌、雄亲鱼放入不同的网箱中;
B、在性成熟的亲鱼胸鳍基部注射催产剂,每尾鱼每次注射量为0.1-0.3mL,当雌鱼的催产剂A一次性注射,则雄鱼的催产剂为A,注射量为雌鱼的1/2;当雌鱼的催产剂分2次注射,两次注射的间隔时间为8-10小时,第一针注射催产剂B、第二针注射催产剂C,B和C的成分部分相同,所述的相同成分在C中的剂量为B中的2-5倍,雄鱼注射催产剂C,注射量为雌鱼第二针注射量的1/2,在雌鱼注射第二针时一次性注射;所述的催产剂A、B、C为催产剂1、催产剂2、绒毛膜促性腺激素中的任意二或三种混合,所述的催产剂1为鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮中任意一种,所述的催产剂2为促黄体素释放激素类似物A2或A3中任意一种,雌鱼催产剂总注射剂量为鲤鱼脑垂体4-10mg/kg或马来酸地欧酮5-10mg/kg,促黄体素释放激素类似物A2或A3 6-20μg/kg,绒毛膜促性腺激素500-1200国际单位/kg;将注射了催产剂的亲鱼放入催产池中,雌雄同池,同时用流水刺激,观察亲鱼的活动情况;
5)人工授精:
当发现雄鱼追逐雌鱼、雌鱼有产卵现象时,捕捞亲鱼,将排卵顺畅的雌鱼及雄鱼放入200ppm的MS222水溶液中进行麻醉,1-2分钟后亲鱼完全被麻醉,先将雄鱼捞出,擦去亲鱼体表和肛门部位的水分,挤压腹部并用干燥的吸管吸取精液备用,按雌雄数量比为1:2-3进行配比,将麻醉的雌鱼捞出擦去体表水分,将鱼卵和精液挤入盆中,用羽毛搅拌1-2分钟使精卵充分混合,再加入2-3倍体积的质量百分浓度为0.4-0.5%的生理盐水搅拌1-2分钟,并用清水漂洗2-3次,转入孵化桶中孵化,孵化桶事先采用20ppm的高锰酸钾消毒和清洗;
6)人工孵化:
受精卵在孵化桶中的孵化密度为30-40万粒/m3,进水量为0.05-0.2L/s,使受精卵在孵化桶内均匀翻滚,孵化期间孵化桶内水体溶氧量要大于6mg/L,pH值7.5-7.9,孵化水温19-23℃;7-10天后鳔充气,转到鱼苗培育缸或网箱内培育。
2.根据权利要求1所述的中华沙鳅人工繁殖方法,其特征在于:所述的步骤4)中,雌鱼的催产剂一次性注射时,催产剂A为促黄体素类似物释放激素A2或A3 8-16μg/kg、马来酸地欧酮6-8mg/kg或鲤鱼脑垂体6-10mg/kg、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意二种或三种的混合物。
3.根据权利要求1所述的中华沙鳅人工繁殖方法,其特征在于:所述的步骤4)中,雌鱼的催产剂分2次注射时,第一次注射的催产剂B为促黄体素类似物释放激素A2或A3 2-4μg/kg、马来酸地欧酮或鲤鱼脑垂体1-2mg/kg的混合物,第二次注射的催产剂C为促黄体素类似物释放激素A2或A36-15μg/kg、鲤鱼脑垂体或马来酸地欧酮5-8mg/kg、绒毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意两种或三种药物的混合物。
4.根据权利要求1所述的中华沙鳅人工繁殖方法,其特征在于:人工授精后对产后中华沙鳅亲鱼进行康复护理,注射硫酸庆大霉素或青霉素1-2次,每次每公斤鱼体注射剂量为硫酸庆大霉素4000-5000国际单位或青霉素1-2万国际单位;再用0.2-0.3ppm的二氧化氯浸泡8-24小时。
5.根据权利要求1所述的中华沙鳅人工繁殖方法,其特征在于:对产后的中华沙鳅亲鱼用0.2-0.5ppm的水霉净或2-4ppm的五倍子药粉浸泡8-12小时。
6.根据权利要求1所述的中华沙鳅人工繁殖方法,其特征在于:所述步骤6)中,在受精卵在进入孵化器之前,将孵化器用浓度为10-20ppm的高锰酸钾浸泡10-30分钟。
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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