CN106389179A

CN106389179A - 竹荪孢子组合物在化妆品中的应用

Info

Publication number: CN106389179A
Application number: CN201610997163.0A
Authority: CN
Inventors: 林陈强; 林戎斌; 张慧; 陈济琛; 林新坚
Original assignee: Institute of Soil and Fertilizer Fujian Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Soil and Fertilizer Fujian Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2016-11-14
Filing date: 2016-11-14
Publication date: 2017-02-15

Abstract

本发明公开了一种竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，组合物主要以竹荪孢子粉和竹荪孢子粉提取物为主要成分，竹荪孢子粉占组合物总重量的 1%~50%，竹荪孢子粉提取物占组合物总重量的 0.1%~20%。竹荪孢子粉为洗脱，干燥，超微粉碎获得；竹荪孢子提取物为以溶剂提取破壁竹荪孢子，过滤或离心获得提取液，提取液浓缩成浸膏。将二者按一定比例，添加化妆品领域可接受的辅料制成化妆品。本发明的化妆品具有显著的肌肤增白作用，它能够有效地抑制体外酪氨酸酶的活性、抑制多巴的自身身氧化和加深。同时,它可以阻击自由基对皮肤细胞的侵害；可以有效抑制透明质酸酶的活性，以达到抗炎症和协同保湿的双重功效。

Description

竹荪孢子组合物在化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及化妆品领域，具体涉及竹荪孢子粉及其提取物在化妆品中的应用以及含有竹荪孢子粉及其提取物的化妆品组合物。

背景技术

皮肤生理上的表面状态、血流、水分、色素等各种各样的成分经过错综复杂的结合，决定了人体的肤色，在这一系列因素中最主要的是黑色素。黑色素的形成过程是：首先由酪氨酸作为底物在酪氨酸酶的作用下形成多巴，再转化为多巴醌，这一最初的反应被称为黑色素合成的速率控制阶段，其后多巴醌经过一系列的氧化异构及聚合反应最终形成黑色素。黑色素的合成处是黑色素小体，成熟的黑色素小体会沿着黑色素细胞伸出的树状突起的末梢向周围的角质细胞移行，被角质细胞获取，黑色素从皮肤的基底层被转移到角质层，进而使肤色变黑。

在美白类化妆品的开发中，为增白肤色或改善皮肤色素异常沉着，常添加各种美白活性原料。常用的有：酪氨酸酶抑制剂：①包括单酚与多酚类(氢醌、熊果苷、壬二酸)；②铜离子螯合剂(曲酸及其酯化物) ;③阻止酪氨酸酶向前黑素体转移的物质(葡萄糖胺类)；④改变前黑素体超微结构的物质(五癸酸)；⑤促进酪氨酸酶蛋白降解的物质(不饱和脂肪酸)；⑥竞争性酪氨酸酶抑制剂(氨甲环酸等) ;⑦其他类(甘草黄酮等)。非酪氨酸酶抑制剂，包括：①抗坏血酸及其衍生物；②角质溶解剂(α-羟酸类、维A酸类、水杨酸等)；③抑制黑素细胞增殖的物质(内皮素受体阻断剂)；④其他类(过氧化氢、山梨酸钾等) 。

近年来随着消费者对自身健康和安全的日益关注,相对于许多生化合成的化妆品功效原料,来源于天然且功效显著的原料则更受青睐。

竹荪是一种大型名贵的食用菌，被历代医药学家誉为“菌中皇后”，具有提高人体免疫力的功能。相关研究表明竹荪含有丰富的氨基酸，其中包括人体必须的8种氨基酸及13种非必需氨基酸，是食用菌中含氨基酸种类最多的一种。此外，竹荪中的有效成分，如竹荪三萜、竹荪多糖，有降低血压和体内胆固醇的作用，在抗肿瘤、抗凝血、抗炎症、降血糖方面都有一定的疗效。竹荪孢子粘附于竹荪菌盖上，就整个竹荪子实体而言，竹荪孢子占干重的9~13 %，相当于每生产3 Kg的商品干竹荪就会产生1 Kg的干竹荪孢子。根据相关报道，竹荪孢子含有丰富的不饱和脂肪酸和维生素等营养成分，且相关研究发现其提取物具有非常好的抗氧化和抗菌作用。但是，在竹荪的采摘过过程中，竹荪孢子一般都是和菌盖一起被直接废弃掉，造成巨大的资源浪费。竹荪孢子极为微小，约为2.5~4×0.5~2μm，孢子粉手感细腻，同时含有抗氧化活性成分。本发明提供一种竹荪孢子在化妆品中的应用，充分利用这部分未被开发的竹荪资源。

发明内容

经本发明人研究发现,竹荪孢子及其提取物具有卓越的美肤功效，尤其是在肌肤增白方面，它能够有效地抑制体外酪氨酸酶的活性、抑制多巴的自身身氧化和加深。同时,它可以阻击自由基对皮肤细胞的侵害；可以有效抑制透明质酸酶的活性，以达到抗炎症和协同保湿的双重功效。

因此，本发明的一个目的是提供竹荪孢子粉及其提取物在化妆品中的应用。

根据本发明，术语“竹荪孢子粉”是指通过任何适当方式从竹荪菌盖中分离获得并经离心干燥或喷雾干燥，超微粉碎，破壁率90% 以上，经灭菌处理后获得而得的竹荪孢子粉；“竹荪孢子提取物”是指从竹荪孢子粉中提取出的含有有效成分的提取物。

根据本发明的一个优选的实施方式，所述化妆品可以选自美白化妆品、抗衰老化妆品、抗炎症化妆品、保湿化妆品或其组合。

根据本发明的另一个目的，本发明提供一种化妆品组合物，所述组合物含有竹荪孢子粉、竹荪孢子粉提取物和化妆品领域可接受的辅料。

所述化妆品领域可按受的辅料可以选自：溶剂、增溶剂、防腐剂、抗氧剂、 pH调节剂、促渗剂、脂质体、保湿剂、增调剂、螯合剂、肤感调节剂、表面活性剂、乳化剂、推进/抛射剂、香精、色素，以及其他功效添加剂。

根据本发明的一个优选的实施方式，所述组合物为霜剂、乳液、膜剂、溶液剂、气雾或喷雾形式。更具体地说，所述组合物可以为洗面奶、护肤啫喱、护肤乳液、护肤霜、眼霜、面膜、气雾或喷雾形式。这些形式可通过本领域技术人员熟知的方法制备。

根据本发明的一个优选的实施方式，所述竹荪孢子粉占组合物总重量的 1%~50%，竹荪孢子粉提取物占所述组合物总重量的 0.1%~20%。

本发明所述竹荪孢子粉的制备方法：将竹荪孢子从菌盖洗脱后，制成孢子粉，超微粉碎使破壁率90% 以上，经灭菌处理后，得到竹荪孢子粉；

本发明所述竹荪孢子粉提取物的制备方法：取竹荪孢子粉适量，以适宜溶媒浸泡，以适宜的提取方法提取，离心或过滤得到澄清液体，任选经过浓缩/干燥步骤，制成浸膏或干粉形式。

所述适宜溶媒主要为水（包括蒸馏水、去离子水等）或有机溶剂（优选醇类和酯类溶剂，醇类溶剂包括乙醇和多元醇等，酯类溶剂包括乙酸乙酯等）；适宜的提取方法选自以下一种或几种：浸提、煎煮、回流和超临界。适宜的浓缩过程包括真空加热蒸发（加热温度40~90℃）、真空冷冻干燥、喷雾干燥等。

本发明所述竹荪孢子粉提取物的制备方法，优选的：取超微粉碎的竹荪孢子粉适量，加入提取罐内，加入20~30倍(w/v)有机溶剂，充分搅拌混匀，在45~60℃ 条件下保温浸提2~3 h，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次，合并滤液，滤液50℃真空浓缩至适量为A；滤渣加入20~30倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在60~80℃ 条件下保温浸提2 h，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次，合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃真空浓缩至适量为B；合并AB组份即为所得竹荪孢子粉提取物，提取物为浸膏或干粉形式。

本发明的显著优点：竹荪孢子及其提取物具有卓越的美肤功效，尤其是在肌肤增白方面，它能够有效地抑制体外酪氨酸酶的活性、抑制多巴的自身身氧化和加深。同时,它可以阻击自由基对皮肤细胞的侵害；可以有效抑制透明质酸酶的活性，以达到抗炎症和协同保湿的双重功效。

竹荪孢子粉提取物对DPPH· 均有清除作用，随着浓度的增加，清除率逐渐增高，表现出明显的量效关系，当浓度大于0.25 mg/mL时，清除率达到90% 以上。

竹荪孢子粉提取物浓度在100 ug/ml、250 ug/ml、500 ug/ml时，对H₂O₂氧化损伤PC12细胞具有保护作用。

附图说明

图1为竹荪孢子不同乙醇浓度提取物对DPPH·自由基的清除作用。

图2为不同竹荪孢子粉提取物浓度对PC12细胞的氧化损伤保护效果。

图3为细胞实验结果。

具体实施方式

本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。

实施例1

取超微破碎的竹荪孢子粉（破壁率90% 以上）适量，加入提取罐内，加入30倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在45℃ 条件下保温浸提3 h，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，50℃真空浓缩至适量，即为所得竹荪孢子提取物。

实施例2

取超微破碎的竹荪孢子粉（破壁率90% 以上）适量，加入提取罐内，加入30倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在60℃条件下保温浸提2 ，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃ 真空浓缩至适量，即为所得竹荪孢子提取物。

实施例3

取超微粉碎的竹荪孢子粉（破壁率90% 以上）适量，加入提取罐内，加入20倍(w/v)无水乙醇，充分搅拌混匀，在45℃ 条件下保温浸提3 ，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，滤液50℃真空浓缩至适量为A，滤渣加入20倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在60℃ 条件下保温浸提2 ，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃真空浓缩至适量为B；合并AB为即为所得竹荪孢子提取物。

实施例4

取超微粉碎的竹荪孢子粉（破壁率90% 以上）适量，加入提取罐内，加入20倍(w/v)无水乙醇，充分搅拌混匀，在50℃ 条件下保温浸提2 ，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，滤液50℃真空浓缩至适量为A，滤渣加入30倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在80℃ 条件下保温浸提2 ，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃真空浓缩至适量为B；合并AB为即为所得竹荪孢子提取物。

实施例5

取超微粉碎的竹荪孢子粉（破壁率90% 以上）适量，加入提取罐内，加入30倍(w/v) 50%乙醇，充分搅拌混匀，在50℃条件下保温浸提2 h，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次；合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃ 真空浓缩至适量，即为所得竹荪孢子提取物。

以下实施例中所使用竹荪孢子提取物均为实施例1中得到的竹荪孢子提取物；所使用竹荪孢子粉均为破壁率90% 以上、经灭菌处理后的竹荪孢子粉。实施例6-9中个组成单位均为重量百分比。

实施例6

面霜的制备

工艺：A相加热到80℃, 均质下慢慢加入到预先分散均匀并加热至80℃的 E相中，加入B相均质3 min，加入 C相调节 pH6~7，搅拌冷却到50℃ 加入D相，搅拌、冷却到35℃ 即得。

实施例7

眼霜的制备

工艺: 在30~50℃下将 A相搅拌直至清澈，在搅拌下缓慢加入 B相，边搅拌边加入C相。将料体均质搅拌均匀即得。

实施例8

面膜的制备

工艺：A相、 B相分别加热到80℃ 搅拌溶解均匀，均质下 B相加入到 A 相中，加完均质3 min,加入预先分散均匀的C相，搅拌冷却到50℃ 加入D相，搅拌、冷却到35℃ 即得。

以上6-8实施例中所述的竹荪孢子组合物均经过①稳定性测试：将料体分别在 -20℃、4℃、室温、48℃、循环(连续变換四个温度条件)、光照条件下放置12周，各料体的颜色和形态都保持稳定；②皮肤安全性测试：证实对皮肤无刺激，不会引发红斑、脱屑、剌痛及灼热等不良反应，可安心使用。

试验例1 DPPH白由基中和实验

一、实验原理

自由基是一类性质活泼、具有极强氧化能力的化学物质。机体中产生的大量自由基，也对皮肤造成损伤，加速衰老。DPPH·是一种稳定的长寿命自由基，其乙醇溶液呈深紫色，在517 nm附近有强吸收。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使 DPPH·光吸收減弱, DPPH·乙醇溶液退色程度与其接受的电子数呈定量关系，借此可评价物质清除自由基的能力。

二、实验方法

在样品管和样品对照管中各加入2.0 m1对应浓度的竹荪孢子粉提取物样品溶液(蒸馏水配制)，阴性对照管和空白对照管中以蒸馏水代替。样品管和阴性对照管中加入DPPH·(购自 Sigma公司，批号：115K1319)乙醇溶液0.5 m1(20 mg/100 mL)。补充蒸馏水至各管终体积均为4 mL，混匀，静置30 min后在517 nm处测定吸光值(Abs) 。

计算对DPPH白由基的清除率。

二、实验结果

不同溶剂的提取物对DPPH·的清除效果见图1。各提取物对DPPH·均有清除作用，随着样品浓度的增加，清除率逐渐增高，表现出明显的量效关系，当浓度大于0.25 mg/mL时，清除率达到90% 以上。

试验例2 竹荪孢子提取物对H₂O₂损伤PC12细胞的保护作用

一、实验原理

H₂O₂具有损伤PC12细胞的作用，使细胞凋亡。加入抗氧化剂后，可有效保护细胞。

二、实验方法

PC12细胞培养至70~80%，PBS清洗2~3遍，加胰酶1 ml，消化3 min，加培养基终止，1000r/min离心3 min，去上清，加培养基，吹打均匀，置96孔板培养，10000 个/孔，24 h后，加入梯度浓度的竹荪孢子粉提取物，受药2 h后，加入750 uM（终浓度）H₂O₂ ，损毁细胞24 h后，MTT法检测细胞存活率。

从图2可以看出，添加竹荪孢子粉提取物浓度在100 ug/ml、250 ug/ml、500 ug/ml时，PC12细胞存活量明显提高，与对照比达差异极显著水平。说明一定浓度的竹荪孢子提取物对H₂O₂氧化损伤PC12细胞具有保护作用，具体效果见图3。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims

1.一种竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述组合物由竹荪孢子粉、竹荪孢子粉提取物和辅料组成。

2.根据权利要求1所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，组合物中，竹荪孢子粉占组合物总重量的 1%~50%，竹荪孢子粉提取物占组合物总重量的 0.1%~20%。

3. 根据权利要求1或2所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述竹荪孢子粉的制备方法如下：将竹荪孢子从菌盖洗脱，200目过滤，滤液5000 r/min离心获得沉淀，去除上清液，沉淀物在50℃下干燥或真空冷冻干燥，超微破碎至破壁率达 90% 以上，经过辐射灭菌处理，制成破壁竹荪孢子粉。

4. 根据权利要求1或2所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述竹荪孢子粉提取物的制备方法如下：取超微粉碎的竹荪孢子粉适量，加入提取罐内，加入20~30倍(w/v)有机溶剂，充分搅拌混匀，在45~60℃ 条件下保温浸提2~3 h，间断性超声震荡15min，过滤，滤渣重复再提取1次，合并滤液，滤液50℃ 真空浓缩至适量为A；滤渣加入20~30倍(w/v)水，充分搅拌混匀，在60~80℃ 条件下保温浸提2 h，间断性超声震荡15 min，过滤，滤渣重复再提取1次，合并滤液，弃去滤渣，滤液50℃ 真空浓缩至适量为B；合并AB组份即为所得竹荪孢子粉提取物。

5.根据权利要求4所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述有机溶剂为醇类或酯类溶剂。

6.根据权利要求4所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述竹荪孢子粉提取物的形式为浸膏或干粉。

7.根据权利要求4所述的竹荪孢子组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述真空浓缩过程为真空加热蒸发、真空冷冻干燥或喷雾干燥。

8.根据权利要求1所述的竹荪孢子粉组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述化妆品的剂型为为霜剂、乳液、膜剂、溶液剂、气雾剂或喷雾剂。