CN106317033A - 一种水飞蓟宾23‑取代衍生物及其注射剂的制备方法和用途 - Google Patents

一种水飞蓟宾23‑取代衍生物及其注射剂的制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种全新的具有抗肿瘤作用的水飞蓟宾衍生物。其药效学结果表明其在治疗肿瘤疾病方面也有着意想不到的治疗效果，对多种肿瘤细胞有显著的抑制作用，特别是对胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和膀胱癌有非常好的效果。本发明是对天然药物的结构改造，原料来源方便，污染少，合成路线简便，成本低，能够进行大规模生产，具有潜在的经济效益。

Description

一种水飞蓟宾23-取代衍生物及其注射剂的制备方法和用途
技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种水飞蓟宾23-取代衍生物及其注射剂的制备方法和抗肿瘤的用途。
背景技术
恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病之一。肿瘤的防治已成为世界范围内广泛重视的课题，抗肿瘤药物的研制与开发也具有极其迫切的需要。各种肿瘤的发病率和死亡率持续攀升，肿瘤的治疗面临着极大的挑战(CA-Cancer.J.Clin.2016,66,115-132)。居高不下的肿瘤发病率和死亡率，也为肿瘤治疗药物提供了广阔的市场空间，2014年全球的抗肿瘤药物市场规模已经达到了600亿美元。
植物是新的生物活性分子的宝贵来源，从植物来源中寻找新的具有抗肿瘤活性的药物越来越受到医药工作者的重视。从植物中已分离出许多抗癌药物，如长春新碱、表鬼臼毒素葡萄糖苷和紫杉醇等。相对于人工合成的化学药物，这些天然来源的有效成分以其毒性较低的优点在肿瘤治疗中得到了大量的应用。
水飞蓟宾(Silybin，SLB)是从菊科药用植物水飞蓟种子的种皮中提取所得的一种黄酮木脂素类化合物，呈黄色粉末，味苦。
现有技术中仅报道水飞蓟宾具有明显的抗自由基活性、促进肝细胞的再生和修复以及保护、稳定肝细胞膜等作用，被称为“天然的保肝药”。临床上用于慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎，初期肝硬化、肝中毒等病的治疗。少有报道水飞蓟宾这类黄酮木脂素类化合物对肿瘤具有抑制作用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种全新的具有抗肿瘤作用的水飞蓟宾衍生物。
令人惊奇的是，对水飞蓟宾进行修饰进行酯化反应，得到的水飞蓟宾衍生物具有非常好的抗肿瘤作用，特别是对胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和膀胱癌有非常好的效果。
本发明的一个目的是提供具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐：
其中，R为氢、钠、钾、镁，式(1)中2,3位和10,11位的立体构型分别是或同时是R构型或S构型。
本发明的另一个目的为提供一种根据权利要求1所述的式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于：水飞蓟宾在催化剂存在下，与1,2-苯二甲酸酐反应，分别得到式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物和水飞蓟宾3,23-取代衍生物，经分离后，得到R为氢的式(1)化合物；根据需要，与适当的碱反应生成药学上可接受的盐。
优选地，催化剂为N,N-二异丙基乙胺或三乙胺。
优选地，水飞蓟宾与1,2-苯二甲酸酐的摩尔比为1:1至1:3。
本发明的另一个目的为提供一种组合物，包括权利要求1中的具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐、抗氧化剂、金属离子螯合剂和pH调节剂。
优选地，抗氧化剂为无水亚硫酸钠。
优选地，金属离子螯合剂为依地酸二钠。
优选地，pH调节剂为氢氧化钠。
优选地，该组合物剂型为注射剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、包合物、固体分散体、缓控释剂型，优选为注射剂。
优选地，该注射剂pH值在4.0～9.0之间，优选6.8～7.0之间。
优选地，该注射剂由如下质量配比原辅料组成：
所述的pH调节剂适量是指将上述式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐、无水亚硫酸钠和依地酸二钠溶于注射用水待完全溶解后，调节溶液pH值至4.0～9.0之间时所需要的pH调节剂的用量。
进一步地，每天给予用者1次。
进一步地，每天给予用者50mg或100mg。
进一步地，给药方式为静脉滴注。
本发明的另一个目的为提供一种所述的组合物的制备方法，其特征在于：所述组合物的剂型为注射剂，包括以下步骤：
称取处方量的无水亚硫酸钠和依地酸钠，溶于注射用水中。另称取处方量的式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐，分次加入搅拌使溶解。待全溶后，加处方量的注射用活性炭搅拌后，冷却至室温并定容。减压过滤除去活性炭至澄清，用氢氧化钠调节pH，然后用微孔滤膜过滤，灌于2mL安剖中，通氮气，熔封，灭菌，即得。
优选地，该注射剂灭菌方式为100-130℃流通蒸汽灭菌20–60min。
本发明的另一个目的为提供一种所述组合物的质控方法，其特征在于：所述组合物的剂型为该注射剂，包括如下步骤：
(1)式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的鉴别：
称取样品适量，加甲醇制成浓度为1mg/mL的溶液，加新配制的1mol/L盐酸羟胺甲醇液0.5ml、6mol/L氢氧化钾甲醇液0.2mL，加热至沸，冷却后加5％盐酸酸化，最后加1％三氯化铁溶液1～2滴，溶液应显紫红色。
(2)式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的HPLC含量测定：
称取样品适量，加甲醇溶解，制成0.12mg/mL的溶液，作为供试品溶液；另取水飞蓟宾对照品适量，加甲醇制成0.12mg/mL的溶液作为对照品溶液。
色谱条件ODS C18柱，流动相：甲醇：水：冰醋酸45：55：1，波长：287nm；流速：1.0mL/min；进样量：5μL。
本发明的另一个目的为提供具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
优选地，所述肿瘤为胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和膀胱癌。
本发明通过化学修饰的方法，设计并合成出与水飞蓟宾结构有所差异的一种全新结构的黄酮木脂素衍生物，即通过在水飞蓟宾3，23位连接1,2-苯二甲酸基，经过大量多次实验并对合成工艺进行优化，分离、纯化，并多次重结晶得到高纯度化合物，即水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)，之后对两个化合物进行初步药效学筛选，结果发现水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)具有非常好的抗肿瘤特性。上述全新结构的目标化合物不仅延长整个分子共轭范围和共轭强度，而且在疏水性、芳香性、电性等方面与水飞蓟宾具有诸多差异化特征，正是由于上述特征的改变，经改造后全新结构的水飞蓟宾23-取代衍生物及其盐的水溶性和生物利用度不仅显著提高，而且将其制成注射剂后，溶液的稳定性增强，通过药动学和药效学实验测试，发现水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂在大鼠体内血药浓度显著增加，生物利用度明显提高，且水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂对抗肿瘤的效果与水飞蓟宾相比较，有显著性差异，药效学结果表明其在治疗肿瘤疾病方面也有着意想不到的治疗效果。
本发明的有益之处在于：通过化学修饰的方法，设计并合成出与水飞蓟宾结构有所差异的一种全新结构的黄酮木脂素衍生物，目标化合物的水溶性和生物利用度显著增加，而且目标化合物的注射剂具有明显的抗肿瘤，对多种肿瘤细胞有显著的抑制作用；再者，本发明是对天然药物的结构改造，原料来源方便，污染少，合成路线简便，成本低，能够进行大规模生产，具有潜在的社会效益和经济效益。
附图说明
图1为水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂在大鼠体内的药-时曲线。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应该理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1：水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)的制备：
水飞蓟宾4.82g(10mmoL)、1,2-苯二甲酸酐1.48g(10mmoL)、N,N-二异丙基乙胺3.0g(10mmoL)，加入到盛有40mL二氯甲烷的干燥圆底烧瓶中，室温搅拌反应过夜，G254薄层检测跟踪(展开剂为二氯甲烷：甲醇：甲酸＝15：1：0.1)，反应结束后以1M盐酸洗涤有机层，用二氯甲烷提取3次，有机层用无水硫酸钠干燥后浓缩，得到淡黄色固体，以甲醇和乙酸乙酯多次重结晶，分别得到水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)5.61g和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)0.56g，收率分别为88.9％和7.20％。
水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)核磁共振氢谱：1H NMR(500MHz,d6-DMSO):δ＝11.90(s,1H,Ar-OH),10.85(s,1H,Ar-OH),9.16(s,1H,Ar-OH),8.05(d,1H,J＝5.0Hz,Ar-H),7.91(d,1H,J＝5.5Hz,Ar-H),7.47(m,1H,Ar-H),7.26(m,1H,Ar-H),6.99-7.12(m,5H,Ar-H),6.88(d,1H,J＝5.0Hz,Ar-H),5.95(s,1H,Ar-H),5.90(s,1H,Ar-H),5.01(m,2H,CH,CH),4.81(d,1H,J＝1.5Hz,CH2),4.67(d,1H,J＝1.5Hz,CH2),4.55(m,1H,CH),4.48(m,1H,CH),3.90(s,3H,CH3)；ESI-MS:m/z＝631.5[M+H]+.
水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)核磁共振氢谱：1H NMR(500MHz,d6-DMSO):δ＝9.06(s,1H,Ar-OH),8.16(m,2H,Ar-H),8.05(m,1H,Ar-H),7.92(m,1H,Ar-H),7.78-7.81(m,4H,Ar-H),7.20(d,1H,J＝1.5Hz,Ar-H),6.99-7.01(dd,1H,J＝7.5,1.5Hz,Ar-H),6.95-6.97(d,1H,J＝7.5Hz,Ar-H),6.91-6.93(dd,1H,J＝7.5,1.5Hz,Ar-H),6.89-6.90(d,1H,J＝3.5Hz,Ar-H),6.71-6.72(d,1H,J＝7.5Hz,Ar-H),6.47-6.48(d,1H,J＝2.5Hz,CH),6.35(s,1H,Ar-OH),6.26(d,1H,J＝1.5Hz,Ar-H),6.12(d,J＝1.5Hz,Ar-H),6.02-6.04(d,1H,J＝9Hz,CH),5.87(s,1H,Ar-OH),5.16-5.18(td,1H,J＝5,2.5Hz,CH),4.73-4.76(dd,1H,J＝12.5,5Hz,CH2),4.45-4.49(dd,1H,J＝12.5,5Hz,CH2),3.82(s,3H,CH3)；ESI-MS:m/z＝779.2[M+H]+.
实施例2：水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)的制备：
水飞蓟宾4.82g(10mmoL)、1,2-苯二甲酸酐2.96g(20mmoL)、N,N-二异丙基乙胺3.0g(10mmoL)，加入到盛有40mL二氯甲烷的干燥圆底烧瓶中，室温搅拌反应过夜，G254薄层检测跟踪(展开剂为二氯甲烷：甲醇：甲酸＝15：1：0.1)，反应结束后以1M盐酸洗涤有机层，用二氯甲烷提取3次，有机层用无水硫酸钠干燥后浓缩，得到淡黄色固体，以甲醇和乙酸乙酯多次重结晶，分别得到水飞蓟宾23-取代的水飞蓟宾衍生物5.76g和水飞蓟宾3，23-取代的水飞蓟宾衍生物0.61g，收率分别为91.2％和7.84％。
实施例3：水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)的制备：
水飞蓟宾4.82g(10mmoL)、1,2-苯二甲酸酐4.44g(30mmoL)、N,N-二异丙基乙胺3.0g(10mmoL)，加入到盛有40mL二氯甲烷的干燥圆底烧瓶中，室温搅拌反应过夜，G254薄层检测跟踪(展开剂为二氯甲烷：甲醇：甲酸＝15：1：0.1)，反应结束后以1M盐酸洗涤有机层，用二氯甲烷提取3次，有机层用无水硫酸钠干燥后浓缩，得到淡黄色固体，以甲醇和乙酸乙酯多次重结晶，分别得到水飞蓟宾23-取代的水飞蓟宾衍生物5.71g和水飞蓟宾3，23-取代的水飞蓟宾衍生物0.65g，收率分别为90.6％和8.35％。
实施例4：水飞蓟宾23-取代衍生物钠盐(SLB-23-Na)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物钠盐(SLB-3,23-Na)的制备：
分别取水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)和水飞蓟宾3,23-取代衍生物(SLB-3,23)10g溶于50mL乙酸乙酯中，室温下和氢氧化钠甲醇溶液进行反应，沉淀析出，过滤，得到不溶于乙酸乙酯的水飞蓟宾23-取代衍生物钠盐(SLB-23-Na)9.8g和水飞蓟宾3,23-取代衍生物钠盐(SLB-3,23-Na)9.6g，收率分别为98.2％和93.0％。
实施例5：水飞蓟宾23-取代衍生物钾盐(SLB-23-K)的制备：
水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)10g，溶于50mL乙酸乙酯中，室温下和氢氧化钾的甲醇溶液进行反应，沉淀析出，过滤，得到不溶于乙酸乙酯的水飞蓟宾23-取代衍生物钾盐(SLB-23-K)9.6g，收率为95.8％。
实施例6：水飞蓟宾23-取代衍生物镁盐(SLB-23-Mg)的制备：
水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)10g，溶于50mL乙酸乙酯中，室温下和氢氧化钾的甲醇溶液进行反应，沉淀析出，过滤，得到不溶于乙酸乙酯的水飞蓟宾23-取代衍生物镁盐(SLB-23-Mg)9.8g，收率为97.4％。
实施例7：水飞蓟宾23-取代衍生物钠盐(SLB-23-Na)注射剂的制备：
无水亚硫酸钠2.0g，依地酸钠0.5g，溶于800mL注射用水中。加热至80℃，取水飞蓟宾23-取代衍生物钠盐(SLB-23-Na)25.0g，分次加入搅拌使溶解。待全溶后，加2％(w/w)注射用活性炭于80℃搅拌十分钟，冷却至室温并定容至刻度。减压过滤除去活性炭至澄清，调节pH至6.8～7.0，然后用微孔滤膜过滤，灌于2mL安剖中，通氮气，熔封，115℃流通蒸汽灭菌30min，即得。
实施例8：水飞蓟宾23-取代衍生物钾盐(SLB-23-K)注射剂的制备：
无水亚硫酸钠2.0g，依地酸钠0.5g，溶于800mL注射用水中。加热至80℃，取水飞蓟宾23-取代衍生物钾盐(SLB-23-K)25.0g，分次加入搅拌使溶解。待全溶后，加2％(w/w)注射用活性炭于80℃搅拌十分钟，冷却至室温并定容至刻度。减压过滤除去活性炭至澄清，调节pH至6.8～7.0，然后用微孔滤膜过滤，灌于2mL安剖中，通氮气，熔封，115℃流通蒸汽灭菌30分钟，即得。
实施例9：水飞蓟宾23-取代衍生物镁盐(SLB-23-Mg)注射剂的制备：
无水亚硫酸钠2.0g，依地酸钠0.5g，溶于800mL注射用水中。加热至80℃，取水飞蓟宾23-取代衍生物镁盐(SLB-23-Mg)25.0g，分次加入搅拌使溶解。待全溶后，加2％(w/w)注射用活性炭于80℃搅拌十分钟，冷却至室温并定容至刻度。减压过滤除去活性炭至澄清，调节pH至6.8～7.0，然后用微孔滤膜过滤，灌于2mL安剖中，通氮气，熔封，115℃流通蒸汽灭菌30分钟，即得。
实施例10：水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂与水飞蓟宾葡甲胺的稳定性比较：
取实施例7、8、9样品适量，参照中国药典2015年版四部稳定性考察项目，我们对所制备的注射剂进行6个月的稳定性考察，结果见表1：
表1实施例7、8、9样品稳定性考察结果
从以上结果可以看出，本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂分别在经过6个月的稳定性试验后，其pH和含量与0月比较，无明显差异，pH和含量均比较稳定；而水飞蓟宾葡甲胺注射液在经过6个月的稳定性试验考察后，其pH和含量明显降低，6个月末含量已降至60％，表明水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂在6个月内稳定，且稳定性优于水飞蓟宾葡甲胺注射剂，极具研发前景。
实施例11：水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂与水飞蓟宾葡甲胺有关物质的比较：
色谱条件ODS C18柱，流动相：甲醇：水：冰醋酸45：55：1，波长：287nm；流速：1.0mL/min；称取样品适量，加甲醇溶解，制成0.12mg/mL的溶液，作为供试品溶液；另取水飞蓟宾对照品适量，加甲醇制成0.12mg/mL的溶液作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液进样5μL，记录色谱图，按外标法以峰面积进行杂质含量计算。结果见表2。
表2实施例7、8、9样品稳定性考察结果
试验表明，本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂在室温条件放置6个月后，杂质含量小于0.5％，6个月内无明显变化，稳定性良好，而水飞蓟宾葡甲胺注射剂在室温6个月后，杂质含量明显增加，且大于5％，说明本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂稳定，而且杂质含量小，结果优于水飞蓟宾葡甲胺注射剂。
实施例12：水飞蓟宾23-取代衍生物抗肿瘤作用研究：
体外分别培养胃癌细胞系MGC803、人结肠癌细胞HCT116、肺癌细胞SPC-A-1、前列腺癌细胞PC-3M以及膀胱癌细胞5637等不同肿瘤细胞，采用不同浓度(0～400μmol/L)的水飞蓟宾23-取代衍生物分别处理以上肿瘤细胞后，MTT法检测水飞蓟宾23-取代衍生物对不同肿瘤细胞的增殖作用，并计算水飞蓟宾23-取代衍生物对各肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)，评价水飞蓟宾23-取代衍生物抗肿瘤活性，结果见表3。
表3水飞蓟宾23-取代衍生物对肿瘤细胞的增殖抑制活性结果
注：与水飞蓟宾对照组比较，1)p<0.01；与水飞蓟宾葡甲胺组比较，2)p<0.01。
实验结果可以看出，在0～400μmol/L浓度范围内，水飞蓟宾对各肿瘤细胞的IC50值均在100μmol/L左右，水飞蓟宾葡甲胺对照组的IC50值均大于50μmol/L，而本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物对各肿瘤细胞的IC50值均小于50μmol/L，尤其是实施例9，其IC50值均在20μmol/L以下，且结果具有显著性差异(p<0.01)，说明本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物对胃癌细胞MGC803、人结肠癌细胞HCT116、肺癌细胞SPC-A-1、前列腺癌细胞PC-3M以及膀胱癌细胞5637等肿瘤细胞有明显的抑制作用。
实施例13：水飞蓟宾23-取代衍生物与水飞蓟宾葡甲胺的药代动力学比较：
15只SD大鼠随机分为五组，每组3只，给药前12hr禁食，将水飞蓟宾、水飞蓟宾葡甲胺溶液和水飞蓟宾23-取代衍生物(按水飞蓟宾)以50mg/Kg的剂量分别尾静脉注射，给药后0.083，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0和8.0hr采血，测定大鼠体内水飞蓟宾的浓度，结果见表4，并绘制药时曲线，结果见图1。水飞蓟宾葡甲胺溶液和水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂在大鼠体内的血药浓度经时变化过程为二房室模型，且血药浓度有明显差异，本发明制备的水飞蓟宾23-取代衍生物注射剂再大鼠体内的浓度要远高于水飞蓟宾和水飞蓟宾葡甲胺，本发明制备的注射剂生物利用度明显提高，为临床上的使用提供理论依据。
表4水飞蓟宾23-取代衍生物药代动力学结果(n＝3)
注：与水飞蓟宾对照组比较，1)p<0.01；与水飞蓟宾葡甲胺组比较，2)p<0.01。

Claims (10)

1.具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐：
其中，R为氢、钠、钾、镁，式(1)中2,3位和10,11位的立体构型分别是或同时是R构型或S构型。
2.一种根据权利要求1所述的式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于：水飞蓟宾在催化剂存在下，与1,2-苯二甲酸酐反应，分别得到式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物和水飞蓟宾3,23-取代衍生物，经分离后，得到R为氢的式(1)化合物；根据需要，与适当的碱反应生成药学上可接受的盐。
3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于：催化剂为N,N-二异丙基乙胺或三乙胺；进一步地，水飞蓟宾与1,2-苯二甲酸酐的摩尔比为1:1至1:3。
4.一种组合物，包括权利要求1中的具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐、抗氧化剂、金属离子螯合剂和pH调节剂。优选地，抗氧化剂为无水亚硫酸钠；优选地，金属离子螯合剂为依地酸二钠；优选地，pH调节剂为氢氧化钠；优选地，该组合物剂型为注射剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、包合物、固体分散体、缓控释剂型。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：该组合物的剂型为注射剂，该注射剂pH值在4.0～9.0之间，优选6.8～7.0之间。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于：该注射剂由如下质量配比原辅料组成：
所述的pH调节剂适量是指将上述式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐、无水亚硫酸钠和依地酸钠溶于注射用水待完全溶解后，调节溶液pH值至4.0～9.0之间时所需要的pH调节剂的用量。
7.根据权利要求4-6任一项所述的组合物，其特征在于：每天给予用者1次；进一步地，每天给予用者50mg或100mg；再进一步地，给药方式为静脉滴注。
8.根据权利要求4-7中任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于：所述组合物的剂型为注射剂，包括以下步骤：
称取处方量的无水亚硫酸钠和依地酸钠，溶于注射用水中。另称取处方量的式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐，分次加入搅拌使溶解。待全溶后，加处方量的注射用活性炭搅拌后，冷却至室温并定容。减压过滤除去活性炭至澄清，用氢氧化钠调节pH，然后用微孔滤膜过滤，灌于2mL安剖中，通氮气，熔封，灭菌，即得；优选地，该注射剂灭菌方式为100-130℃流通蒸汽灭菌20–60min。
9.根据权利要求4-7中任一项所述的组合物的质控方法，其特征在于：所述组合物的剂型为该注射剂，包括如下步骤：
(1)式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的鉴别：
称取样品适量，加甲醇制成浓度为1mg/mL的溶液，加新配制的1mol/L盐酸羟胺甲醇液0.5ml、6mol/L氢氧化钾甲醇液0.2mL，加热至沸，冷却后加5％盐酸酸化，最后加1％三氯化铁溶液1～2滴，溶液应显紫红色。
(2)式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐的HPLC含量测定：
称取样品适量，加甲醇溶解，制成0.12mg/mL的溶液，作为供试品溶液；另取水飞蓟宾对照品适量，加甲醇制成0.12mg/mL的溶液作为对照品溶液。
色谱条件ODS C18柱，流动相：甲醇：水：冰醋酸45：55：1，波长：287nm；流速：1.0mL/min；进样量：5μL。
10.根据权利要求1的具有式(1)所示结构的水飞蓟宾23-取代衍生物(SLB-23)及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用，优选地所述肿瘤为胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和膀胱癌。
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