CN106289919A - 一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 - Google Patents
一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106289919A CN106289919A CN201610964981.0A CN201610964981A CN106289919A CN 106289919 A CN106289919 A CN 106289919A CN 201610964981 A CN201610964981 A CN 201610964981A CN 106289919 A CN106289919 A CN 106289919A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protein
- aqueous solution
- calcium fluoride
- wafer
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 63
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 63
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- WUKWITHWXAAZEY-UHFFFAOYSA-L calcium difluoride Chemical compound [F-].[F-].[Ca+2] WUKWITHWXAAZEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 29
- 229910001634 calcium fluoride Inorganic materials 0.000 claims abstract description 29
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 9
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009991 scouring Methods 0.000 claims description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 abstract description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 abstract description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 abstract description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 38
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 35
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 27
- 239000010408 film Substances 0.000 description 16
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 14
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 3
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 238000001831 conversion spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 3
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 3
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 238000003682 fluorination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001814 protein method Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/35—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using infrared light
- G01N21/3577—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using infrared light for analysing liquids, e.g. polluted water
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
本发明属于生物大分子分析技术领域，具体为一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法。本发明直接将蛋白质液体滴在氟化钙晶片的表面，然后均匀地展开，在室温下，让溶剂自然蒸发，最终类似于固体状态的蛋白质固定在氟化钙晶片的表面，用以红外光谱测试。整个样品处理过程中，不需要多余的操作，不损害蛋白的自然状态。操作更简单，而且在很大程度减少了水分对图谱质量的影响，将其应用于红外技术，得到的蛋白质图谱会更加的平滑，所测的蛋白质浓度下限更低（>0.5mg/ml，传统方法浓度>3mg/ml），估算的蛋白质二级结构含量的精度不受样品准备简化的影响。
Description
技术领域
本发明属于生物大分子分析技术领域，具体涉及—种简单高效的样品准备方法，特别是一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法。
背景技术
红外光谱是最早用于测定多肽及蛋白质二级结构的手段之一。红外光谱技术
应用于多肽及蛋白质二级结构分析大致经历了定性、半定量和定量研究三个发展阶段。
早期的研究指出在蛋白质的红外谱带中都有氢键化的NH基团的3300cm-1特征吸收带以及1700-1500cm-1范围的酰胺I带和II带；其余吸收带则主要由组成蛋白质的氨基酸残基的性质决定。随着后来研究的不断深入，到1956年己知多肽和蛋白质在红外区的特征吸收带有9个之多，即酰胺I带，酰胺II带，酰胺III带，酰胺IV带，酰胺V带，酰胺VI带，酰胺VIII带，酰胺A带和酰胺B带。其中酰胺I带对蛋白质的结构研究最有价值，酰胺A带和II带也用于多肽和蛋白质的构象研究。由于偏振辐射技术的发展以及模型多肽制备方法和蛋白质纯化方法的改进，红外研究在定性估计蛋白质二级结构的主要成分方面取得了重要进展。
70年代中期，发展了若干半定量计算蛋白质构象的方法。但是这些方法的也有其局限性，因为它要求许多参数，给实际工作造成了困难。并且由于仪器等条件的限制，以往仅限于定性和半定量研究。80年代傅里叶变换红外光谱和计算机辅助程序的发展，使蛋白质二级结构的研究的定量分析提供可能。通过二阶导数和去卷积的应用，使得红外测定蛋白质二级结构含量组成更加精准。
由于水在酰胺I带有一定的红外吸收，直到90年代，实验中一般采用重水体系进行测定。然而，重水与水毕竟有差别，且重水体系的操作也比较复杂。
90年代，蛋白红外光谱超薄样品池垫片（6-7μm），以及蛋白质红外光谱的专门分析软件投入应用，使得检测、分析水溶液环境中蛋白质二级结构成为可能。1990年，Dong等实验室用十多种己知X射线衍射数据的蛋白进行红外光谱分析，对水溶液中酰胺I带频率进行了指认，建立了红外光谱定量分析蛋白质在水环境中二级结构的方法，并以此来研究蛋白质的构象变化。该方法的建立在蛋白质二级结构的测定以及动力学的测定方面起到了重要的作用。原有的上样方法利用的是Biocell 氟化钙样品池，上样池包括垫片，氟化钙晶片（两片晶片，有孔和无孔），超薄样品膜。样品膜被裁剪成特定的形状，放在两个晶片之间，中间的空隙用于上样。无孔垫片，无孔晶片，样品膜，有孔晶片，有孔垫片，按顺序叠加，形成三明治的形状，放置在固定装置中。使用1ml 注射器将样品通过小孔注入到样品膜和晶片的空隙中。该方法使用了超薄的样品膜，能有效定量地扣除水分，具备其他技术所不具备的优势。当然，该方法也有不足之处，由于要消除水分对于蛋白样品的影响，其上样所需的样品池的膜是很薄的，而且需要在上样的过程中要求没有气泡产生，这就导致进样困难，需要一定的经验才能成功上样，而且不能完全消除水分的影响，需要软件的协助。其次，该技术对于蛋白样品的浓度是有要求的，要想得到蛋白质的信号，蛋白溶液需要高浓度（>3 mg/ml），而有些蛋白在浓度较高时会发生聚集，这也就导致了其应用有一定的局限性。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种操作简单的用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法，其效率更高，质量更好。
本发明将蛋白样品滴在氟化钙晶片的表面，待溶剂自然蒸发后，晶片表面形成固态薄膜状，用于谱图收集。该方法操作简单，不会有气泡产生。期间水分不断蒸发，减少了水分的影响，而且对蛋白浓度的要求也较传统方法低很多（>0.5 mg/ml）。从实验结果来看，该方法实用可行。
本发明使用的技术方案利用的原理在其他红外技术中也有应用。现有其他技术中是将样品溶液滴在适当的载体上，挥发掉溶剂，将膜取下，制得样品膜，或者是在盐窗上成膜，虽可直接用于测定，但盐窗价格昂贵，稍微使用不当就容易破裂，且盐窗对水溶液不稳定，主要是用于高聚物的测定。本发明涉及的技术方案所使用的是氟化钙晶片，低溶解度，耐酸碱，主要用于测定水溶液中的蛋白质样品，其应用领域完全不同。本发明中所用的傅里叶红外分析仪配有专用于蛋白分析的软件，专门用于检测水溶液状态的蛋白质二级结构组成。
本发明的技术方案具体介绍如下。
本发明提供一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱
样品准备方法，其特征在于，其采用可拆卸的氟化钙样品池进样，通过将蛋白质水溶液直接涂布在氟化钙晶片上，待溶剂室温自然挥发后完成制样，从而进行傅里叶变换红外数据采集；其中：蛋白质水溶液的浓度为0.5mg/ml~20mg/ml，涂布的厚度为2-50μm。
本发明中，蛋白质水溶液涂布前，先进行预处理，除去冷冻保存的蛋白质中
的甘油等其他化学物质，并将蛋白质水溶液用低盐缓冲液透析，除去高盐。
本发明中，蛋白质水溶液是由蛋白质和水组成的溶液，或者是由蛋白质和缓
冲液组成的溶液。
本发明中，蛋白质水溶液的浓度为3-15mg/ ml。涂布的厚度为10-30μm。
本发明中，可拆卸的氟化钙样品池包括一片氟化钙晶片、两片垫片和固定装置，垫片、氟化钙晶片和垫片按顺序叠加，置于固定装置中固定。
本发明提供的用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱
样品准备方法的具体步骤如下：
(1)氟化钙晶片用溶剂擦洗干净；
(2)将蛋白质水溶液均匀地涂布于氟化钙晶片的表面，并在室温下自然挥发；
(3)缓冲液会不断蒸发，蛋白溶液在氟化钙晶体表面形成透明的薄层固体膜；
(4)将氟化钙晶片固定好，进行红外数据采集。
本发明制样后，进行红外数据采集，得到二阶导数谱图，进而可分析出蛋白
质二级结构的组成。
和现有技术相比，本发明具有的有益效果在于：
1.实验条件相对现有的技术相对宽松；
2.利用原有的实验装置，操作步骤更简单，而且在很大程度减少了水分对图谱质量的影响，操作条件及参数和原有方法相同，无需改进；
3.可用于检测低浓度的蛋白，扩大了蛋白的使用范围；
4.得到的图谱更加光滑，精度更高，所测的蛋白质浓度下限更低（>0.5mg/ml，传统方法浓度>3mg/ml；
5.蛋白的固化和疾病相关，该方法提供了一种蛋白固化二级结构组成含量测定方法；
总之，本发明在原有进样的技术的基础上进行了改进，简化了操作步骤，直接将蛋白固定在氟化钙晶片，提高了实验的成功率，同时可以作为一种对比技术，检测特殊蛋白在固化的过程中二级结构组成含量的变化，这对于某些疾病的产生机理或具有重要的意义。
附图说明
图1是本发明实施例1和传统方法的实验结果比较示意图。
图2 是本发明实施例2和传统方法的实验结果比较示意图。
图3是本发明实施例子3低浓度蛋白测定结果示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例中，红外实验部分所用到的光谱仪为美国Bio tools公司的PR0TA-2X系列Prota蛋白分析仪，主要组件包括：ABB BomemMB3000傅立叶变换红外光谱仪，薄膜型氟化钙可拆卸液体氟化钙样品池(ABB Bo men Inc.)，气体干燥吹扫装置和配套的集成谱图收集、数据处理软件Grams/Al以及基于此软件的PROTA软件。
实施例1 水溶液中环磷酸腺苷受体蛋白二级结构测定
1. 实验室纯化重组的环磷酸腺苷受体蛋白，蛋白浓度为3-4 mg/ml，缓冲液为20-30mmol/L的磷酸盐缓冲溶液。空白为只含20-30 mmol/L的磷酸盐蛋白缓冲液。
2. 将环磷酸腺苷受体蛋白样品和空白样品涂在氟化钙晶片上，涂布的厚度为10μm，室温下自然挥发，待用。在传统方法中，用到厚度为6-10μm的聚丙烯薄膜，裁剪成晶片的形状，中间掏空，将薄膜放到两个晶片之间，固定好后，则在两个晶片之间形成了6-10μm的空隙用于上样。使用1ml 注射器将样品通过小孔注入到样品膜和晶片的空隙中，用于检测。
3. 傅里叶红外变换光谱在傅里叶变换红外光谱仪上测定，使用相应检测器，并不断用干燥空气吹扫。
4. 待吹扫完成后，收集空气峰。
5. 将空白样品放入样品池，收集红外谱图。
6. 将蛋白样品放入样品池，收集红外谱图。
7. 依次扣除空气和空白样品峰，在2000到1750cm-1内基线平直说明已经成功将水扣除。二阶导数图谱通过萨维斯—高莱求导而得。蛋白质中各二级结构组成含量通过倒转的二级衍生谱中1600-1700cm-1酰胺I带由曲线拟合得到。
图1 是实施例1实验结果示意图，并和传统注射上样法相比较，二者区别在误差范围内。
实施例2水溶液中细胞色素C二级结构测定
1. 公司购得纯度在99.9%以上的细胞色素C，将其溶在水中，终浓度为10-20mg/ml，离心待用。
2. 将细胞色素C样品和空白样品涂在氟化钙晶片上，涂布的厚度为40μm，室温下自然挥发，待用。在传统方法中，用到厚度为6-10μm的聚丙烯薄膜，裁剪成晶片的形状，中间掏空，将薄膜放到两个晶片之间，固定好后，则在两个晶片之间形成了6-10μm的空隙用于上样。使用1ml 注射器将样品通过小孔注入到样品膜和晶片的空隙中，用于检测。
3. 傅里叶红外变换光谱在傅里叶变换红外光谱仪上测定，使用相应检测器，并不断用干燥空气吹扫。
4. 待吹扫完成后，收集空气峰。
5. 将空白样品放入样品池，收集红外谱图。
6. 将蛋白样品放入样品池，收集红外谱图。
7. 依次扣除空气和空白样品峰，在2000到1750cm-1内基线平直说明已经成功将水扣除。二阶导数图谱通过萨维斯—高莱求导而得。蛋白质中各二级结构组成含量通过倒转的二级衍生谱中1600-1700cm-1酰胺I带由曲线拟合得到。
图2 是实施例2实验结果示意图，并和传统注射上样法相比较，二者区别在误差范围内。
实施例3水溶液中低浓度牛血清蛋白二级结构测定
1. 从公司购得纯度在99.9%以上的牛血清白蛋白，将其溶在水中，终浓度为0.5-1mg/ml，离心待用。
2. 将牛血清白蛋白样品和空白样品涂在氟化钙晶片上，涂布的厚度为25μm，室温下自然挥发，待用。
3. 傅里叶红外变换光谱在傅里叶变换红外光谱仪上测定，使用相应检测器，并不断用干燥空气吹扫。
4. 待吹扫完成后，收集空气峰。
5. 将空白样品放入样品池，收集红外谱图。
6. 将蛋白样品放入样品池，收集红外谱图。
7. 依次扣除空气和空白样品峰，在2000到1750cm-1内基线平直说明已经成功将水扣除。二阶导数图谱通过萨维斯—高莱求导而得。蛋白质中各二级结构组成含量通过倒转的二级衍生谱中1600-1700cm-1酰胺I带由曲线拟合得到。
图3 是实施例3实验结果示意图，0.5 mg牛血清白蛋白结构测定图。
Claims (7)
1.一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方
法，其特征在于，其采用可拆卸的氟化钙样品池进样，通过将蛋白质水溶液直接涂布在氟化钙晶片上，待溶剂室温自然挥发后完成制样，从而进行傅里叶变换红外数据采集；其中：蛋白质水溶液的浓度为0.5mg/ml~20mg/ml，涂布的厚度为2-50μm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，蛋白质水溶液涂布前，先进行预处理，除去冷冻保存的蛋白质中的甘油，并将蛋白质水溶液用低盐缓冲液透析，除去高盐。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，蛋白质水溶液是由蛋白质和水组成的溶液，或者是由蛋白质和缓冲液组成的溶液。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，蛋白质水溶液的浓度为3-15mg/ ml。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，涂布的厚度为10-30μm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，可拆卸的氟化钙样品池包括一片氟化钙晶片、两片垫片和固定装置，垫片、氟化钙晶片和垫片按顺序叠加，置于固定装置中固定。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1) 氟化钙晶片用溶剂擦洗干净；
(2) 将蛋白质水溶液均匀地涂布于氟化钙晶片的表面，并在室温下自然挥发；
(3) 缓冲液会不断蒸发，蛋白溶液在氟化钙晶体表面形成透明的薄层固体膜；
(4) 将氟化钙晶片固定好，进行红外数据采集。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610964981.0A CN106289919A (zh) | 2016-10-31 | 2016-10-31 | 一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610964981.0A CN106289919A (zh) | 2016-10-31 | 2016-10-31 | 一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106289919A true CN106289919A (zh) | 2017-01-04 |
Family
ID=57719436
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610964981.0A Pending CN106289919A (zh) | 2016-10-31 | 2016-10-31 | 一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106289919A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109522955A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-03-26 | 浙江和谱生物科技有限公司 | 基于傅里叶变换红外吸收光谱的微生物分型分析方法 |
| CN114364968A (zh) * | 2019-08-26 | 2022-04-15 | 维也纳兽医大学 | 用于分析腹膜透析样品的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN2482076Y (zh) * | 2000-06-23 | 2002-03-13 | 北京大学 | 一种活体组织红外光谱分析的样品盛放装置 |
| CN101915745A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-12-15 | 浙江省交通工程建设集团有限公司 | 一种改性沥青中sbs改性剂含量的红外光谱分析方法 |
| CN102393379A (zh) * | 2011-11-10 | 2012-03-28 | 复旦大学 | 一种红外光谱测定低浓度蛋白质二级结构的方法 |
| CN105300886A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-02-03 | 福建师范大学 | 一体化红外液体样品池装置与红外样品池 |
-
2016
- 2016-10-31 CN CN201610964981.0A patent/CN106289919A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN2482076Y (zh) * | 2000-06-23 | 2002-03-13 | 北京大学 | 一种活体组织红外光谱分析的样品盛放装置 |
| CN101915745A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-12-15 | 浙江省交通工程建设集团有限公司 | 一种改性沥青中sbs改性剂含量的红外光谱分析方法 |
| CN102393379A (zh) * | 2011-11-10 | 2012-03-28 | 复旦大学 | 一种红外光谱测定低浓度蛋白质二级结构的方法 |
| CN105300886A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-02-03 | 福建师范大学 | 一体化红外液体样品池装置与红外样品池 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 柯以侃 等: "《分析化学手册 第三分册 光谱分析》", 30 September 1998, 北京：化学工业出版社 * |
| 王世平 等: "《现代仪器分析原理与技术》", 31 January 1999, 哈尔滨工程大学出版社 * |
| 韩立 等: "《仪器分析》", 31 October 2014, 长春：吉林大学出版社 * |
| 高铮亚: ""水溶液中蛋白质二级结构红外分析方_省略_的建立及cAMP受体蛋白构象研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109522955A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-03-26 | 浙江和谱生物科技有限公司 | 基于傅里叶变换红外吸收光谱的微生物分型分析方法 |
| CN114364968A (zh) * | 2019-08-26 | 2022-04-15 | 维也纳兽医大学 | 用于分析腹膜透析样品的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108279309B (zh) | 一种pla2r抗体的检测试纸条及检测方法 | |
| CN111443072B (zh) | 病毒检测用拉曼芯片、制备方法、及病毒快速检测方法 | |
| CN100449306C (zh) | 蛋白质组的表面增强拉曼光谱检测方法 | |
| JPS6454260A (en) | Immunological analysis for ck-mm cardiac infarction | |
| Caspersson | Quantitative cytochemical methods for the study of cell metabolism | |
| WO2004097903A3 (en) | Single tool defect classification solution | |
| CN110530965A (zh) | 一种硅纳米线阵列芯片检测细胞代谢物、脂质的方法 | |
| CN106289919A (zh) | 一种用于分析水溶液中蛋白质二级结构的傅里叶变换红外光谱样品准备方法 | |
| CN107677808A (zh) | 一种甲状腺球蛋白的定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法 | |
| US6569685B1 (en) | Protein fingerprint system and related methods | |
| CN108287206B (zh) | 一种毛发中巴比妥类药物定量检测方法及应用 | |
| CN103048471A (zh) | 一种定量检测蛋白乙酰化水平的方法 | |
| Aoyagi | Review of TOF‐SIMS bioanalysis using mutual information | |
| CN205333650U (zh) | 一种ngal时间分辨荧光纳米免疫层析定量检测试纸条 | |
| CN111189954A (zh) | 一种tlc-sers联用检测毛发中毒品的方法 | |
| CN104198706B (zh) | 一种肿瘤标志物电化学免疫传感器的制备方法 | |
| CN102375063A (zh) | 一种常见蛋白质的免疫质谱试剂盒及制备方法 | |
| CN109212195A (zh) | 一种利用磁微粒化学发光法快速检测人amh的试剂盒 | |
| CN101514986A (zh) | 一种利用局域表面等离子体增强的无标记生化探测方法 | |
| Jin et al. | A CE–LIF method to monitor autophagy by directly detecting LC3 proteins in HeLa cells | |
| CN104062287A (zh) | 一种基于纳米金催化的化学发光分析检测铁蛋白的方法 | |
| TW200946905A (en) | Method and device to detect biological molecule using single-dielectrophoresis | |
| CN114166917A (zh) | 一种电化学分离、检测及释放外泌体的方法 | |
| CN113281309A (zh) | 一种毒死蜱、多菌灵、阿特拉津三合一检测方法 | |
| CN107202893B (zh) | 一种小分子芯片、其构建方法、其应用及其检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170104 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |