CN106279303A

CN106279303A - N‑4‑苯磺酰胺基‑N’‑1‑脱氧‑(2‑脱氧‑2‑取代氨基)‑β‑D‑吡喃葡萄糖基硫脲化合物及其用途

Info

Publication number: CN106279303A
Application number: CN201610718089.4A
Authority: CN
Inventors: 刘洋; 郭春; 侯状; 程卯生
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Priority date: 2016-08-25
Filing date: 2016-08-25
Publication date: 2017-01-04
Anticipated expiration: 2036-08-25
Also published as: CN106279303B

Abstract

本发明公开了一类具有抑制碳酸酐酶活性、进而达到抗肿瘤转移侵袭效果的具有通式（）所示结构的新型N‑4‑苯磺酰胺基‑N’‑1‑脱氧‑(2‑脱氧‑2‑取代氨基)‑β‑D‑吡喃葡萄糖基硫脲化合物。该类化合物在结构上具有磺胺、取代氨基葡萄糖和硫脲三个活性片段，通过与碳酸酐酶中的Zn²⁺离子形成配位键，实现抑制酶的催化活性，发挥抗肿瘤转移侵袭的作用，在作为抗肿瘤药物方面具有潜在应用。本发明涉及的通式（）中的R的定义见说明书。

Description

N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物及其用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物及其制备方法和医药用途，具体涉及新颖的N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物及其制备方法和对碳酸酐酶IX的抑制作用，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

碳酸酐酶(Carbonic anhydrases，CAs)普遍存在于生物体内，是一类含锌金属酶，主要生理作用是催化二氧化碳的可逆水合反应，对诸如体内的气体交换、离子交换和维持细胞内外pH的平衡等生理过程至关重要。其中，碳酸酐酶IX(CA IX)为跨膜蛋白，目前已经被鉴定为肿瘤相关蛋白，除了胃肠粘膜组织有一定表达外，在其它正常组织中几乎不表达，而在许多实体瘤中却高度表达，并参与调节癌细胞增殖和转化，肿瘤转移和侵袭(KimS.J.,et a1.Clin Cancer Res,2004,l0:7925–7933；Shurin G.V.,et al.Cancer Res,2001,61:363–369.)。因此，CA IX已经成为了一个潜在的抗肿瘤药物作用靶点，其抑制剂的研究已经发展成为一个令人瞩目的新型抗肿瘤策略。

尽管CA IX为跨膜蛋白，但其胞外催化域是生物功能的关键区域，催化中心位于一个锥形腔内，该空腔从蛋白质表面贯穿到中心，分为疏水区和亲水区两部分，Zn²⁺离子则位于这个空腔的最底部，成为抑制剂分子的主要结合位点。这种结构与细胞质内碳酸酐酶CAI和CA II的活性中心大体类似，功能也基本相同，但也为设计高选择性CA IX抑制剂创造了极大的难题(Monti S.M.,et al.Curr Med Chem,2012,19:821–830.)。

由于CA I、CA II和CA IX晶体结构的高度相似性，单纯以酶的结构为依据设计选择性抑制剂比较困难，近些年出现了“非膜渗透性抑制剂”的理论，从这些同工酶的亚细胞定位的不同上来设计靶向不同的同工酶的抑制剂(Thiry,A.,et al.J Med Chem,2008,51:3051–3056.)。从亚细胞定位上看，CA I、CA II只存在于细胞质中，而肿瘤相关的CA IX则存在于细胞膜上，并且其活性中心位于细胞膜外。因此，合理设计非膜渗透性抑制剂，可以实现靶向CA IX，而不会作用于CA I和CA II，由此可避免药物脱靶造成的副作用，大大提高了抑制剂的成药性。

此外，研究发现，CA IX中有一些氨基酸残基是其他同工酶所不具有的，比如天门冬氨酸(Asp132)残基的存在，可以在抑制剂中引入带正电的侧链，使其与Asp132形成离子相互作用，增加分子与酶的结合力。另外，带有游离羟基的苏氨酸(Thr69)残基位于空腔的亲水口袋、带有胍基的精氨酸(Arg130)残基位于空腔的入口处，可以在抑制剂中引入能与之形成氢键的基团。此外，CA IX一级序列的131位为缬氨酸(Val131)，而其胞质同工酶CAII为苯丙氨酸(Phe131)，因此加大抑制剂的空间位阻或许可以增加对CA IX的作用选择性(Alterio,V.,et al.J Am Chem Soc,2006,128:8329–8335；Thiry,A.,et al.J Med Chem,2006,49:2743–2749.)。

发明内容

本发明的目的在于设计与合成一类新型的N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物，进行具有治疗癌症的药物创制研究。

为了完成本发明之目的，可采用如下技术方案：

本发明是涉及具有通式(I)结构的新型N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物，及其光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的盐。

其中：

R为取代或未取代的苯基，所述取代基为C₁－C₃烷氧基；

优选地，R为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲氧基；

进一步地，

R优选为(1)2-甲氧基苯基，(2)3-甲氧基苯基(3)4-甲氧基苯基，(4)2,3-二甲氧基苯基，(5)2,4-二甲氧基苯基，(6)2,5-二甲氧基苯基，(7)2,6-二甲氧基苯基，(8)3,4-二甲氧基苯基，(9)3,5-二甲氧基苯基，(10)2,3,4-三甲氧基苯基，(11)2,3,5-三甲氧基苯基，(12)2,3,6-三甲氧基苯基，(13)2,4,5-三甲氧基苯基，(14)2,4,6-三甲氧基苯基，(15)3,4,5-三甲氧基苯基的一种；

R特别优选为(1)2-甲氧基苯基，(2)3-甲氧基苯基(3)4-甲氧基苯基，(4)2,3-二甲氧基苯基，(5)2,4-二甲氧基苯基，(6)2,4,5-三甲氧基苯基，(7)3,4,5-三甲氧基苯基的一种；

本发明还包括如下具体的N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物，及其光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的盐：

为了制备本发明通式(I)所述的化合物，及其光学活性体，非对映异构体，采用如下路线合成该类化合物：将氨基葡萄糖盐酸盐的氨基以2,2,2-三氯乙氧酰基保护得中间体2，中间体2引入苯甲酰基得到中间体3，中间体3在氢溴酸的醋酸溶液中发生取代反应得到中间体4，中间体4与硫氰酸铵发生取代反应得到中间体5，中间体5与磺胺反应生成中间体6，中间体6用锌粉-冰醋酸处理脱去2,2,2-三氯乙氧酰基得到中间体7，中间体7在冰浴条件下与各种取代的肉桂酰氯发生酰胺化反应制得中间体8，最后在碱性溶液中脱去糖上的全部苯甲酰基得到通式(I)的化合物。

反应式如下：

更具体地，反应式为：

其中，

R为取代或未取代的苯基，所述取代基为C₁-C₃烷氧基。

本发明基于CA IX的结构特征和亚细胞定位，设计合成选择性非膜渗透性CA IX抑制剂，选用亲水性的氨基葡萄糖为骨架，通过硫脲柔性连接基团引入靶向CA IX活性中心的经典药效团磺胺片段，并在糖上氨基以酰胺形式接入取代肉桂酰基结构，以此与天门冬氨酸(Asp132)残基产生作用，整体结构可选择性抑制胞外的CA IX催化活性，发挥抗肿瘤作用。

具体实施方式

联系如下实施例，将更好地理解本发明的化合物和他们的制备，这些实施例旨在阐述而不是限制本发明的范围。

实施例1：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-4’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A1)

将氨基葡萄糖盐酸盐(15g，69mmol)溶于150mL水中，加入碳酸氢钠(17.39g，207mmol)和氯甲酸三氯乙酯(11.45mL，83mmol)，反应5h，抽滤，干燥，得白色固体20g，产率90％。

将上述产物悬浮于吡啶(50mL)中，冰浴下滴加70mL苯甲酰氯，反应5h。待溶液澄清后，加入200mL水搅拌20min，用二氯甲烷萃取3次，有机层水洗3次，稀盐酸调pH至5，饱和碳酸氢钠调pH至7，水洗2次，无水硫酸钠干燥。过滤，减压除去溶剂得中间体3。

将上述粗品溶于干燥二氯甲烷，冰浴下滴加70mL HBr/AcOH溶液，反应2h后加入200mL水搅拌20min，用二氯甲烷萃取3次，有机层水洗3次，稀盐酸调pH至5，饱和碳酸氢钠调pH至7，水洗2次，无水硫酸钠干燥。柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得到26g中间体4，两步产率62％。

称取溴代糖(26g，35.76mmol)和干燥的硫氰酸铵(2.7g，35.76mmol),加入丙酮和无水乙腈各50mL，50℃搅拌2h。滤掉白色固体，滤液浓缩，以石油醚/乙酸乙酯(5:1)柱层析得14g白色固体5，产率55％。

将磺胺(3.4g，19.77mmol)和中间体5(14g，19.77mmol)溶于吡啶，室温反应1h。反应液用二氯甲烷萃取3次，有机层水洗3次，稀盐酸调pH至5，饱和碳酸氢钠调pH至7，水洗2次，无水硫酸钠干燥。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝40:1)得到16g中间体6，产率92％。

中间体6(16g，18mmol)溶于40mL的冰乙酸中，加入锌粉(39g，600mmol)，室温反应2h，反应液浓缩，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝25:1)提纯，得10.8g中间体7，产率85％。

中间体7(200mg，0.284mmol)溶于10mL吡啶，冰浴条件下滴加对甲氧基肉桂酰氯，反应1h，用甲醇淬灭反应，浓缩，二氯甲烷萃取3次，有机层水洗3次，稀盐酸调pH至5-6，饱和碳酸氢钠调pH至7，水洗2次，无水硫酸钠干燥。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝15:1)提纯，得到200mg中间体8，产率81％。

中间体8(100mg，0.11mmol)加入10mL的甲醇中，加入1M甲醇钠/甲醇溶液0.3mL，室温反应10min，加入阳离子交换树脂搅拌调pH至7左右，过滤，滤液浓缩，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝10:1)，得到白色固体55.9mg，产率87.5％。

Mp 165.5–167.2℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.37(s,1H),8.22(s,1H),8.02(s,1H),7.71(dd,J＝23.0,8.8Hz,4H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝15.5Hz,1H),7.27(s,2H),6.98(d,J＝8.7Hz,2H),6.51(d,J＝15.8Hz,1H),5.42(s,1H),5.04(s,2H),3.82(d,J＝9.3Hz,1H),3.78(s,3H),3.65(d,J＝10.8Hz,1H),3.52(dd,J＝11.8,4.5Hz,1H),3.44(d,J＝7.0Hz,2H),3.23(dd,J＝17.2,8.4Hz,1H),3.16(d,J＝9.9Hz,1H)；ESI-MS(m/z):575.4[M+H]⁺。

实施例2：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-3’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A2)

实施例2的化合物制备方法同实施例1，只是使用间甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体57.4mg，产率89.8％。

Mp 170.9–172.7℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.38(s,1H),8.33(d,J＝6.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.73(d,J＝8.9Hz,2H),7.69(d,J＝8.7Hz,2H),7.41(d,J＝15.5Hz,1H),7.33(t,J＝7.9Hz,1H),7.29(s,2H),7.14(d,J＝7.4Hz,1H),7.12(s,1H),6.97–6.94(m,1H),6.66(d,J＝15.5Hz,1H),5.43(s,1H),5.10(s,2H),3.83(d,J＝9.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.64(d,J＝11.0Hz,1H),3.51(dd,J＝11.8,4.4Hz,1H),3.44(dd,J＝14.0,7.0Hz,2H),3.23(t,J＝9.1Hz,1H),3.16(d,J＝8.8Hz,1H)；ESI-MS(m/z):575.4[M+Na]⁺。

实施例3：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A3)

实施例3的化合物制备方法同实施例1，只是使用邻甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体53.2mg，产率83.3％。

Mp 172.9–174.5℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.37(s,1H),8.31(s,1H),8.01(s,1H),7.72(d,J＝14.0,8.8Hz,5H),7.52(d,J＝7.3Hz,1H),7.37(t,J＝7.8Hz,1H),7.27(s,2H),7.07(d,J＝8.3Hz,1H),6.99(t,J＝7.5Hz,1H),6.70(d,J＝15.7Hz,1H),5.43(s,1H),5.07(d,J＝20.3Hz,2H),4.52(s,1H),3.85(s,3H),3.65(s,1H),3.55–3.50(m,1H),3.44(dd,J＝7.0,5.1Hz,2H),3.24(dd,J＝14.8,9.0Hz,1H),3.16(d,J＝6.6Hz,1H)；ESI-MS(m/z):575.5[M+Na]⁺。

实施例4：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,3’-二甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A4)

实施例4的化合物制备方法同实施例1，只是使用2,3-二甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体50mg，产率76.8％。

Mp 164.6–166.7℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.41(s,1H),8.37(d,J＝7.7Hz,1H),8.01(t,J＝15.3Hz,1H),7.76–7.66(m,5H),7.30(d,J＝10.1Hz,2H),7.15(d,J＝7.7Hz,1H),7.11(t,J＝7.8Hz,1H),7.07(d,J＝8.0Hz,1H),6.67(d,J＝15.9Hz,1H),5.43(s,1H),5.10(s,2H),3.90–3.82(m,1H),3.81(s,3H),3.72(s,3H),3.64(s,1H),3.52(dd,J＝12.0,4.2Hz,1H),3.4–3.42(m,2H),3.24(t,J＝9.1Hz,1H),3.17–3.12(m,1H)；ESI-MS(m/z):605.4[M+Na]⁺。

实施例5：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,4’-二甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A5)

实施例5的化合物制备方法同实施例1，只是使用2,4-二甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体56.2mg，产率86.5％。

Mp 148.5–150.2℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.46(d,J＝66.9Hz,1H),8.25(dd,J＝27.8,7.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.83–7.74(m,1H),7.71(dd,J＝22.9,8.8Hz,4H),7.61(d,J＝16.2Hz,1H),7.45(d,J＝8.4Hz,1H),7.29(s,2H),6.60(s,1H),6.60–6.57(m,1H),5.40(s,1H),5.08(s,2H),4.56(s,1H),3.85(s,3H),3.80(s,3H),3.76(s,1H),3.63(s,1H),3.54–3.49(m,2H),3.23(dd,J＝16.4,7.5Hz,1H),3.12(s,1H)；ESI-MS(m/z):605.4[M+Na]⁺。

实施例6：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,4’,5’-三甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A6)

实施例6的化合物制备方法同实施例1，只是使用2,4,5-三甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体54.7mg，产率82.6％。

Mp 164.4–167.2℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.40(s,1H),8.19(s,1H),8.02(s,1H),7.73(d,J＝8.6Hz,2H),7.69(d,J＝8.7Hz,2H),7.65(d,J＝15.8Hz,1H),7.29(s,2H),7.07(s,1H),6.71(s,1H),6.57(d,J＝15.8Hz,1H),5.39(s,1H),5.08(s,2H),4.55(s,1H),3.84(s,3H),3.83(s,3H),3.78(d,J＝11.5Hz,1H),3.74(s,3H),3.54–3.49(m,1H),3.44(d,J＝7.0,5.1Hz,2H),3.23(dd,J＝14.7,8.8Hz,1H),3.14(s,1H)；ESI-MS(m/z):635.4[M+Na]⁺。

实施例7：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-3’,4’,5’-三甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲(A7)

实施例7的化合物制备方法同实施例1，只是使用3,4,5-三甲氧基肉桂酰氯替代了对甲氧基肉桂酰氯，得白色固体57.6mg，产率92.7％。

Mp 207.4–210.6℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ10.35(s,1H),8.25(s,1H),8.03(s,1H),7.73(d,J＝8.7Hz,2H),7.69(d,J＝8.8Hz,2H),7.38(d,J＝15.6Hz,1H),7.27(s,2H),6.90(s,2H),6.61(d,J＝15.5Hz,1H),5.41(s,1H),5.06(d,J＝16.4Hz,2H),4.52(s,1H),3.81(s,7H),3.68(s,3H),3.67–3.63(m,1H),3.54–3.50(m,1H),3.44(d,J＝6.8Hz,1H),3.25–3.21(m,1H),3.17(s,1H)；ESI-MS(m/z):635.5[M+Na]⁺。

本发明产物的药理研究

(1)采用酶水解法测定化合物A1－A7对人源碳酸酐酶IX(hCA IX)的抑制作用。用分析缓冲液将底物稀释到2mM，用分析缓冲液将酶稀释到20ng/μL，将50μL酶加入到96孔板中，加入抑制剂，室温下孵育15min，加入25μL2mM底物起始反应，10min后酶标仪读取348nm吸光度值。测试7个不同浓度的抑制率得到IC₅₀值，抑制率计算公式如下：

％inhibition＝(1-sample activity/total activity)*100

所测结果如下表：

(2)采用MTT法测定化合物A1－A7对人结肠癌细胞HT-29的细胞活力抑制作用。取对数生长期的上述细胞，将细胞密度调整至2×10⁴个/孔埋入96孔板，37℃培养24小时后，除阴性对照组外，每组设三个平行孔，加入相应药物，继续于37℃下培养24小时后每孔加入MTT(0.5mg/mL)溶液培养3小时，弃去上清液，以PBS清洗残留药物后，每孔加入100μL DMSO，于微量振荡器振荡10分钟以将结晶完全溶解，随后用Emax Microplate Reader(MolecularDevices,Sunnyvale,CA,USA)测定各孔在540nm处的吸光值，根据阴性对照组计算细胞活力抑制率：

Inhibitory ratio(％)＝(A_540,control–A_{540,experiment})/(A_540,control–A_540,blank)×100

所测结果如下表：

Claims

1.通式(I)的N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-(2-脱氧-2-取代氨基)-β-D-吡喃葡萄糖基硫脲化合物，及其光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的盐：

其中：

R为取代或未取代的苯基，所述取代基为C₁－C₃烷氧基。

2.权利要求1所述的化合物，及其光学异构体，非对映异构体和药学上可接受的盐，其中，R为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲氧基。

3.权利要求1－2任何一项所述的化合物，及其光学异构体，非对映异构体和药学上可接受的盐，其中，

R为(1)2-甲氧基苯基，(2)3-甲氧基苯基(3)4-甲氧基苯基，(4)2,3-二甲氧基苯基，(5)2,4-二甲氧基苯基，(6)2,5-二甲氧基苯基，(7)2,6-二甲氧基苯基，(8)3,4-二甲氧基苯基，(9)3,5-二甲氧基苯基，(10)2,3,4-三甲氧基苯基，(11)2,3,5-三甲氧基苯基，(12)2,3,6-三甲氧基苯基，(13)2,4,5-三甲氧基苯基，(14)2,4,6-三甲氧基苯基，(15)3,4,5-三甲氧基苯基的一种。

4.权利要求1－3任何一项所述的化合物，及其光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的盐，选自：

A1：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-4’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A2：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-3’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A3：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’-甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A4：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,3’-二甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A5：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,4’-二甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A6：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-2’,4’,5’-三甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

A7：N-4-苯磺酰胺基-N’-1-脱氧-[(2-脱氧-2-氨基-N-反-3’,4’,5’-三甲氧基肉桂酰基)-β-D-吡喃葡萄糖酰胺基]硫脲

5.权利要求1－4任何一项所述化合物及其光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于：

将氨基葡萄糖盐酸盐的氨基以2,2,2-三氯乙氧酰基保护得中间体2，中间体2 引入苯甲酰基得到中间体3，中间体3在氢溴酸的醋酸溶液中发生取代反应得到中间体4，中间体4与硫氰酸铵发生取代反应得到中间体5，中间体5与磺胺反应生成中间体6，中间体6用锌粉在酸溶液中处理脱去2,2,2-三氯乙氧酰基得到中间体7，中间体7在冰浴条件下与各种取代的肉桂酰氯发生酰胺化反应制得中间体8，最后在碱性溶液中脱去糖上的全部苯甲酰基得到通式(I)的化合物；

其中，R如权利要求1－4所述。

6.一种药物组合物，包含权利要求1－4任何一项所述的化合物及其光学活性体，非对映异构体，药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

7.一种药物制剂，包含权利要求1－4任何一项所述的化合物及其光学活性体，非对映异构体，药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物。

8.权利要求1－4任何一项所述的化合物及其光学活性体，非对映异构体，药学上可接受的盐或权利要求6所述药物组合物或权利要求7所述的药物制剂在制备抑制碳酸酐酶药物中的应用。

9.权利要求1－4任何一项所述的化合物及其光学活性体，非对映异构体，药学上可接受的盐或权利要求6所述药物组合物或权利要求7所述的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。