CN106417905A - 一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法，包括如下步骤：S1.将去油的鱼肉加入复合酶，进行酶解；S2.将S1中经过酶解后的物质加入复合菌体进行半固态混合发酵；S1中，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶；S2中，所述复合菌体为分别将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌培养成种子液，再依次离心，分别将离心所获得的菌体混合后所得；所述复合酶的加入量为0.5~3%，酶解工艺为调节pH为5~6，酶解温度为45~55℃，酶解时间为40~180min。应用本发明方法转化鱼粉，工艺简单，并且鱼粉中小肽含量高，蛋白质利用率高。同时，发酵处理可使产品含有大量有益微生物以及复杂的代谢产物，有效提高了鱼粉的品质。

Description

一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法

技术领域

本发明属于养殖业技术领域，涉及一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法。

背景技术

鱼粉是动物饲料中重要的蛋白来源。但随着养殖业的不断发展，我国鱼粉供应存在巨大的缺口，需要大量进口。另外，技术和资金等原因也导致国产鱼粉质量参差不齐，与国外进口高档鱼粉相比，我国自产鱼粉普遍存在蛋白质含量相对较低、脂肪含量较高、灰分较高以及颜色较深等缺点。

鱼粉中鱼蛋白和鱼脂肪的含量是决定鱼粉质量的关键因素，鱼蛋白含量越高脂肪残留量越少，鱼粉的质量就越好。鲜鱼具有水分、油脂和大分子蛋白含量高的特点，而目前鱼粉生产多采用直接对鲜鱼进行加工的方式，虽然这种工艺比较简单且易于操作，但也严重影响了鱼粉的质量。另外，水分、油脂和大分子蛋白含量高容易导致鱼粉变质等现象的发生，也不利于鱼粉营养成分的吸收。

发明内容

本发明的目的在于根据现有技术中的不足，提供了一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法，包括如下步骤：

S1.将去油的鱼肉加入复合酶，进行酶解；

S2.将S1中经过酶解后的物质加入复合菌体进行半固态混合发酵；

S1中，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶；

S2中，所述复合菌体为分别将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌培养成种子液，再依次离心，分别将离心所获得的菌体混合后所得；

所述复合酶的加入量为0.5~3%，酶解工艺为调节pH为5~6，酶解温度为45~55℃，酶解时间为40~180min。

本发明利用酶解处理和微生物发酵处理能使大分子的动物蛋白成分转变为小分子的氨基酸和肽，这些成分具有很高的利用价值，能有效提高鱼粉的附加价值。

优选地，S1中酶解条件为调节pH至5~6，酶解温度45~55℃，酶解时间55~65mim。

优选地，S2中半固态发酵含水量为55~70%，复合菌体的接种量为3~10%，半固态发酵温度为25~35℃。

更优选地，S2中半固态发酵至pH为4.5~5。

优选地，按单酶酶活量计，S1中木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶的混合比为3:2:1。

优选地，按离心后所获得的菌体湿重计，S2中嗜酸乳杆菌菌体、枯草芽孢杆菌菌体和酿酒酵母菌菌体的混合比为1:1:1。

优选地，将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别进行活化，待上述3种菌体的菌数达到10⁸以上，再依次离心，混合离心后的菌体，得到混合菌体。

更优选地，所述复合菌体采用如下步骤制备：

S1. 分别将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌接入培养基中制成一级种子液；

S2. 取一级种子液继续培养，制成二级种子液；

S3. 分别取二级种子液，在3000-4000 r/min离心5~15分钟，收集活菌体，按质量比1:1:1混合嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌获得混合发酵用复合菌。

根据本发明提供的方法得到鱼粉，其小肽含量≥35%、胃蛋白酶消化率≥97%、鱼粉中益生菌数目≥10⁸。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

本发明应用本发明生产生物转化鱼粉，工艺简单，并且鱼粉中小肽含量高，蛋白质利用率高。同时，发酵处理可使产品含有大量有益微生物以及复杂的代谢产物，有效提高了鱼粉的品质。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。

实施例1：

本实施例提供的方法如下：

预处理——蒸煮——压榨——分离——酶解处理——浓缩——发酵处理——干燥粉碎。具体包括如下步骤：

（1）将原料鱼进行清洗，去除石头、沙子等异物后，送入切碎机切成鱼块；

（2）将鱼块送入蒸煮设备，通入高温蒸汽进行蒸煮30分钟；

（3）将蒸煮后的鱼块送入压榨机中进行压榨，分离鱼油和鱼肉，压榨饼经撕碎机撕碎后与去除鱼油的蒸煮液混合；

（4）调节pH至5.5，温度至50℃，按质量百分比为2%加入复合酶粉（复合酶粉由木瓜蛋白酶粉、中性蛋白酶粉和菠萝蛋白酶粉复配所得），酶解60分钟；

（5）调节含水量为60%，按接种量5%接入经过活化培养的混合菌体（混合菌体为嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌发酵，离心，混合所得），在30℃条件下半固态混合发酵至pH为4.5；

（6）将发酵后的鱼块进行干燥粉碎装袋，获得生物转化鱼粉成品。

步骤4中所用复合酶粉中复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，根据单酶酶活力单位进行复配，比例为3:2:1。

步骤5中所述的混合菌种发酵方法，其制种包括如下步骤：

（1）分别将活化好的嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌按5%的接种量接入MRS培养基、牛肉膏蛋白胨培养基和YPD培养基中制成一级种子液；

（2）取一级种子液按5%接种量分别接入MRS培养基、牛肉膏蛋白胨培养基和YPD培养基中，待上述3种菌体的菌数达到10⁸以上，制成二级种子液；（3）分别取二级种子液，4000 r/min离心10分钟，收集活菌体，按菌体湿重计，质量比1:1:1混合嗜酸乳杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液和酿酒酵母菌种子液获得混合发酵用菌体。

所述的按上述技术方法生产的生物转化鱼粉，其小肽含量为35.4%、胃蛋白酶消化率为98.6%、鱼粉中益生菌数目≥10⁸。

实施例2

一种应用酶解和发酵技术生产生物转化鱼粉的方法，包括如下步骤：

（1）将原料鱼进行清洗，去除石头、沙子等异物后，送入切碎机切成鱼块；

（2）将鱼块送入蒸煮设备，通入高温蒸汽进行蒸煮20分钟；

（3）将蒸煮后的鱼块送入压榨机中进行压榨，分离鱼油和鱼肉，压榨饼经撕碎机撕碎后与去除鱼油的蒸煮液混合；

（4）调节pH至5.5，温度至50℃，按添加量0.5%加入复合酶粉（复合酶粉由木瓜蛋白酶粉、中性蛋白酶粉和菠萝蛋白酶粉复配所得），酶解180分钟；

（5）调节含水量为70%，按接种量10%接入经过活化培养的混合菌体（混合菌体为嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌发酵，离心，混合所得），在30℃条件下半固态混合发酵至pH为5；（6）将发酵后的鱼块进行干燥粉碎装袋，获得生物转化鱼粉成品。

步骤4中所用复合酶粉中复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，并分别根据单酶酶活力单位进行复配，比例为3:2:1。

步骤5中所述的混合菌种发酵方法，其制种包括如下步骤：

（1）分别将活化好的按5%的接种量接入MRS培养基、牛肉膏蛋白胨培养基和YPD培养基中制成一级种子液；

（2）取一级种子液按5%接种量分别接入MRS培养基、牛肉膏蛋白胨培养基和YPD培养基中，待上述3种菌体的菌数达到10⁸以上，制成二级种子液；

（3）分别取二级种子液，3000 r/min离心15分钟，收集活菌体，按菌体湿重计，质量比1:1:1混合嗜酸乳杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液和酿酒酵母菌种子液获得混合发酵用菌种。

所述的按上述技术方法生产的生物转化鱼粉，其小肽含量为35.1%、胃蛋白酶消化率为98.3%、鱼粉中益生菌数目≥10⁸。

应用本发明生产生物转化鱼粉，工艺简单，并且鱼粉中小肽含量高，蛋白质利用率高。同时，发酵处理可使产品含有大量有益微生物以及复杂的代谢产物，有效提高了鱼粉的品质。

对比例1

方法同实施例1，不同的是不采用复合菌种，仅采用酿酒酵母菌进行发酵，其他均同实施例1进行处理。

对比例2

方法同实施例1，不同的是不采用复合酶，仅采用木瓜蛋白酶进行酶解处理，其他均同实施例1进行处理。

对比例3

方法同实施例1，不同的是复合酶为木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，其他均同实施例1进行处理。

对比例4

方法同实施例1，不同的是混合菌种中加入的菌种为为嗜酸乳杆菌和酿酒酵母菌，其他均同实施例1进行处理。

表1为对比例1~4的方法对鱼粉指标的影响：

表1

对比例编号	对比例1	对比例2	对比例3	对比例4
					胃蛋白酶消化率（%）	90.2%	92.8%	93.5%	91.3%
小肽含量（%）	13.8%	26.6%	27.3%	14.5%
					益生菌数目	106	108	108	106

从表1中对比例得出的数据来看，只有采用复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，混合菌种为嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌的组合才能实现最佳的处理效果，不仅小肽含量突出，且消化率高，益生菌产生数目多。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。

Claims (9)

1.一种应用酶解和发酵生产鱼粉的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.将去油的鱼肉加入复合酶，进行酶解；

S2.将S1中经过酶解后的物质加入复合菌体进行半固态混合发酵；

S1中，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶；

S2中，所述复合菌体为分别将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌培养成种子液，再依次离心，分别将离心所获得的菌体混合后所得；

所述复合酶的加入量为0.5~3%，酶解工艺为调节pH为5~6，酶解温度为45~55℃，酶解时间为40~180min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中酶解条件为调节pH至5~6，酶解温度45~55℃，酶解时间55~65mim。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S2中半固态发酵含水量为55~70%，复合菌体的接种量为3~10%，半固态发酵温度为25~35℃。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，S2中半固态发酵至pH为4.5~5。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，按单酶酶活量计，S1中木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶的混合比为3:2:1。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，按离心后所获得的菌体湿重计，S2中嗜酸乳杆菌菌体、枯草芽孢杆菌菌体和酿酒酵母菌菌体的混合比为1:1:1。

7.根据权利要求1或6所述的方法，其特征在于，将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别进行活化，待上述3种菌体的菌数达到10⁸以上，再依次离心，混合离心后的菌体，得到混合菌体。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述复合菌体具体包括如下步骤制成：

S1. 分别将嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌接入培养基中制成一级种子液；

S2. 取一级种子液继续培养，制成二级种子液；

S3. 分别取二级种子液，在3000-4000 r/min离心5~15分钟，收集活菌体，按质量比1:1:1混合嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌获得混合发酵用复合菌。

9.一种权利要求1至8任一所述的方法制备得到的鱼粉。