CN106442835A - 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法 - Google Patents

血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106442835A
CN106442835A CN201610846423.4A CN201610846423A CN106442835A CN 106442835 A CN106442835 A CN 106442835A CN 201610846423 A CN201610846423 A CN 201610846423A CN 106442835 A CN106442835 A CN 106442835A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acetylcholine
detection method
concentration
blood plasma
uplc
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610846423.4A
Other languages
English (en)
Inventor
付淑军
冯利民
袁圆
赖东海
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Integrated Testing Technology (tianjin) Co Ltd
Original Assignee
Integrated Testing Technology (tianjin) Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Integrated Testing Technology (tianjin) Co Ltd filed Critical Integrated Testing Technology (tianjin) Co Ltd
Priority to CN201610846423.4A priority Critical patent/CN106442835A/zh
Publication of CN106442835A publication Critical patent/CN106442835A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/8813—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample biological materials
    • G01N2030/8822—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample biological materials involving blood

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明提供血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC‑MS/MS检测方法，包括以下步骤：（1）血浆样品预处理方法：取人空白血浆，加入胆碱酯酶抑制剂，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min，加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入CH3OH:CH3CN=1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，离心,取上清进样测定；（2）按照一定条件进行UPLC‑MS/MS检测；(3）制作标准曲线：选取乙酰胆碱浓度为2ng/ml，5ng/ml，10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml按照以上方法处理后，其数据制备标准曲线;(4）根据样品的峰面积和标准曲线的回归方程中，计算尿血浆中乙酰胆碱的浓度。本发明的有益效果是简单快捷，灵敏度高，抗干扰能力强，适合多种情况下乙酰胆碱的定性定量检测。

Description

血浆中乙酰胆碱的浓度的UPLC-MS/MS检测方法
技术领域
本发明属于生物分析领域，尤其是涉及一种血浆中乙酰胆碱的浓度的UPLC-MS/MS检测方法。
背景技术
神经递质是一种在神经系统中担当信使的特定的化学物质，在生命活动中起着非常重要的调控作用。乙酰胆碱是一种胆碱类的神经递质，对反应的警戒性，大脑的记忆力，以及学习能力都会产生影响。对乙酰胆碱的测定多采用电化学检测法，但其步骤十分繁杂。因此，在实际复杂的样品以及医学临床诊断中需要发展一种高专属性、简单、快速、灵敏的检测方法。
自从色谱-质谱联用技术发展以来，人们利用该技术在化学物质定性定量分析、临床医药检测、以及生物大分子如蛋白质、核酸、糖类等方面进行了广泛和深入的研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简单、检测效率高、成本低的血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法。本发明公开了利用液质联用技术建立了血浆中乙酰胆碱一种新的检测技术方法，并为医学研究及临床诊断提供准确、快速、灵敏的分析方法。
本发明的技术方案是：
血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，包括以下步骤：
1)血浆样品预处理方法：
取人空白血浆，加入胆碱酯酶抑制剂，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min，使胆碱酯酶抑制剂与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
2)样品HPLC-MS/MS检测条件为：
液相条件
流动相：A:0.1％甲酸水溶液 B:0.1％甲酸的乙腈溶液
流速：0.5ml/min 进样量：5ul
色谱柱：安捷伦ZORBAX SB-Aq 4.6*150mm,5um
梯度洗脱程序
Time/min A％ B％
0 95 5
3.5 95 5
5.0 77 23
5.1 95 5
10.0 95 5
质谱条件
毛细管电压(kV):3.2kV 源温度(℃):120
脱溶剂气温度(℃):300 脱溶剂气流量(L/Hr)600
气帘气流量(L/Hr):50； 驻留时间(s):0.02
3)制作标准曲线：选取乙酰胆碱浓度为2ng/ml，5ng/ml，10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml按照以上方法处理后，进样检测，其数据制备标准曲线。
4)根据样品的峰面积和标准曲线的回归方程中，计算血浆中乙酰胆碱的浓度
进一步，所述胆碱酯酶抑制剂为小檗碱。
进一步，小檗碱作为乙酰胆碱酯酶抑制剂的浓度为0.5mg/ml。
处理方法为：取人空白血浆50ul，加入5ul 5mg/ml小檗碱溶液(即小檗碱在血浆的终浓度为0.5mg/ml)，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入150ul CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
进一步，乙酰胆碱的保留时间为3.43min。
进一步，用小檗碱抑制乙酰胆碱酯酶后在测定血浆中乙酰胆碱，最低检测限为0.5ng/ml。
进一步，该检测方法中，定量限为2ng/ml，线性范围为2-200ng/ml。
进一步，所述胆碱酯酶抑制剂为石杉碱甲或毒扁豆碱。
血浆中的乙酰胆碱酯酶会快速将乙酰胆碱水解，因此难检测到血浆中的Ach，以此为依据，在血浆中加入乙酰胆碱酯酶抑制剂，抑制乙酰胆碱的快速水解。
本发明具有的优点和积极效果是：UPLC-MS/MS检测方法检测血浆中乙酰胆碱浓度，简单快捷，灵敏度高，抗干扰能力强，适合多种情况下乙酰胆碱的定性定量检测，为生物检测行业中血浆中乙酰胆碱的检测提供了指导方法。
附图说明
图1是血浆中小檗碱浓度依次为0.01、0.1、0.5、1mg/ml时，Ach为50ng/ml的色谱图。
图2是为空白血浆色谱图，在保留时间为3.24min和3.64min处有两个干扰色谱峰。
图3是加0.5mg/ml小檗碱后血浆中Ach浓度依次为1，5，50，100ng/ml时的色谱图。
图4是乙酰胆碱制备得到的标准曲线。
具体实施方式
实施例1
不同浓度小檗碱试验：
取人空白血浆50ul，加入不同浓度的小檗碱溶液(即小檗碱在血浆的终浓度分别为0.01、0.1、0.5、1mg/ml)，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入150ul CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
图1为血浆中小檗碱浓度依次为0.01、0.1、0.5、1mg/ml时，血浆中Ach为50ng/ml的色谱图，有图可见，但血浆中小檗碱浓度为0.5mg/ml和1mg/ml时，保留时间为3.44min处的Ach色谱峰强度基本相当，而血浆中小檗碱浓度为0.1mg/ml和0.01mg/ml时，保留时间为3.44min处的Ach色谱峰强度依次减弱。因此血浆中0.5mg/ml的小檗碱即可对血浆中乙酰胆碱酯酶达到完全抑制，故后续试验中选择0.5mg/ml的小檗碱作为乙酰胆碱酯酶抑制剂。
实施例2
最低检出限实验：
分别取含1ng/ml、5ng/ml、50ng/ml和100ng/ml血浆50ul和50ul空白血浆，加入小檗碱溶液使小檗碱在血浆的终浓度为0.5mg/ml，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min。再加入150ul CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
图2为空白血浆色谱图，在保留时间为3.24min和3.64min处有两个干扰色谱峰。图3与图2比，Ach浓度为50ng/ml和100ng/ml时，保留时间在3.43处的Ach色谱峰明显，Ach浓度为1ng/ml时，Ach的色谱峰不明显，5ng/ml可见明显Ach峰，信噪比为20。检测限为0.5ng/ml。所以用小檗碱抑制乙酰胆碱酯酶后在测定血浆中乙酰胆碱的方法，最低定量限在2ng/ml。
实施例3
标准曲线的制备：选取乙酰胆碱浓度为2ng/ml，5ng/ml，10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml，加入小檗碱溶液使小檗碱在血浆的终浓度为0.5mg/ml，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入150ul CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
图4为制备得到的标准曲线。
实施例4
回收率与基质效应试验：选取乙酰胆碱浓度为2ng/ml，50ng/ml，1600ng/ml，加入小檗碱溶液使小檗碱在血浆的终浓度为0.5mg/ml，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入150ulCH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。通过QC样品平均峰面积比相应浓度的回收率样品的峰面积，计算每个浓度样品和内标的回收率。
通过各浓度回收率样品的峰面积比相应基质效应样品的峰面积，计算每个浓度样品和内标的基质效应。
表1 Ach回收率和基质效应(n＝3)
表2 Ach回收率和基质效应数据
血浆中Ach检测样品处理中，需加入足够的小檗碱(0.5mg/ml)以抑制血浆中的乙酰胆碱酯酶，然后再结合PPT法处理样品。此方法回收率为80％，但基质效应偏低(30％)，可能是高浓度的小檗碱所致，可试验选择其他高抑制活性的化合物作为抑制剂，如石杉碱甲、毒扁豆碱等，这样可以降低抑制剂的浓度，减小基质效应。
以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。

Claims (8)

1.血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)血浆样品预处理方法：
取人空白血浆，加入胆碱酯酶抑制剂，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min，使胆碱酯酶抑制剂与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定；
2)样品HPLC-MS/MS检测条件为：
液相条件
流动相：A:0.1％甲酸水溶液 B:0.1％甲酸的乙腈溶液
流速：0.5ml/min 进样量：5ul
色谱柱：安捷伦ZORBAX SB-Aq 4.6*150mm,5um
梯度洗脱程序
Time/min A％ B％ 0 95 5 3.5 95 5 5.0 77 23 5.1 95 5 10.0 95 5
质谱条件
毛细管电压(kV):3.2kV 源温度(℃):120
脱溶剂气温度(℃):300 脱溶剂气流量(L/Hr)600
气帘气流量(L/Hr):50； 驻留时间(s):0.02
3)制作标准曲线：选取乙酰胆碱浓度为2ng/ml，5ng/ml，10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml按照以上方法处理后，进样检测，其数据制备标准曲线；
4)根据样品的峰面积和标准曲线的回归方程中，计算血浆中乙酰胆碱的浓度。
2.根据权利要求1所述的血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：步骤(1)所述乙酰胆碱酯酶抑制剂为小檗碱。
3.根据权利要求2所述的血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：小檗碱作为乙酰胆碱酯酶抑制剂的浓度为0.5mg/ml。
4.根据权利要求1或2所述的血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：血浆样品处理方法为：取人空白血浆50ul，加入5ul 5mg/ml小檗碱溶液(即小檗碱在血浆的终浓度为0.5mg/ml)，涡旋混匀后，4℃冰箱中放置20min,使小檗碱与乙酰胆碱酯酶充分作用，然后再加入5ul std溶液，涡旋混匀后，再加入150ul CH3OH:CH3CN＝1:1的溶液沉淀蛋白，涡旋1min后，15000r/min离心10min,取上清150ul进样测定。
5.根据权利要求4所述血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：乙酰胆碱的保留时间为3.43min。
6.根据权利要求4所述血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：用小檗碱抑制乙酰胆碱酯酶后在测定血浆中乙酰胆碱，最低检测限为0.5ng/ml。
7.根据权利要求4所述血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：该检测方法中，定量限为2ng/ml，线性范围为2-200ng/ml。
8.根据权利要求1所述的血浆中乙酰胆碱的浓度检测方法的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：步骤(1)所述胆碱酯酶抑制剂为石杉碱甲或毒扁豆碱。
CN201610846423.4A 2016-09-23 2016-09-23 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法 Pending CN106442835A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610846423.4A CN106442835A (zh) 2016-09-23 2016-09-23 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610846423.4A CN106442835A (zh) 2016-09-23 2016-09-23 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106442835A true CN106442835A (zh) 2017-02-22

Family

ID=58167115

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610846423.4A Pending CN106442835A (zh) 2016-09-23 2016-09-23 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106442835A (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4590166A (en) * 1983-03-11 1986-05-20 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Method for separating and measuring the amount of polar compounds and their metabolites in aqueous solutions
JPS61159161A (ja) * 1984-12-29 1986-07-18 Shimadzu Corp アセチルコリン分析装置
JPH09124513A (ja) * 1995-10-31 1997-05-13 Mitsubishi Pencil Co Ltd カテコールアミン類と第４級アミン類との分離用液体クロマトグラフィーカラム充填剤、その製造方法およびそれを用いた分離方法
CN103487545A (zh) * 2013-10-11 2014-01-01 安徽中医药大学 卡巴胆碱及其杂质含量的液相色谱检测方法
CN105891368A (zh) * 2016-05-10 2016-08-24 天津医科大学总医院 人外周血单个核细胞内乙酰胆碱含量的检测方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4590166A (en) * 1983-03-11 1986-05-20 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Method for separating and measuring the amount of polar compounds and their metabolites in aqueous solutions
JPS61159161A (ja) * 1984-12-29 1986-07-18 Shimadzu Corp アセチルコリン分析装置
JPH09124513A (ja) * 1995-10-31 1997-05-13 Mitsubishi Pencil Co Ltd カテコールアミン類と第４級アミン類との分離用液体クロマトグラフィーカラム充填剤、その製造方法およびそれを用いた分離方法
CN103487545A (zh) * 2013-10-11 2014-01-01 安徽中医药大学 卡巴胆碱及其杂质含量的液相色谱检测方法
CN105891368A (zh) * 2016-05-10 2016-08-24 天津医科大学总医院 人外周血单个核细胞内乙酰胆碱含量的检测方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHAO ZHANG ET AL: "Determination of non-neuronal acetylcholine in human peripheral blood mononuclear cells by use of hydrophilic interaction ultra-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
SUSANNE H. KIRSCH ET AL: "Quantification of acetylcholine, choline, betaine, and dimethylglycine in human plasma and urine using stable-isotope dilution ultra performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
余昌平: "盐酸小檗碱与胆碱酯酶互作的物理化学研究及其抗肿瘤作用效应研究", 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
潘峰 等: "《全国生物医药色谱及相关技术学术交流会（2012）会议手册》", 20 April 2012 *
鲁远君 等: "脑出血患者血浆去甲肾上腺素、乙酰胆碱与自主神经功能障碍的相关性研究", 《重庆医科大学学报》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mitrowska et al. Multiresidue method for the determination of nitroimidazoles and their hydroxy-metabolites in poultry muscle, plasma and egg by isotope dilution liquid chromatography–mass spectrometry
CN106990185B (zh) 一种同时测定血浆中六种酪氨酸激酶抑制剂浓度的方法
Cerkvenik-Flajs et al. Trace analysis of endectocides in milk by high performance liquid chromatography with fluorescence detection
CN113341012B (zh) 一种同时检测同型半胱氨酸代谢通路上多种代谢物的方法、试剂盒及其应用
Chimalakonda et al. Development and validation of a liquid-chromatography tandem mass spectrometry method to determine in vitro and in vivo histamine release
CN112505179B (zh) 一种测定同位素稀释超高效液相色谱质谱联用方法
CN111579679A (zh) 一种抗肿瘤药物检测试剂盒及其应用
Busch et al. A validated HPLC-MS/MS method for estimating the concentration of the ganglioside, GD2, in human plasma or serum
CN111579685A (zh) 一种检测血浆中抗凝血药物的试剂盒及其应用
Sato et al. Establishment of an analytical method for simultaneous quantitation of CDK4/6 inhibitors, aromatase inhibitors, and an estrogen receptor antagonist in human plasma using LC-ESI-MS/MS
CN113917049A (zh) 临床研究血浆样本中氯丙嗪及代谢物浓度的生物分析方法
CN113933419A (zh) 一种测定人全血中5种免疫抑制剂类药物浓度的方法
CN111812220A (zh) 一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法
Du et al. Establishment and validation of the LC-MS/MS method for the determination of lincomycin in human blood: Application to an allergy case in forensic science
CN111812217B (zh) 一种检测血浆中抗动脉粥样硬化药物浓度的方法
CN111551645B (zh) 一种硫酸羟氯喹有关物质的检测方法及其应用
Mitema et al. Development and validation of TOF/Q-TOF MS/MS, HPLC method and in vitro bio-strategy for aflatoxin mitigation
CN111579683A (zh) 超高效液相色谱串联质谱检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒
CN106442835A (zh) 血浆中乙酰胆碱的浓度的uplc‑ms/ms检测方法
Bu et al. Determination of piperazine in eggs using accelerated solvent extraction (ASE) and solid phase extraction (SPE) with high-performance liquid chromatography–fluorescence detection (HPLC-FLD) and pre-column derivatization with dansyl chloride
CN116500158A (zh) 血液样本抗癫痫类药物检测方法和试剂盒
CN113917060A (zh) 一种人血浆中紫杉醇的定量分析方法
Qiu et al. HPLC, quantitative NMR and HRMS spectroscopic data of nusbiarylins as a new class of antimicrobial agents
Fernández-Fernández et al. Development of an isotope dilution GC–MS procedure for the routine determination of creatinine in complex serum samples
CN113820424A (zh) 一种同时测定人血浆中14种抗抑郁药浓度的hplc-ms/ms方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170222

RJ01 Rejection of invention patent application after publication