CN106366014B - 一种油菜花碱及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种油菜花碱及其应用，属于食品、保健品和医药领域。本发明利用乙醇溶液从油菜花粉或油菜蜂花粉中提取油菜花碱，利用大孔树脂、MCI柱层析和ODS‑C18反相柱层析进行分离得到油菜花碱纯品。经质谱、1HNMR谱、13CNMR谱、135dept谱、碳氢相关谱(HMQC)和碳氢远程相关谱(HMBC)解析确定了该化合物为C25H31O4N3，结构为：利用角叉菜胶所致大鼠前列腺炎症的模型进行了体内抗前列腺炎症试验，表明油菜花碱具有抑制前列腺炎的作用，本发明提供的油菜花碱能够有效用于制备抗前列腺炎的药物中以及食品、保健食品中。

Description

一种油菜花碱及其应用
技术领域
本发明涉及一种油菜花碱及其应用，属于食品、保健品和医药领域。
背景技术
油菜花粉是油料作物油菜(Brassica campestris L.)的花粉，油菜蜂花粉(beepollen)是蜜蜂从油菜植物的花药内采集的花粉球。油菜花粉和油菜蜂花粉具有多种生理功能，特别是对前列腺增生和前列腺炎具有显著的治疗作用。如果能够从油菜花粉中提取出其功效成分，并鉴定出其结构，便有希望可以用来制备药物，或者通过化学方法合成该物质制备药物，然而目前有关油菜花粉和油菜蜂花粉中的化学成分的报道中，大都是从油菜花粉中提取得到具有上述功效的粗提物，仍不清楚抑制前列腺增生、抗前列腺炎的功能成分是何种物质，更不能得到其功效成分的化学结构。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种油菜花碱，该化合物具有新的化学结构，首次从油菜花粉和油菜蜂花粉中分离得到，命名为油菜花碱，其分子式为C25H31O4N3，结构式如式(1)所示：
所述油菜花碱为黄色无定形粉末，熔点161～162℃，分子质量[M+1]为438.2397(计算值为438.2393)，具有抗前列腺炎症的功能。
本发明的另外一个目的是提供一种所述油菜花碱的提取制备方法，通过以下步骤实现：
(1)提取：将油菜花粉或油菜蜂花粉粉碎，过40目筛，取筛下粉体，用60％～90％体积浓度的乙醇溶液提取，过滤，取滤液，重复提取一次，合并乙醇提取液，减压浓缩回收乙醇，得流体浸膏；以有机溶剂对流体浸膏脱脂；脱脂后溶于水中，过大孔树脂柱，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，并减压回收乙醇，得洗脱物；(2)分离：将所得洗脱物进行柱层析，用乙醇水溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品。
步骤(1)所述提取是用10倍体积分数为60％～90％的乙醇水溶液于室温下提取2～4小时，油菜花粉质量kg与乙醇溶液体积L的比例为1：8-10。
步骤(1)所述的脱脂是用正己烷或石油醚脱脂。
步骤(1)所述大孔树脂为AB-8或X-5。
步骤(1)中所述的用乙醇溶液洗脱是用15％、45％、90％体积浓度的乙醇溶液分别20L、40L、30L进行梯度洗脱或者用30％、45％、60％体积浓度的乙醇溶液分别20L、40L、30L进行梯度洗脱，所述的收集洗脱液是收集以45％的乙醇水溶液洗脱所得洗脱液。
步骤(2)所述的柱层析是先经MCI柱层析，用体积分数为15％～90％的乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱洗脱液，再经ODS-C18反相柱层析，用体积分数为20％～60％乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品。
本发明的有益效果在于：
本发明提供了一种新的化合物油菜花碱，该化合物首次从油菜花粉和油菜蜂花粉中分离到，具有抗前列腺炎症的作用，在体内抗前列腺炎症试验中，当油菜花碱剂量400mg/kg时，大鼠前列腺湿重为0.8736g、前列腺指数为0.2415％、IL-8为61.160pg/mL、脾脏指数为0.166％，具有显著的抑制作用。本发明提供的提取制备油菜花碱的方法，反应条件温和，不含有毒有害试剂，操作简单。
附图说明
图1：油菜花碱的HREI-MS谱图
图2：油菜花碱的13C NMR谱图
图3：油菜花碱的135dept谱图
图4：油菜花碱的1H NMR谱图
具体实施方式
实施例1
取5kg油菜蜂花粉，粉碎，过40目筛，取筛下粉体，筛上物再次粉碎过40目筛，取筛下粉体，将筛下粉体置于50升提取罐中，加40升体积分数为80％的乙醇水溶液，室温下提取3小时，过滤，取滤液，滤渣再重复提取二次，合并得滤液115升，减压浓缩至6升，倒入萃取罐中，加入6升正己烷脱脂，60r/min搅拌40分钟，再静置5小时，分离出正己烷相，再重复脱脂一次，取二次脱脂后的样品加去离子水6升，在50℃条件下开盖搅拌40分钟挥发残留的正己烷，然后过大孔树脂柱AB-8(10×150cm)柱，先用20升体积分数为15％乙醇的水溶液洗脱，然后用40升体积分数为45％的乙醇水溶液洗脱，最后用30升体积分数为90％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为45％乙醇水溶液洗脱液并减压回收乙醇，得浓缩物3升。
分离：将3升浓缩物上MCI层析柱(5×150cm)，依次使用体积分数为15％、50％、90％的乙醇水溶液各5升进行梯度洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱的洗脱液，浓缩后 再经ODS-C18反相柱(5×100cm)层析，用体积分数为50％的乙醇水溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品31克。
实施例2油菜花碱结构鉴定
HREI-MS给出分子质量[M+1]＝438.2397(计算值为438.2393)，1H和13C核磁共振数据见表1。
表1.油菜花碱的1H和13C核磁共振数据
1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)谱图所示，δ6.78，7.39，7.30处应有二个AA'BB'体系的质子信号，δ6.49，6.55，7.31，7.34处各有1个质子信号，为烯氢质子信号，J＝11和11.5表明化合物中存在二个顺式双键。δ1.48～δ3.25为饱和碳上的质子或与杂原子相连的质子信号。13C-NMR谱图可见δ166.0，166.4处为羰基碳信号，该羰基连接在p-π共轭体系中。δ159.4，159.3为苯环上的连氧碳信号，δ116.2，129.4，129.6为苯环AA'BB'体系碳信号，与1H-NMR谱数据一致。δ47.2，45.5，38.1，36.3为连氮的碳信号。综上分析，再结合碳氢相关谱(HMQC)，碳氢远程相关谱(HMBC)确定该化合物的结构如式(1)所示。
实施例3油菜花碱抗前列腺炎症活性评估
利用角叉菜胶所致大鼠前列腺炎症的模型对油菜花碱进行了体内抗前列腺炎症试验，通过前列腺湿重、前列腺指数、IL-8和脾脏指数四指标来检测油菜花碱对前列腺炎症的作用，结果如表2所示。
表2.油菜花碱对角叉菜胶所致大鼠前列腺炎症的抑制效果
n＝10；*表示与模型组相比有明显差异，P<0.05；**表示与模型组相比有非常明显差异，P<0.01
以上结果显示，模型组前列腺湿重和前列腺指数显著增加(P<0.01)，可以看出前列腺组织因为炎症反应，大量炎性细胞的浸润水肿，继而发生器质性改变，质量增加。与模型组相比，油菜花碱在200mg/kg剂量时前列腺湿重、前列腺指数、IL-8和脾脏指数四指标有显著的抑制作用，在400mg/kg剂量时四个指标有非常显著的抑制作用。表明油菜花碱具有抑制前列腺炎症的作用。
实施例4
取5kg油菜蜂花粉，粉碎，过40目筛，取筛下粉体，筛上物再次粉碎过40目筛，取筛下粉体，将筛下粉体置于50升提取罐中，加40升体积分数为60％的乙醇水溶液，室温下提取2小时，过滤，取滤液，滤渣再重复提取二次，合并得滤液115升，减压浓缩至6升，倒入萃取罐中，加6升正己烷脱脂，60r/min搅拌40分钟，再静置5小时，分出正己烷相，再重复脱脂一次，取二次脱脂后的样品加去离子水6升，在50℃条件下开盖搅拌40分钟挥发残留的正己烷，然后过大孔树脂柱AB-8(10×150cm)柱，先用20升体积分数为30％的乙醇水溶液洗脱，然后用40升体积分数为45％的乙醇水溶液洗脱，最后用30升体积分数为60％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为45％乙醇水溶液洗脱液，并减压回收乙醇，得浓缩物3升。
分离：将3升浓缩物上MCI柱层析(5×150cm)，依次使用体积分数为20％、50％、80％的乙醇水溶液各5升进行梯度洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱的洗脱液，浓缩后再经ODS-C18反相柱(5×100cm)层析，用体积分数为60％的乙醇水溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品28克。
实施例5
取5kg油菜花粉，粉碎，过40目筛，取筛下粉体，筛上物再次粉碎过40目筛，取筛下粉体，将筛下粉体置于50升提取罐中，加45升体积分数为70％的乙醇水溶液，室温下提取4小时，过滤，取滤液，重复提取二次，合并得滤液115升，减压浓缩至6升，倒入萃取罐中，加6升石油醚脱脂，60r/min搅拌40分钟，再静置5小时，分出石油醚相，重复脱脂一次，取二次脱脂后的样品加去离子水6升，在50℃条件下开盖搅拌40分钟挥发残留的石油醚，然后过大孔树脂柱X-5(10×150cm)柱，先用20升体积分数为15％的乙醇水溶液洗脱，然后用40升体积分数为45％的乙醇水溶液洗脱，最后用30升体积分数为90％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为45％乙醇水溶液洗脱液并减压回收乙醇，得浓缩物3升。
分离：将3升浓缩物过MCI柱层析(5×150cm)，依次使用体积分数为30％、60％、90％的乙醇水溶液各5升进行梯度洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱的洗脱液，浓缩后再经ODS-C18反相柱(5×100cm)层析，用体积分数为20％的乙醇水溶液梯度洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品30克。
实施例6
取5kg油菜花粉，粉碎，过40目筛，取筛下粉体，筛上物再次粉碎过40目筛，取筛下粉体，将筛下粉体置于50升提取罐中，加50升体积分数为90％的乙醇水溶液，室温下提取4小时，过滤，取滤液，重复提取二次，合并得滤液115升，减压浓缩至6升，倒入萃取罐中，加6升石油醚脱脂，60r/min搅拌40分钟，再静置5小时，分出石油醚相，重复脱脂一次，取二次脱脂后的样品加去离子水6升，在50℃条件下开盖搅拌40分钟挥发残留的正己烷或石油醚，然后过大孔树脂X-5(10×150cm)柱，先用20升体积分数为30％的乙醇水溶液洗脱，然后用40升体积分数为45％的乙醇水溶液洗脱，最后用30升体积分数为60％的乙醇水溶液洗脱，收集45％的乙醇水溶液洗脱液并减压回收乙醇，得浓缩物3升。
分离：将3升浓缩物过MCI层析柱(5×150cm)，依次使用体积分数为15％、50％、90％的乙醇水溶液各5升进行梯度洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱的洗脱液，浓缩后再经ODS-C18反相柱(5×100cm)层析，用体积分数为40％乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品30克。
以上较佳实施例仅用于说明本发明的内容，除此之外，本发明还有其他实施方式，但凡本领域技术人员因本发明所涉及之技术启示，而采用等同替换或等效变形方式形成的技术方案均落在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种油菜花碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取：将油菜花粉或油菜蜂花粉粉碎，过40目筛，取筛下粉体，用60％～90％体积浓度的乙醇溶液提取，过滤，取滤液，重复提取一次，合并乙醇提取液，减压浓缩回收乙醇，得流浸膏；以有机溶剂对流浸膏脱脂；脱脂后溶于水中，过大孔树脂柱，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，并减压回收乙醇，得洗脱物；
(2)分离：将所得洗脱物进行柱层析，用乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，得油菜花碱纯品；
步骤(1)中所述提取是用体积分数为60％～90％的乙醇溶液于室温下提取2～4小时，油菜花粉质量kg与乙醇溶液体积L的比例为1:8-10；所述的有机溶剂脱脂是正己烷或石油醚脱脂；
所述油菜花碱的结构式为：
2.根据权利要求1所述的油菜花碱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述大孔树脂为AB-8或X-5。
3.根据权利要求1所述的油菜花碱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的用乙醇溶液洗脱是用15％、45％、90％体积浓度的乙醇溶液分别20L、40L、30L进行梯度洗脱或者用30％、45％、60％体积浓度的乙醇溶液分别20L、40L、30L进行梯度洗脱，所述的收集洗脱液是收集以45％的乙醇溶液洗脱所得洗脱液。
4.根据权利要求1所述的油菜花碱的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的柱层析是先经MCI柱层析，用15％～90％体积浓度的乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，收集含油菜花碱洗脱液，再经ODS-C18反相柱层析，用20％～60％体积浓度的乙醇溶液洗脱，用薄层层析法检测，收集得到油菜花碱纯品。
5.一种油菜花碱在制备抗前列腺炎症的药物中的应用，其特征在于，所述油菜花碱的结构式为：
6.一种抗前列腺炎症的药物，其特征在于，活性成分包括权利要求1所述的油菜花碱。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103083328A (zh) * 2011-11-04 2013-05-08 上海医药工业研究院 油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法
CN103536640A (zh) * 2013-10-17 2014-01-29 徐一达 一种从油菜花粉和油菜蜂花粉中提取分离核苷的方法及其抗前列腺增生的应用
CN103536639A (zh) * 2013-10-17 2014-01-29 徐一达 一种利用油菜花粉和油菜蜂花粉生产抗前列腺增生产品的方法
CN103553955A (zh) * 2013-09-03 2014-02-05 徐一达 油菜花粉中新的抗前列腺增生化合物Brassicalkaloid

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6332600B2 (ja) * 2014-01-30 2018-05-30 東洋紡株式会社 ポリアミンコンジュゲートの製造方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103083328A (zh) * 2011-11-04 2013-05-08 上海医药工业研究院 油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法
CN103553955A (zh) * 2013-09-03 2014-02-05 徐一达 油菜花粉中新的抗前列腺增生化合物Brassicalkaloid
CN103536640A (zh) * 2013-10-17 2014-01-29 徐一达 一种从油菜花粉和油菜蜂花粉中提取分离核苷的方法及其抗前列腺增生的应用
CN103536639A (zh) * 2013-10-17 2014-01-29 徐一达 一种利用油菜花粉和油菜蜂花粉生产抗前列腺增生产品的方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Di-coumaroylspermidines and tri-coumaroylspermidines in anthers of different species of the genus Aphelandra;Werner, Christa 等;《Phytochemistry》;19950930;第40卷(第2期);第462页化合物3 *
Online coupling of high-performance liquid chromatography to atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry (HPLC/APCI-MS and MS/MS). The pollen analysis of Hippeastrum × hortorum;Youhnovsky, Nikolay 等;《Helvetica Chimica Acta》;19980930;第81卷(第9期);第1662页表1 *
The photoisomerization behavior of the (4-hydroxycinnamoyl)spermidines;Hu, Wenquing 等;《Helvetica Chimica Acta》;19980204;第81卷(第2期);第343页化合物4 *
The synthesis of p-cumaroylspermidines;Hu, Wenqing 等;《Helvetica Chimica Acta》;19960331;第79卷(第2期);The synthesis of p-cumaroylspermidines *
油菜花粉的化学成分研究;郭娟丽 等;《中国中药杂志》;20090531;第34卷(第10期);第1235-1237页 *
油菜蜂花粉抗氧化活性成分的研究;吴盼盼;《中国优秀硕士论文全文数据库 农业科技辑》;20151215(第12期);D051-14页 *
油菜蜂花粉生理活性及作用机制研究进展;孙毅 等;《中国蜂业》;20100901;第61卷(第9期);第5-9页 *

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