CN108739549A - 野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法 - Google Patents

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黄学潇
顾正选
余泽文
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Abstract

本发明提供了一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，包括建立仿生态池，模拟野生长薄鳅的栖息环境；将收集来的野生长薄鳅浸泡消毒后进行隔离暂养；将暂养结束后的长薄鳅投进所述仿生态池进行驯化；将配制好的亲鱼饲料进行投喂；产前强化：在长薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液；繁殖时间前2个月提高仿生态池水体流速，同时提高水温至25～26℃，刺激亲鱼性腺发育成熟；本发明通过建立仿生态池模拟了野生长薄鳅的栖息环境、水流、饵料，调整亲鱼饲料的营养比例，以及实施产前强化措施，保证性腺发育成熟率达到50％以上，提高规模化人工繁殖过程中的催产率。

Description

野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法
技术领域
本发明涉及鱼类性腺发育领域，尤其涉及一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法。
背景技术
长薄鳅(Leptobotia elongata)隶属于鲤形目、鳅科、沙鳅亚科、薄鳅属，是我国长江中上游特有鱼类，近年来随着长江流域水电梯级开发以及自然生境的破坏，野生长薄鳅资源锐减，目前长薄鳅在《中国物种红色名录》和《中国濒危动物红皮书鱼类》中均被列为易危(VU)等级。对野生长薄鳅进行保护性人工繁殖已经迫在眉睫。
但野生长薄鳅人工驯养死亡率极高，并且人工驯养条件下野生亲本几乎都会出现不同程度的性腺退化现象。使得采集的野生长薄鳅亲本在人工养殖条件下难以达到性腺发育成熟。目前有关长薄鳅人工繁殖的技术虽有报道，但基本都属于个例，长薄鳅规模化人工培育性腺发育成熟的技术尚未突破。这成为制约长薄鳅野生亲本保护性人工繁殖的技术瓶颈。
对比文件1：申请号为“CN201310590593.7”，名称为“一种长薄鳅苗种培育方法”，通过长薄鳅幼苗的精心培育，从水花阶段培育到3～4cm规格苗种，培育出个体强壮、规格统一的苗种，提高了长薄鳅的苗种成活率，为长薄鳅的成鱼养殖效益提供了保障，但该方法旨在提高长薄鳅苗种的成活率，培育出个体强壮、规格统一的苗种供应市场的需求，并不能得到性腺发育成熟的野生长薄鳅，目前尚未有长薄鳅规模化人工培育性腺发育成熟的技术。
因此，有必要发明一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法。为长薄鳅野生亲本保护性人工繁殖奠定基础。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，通过建立仿生态池最大限度地模拟了野生长薄鳅的栖息环境、水流、饵料，同时饲料中提高蛋白质和脂类的比例，且添加一定量的维生素和鱼油，以及产前强化时提高水体流速、升高水温以及多次少量的外源激素注射等措施，实现长薄鳅产前综合强化培育，保证性腺发育成熟率达到50％以上，提高规模化人工繁殖过程中的催产率。
本发明是这样实现的：
本发明提供一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，具体包括如下步骤：
步骤1、建立仿生态池：建造地上水泥池，模拟野生长薄鳅的栖息环境；
步骤2、隔离暂养：将收集来的野生长薄鳅浸泡消毒后进行隔离暂养；
步骤3、驯化：将暂养结束后的长薄鳅投进所述仿生态池进行驯化；
步骤4、投喂：将配制好的亲鱼饲料进行投喂，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，
所述基础营养组分包括粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和其他营养成分，且所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，
所述添加组分为每千克成品饲料中添加维生素C 110～130mg、维生素A 140～160mg、维生素E 180～200mg、富含n-3高不饱和脂肪酸的鱼油24～26g；
步骤5、产前强化：在薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液；繁殖时间前2个月提高仿生态池水体流速，同时提高水温，刺激亲鱼性腺发育成熟。
本发明具有如下有益效果：
本发明通过建立仿生态池最大限度地模拟了野生长薄鳅的栖息环境(包括鹅卵石、金鱼藻水流速度等)，投喂配制好的亲鱼饲料，最后经过产前强化(通过提高水体流速、升高水温以及多次少量的外源激素注射等措施)保证雌性亲鱼中性腺发育至Ⅳ期中的所占比例最高达57.5％、雄性亲鱼中发育至Ⅳ期中的所占比例为74.1％，获得了比较好的同步性，且比常规饲养方法性成熟提前1个多月，具体地如下：
(1)采用较长的隔离暂养期避免野生长薄鳅从野外携带的病原进入仿生态池，提高驯化成活率；同时仿生态池最大限度地模拟了野生长薄鳅的栖息环境、水流、饵料，降低人工养殖环境对长薄鳅造成的应激反应；
(2)每50m2的仿生态池放养长薄鳅野生亲本30～50尾，同时混养麦穗鱼2～4kg，麦穗鱼即作为长薄鳅的生物饵料又可以帮助清除残饵；
(3)投喂配制好的亲鱼饲料，结合长薄鳅亲本发育的营养需求，提高蛋白质和脂类的比例，同时添加一定量的维生素和富含n-3高不饱和脂肪酸的(HUAF)鱼油，保证亲本性腺发育所需的营养需求，40天内增重率高达20％，成活率高达93％，说明本饲料对长薄鳅的适口性好，营养全面，亲鱼生长快。此外，使用本发明的饲料性腺成熟时间提前近20多天，雌雄平均性腺指数、生存活力指数、受精率均显著升高；
(4)通过提高水体流速、升高水温以及多次少量的外源激素注射等措施，实现长薄鳅产前综合强化培育，保证性腺发育成熟率达到50％以上，提高规模化人工繁殖过程中的催产率。
具体实施方式
实施例1
本实例提供的一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，具体包括如下步骤：
步骤1、建立仿生态池：于2016年利用观音岩鱼类增殖站长宽深分别为4×13×1.5m的地上水泥池进行仿生态池改造，池底铺上粒径5～20cm的大小不等的鹅卵石，同时放置150根直径110mm长度为50cm的pvc管，池中种植少量金鱼藻，金鱼藻净化水质的同时可以为长薄鳅提供遮蔽物，池中设置进排水管，其中进水管水流速可调，控制池水流速0.8m/s以上，养殖用水需经过策底杀菌消毒，水体日交换次数为3次。通过塑料膜和遮阳网控制水温，水池中架设一台2kw的潜水泵，以备繁殖时间前2个月加大池水流速，促进性腺发育成熟；
步骤2、隔离暂养：2016年在金沙江攀枝花江段收集野生长薄鳅亲本160kg，亲本收集后剔除受伤严重的亲本，其余亲本在直径1m的养殖缸中采用10％的NaCl浸泡15min，消毒后的亲本暂养在直径2m的隔离暂养缸中，暂养水体经过严格消毒处理，暂养前3天采用200万iu/m3的青霉素钠浸泡进行细菌性疾病的防治，暂养30天；
步骤3、驯化：选择经过隔离暂养且鱼体健康、摄食正常的长薄鳅40尾进入仿生态池开始进行驯化，同时混养麦穗鱼3kg，麦穗鱼即作为长薄鳅的生物饵料又可以帮助清除残饵，根据池中麦穗鱼的密度及时进行饵料鱼的补充。日常培育水温控制在20-22℃；
步骤4、投喂：将配制好的亲鱼饲料进行投喂，日投喂量控制在鱼体重的3～4％，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，
所述基础营养组分包括粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和其他营养成分，根据长薄鳅亲本发育的营养需求，配置合适的营养比例，所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，即饲料基础营养成分为粗蛋白质含量42％，粗脂肪14％，粗灰分5％，粗纤维8％，剩余为维生素、矿物质、各种添加剂等其他营养成分；
所述添加组分为每千克成品饲料中添加维生素C 120mg、维生素A 150mg、维生素E190mg、鱼油25g；
步骤5、产前强化：长薄鳅繁殖时间通常为每年5-6月份，在薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，即于2017年3月5日、4月5日、5月5日分别对驯养的长薄鳅各注射一次鲤脑垂体(PG)研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，促进长薄鳅性腺发育；
从2017年4月5日开始，开启仿生态池的潜水泵进行冲水，提高仿生态池水体流速，使得池水流速达到1.5m/s，同时通过塑料薄膜增温的方式提高水温至25-26℃，刺激亲鱼性腺发育成熟。
2017年6月15日检查亲本性腺发育情况，具体结果如实验例1中的表1所示。
实施例2
本实例提供的一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，具体包括如下步骤：
步骤1、建立仿生态池：于2016年利用观音岩鱼类增殖站长宽深分别为4×13×1.5m的地上水泥池进行仿生态池改造，池底铺上粒径5～20cm的大小不等的鹅卵石，同时放置150根直径110mm长度为50cm的pvc管，池中种植少量金鱼藻，金鱼藻净化水质的同时可以为长薄鳅提供遮蔽物，池中设置进排水管，其中进水管水流速可调，控制池水流速0.8m/s以上，养殖用水需经过策底杀菌消毒，水体日交换次数为3次。通过塑料膜和遮阳网控制水温，水池中架设一台2kw的潜水泵，以备繁殖时间前2个月加大池水流速，促进性腺发育成熟；
步骤2、隔离暂养：2016年在长江泸州江段收集野生长薄鳅亲本160kg，亲本收集后剔除受伤严重的亲本，其余亲本在直径1m的养殖缸中采用10％的NaCl浸泡15min，消毒后的亲本暂养在直径2m的隔离暂养缸中，暂养水体经过严格消毒处理，暂养前3天采用200万iu/m3的青霉素钠浸泡进行细菌性疾病的防治，暂养30天；
步骤3、驯化：选择经过隔离暂养且鱼体健康、摄食正常的长薄鳅50尾进入仿生态池开始进行驯化，同时混养麦穗鱼4kg，麦穗鱼即作为长薄鳅的生物饵料又可以帮助清除残饵，根据池中麦穗鱼的密度及时进行饵料鱼的补充。日常培育水温控制在20-22℃；
步骤4、投喂：将配制好的亲鱼饲料进行投喂，日投喂量控制在鱼体重的3～4％，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，
所述基础营养组分包括粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和其他营养成分，根据长薄鳅亲本发育的营养需求，配置合适的营养比例，所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，即饲料基础营养成分为粗蛋白质含量42％，粗脂肪14％，粗灰分5％，粗纤维8％，剩余为维生素、矿物质、各种添加剂等其他营养成分；
所述添加组分为每千克成品饲料中添加维生素C 130mg、维生素A 160mg、维生素E200mg、鱼油26g；
步骤5、产前强化：长薄鳅繁殖时间通常为每年5-6月份，在薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，即于2017年3月5日、4月5日、5月5日分别对驯养的长薄鳅各注射一次鲤脑垂体(PG)研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，促进长薄鳅性腺发育；
从2017年4月5日开始，开启仿生态池的潜水泵进行冲水，提高仿生态池水体流速，使得池水流速达到1.5m/s，同时通过塑料薄膜增温的方式提高水温至25-26℃，刺激亲鱼性腺发育成熟。
2017年6月15日检查亲本性腺发育情况，，具体结果如实验例1中的表1所示。
实施例3
本实例提供的一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，具体包括如下步骤：
步骤1、建立仿生态池：于2016年利用观音岩鱼类增殖站长宽深分别为4×13×1.5m的地上水泥池进行仿生态池改造，池底铺上粒径5～20cm的大小不等的鹅卵石，同时放置150根直径110mm长度为50cm的pvc管，池中种植少量金鱼藻，金鱼藻净化水质的同时可以为长薄鳅提供遮蔽物，池中设置进排水管，其中进水管水流速可调，控制池水流速0.8m/s以上，养殖用水需经过策底杀菌消毒，水体日交换次数为3次。通过塑料膜和遮阳网控制水温，水池中架设一台2kw的潜水泵，以备繁殖时间前2个月加大池水流速，促进性腺发育成熟；
步骤2、隔离暂养：2016年在长江川江江段收集野生长薄鳅亲本160kg，亲本收集后剔除受伤严重的亲本，其余亲本在直径1m的养殖缸中采用10％的NaCl浸泡15min，消毒后的亲本暂养在直径2m的隔离暂养缸中，暂养水体经过严格消毒处理，暂养前3天采用200万iu/m3的青霉素钠浸泡进行细菌性疾病的防治，暂养30天；
步骤3、驯化：选择经过隔离暂养且鱼体健康、摄食正常的长薄鳅30尾进入仿生态池开始进行驯化，同时混养麦穗鱼2kg，麦穗鱼即作为长薄鳅的生物饵料又可以帮助清除残饵，根据池中麦穗鱼的密度及时进行饵料鱼的补充。日常培育水温控制在20-22℃；
步骤4、投喂：将配制好的亲鱼饲料进行投喂，日投喂量控制在鱼体重的3～4％，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，
所述基础营养组分包括粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和其他营养成分，根据长薄鳅亲本发育的营养需求，配置合适的营养比例，所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，即饲料基础营养成分为粗蛋白质含量42％，粗脂肪14％，粗灰分5％，粗纤维8％，剩余为维生素、矿物质、各种添加剂等其他营养成分；
所述添加组分为每千克成品饲料中添加维生素C 110mg、维生素A 140mg、维生素E180mg、鱼油24g；
步骤5、产前强化：长薄鳅繁殖时间通常为每年5-6月份，在薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，即于2017年3月5日、4月5日、5月5日分别对驯养的长薄鳅各注射一次鲤脑垂体(PG)研磨液，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重，促进长薄鳅性腺发育；
从2017年4月5日开始，开启仿生态池的潜水泵进行冲水，提高仿生态池水体流速，使得池水流速达到1.5m/s，同时通过塑料薄膜增温的方式提高水温至25-26℃，刺激亲鱼性腺发育成熟。
2017年6月15日检查亲本性腺发育情况，具体结果如实验例1中的表1所示。
实验例1检查亲本性腺发育情况
2017年6月15日检查亲本性腺发育情况，试验结束后，分别从实施例1-3中随机从每口亲鱼中挑选10尾亲鱼，且按照雌雄1:1的比例随机挑选，解剖观察亲本性腺发育情况，并统计试验期间亲鱼的平均成活率、雌性腺指数、雌性亲鱼中性腺发育至Ⅳ期中的所占比例、雄性亲鱼中发育至Ⅳ期中的所占比例以及从驯化好至性腺成熟所需时间。
表1
由表1可知，本发明实施例1-3提供的一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法中，试验期间亲鱼的平均成活率在89.6％以上；性腺质量明显得到改善，性腺指数均比常规饲养方式所得亲鱼的性腺指数明显提高；雌性亲鱼中性腺发育至Ⅳ期中的所占比例最高达57.5％、雄性亲鱼中发育至Ⅳ期中的所占比例为74.1％，获得了比较好的同步性，且比常规饲养方法性成熟提前1个多月。通过本技术方案，加速了长薄鳅的性腺发育，明显提高了性腺发育质量，且性腺发育获得相对较好的同步性。
实验例2
所述实施例1-3中，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，所述基础营养组分中的所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，上述比值是本申请人以本实施例1驯养好的长薄鳅随机挑选一部分作为对比例1-3，相对应地喂以以下对比例1-3中营养成分比例的饲料，进行多组实验创新性探索得到的，现将探索过程简单陈述如下：
对比例1：粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，其余与实施例1相同；
对比例2：粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝30：18：2：9；
对比例3：粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，与实施例1相同，区别在于每千克成品饲料中均不添加维生素C、维生素A、维生素E以及富含n-3高不饱和脂肪酸的鱼油；
每天饱食投喂两次，分别在6:00和19:00持续8个周。各组亲鱼的参数指标如表2。
表2
其中，
N为实验开始时的仔鱼数；hi为第i天的仔鱼死亡累积数量，k为生存尾数为0时的天数。
由表2可见，本发明中的配制好的亲鱼饲料，所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，且每千克成品饲料中添加维生素C 110～130mg、维生素A 140～160mg、维生素E 180～200mg、富含n-3高不饱和脂肪酸的鱼油24～26g时，40天内增重率高达20.1％，成活率高达93.3％，说明本饲料对长薄鳅的适口性好，营养全面，亲鱼生长快。此外，使用本发明的饲料性腺成熟时间提前近20多天，雌雄平均性腺指数、生存活力指数、受精率均显著升高。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
步骤1、建立仿生态池：建造地上水泥池，模拟野生长薄鳅的栖息环境；
步骤2、隔离暂养：将收集来的野生长薄鳅浸泡消毒后进行隔离暂养；
步骤3、驯化：将暂养结束后的长薄鳅投进所述仿生态池进行驯化；
步骤4、投喂：将配制好的亲鱼饲料进行投喂，所述配制好的亲鱼饲料包括基础营养组分和添加组分，
所述基础营养组分包括粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和其他营养成分，且所述粗蛋白质：粗脂肪：粗灰分：粗纤维＝42：14：5：8，
所述添加组分为每千克成品饲料中添加维生素C 110～130mg、维生素A 140～160mg、维生素E 180～200mg、富含n-3高不饱和脂肪酸的鱼油24～26g；
步骤5、产前强化：在薄鳅繁殖时间前3个月，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液；繁殖时间前2个月提高仿生态池水体流速，同时提高水温，刺激亲鱼性腺发育成熟。
2.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤1中，将收集来的野生长薄鳅采用10％的NaCl浸泡消毒15min，之后进入隔离暂养缸进行隔离暂养，暂养时间为30天。
3.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤1中，暂养前3天采用200万iu/m3的青霉素钠浸泡进行细菌性疾病的防治。
4.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤2中，仿生态池为长宽深分别为4×13×1.5m的地上水泥池。
5.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤2中，模拟野生长薄鳅的栖息环境的具体做法为：在池底铺上粒径为5～20cm的大小不等的鹅卵石，同时放置150根直径110mm长度为50cm的pvc管，且池中种植少量金鱼藻，控制池中池水流速在0.8m/s及以上。
6.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤2中，仿生态池中设有用于控制水温的塑料膜和遮阳网，水池中架设一台2kw的潜水泵，以备繁殖时间前2个月加大池水流速，促进性腺发育成熟。
7.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤2中，仿生态池中的养殖用水需经过策底杀菌消毒，水体日交换次数为2～3次。
8.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤3中，每50m2的仿生态池放养长薄鳅野生亲本30～50尾的同时混养麦穗鱼2～4kg，驯化时的日常培育水温控制在20～22℃。
9.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤4中，所述配制好的亲鱼饲料的日投喂量控制在鱼体重的3～4％。
10.如权利要求1所述的野生长薄鳅人工养殖条件下驯化至性腺发育成熟的方法，其特征在于，所述步骤5中，每个月注射一次鲤脑垂体研磨液时，每次注射剂量为2mg/kg鱼体重；提高仿生态池水体流速至1.5m/s，同时提高水温至25～26℃。
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