CN106383156B - 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法 - Google Patents

一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106383156B
CN106383156B CN201610902707.0A CN201610902707A CN106383156B CN 106383156 B CN106383156 B CN 106383156B CN 201610902707 A CN201610902707 A CN 201610902707A CN 106383156 B CN106383156 B CN 106383156B
Authority
CN
China
Prior art keywords
electrode
solution
rtm
zearalenone
omco
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201610902707.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106383156A (zh
Inventor
戴宏
汪慧霞
高利红
林燕语
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujian Normal University
Original Assignee
Fujian Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Normal University filed Critical Fujian Normal University
Priority to CN201610902707.0A priority Critical patent/CN106383156B/zh
Publication of CN106383156A publication Critical patent/CN106383156A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106383156B publication Critical patent/CN106383156B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/38—Cleaning of electrodes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明公开一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法。该方法利用聚多巴胺敏化的金红石型TiO2介观晶体作为光电活性基底材料，并用于固定化玉米赤霉烯酮抗体；介孔四氧化三钴标记的玉米赤霉烯酮二抗作为信号探针，借助于该探针对基底材料的信号放大作用，制备一种基于夹心免疫识别模式的光电化学传感器，并应用于对玉米赤霉烯酮的定量检测。基于聚多巴胺的稳定性及优良导电性，其与RTM的复合材料能加快光生电子的转移速度并提高光电流信号;通过夹心免疫识别的过程，将具有竞争性捕光能力的OMCO引入到传感界面上。实现对玉米赤霉烯酮浓度在1×10‑6 ng/mL–20 ng/mL范围内的高灵敏检测。

Description

一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法
技术领域
本发明属于新型功能材料与生物传感检测技术领域，具体涉及一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法。
背景技术
玉米赤霉烯酮(Zearalenone)，又称F-2毒素，是玉米赤霉菌的代谢产物。其广泛分布于受污染的谷物及农副产品、奶制品中，尤其是玉米及其加工制品中。玉米赤霉烯酮具有生殖发育毒性、免疫毒性及强烈的致畸毒性等，也可对内分泌造成影响，并且可能诱发肿瘤。目前，检测玉米赤霉烯酮的生物测定方法主要有酶联免疫吸附试验、电化学和荧光光谱等。然而，这些方法的灵敏度的进一步增强及探索一个低背景信号，重现性好，宽的响应范围的传感平台仍然是玉米赤霉烯酮测定的迫切要求。
光电化学（PEC）检测，是基于光电化学过程和化学/生物识别过程建立起来的一种新的分析方法。该方法以光作为激发信号，以光电流作为检测信号，具有灵敏度高、响应快速、设备简单和易微型化等优点，为临床诊断、环境监测与食品安全等领域提供了一种强有力手段。光电化学分析使用光作为激发信号，检测的是电信号，通过采用不同形式的能量作为激发信号和检测信号，使激发和检测信号互不干扰，因而背景信号较低，可获得较高的灵敏度。光电材料的类型、性能与光电化学过程的实现有着直接且紧密的关系，光电材料本身的光电化学性质、制备方法、复合效果、形貌控制、电荷传导速率等对于光电化学过程的顺利实现有重要影响。
TiO2纳米材料因其独特的光催化活性、无毒性，优异的化学和物理稳定性，使其成为光催化和光电化学传感器的理想材料。二氧化钛的性能一般受晶型、晶粒大小、晶面、结晶度、比表面积、微结构等的影响。TiO2介观晶体是晶体亚单元有序排列构成的，相比于传统的TiO2单晶，TiO2介观晶体具有更加优良的太阳能转换和催化性能，能显著提高PEC性能。然而，TiO2禁带宽度较大，只能被紫外光激发，因此在可见光区光电转换效率较低。聚多巴胺（PDA）可以在无任何表面预处理的情况下通过在碱性水溶液中氧化聚合涂层在各种固体表面。而且，PDA有许多的苯醌（BQ）基团，BQ可作为电子受体接受从RTM导带中产生的光生电子，从而延缓载流子复合，提高RTM的阴极光电流。本发明通过一个简单的一步法合成金红石型介管晶体（RTM）并引入一个典型的敏化剂聚多巴胺来进一步提高RTM的光电转换效率。而具有竞争性捕光能力的介孔四氧化三钴（OMCO）及Ab2的引入，抗原与抗体特异性结合，形成空间位阻效应，将明显的降低光电流信号。光电流信号与玉米赤霉烯酮浓度在一定范围内呈线性，实现玉米赤霉烯酮的高灵敏检测。
发明内容
本发明的目的之一是基于聚多巴胺敏化的TiO2介观晶体的光电化学传感器的制备。
本发明的目的之二是利用生物功能化负载的介孔四氧化三钴材料对光电平台的高效信号猝灭作用，实现对玉米赤霉烯酮的高灵敏检测。
为实现发明目的，本发明采用如下技术方案：
(1)GCE的预处理：GCE首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；
（2）PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极的制备：滴加4μL浓度为3mg/ml 金红石型TiO2介观晶体（RTM）悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温,将电极浸入0.5 mg/ml聚多巴胺（PDA）溶液中30 min，室温条件下晾干,即得到PDA/RTM 修饰电极；将修饰电极于5 μL浓度为2 mg/mL的玉米赤霉烯酮抗体（Ab1）溶液中于37°C下孵育1h，随后使用pH 7.5的磷酸缓冲溶液去除多余的Ab1，再将电极浸入20μL 浓度为1.0 wt.%的BSA 1 h，封闭电极表面上非特异性活性位点，冲去表面残余液后，即得到PDA/RTM/ Ab1修饰电极；将电极浸入5 μL不同浓度的玉米赤霉烯酮（ZEN）标准溶液中于37°C下孵育1h；用pH 7.5的磷酸缓冲溶液冲洗电极表面并在室温条件下自然晾干，得到PDA/RTM/ Ab1/ZEN修饰电极；最后，在5 μL特定浓度的Ab2@OMCO溶液中孵育，洗去残余液后即得到PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极；
（3）玉米赤霉烯酮的检测：采用三电极体系进行测定，以PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极，利用光电化学工作站进行检测，设置电压为-0.1V，每隔10s进行开关灯，氙灯发射的单色光激发光源使用前由单色仪过滤；在pH 7.5的 PBS缓冲溶液中，通过光电化学工作站进行检测1×10-6 ng/mL–20ng/mL一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮标准溶液，通过记录开关灯前后产生的不同电流信号，绘制工作曲线；待测样品溶液代替玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测，检测的结果可通过工作曲线查得。
上述金红石型TiO2介观晶体（RTM）材料的制备：
0.5 g十二烷基苯磺酸钠（SDBS）溶解在25 mL 2.2 mol/mL HNO3溶液中，搅拌15分钟。然后加入0.5 mL异丙醇钛（IV），在80°C下搅拌48 h。随后，所得产物经离心、用超纯水、乙醇洗涤4-5次后，在60 °C下干燥过夜。上述产物在400 °C空气中煅烧1h以去除残留的有机物，制得金红石型TiO2介观晶体。
上述特定浓度的Ab2@OMCO溶液的制备：
1）介孔四氧化三钴(OMCO)的制备：将3 g KIT-6分子筛加入30 mL 浓度为0.84mol/L 的Co（NO3）2•6H2O的乙醇溶液中, 在80°C下蒸发至干，重复上述步骤；最后，在450°C下对材料进行煅烧6 h，KIT-6硬模板用2 mol/L NaOH溶液除去，离心分离除去硅酸钠，样品在100°C下干燥即得到3d-Co3O4粉末。2）介孔四氧化三钴标记二抗(Ab2@OMCO)溶液的制备：10μL浓度为10 mg/mL OMCO分散在50μl 浓度为1.0 wt.%的（3-氨基丙基）三乙氧基硅烷(APTES)溶液，搅拌30 min并超声4小时后，8000转速下离心20 min，获得的沉淀重新分散在超纯水中获得APTES功能化的OMCO；在上述溶液中加入10μL浓度为5.0%戊二醛（GLD）于4°C冰箱中保持1 h；然后，加入20μL浓度为10 mg/ml的玉米赤霉烯酮二抗（Ab2）溶液，混合溶液在4°C条件下轻轻摇动2 h；离心分离表面物理吸附的Ab2，在10μL浓度为wt. 1.0%BSA溶液中于4°C下孵育1h；离心分离，再用PBS溶液洗涤三次；最后，所制备的Ab2@OMCO重新分散到pH 7.5的100μL的磷酸缓冲溶液中。
本发明所述的一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学传感器，包括工作电极、铂丝电极为对电极和Ag/ AgCl为参比电极，其特征在于，所述的工作电极采用PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极，其由下述步骤的方法制备而成的，，1）玻碳电极的抛光：玻碳电极首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；2）PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极的制备：滴加4μL浓度为3mg/ml 金红石型TiO2介观晶体（RTM）悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温,将电极浸入0.5 mg/ml PDA溶液中30 min，室温条件下晾干,即得到PDA/RTM 修饰电极；将修饰电极于5 μL浓度为2 mg/mL的玉米赤霉烯酮抗体（Ab1）溶液中于37°C下孵育1h，随后使用pH 7.5的磷酸缓冲溶液去除多余的Ab1，再将电极浸入20μL 浓度为1.0 wt.%的BSA 1 h，封闭电极表面上非特异性活性位点，冲去表面残余液后，即得到PDA/RTM/ Ab1修饰电极；将电极浸入5 μL不同浓度的ZEN标准溶液中于37°C下孵育1h；用pH 7.5的磷酸缓冲溶液冲洗电极表面并在室温条件下自然晾干，得到PDA/RTM/ Ab1/ZEN修饰电极；最后，在5 μL特定浓度的Ab2@OMCO溶液中孵育，洗去残余液后即得到PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极；
本发明所述的一种基于TiO2介观晶体的光电化学传感器用于玉米赤霉烯酮的检测方法，其特征在于，步骤如下：1）采用三电极体系进行测定，以PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极，利用光电化学工作站进行检测，设置电压为-0.1V，每隔10s进行开关灯，氙灯发射的单色光激发光源使用前由单色仪过滤；2）在pH 7.5的 PBS缓冲溶液中，通过光电化学工作站进行检测1×10-6 ng/mL–20 ng/mL一系列不同溶度的玉米赤霉烯酮标准溶液，通过记录开关灯前后产生的不同电流信号，绘制工作曲线；待测样品溶液代替玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测，检测的结果可通过工作曲线查得。
本发明的显著优点为：
(1)以聚多巴胺敏化的金红石型TiO2介观晶体为光电活性基底材料，金红石型TiO2介观晶体具有较高的孔隙率，聚多巴胺的引入增强了电子的传输速度，与单独的传统TiO2单晶材料相比，有效提高光电转换效率及传感器的灵敏度。
(2)利用介孔四氧化三钴标记二抗作为生物探针，提高了检测方法的特异性，对基底材料有信号放大作用，进一步提高该传感器的灵敏度。
(3)抗原与抗体特异性结合形成空间位阻效应，制得的传感器实现了对玉米赤霉烯酮的超灵敏检测。
附图说明
图1为本发明所述的基于TiO2介管晶体的光电化学传感器的制备过程示意图。
图2A为RTM的SEM图。
图2B及图2B插图为RTM的TEM图及SEAD图。
图2C为OMCO的SEM图。
图2D为OMCO的TEM图。
图3A为不同浓度1×10-6 ng/mL–20 ng/mL（a-h）玉米赤霉烯酮标准溶液，传感电极的光电流响应图。
图3B为传感电极的光电流响应与玉米赤霉烯酮标准溶液浓度的线性关系图。
具体实施方式
本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。
实施例1
一种基于TiO2介管晶体的光电化学传感器的制备方法(如图1所示)：
（1）玻碳电极的预处理：玻碳电极首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；
（2）滴加4μL浓度为3 mg/ml RTM悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温；
（3）将电极浸入0.5 mg/ml PDA溶液中30 min，室温条件下晾干；
（4）将修饰电极于5 μLAb1(2 mg/m)溶液中于37°C下孵育1h，接着用pH 7.5的磷酸缓冲溶液洗去多余的Ab1再将电极浸入20μL 浓度为1.0 wt.%的BSA 1 h，封闭电极表面上非特异性活性位点；冲去表面残余液后，将电极浸入5 μL不同浓度的ZEN标准溶液中于37°C下孵育1h；用pH 7.5的磷酸缓冲溶液冲洗电极表面并在室温条件下自然晾干；
（5）最后，在5 μL特定浓度的Ab2@OMCO溶液中孵育，洗去残余液后即得RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极。
实施例2
金红石型TiO2介观晶体（RTM）材料的制备：
0.5 g十二烷基苯磺酸钠（SDBS）溶解在25 mL 2.2 mol/ml HNO3溶液中，搅拌15分钟。然后加入0.5 mL异丙醇钛（IV），在80 °C下搅拌48 h。随后，所得产物经离心、用超纯水、乙醇洗涤4-5次后，在60 °C下干燥过夜。上述产物在400 °C 空气中煅烧1h以去除残留的有机物，制得金红石型TiO2介观晶体。RTM的电子发射扫描电子显微镜（SEM）图，如图2 A所示，RTAM为90-130 nm大小的多孔结构。RTM的透射电镜（TEM）图及选区电子衍射（SAED）图，如图2 B及图2B中的插图所示，表明金红石型TiO2介晶的形成。
实施例3
介孔四氧化三钴(OMCO)溶液的制备：
介孔四氧化三钴(OMCO)的制备：将3 g KIT-6分子筛加入30 mL 浓度为0.84 mol/L 的Co（NO3）2•6H2O的乙醇溶液中, 在80 °C下蒸发至干。重复上述步骤。最后，在450 °C下对材料进行煅烧6 h。KIT-6硬模板用2 mol/L NaOH溶液除去，离心分离除去硅酸钠，样品在100 °C下干燥即得到3d-Co3O4粉末。OMCO的电子发射扫描电子显微镜（SEM）图，如图2 C所示，表明OMCO具有周期性的介孔网状结构。OMCO的透射电镜（TEM）图，如图2D所示，表明OMCO具有规则有序的介孔结构，能固定更多的生物大分子，使其能有效的提高PEC生物传感器的灵敏度。
介孔四氧化三钴标记二抗(Ab2@OMCO)溶液的制备：
10μL浓度为10 mg/ml OMCO分散在50μl 浓度为1.0 wt.%的（3-氨基丙基）三乙氧基硅烷(APTES)溶液，搅拌30 min并超声4小时后，8000转速下离心20 min，获得的沉淀重新分散在超纯水中获得APTES功能化的OMCO；在上述溶液中加入10μ浓度为5.0%的GLD于4°C冰箱中保持1 h；然后，加入20μL浓度为10 mg/ml的玉米赤霉烯酮二抗（Ab2）溶液，混合溶液在4°C条件下轻轻摇动2 h；离心分离表面物理吸附的Ab2，在10μL浓度为1.0 wt. % BSA溶液中于4°C下孵育1h；离心分离，再用PBS溶液洗涤三次；最后，所制备的Ab2@OMCO重新分散到pH 7.5的100μL的磷酸缓冲溶液中。
实施例4
一种基于TiO2介管晶体的光电化学传感器用于玉米赤霉烯酮的检测方法，步骤如下：
（1）采用三电极体系进行测定，以RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极，利用光电化学工作站进行检测，设置电压为-0.1V，每隔10s进行开关灯，氙灯发射的单色光激发光源使用前由单色仪过滤；；
（2）在pH 7.5的 PBS缓冲溶液中，通过光电化学工作站进行检测1×10-6 ng/mL–20ng/mL一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮标准溶液，通过记录开关灯前后产生的不同电流信号，绘制工作曲线。图3 A为不同浓度1×10-6 ng/mL–20 ng/mL（a-i）玉米赤霉烯酮标准溶液，传感电极的光电流响应。图3 B为传感电极的光电流响应与玉米赤霉烯酮标准溶液浓度的线性关系图。
将待测样品溶液代替玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测，检测的结果可通过工作曲线查得。

Claims (4)

1.一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）玻碳电极（GCE）的预处理：GCE首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；
（2）PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极的制备：滴加4μL浓度为3mg/ml 的金红石型TiO2介观晶体（RTM）悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温，将电极浸入0.5 mg/ml聚多巴胺 (PDA)溶液中30 min，室温条件下晾干,即得到PDA/RTM 修饰电极；将修饰电极于5 μL浓度为2 mg/mL 的玉米赤霉烯酮抗体Ab1溶液中37°C下孵育1h，随后使用pH 7.5的磷酸缓冲溶液去除多余的玉米赤霉烯酮抗体Ab1，再将电极浸入20μL 浓度为1.0wt.%的BSA 1 h，封闭电极表面上非特异性活性位点，冲去表面残余液后，即得到PDA/RTM/Ab1修饰电极；将电极浸入5 μL不同浓度的玉米赤霉烯酮（ZEN）标准溶液中于37°C下孵育1h；用pH 7.5的磷酸缓冲溶液冲洗电极表面并在室温条件下自然晾干，得到PDA/RTM/ Ab1/ZEN修饰电极；最后，在5 μL特定浓度的Ab2@OMCO溶液中孵育，洗去残余液后即得到PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极；
（3）玉米赤霉烯酮的检测：采用三电极体系进行测定，以PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极，利用光电化学工作站进行检测，设置电压为-0.1V，每隔10s进行开关灯，氙灯发射的单色光激发光源使用前由单色仪过滤；在pH 7.5的 PBS缓冲溶液中，通过光电化学工作站进行检测1×10-6 ng/mL–20 ng/mL一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮标准溶液，通过记录开关灯前后产生的不同电流信号，绘制工作曲线；待测样品溶液代替玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测，检测的结果可通过工作曲线查得。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的金红石型TiO2介观晶体（RTM）材料由下述方法制备的：0.5 g十二烷基苯磺酸钠（SDBS）溶解在25 mL 2.2 mol/mL HNO3溶液中，搅拌15分钟；然后加入0.5mL异丙醇钛（IV），在80°C下搅拌48 h；随后，所得产物经离心、用超纯水、乙醇洗涤4-5次后，在60°C下干燥过夜；上述产物在400 °C 空气中煅烧1h以去除残留的有机物，制得金红石型TiO2介观晶体（RTM）。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的特定浓度的Ab2@OMCO溶液由下述方法制备的：
(1)介孔四氧化三钴(OMCO)的制备：将3 g KIT-6分子筛加入30mL浓度为0.84mol/L的Co（NO3）2•6H2O的乙醇溶液中, 在80°C下蒸发至干，重复上述步骤；最后，在450°C下对材料进行煅烧6 h，KIT-6硬模板用2 mol/L NaOH溶液除去，离心分离除去硅酸钠，样品在100°C下干燥即得到介孔四氧化三钴；
(2)介孔四氧化三钴标记二抗(Ab2@OMCO)溶液的制备：10μL浓度为10 mg/ml OMCO分散在50μL 浓度为1.0 wt.%的（3-氨基丙基）三乙氧基硅烷(APTES)溶液，搅拌30 min并超声4h后，8000转速下离心20 min，获得的沉淀重新分散在超纯水中获得APTES功能化的OMCO；在上述溶液中加入10μL浓度为5.0 wt.%戊二醛（GLD）于4°C冰箱中保持1 h；然后，加入20μL浓度为10 mg/ml的玉米赤霉烯酮二抗（Ab2）溶液，混合溶液在4°C条件下轻轻摇动2 h；离心分离表面物理吸附的Ab2，在10μL浓度为1.0 wt.%的BSA溶液中4°C下孵育1h；离心分离，再用PBS溶液洗涤三次；最后，所制备的Ab2@OMCO重新分散到pH 7.5的100μL的磷酸缓冲溶液中。
4.一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学传感器，包括工作电极、铂丝电极为对电极和Ag/ AgCl为参比电极，其特征在于，所述的工作电极采用PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极，其由下述步骤的方法制备而成的1）玻碳电极的抛光：玻碳电极首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；2）PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极的制备：滴加4μL浓度为3mg/ml RTM悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温,将电极浸入0.5 mg/ml PDA溶液中30 min，室温条件下晾干,即得到PDA/RTM 修饰电极；将修饰电极于5 μL浓度为2 mg/mL 的Ab1溶液中于37°C下孵育1h，随后使用pH 7.5的磷酸缓冲溶液去除多余的Ab1，再将电极浸入20μL 浓度为1.0 wt.%的BSA 1 h，封闭电极表面上非特异性活性位点，冲去表面残余液后，即得到PDA/RTM/ Ab1修饰电极；将电极浸入5μL不同浓度的ZEN标准溶液中于37°C下孵育1h；用pH 7.5的磷酸缓冲溶液冲洗电极表面并在室温条件下自然晾干，得到PDA/RTM/ Ab1/ZEN修饰电极；最后，在5 μL特定浓度的Ab2@OMCO溶液中孵育，洗去残余液后即得到PDA/RTM/Ab1/ZEN/Ab2@OMCO修饰电极。
CN201610902707.0A 2016-10-16 2016-10-16 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法 Expired - Fee Related CN106383156B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610902707.0A CN106383156B (zh) 2016-10-16 2016-10-16 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610902707.0A CN106383156B (zh) 2016-10-16 2016-10-16 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106383156A CN106383156A (zh) 2017-02-08
CN106383156B true CN106383156B (zh) 2018-08-24

Family

ID=57958718

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610902707.0A Expired - Fee Related CN106383156B (zh) 2016-10-16 2016-10-16 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106383156B (zh)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107589166B (zh) * 2017-09-07 2019-07-02 漳州出入境检验检疫局综合技术服务中心 一种基于TiO2介观晶体的免标记型玉米赤霉烯酮光电化学检测方法和传感器
CN107748190B (zh) * 2017-12-06 2019-05-28 福建师范大学 一种玉米赤霉烯酮的免标记型光电化学传感器的制备方法
CN108802015B (zh) * 2018-06-13 2020-08-21 福建省妇幼保健院 基于肽传感器的玉米赤霉烯酮电化学发光传感器的制备
CN109884319B (zh) * 2019-03-21 2022-05-10 福建师范大学 一种卵巢癌肿瘤标记物的双模式免疫分析方法
CN109975375B (zh) * 2019-04-11 2021-07-02 福建师范大学 一种基于信号增强型多聚体功能化金红石相二氧化钛介晶的玉米赤霉烯酮检测方法
CN110244061B (zh) * 2019-07-17 2022-09-27 福建师范大学 一种基于螺旋碳纳米管光热效应的玉米赤霉烯酮多通道信号检测免疫分析方法
CN110488021B (zh) * 2019-08-21 2023-06-13 浙江理工大学 一种基于聚多巴胺-二氧化钛复合材料修饰玻碳电极的丝素蛋白电化学免疫传感器
CN111077201B (zh) * 2019-12-23 2022-03-22 江苏大学 一种监测玉米赤霉烯酮的光电化学适配体传感器的制备方法
CN117567426B (zh) * 2024-01-19 2024-04-23 寿光金远东变性淀粉有限公司 一种丙交酯生产方法及装置

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103149259A (zh) * 2013-02-20 2013-06-12 华东师范大学 AChE/Ag-N/F/TiO2NTs光电化学生物传感器及其制备方法和应用
CN105572197A (zh) * 2016-02-25 2016-05-11 济南大学 一种基于磁性纳米光敏材料的光电化学雌二醇传感器的制备方法及应用
CN105628758A (zh) * 2016-02-25 2016-06-01 济南大学 一种基于二维纳米光敏材料的光电化学对硫磷传感器的制备方法及应用
CN105675689A (zh) * 2016-03-16 2016-06-15 济南大学 一种基于硫化钼复合材料构建的过氧化氢无酶传感器的制备方法及应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7090757B2 (en) * 2002-02-15 2006-08-15 Ut-Battelle Llc Photoelectrochemical molecular comb

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103149259A (zh) * 2013-02-20 2013-06-12 华东师范大学 AChE/Ag-N/F/TiO2NTs光电化学生物传感器及其制备方法和应用
CN105572197A (zh) * 2016-02-25 2016-05-11 济南大学 一种基于磁性纳米光敏材料的光电化学雌二醇传感器的制备方法及应用
CN105628758A (zh) * 2016-02-25 2016-06-01 济南大学 一种基于二维纳米光敏材料的光电化学对硫磷传感器的制备方法及应用
CN105675689A (zh) * 2016-03-16 2016-06-15 济南大学 一种基于硫化钼复合材料构建的过氧化氢无酶传感器的制备方法及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
The photoelectrochemical exploration of multifunctional TiO<sub>2</sub> mesocrystals and its enzyme-assisted biosensing application;Hong Dai et al.;《Biosensors and Bioelectronics》;20150427;第72卷;18-24 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106383156A (zh) 2017-02-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106383156B (zh) 一种基于TiO2介观晶体的玉米赤霉烯酮光电化学检测方法
CN107748190B (zh) 一种玉米赤霉烯酮的免标记型光电化学传感器的制备方法
CN106290514B (zh) 一种基于硅酞菁功能化的TiO2介观晶体的黄曲霉毒素光电化学检测方法
CN107589166B (zh) 一种基于TiO2介观晶体的免标记型玉米赤霉烯酮光电化学检测方法和传感器
CN106290528B (zh) 一种基于TiO2介观晶体的胰蛋白酶光电化学检测方法
CN110320260B (zh) 基于MXenes和黑磷量子点增强的外泌体电致化学发光传感器
Karaman et al. Sensitive sandwich-type electrochemical SARS-CoV‑2 nucleocapsid protein immunosensor
CN105717180B (zh) 一种基于二维纳米复合材料的光电化学黄曲霉毒素生物传感器的制备方法及应用
CN108020587A (zh) 双重信号放大作用的牛奶中金黄色葡萄球菌的检测方法
CN110220957B (zh) 基于NiFe2O4纳米管的异鲁米诺全功能探针的双模式电致化学发光-温度免疫传感器
CN109115751B (zh) 针对呕吐毒素的TiO2-B整合型免过氧化氢电致化学发光传感器的构建
CN106526159A (zh) 一种基于TiO2介晶纳米材料的双响应夹心型免疫传感器的制备方法及应用
CN113588752B (zh) 一种电致化学发光适配体传感器的制备方法及应用
CN109975375B (zh) 一种基于信号增强型多聚体功能化金红石相二氧化钛介晶的玉米赤霉烯酮检测方法
CN108519412A (zh) 基于类石墨烯碳三氮四纳米片的电致化学发光传感器构建方法及其Hg2+检测应用
CN109085158B (zh) 一种用于癌细胞及h2o2检测的纸基传感器的构建
CN106370858B (zh) 一种基于电位寻址模式的双肿瘤标志物的光电检测方法
CN108802391A (zh) 一种基于TiO2介晶诱导的共振能量转移型电化学发光及对卵巢癌标记物的免疫传感方法
Yang et al. A novel photoelectrochemical sensor for the detection of α-fetoprotein based on a mesoporous TiO 2–CdS QD composite film
Balasubramanian et al. Si-based sensor for virus detection
CN110530842B (zh) Fe3O4@SiO2/Au NPs颗粒的制备方法及其应用
CN101498719A (zh) 酶功能化纳米免疫标记物的制备方法及其应用
CN106124585B (zh) 一种基于PPy/CdS/g‑C3N4光电适配体传感器的制备方法及应用
CN109884319A (zh) 一种卵巢癌肿瘤标记物的双模式免疫分析方法
CN103616357A (zh) 一种可视化生物传感器件及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20180824

Termination date: 20211016