CN106266265A - 一种裸花紫珠中药组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种裸花紫珠中药组合物及其制备方法和用途，所述组合物含有1份裸花紫珠石油醚萃取有效部位B和2-4份裸花紫珠提取物C，本发明所得组合物具有治疗结核病的作用。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法及其治疗结核病的用途。
背景技术
裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)为马鞭草科紫珠属植物，产自我国海南、广西、广东，印度、越南、马来西亚等地也有分布，其根、叶可入药，具有收敛止血、消炎解毒等功效。近两年对裸花紫珠的抗结核杆菌的作用有少量研究，如《裸花紫珠对临床分离结核分枝杆菌的体外抑菌作用》(中华中医药杂志，2014,29(11)：3630-3632)、《裸花紫珠收敛止血及对结核分枝杆菌的抗菌作用研究》(湖南师范大学，2014年硕士论文)，初步研究了对裸花紫珠干浸膏对结核分枝杆菌的作用，但尚未明晰其物质基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种裸花紫珠中药组合物，通过以下技术方案实现：
一种中药组合物，其特征在于含有重量份为1份裸花紫珠石油醚萃取有效部位B和2-4份裸花紫珠提取物C，其中所述裸花紫珠石油醚萃取有效部位B的制备方法为：
(1)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90％-95％乙醇加热回流提取1-3次，得提取液，过滤后所得滤液浓缩成浸膏A，
(2)步骤(1)所得浸膏A均匀分散于水中，加入石油醚萃取，除去溶剂，浓缩，干燥得到石油醚萃取有效部位B，
所述裸花紫珠提取物C的制备方法为：
取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90-95％乙醇加热回流提取1-3次，提取液滤过，合并，滤液浓縮至相对密度为1.04－1.06(60℃)的清膏，加入浓缩液总重4％－6％的1％的壳聚糖醋酸溶液，搅匀，冷却，静置16－24小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.10(60℃)的清膏，加入DM-130树脂，静态吸附20-24h，滤过，滤液浓缩干燥得裸花紫珠提取物C。
作为上述方案的优选，所述石油醚萃取有效部位B的制备方法步骤(1)为：取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入95％乙醇加热回流提取3次，得提取液，过滤后所得滤液减压浓缩得浸膏A。
本发明中药组合物中所述裸花紫珠提取物C的重量份优选为3份。
本发明的另一个目的是提供所述中药组合物的制备方法，技术方案如下：
本发明所述中药组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90％-95％乙醇加热回流提取1-3次，得提取液，过滤后所得滤液浓缩成浸膏A，
(2)步骤(1)所得浸膏A均匀分散于水中，加入石油醚萃取，除去溶剂，浓缩，干燥得到石油醚萃取有效部位B，
(3)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90-95％乙醇加热回流提取1-3次，提取液滤过，合并，滤液浓縮至相对密度为1.04－1.06(60℃)的清膏，加入浓缩液总重4％－6％的1％的壳聚糖醋酸溶液，搅匀，冷却，静置16－24小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.10(60℃)的清膏，加入DM-130树脂，静态吸附20-24h，滤过，滤液浓缩干燥得裸花紫珠提取物C，
(4)石油醚萃取有效部位B与裸花紫珠提取物C以1:2-4的重量比例混合，即得。
本发明的另一个目的是提供所述中药组合物在制备具有抗结核杆菌作用药物中的用途和在制备治疗结核病药物中的用途。
本发明所述的中药组合物，可以含有有效量的上述任一项所述中药组合物和药学上可接受的辅料，制备成药物制剂。
裸花紫珠的化学成分有黄酮及苷类、三萜及苷类、二萜、苯乙醇苷类、酚酸类、甾体类、挥发油等，目前已从中分离得到100余个化合物。然而现有的对裸花紫珠成分与抗结核分枝杆菌作用的研究相对薄弱，已有研究结论推测主要作用成分是黄酮类。众所周知，中药成分复杂，一般通过多组分、多靶点、整体协同作用发挥抗结核作用，多重耐药性结核杆菌的出现使得控制结核病仍然是一个急需解决的全球性难题。发明人在前期研究基础上，对抗结核杆菌活性成分群做了深入的研究，通过采用溶剂(水、甲醇、乙醇、丙酮等)提取，结合大孔树脂或活性碳或陶瓷膜或萃取等等分离方法，联合质谱、液相等分析技术，最终得出本发明的技术方案，其实验效果与对比例、阳性对照药等对比见具体实施方式。
发明人在前期研究基础上，深入研究后，石油醚部位和特定工艺所得裸花紫珠提取物以特定的比例所得混合物的抗结核杆菌作用更强，这与壳聚糖醋酸溶液和DM-130通过吸附、聚合、沉淀、分离等方式，将裸花紫珠经醇提后药渣的水提物中粘液质、多糖、色素等非活性成分和可能对抗结核作用起拮抗作用的成分除去，另一方面进一步富集和纯化活性成分，联合裸花紫珠石油醚萃取有效部位，从而大大提高单位中药组合物的生物活性，为后续新产品的研究和开发奠定物质基础。
本发明的有益效果：(1)获得抗结核分枝杆菌作用较强的中药组合物，(2)制备方法操作简便。
具体实施方式
以下将进一步通过举例详细说明，发明人通过不同制备工艺得到相应的实施例和对比例，并测得实施例、对比例、阳性对照药的MIC值，详见表1。
发明人通过如下工艺制得实施例：
1、裸花紫珠石油醚萃取有效部位B的制备：
(1)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90％-95％乙醇加热回流提取1-3次，得提取液，过滤后所得滤液浓缩成浸膏A，
(2)步骤(1)所得浸膏A均匀分散于水中，加入石油醚萃取，除去溶剂，浓缩，干燥得到石油醚萃取有效部位B，
2、裸花紫珠提取物C的制备：
取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90-95％乙醇加热回流提取1-3次，提取液滤过，合并，滤液浓縮至相对密度为1.04－1.06(60℃)的清膏，加入浓缩液总重4％－6％的1％的壳聚糖醋酸溶液，搅匀，冷却，静置16－24小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.10(60℃)的清膏，加入DM-130树脂，静态吸附20-24h，滤过，滤液浓缩干燥得裸花紫珠提取物C。
3、将裸花紫珠石油醚萃取有效部位B与裸花紫珠提取物C以1:2-4的重量比混合即得，所用石油醚萃取有效部位B与裸花紫珠提取物C均浓缩干燥至干浸膏。
各实施例、对比例、阳性对照药对抑制结核分枝杆菌的实验方法如下：
1.材料
1.1 菌株：结核分枝杆菌标准菌株MTB H37Rv(湖南省结核病防治所提供)
1.2 培养基及抗菌药物
基础培养基为改良罗氏培养基；抗菌药物为各实施例、对比例、阳性对照药。
1.3 试剂：Middlebrook 7H9肉汤OADC增菌液购自BD Difco公司；阳性对照药异烟肼、利福平、乙胺丁醇购自sigma公司；DMSO去离子水、吐温-80购自国药集团化学试剂有限公司，均为化学分析纯；96微孔板(Corning，美国)；Alamar blue(Serotec，英国)；7H9(Difco，美国)；OADC(BD，美国)。
2.实验和方法
2.1 菌落的准备：依照改良罗氏法配制出基础液将结核杆菌接种培养；
2.2 原液浓度的配制：取约16g本发明所得中药组合物用DMSO溶解，充分溶解后以0.22um滤膜过滤，除菌，备用。对比例所得样品同此法配制。异烟肼5g,乙胺丁醇5g分别用水充分溶解后以0.22um滤膜过滤，除菌，备用。利福平5g用DMSO溶解后以0.22um滤膜过滤，除菌，备用。
2.3 实验
将200ul的无菌去离子水加入到所有无菌的96孔板的外周界的孔，以尽量减少孵育期间在测试孔中的介质的蒸发。以无菌Middlebrook 7H9肉汤稀释裸花紫珠原液和其他三种阳性药物4倍最大期望最终检测浓度(裸花紫珠为32mg/ml，异烟肼为1.6μg/ml，乙胺丁醇为40μg/ml，利福平为8μg/ml)加入检测孔中100ul，然后对药物进行2倍系列稀释分别稀释至1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64。每个药物部分浓度重复2孔。选取罗氏培养基上生长2-3周的新鲜菌落，用玻璃珠磨菌，稀释至1个麦氏浓度(McFarland 1,相当于(3-6)×107CFU/ml」，再以1：25稀释后向微孔板加入100ul菌液，菌液的终浓度约为106CFU/ml。每个菌株设1个不含药物的生长对照孔(阳性对照)和只含有7H9不含药物和菌液的无菌对照孔(阴性对照)，各菌株平行进行3次测试。96孔板于37℃孵育5d后在生长对照孔加入20ulAlamar blue和50ulTweerr80(5％)的混合液，37℃孵育24h，如果颜色从蓝色变为粉色，则在各实验药物孔内加入上述量的Alamar blue和Tweerr80混合液，37℃孵育24h记录各孔的颜色，蓝色孔为无生长，粉红色孔为有生长。如出现紫红色孔，则继续在37℃培养24h，如果不变为粉红色且其相连的蓝色孔仍为蓝色，则记录为有生长。MIC定义为阻止颜色变化(从蓝色变为粉红色)的最低药物浓度。
上述方法平行试验,应用相同的菌液和浓度以及药物在同日内操作,进行3次。报告的MIC结果为2次及2次以上相同的MIC值。实验结果见下表1。
表1
各实施例、空白对照组、阳性对照药组的止血作用的实验方法如下：
将90只健康昆明小白鼠随机分9组(每组10只，雌雄各半)，分为实验组(实施例1-7)、阳性对照药组(云南白药组)、空白对照组，连续给药7天，实验组和阳性对照药组的剂量0.5g/kg，灌胃体积0.2mL/10g体重，空白对照组给予等体积生理盐水，最后一天给药45min后，用剪尾法测定小鼠出血时间(BT)，用毛细玻管法测凝血时间(CT)，评价药物止血效果。实验结果见下表2。
表2 本发明组合物对小鼠止血作用的影响(均数±标准差，N＝10)
| 组别 | 剂量 | BT(秒) | CT(秒) |
| 空白对照组 | 20.56±2.32 | 66.91±4.85 | |
| 实施例1 | 0.5g/kg | 14.61±1.72** | 45.82±3.97** |
| 实施例2 | 0.5g/kg | 13.57±1.35** | 44.86±3.27** |
| 实施例3 | 0.5g/kg | 13.28±1.48** | 43.81±3.72** |
| 实施例4 | 0.5g/kg | 14.17±1.53** | 44.26±3.55** |
| 实施例5 | 0.5g/kg | 14.36±1.29** | 43.57±3.84** |
| 实施例6 | 0.5g/kg | 13.87±1.35** | 42.29±4.13** |
| 实施例7 | 0.5g/kg | 14.30±1.22** | 43.77±3.61** |
| 云南白药组 | 0.5g/kg | 13.98±2.03** | 46.15±3.87** |
*P<0.05，**P<0.01与空白对照组比较。
表1表明本发明所得中药组合物的抗结核杆菌作用较强，与现有技术相比，具有显著差异，可用于制备抗结核杆菌作用的药物中，而且所得组合物具有收敛止血作用(见表2)，可充分发挥收敛止血和抗结核杆菌的综合作用，用于治疗结核病。
Claims (8)
1.一种中药组合物，其特征在于其组分含有重量份为1份裸花紫珠石油醚萃取有效部位B和2-4份裸花紫珠提取物C，其中所述裸花紫珠石油醚萃取有效部位B的制备方法为：
(1)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90％-95％乙醇加热回流提取1-3次，得提取液，过滤后所得滤液浓缩成浸膏A，
(2)步骤(1)所得浸膏A均匀分散于水中，加入石油醚萃取，除去溶剂，浓缩，干燥得到石油醚萃取有效部位B，
所述裸花紫珠提取物C的制备方法为：取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90-95％乙醇加热回流提取1-3次，提取液滤过，合并，滤液浓縮至相对密度为1.04－1.06(60℃)的清膏，加入浓缩液总重4％－6％的1％的壳聚糖醋酸溶液，搅匀，冷却，静置16－24小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.10(60℃)的清膏，加入DM-130树脂，静态吸附20-24h，滤过，滤液浓缩干燥得裸花紫珠提取物C。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述石油醚萃取有效部位B的制备方法步骤(1)为：取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入95％乙醇加热回流提取3次，得提取液，过滤后所得滤液减压浓缩得浸膏A。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述裸花紫珠提取物C的重量份为3份。
4.如权利要求1所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90％-95％乙醇加热回流提取1-3次，得提取液，过滤后所得滤液浓缩成浸膏A，
(2)步骤(1)所得浸膏A均匀分散于水中，加入石油醚萃取，除去溶剂，浓缩，干燥得到石油醚萃取有效部位B，
(3)取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入90-95％乙醇加热回流提取1-3次，提取液滤过，合并，滤液浓縮至相对密度为1.04－1.06(60℃)的清膏，加入浓缩液总重4％－6％的1％的壳聚糖醋酸溶液，搅匀，冷却，静置16－24小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.10(60℃)的清膏，加入DM-130树脂，静态吸附20-24h，滤过，滤液浓缩干燥得裸花紫珠提取物C，
(4)石油醚萃取有效部位B与裸花紫珠提取物C以1:2-4的重量比例混合，即得。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)为：取裸花紫珠药材，粉碎成粗粉，加入95％乙醇加热回流提取3次，得提取液，过滤后所得滤液减压浓缩得浸膏A。
6.权利要求1-3任一项所述中药组合物在制备具有抗结核杆菌作用药物中的应用。
7.权利要求1-3任一项所述中药组合物在制备治疗结核病药物中的应用。
8.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，含有有效量的权利要求1-3任一项所述中药组合物和药学上可接受的辅料，制备成药物制剂。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107951959A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-04-24 | 海南医学院 | 一种裸花紫珠涂膜剂及其制备方法 |
| CN108686045A (zh) * | 2018-07-03 | 2018-10-23 | 江西普正制药有限公司 | 一种裸花紫珠组合物及其治疗咽炎的应用 |
| CN110731989A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 九芝堂股份有限公司 | 一种口喷产品及其制备方法和应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101234159A (zh) * | 2007-01-29 | 2008-08-06 | 陈晓坚 | 一种具有协同作用的药物组合物 |
| CN103479798A (zh) * | 2012-06-13 | 2014-01-01 | 九芝堂股份有限公司 | 一种抗结核杆菌中药及制备方法 |
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2015
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101234159A (zh) * | 2007-01-29 | 2008-08-06 | 陈晓坚 | 一种具有协同作用的药物组合物 |
| CN103479798A (zh) * | 2012-06-13 | 2014-01-01 | 九芝堂股份有限公司 | 一种抗结核杆菌中药及制备方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107951959A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-04-24 | 海南医学院 | 一种裸花紫珠涂膜剂及其制备方法 |
| CN108686045A (zh) * | 2018-07-03 | 2018-10-23 | 江西普正制药有限公司 | 一种裸花紫珠组合物及其治疗咽炎的应用 |
| CN110731989A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 九芝堂股份有限公司 | 一种口喷产品及其制备方法和应用 |
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