JP2014527051A - Ｃ−９位に酸素が官能化されたラブダン誘導体 - Google Patents

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Abstract

本発明は、Leucas stelligeraから単離された、ラブダン系に属する、一般式１
のジテルペンに関し、哺乳類における抗酸菌活性の予防、治療、抑制または成長と増殖のコントロールに有用である。本発明はさらに、それらを含む留出物を単離するためのプロセスについても開示する。
【選択図】なし

Description

本発明は、Leucas stelligeraから単離された、ラブダン系に属する、一般式１のジテ
ルペンに関し、哺乳類における抗酸菌活性の予防、治療、抑制または成長と増殖のコントロールに有用である。本発明はさらに、それらを含む留出物の単離プロセスについても開示する。
結核（ＴＢ）は、２００９年には世界中で約２００万の死亡、９００万の感染を出している、重大であるにもかかわらずおろそかにされている死亡や病気の原因である。歴史上のどの時期よりも、今日において結核は多い。耐性菌の発生とＨＩＶの流行とが重なり、ＴＢは世界的に公の健康危機と化した。しかしながら、利用可能な投薬計画で患者のほとんどを治療できるものの、不十分な世界の薬剤パイプラインと相まってのＭＤＲ、ＳＤＲおよびＸＤＲ−ＴＢの発生は、新しい作用形態や新規な構造体をもつ新薬の開発に向けた継続的な取組みの必要性を示している。従って、新しい抗結核薬の開発のための、新しいリード分子の同定が、現在急務となっている。
シソ科でジテルペン系の、特にロイカス属由来の化合物は、抗結核薬研究において、興味深い物質となっている。２０１１年４月−６月に出版された、International Journal of Pharm Tech Research,ISSN:0974-4304 Vol.3,No.2,pp872-880のVikrant Aryaらによる表題“A Review on Anti-Tubercular Plants”という表題の記事は、抗結核活性に関与するさまざまな植物薬を、アルカロイド、フラボノイド、タンニン、キサントン、トリテルペン、キノン等の化学成分も併せて開示している。上記記事の表２には、アユルヴェーダ由来の一般的な抗結核植物について、簡単な説明がされている。表３には、アルコールを溶剤として使用することにより、（ｉ）シソ科のSalvia hypargeiaと（ii）シソ科のSalvia sclareaの植物からジテルペンが単離された、外来種の抗結核植物が列挙されている。
Nat.Prod.Rep.,2003,20,535-557,付与ＤＯＩ：10.1039/b212154aの、Brent R. Coppに
よる‘Antimycobacterial natural products’という表題の記事は、抗ＴＢ活性を有する天然産物について開示されている。その記事はさらに、抗ＴＢ活性を有するテルペンについて開示している。（ｉ）紅海藻Plocamium cartilagineumからもともと単離された、ハ
ロゲン化モノテルペンは、防藻活性だけでなく、結核菌Ｈ３７Ｒｖに対してＭＩＣ ３２
μｇ／ｍｌ、及びM.avium（ＭＩＣ ６４μｇ／ｍｌ）という、強力な抗抗酸菌活性を示した。（ii）さらに、この研究で、抗結核（結核菌Ｈ３７Ｒｖ）活性を示すと同定されているものは、ジュニペクセルス酸（ＭＩＣ １４．４μｇ／ｍｌ）（２０５）及びスクラレ
オール（ＭＩＣ ６．０μｇ／ｍｌ）（２０６）である。
Der Pharmacia Lettre,2010,2(4):284-296の、Katara Antarikshらによる“Phytochemical Investigation and Antimicrobial Activity of Leucas_cephalotes(Roth.) Spreng.
Whole Herbという表題の記事では、Leucas_cephalotes(Roth.) Spreng（シソ科）は様々な病気を治すと開示されている。その植物には解熱作用があり、また、興奮剤、去痰薬、緩下剤、発汗剤、殺虫剤及び通経剤としても考えられている。Leucas_cephalotes(Roth.)
Spreng. whole herbは、公知のトリテルペン、５つのステロール及び８つのフラボンと
共に、新規なラブダン、ノルラブダン及びアビエダン型ジテルペン及びプロトスタン型トリテルペンとを含む。
茎、葉及び根の横断面の異なる抽出物は、活性成分を同定するため、様々な植物化学物質検査を受け、上記記事の表２に示されている。エタノール及びメタノール抽出物は、他の抽出物と比べ、活性成分が多く含まれると分かった。糖質、プロテイン及びアミノ酸、配糖体、フラボノイド、タンニン及びフェノール及びステロイドのような植物化学物質は、ほとんどの抽出物でよく発見された（しかしながら、前記抽出物は、植物成分としてのジテルペンについては言及されていない）。
J.Nat.Prod.,2006,69(7),pp988-994及び付与ＤＯＩ:10.1021/np058118mの、Samir Kumar Sadhuらによる“Diterpenes from Leucas aspera Inhibiting Prostanglandin-Induced
Contractions”という表題の記事は、公知の化合物であるアスペルフェナマート、マス
リン酸、（−）−イソロリオリド、及びリニホリオシドと共に、４つの新規なジテルペン、ロイカスペロンＡ（１）とＢ（２）とロイカスペロールＡ（３）とＢ（４）、及び３つの新規なイソピマラン配糖体、ロイカスペロシドＡ，Ｂ及びＣ（５−７）に関する。ロイカスペロンＡ（１）、ロイカスペロシドＡ（５）及びＢ（６）及びリニホリオシドは、プロスタグラジン誘発収縮の抑制を示した。
このような新規な分子の研究において、幅広い範囲の植物の抽出物が、その結核に対する抑制可能性を検査された。Leucas stelligeraの抽出物は、検査された抽出物の中で意
外にも最も抗結核特性の効果があると示された。Leucas stelligeraは、野菜として食さ
れる葉付きの食用植物である。この種における化学的及び薬理学的研究は報告されていない。
本発明の主な目的は、Leucas stelligeraから単離された、ヒト型結核菌の治療に有用
である一般式１の化合物を提供することである。
本発明の他の目的は、Leucas stelligeraからのジテルペン化合物の単離及び特性評価
プロセスを提供することである。
［発明の要約］
従って、本発明は、Leucas stelligeraから単離された、ラブダン系に属する、一般式
１のジテルペンを提供する。
本発明の一実施形態によると、一般式１の化合物であって、前記化合物は、以下の化合物群で表される。
本発明の他の実施形態によると、一般式１の化合物は、哺乳類における結核活性の予防、治療、抑制または成長と増殖のコントロールに有用である。
本発明の更に他の実施形態によると、請求項１に記載の一般式１の化合物は、ヒト型結核菌に対するＩＣ５０値が５．０２〜９．８μｇ／ｍｌの範囲内である。
本発明の更に他の実施形態によると、請求項１に記載の一般式１の化合物は、ヒト型結核菌に対するＩＣ９０値が１０．７〜４６．５２μｇ／ｍｌの範囲内である。
本発明の更に他の実施形態によると、
（ｉ）L.stelligeraの地上部分を粉砕した後、２５〜３０℃の範囲内の温度にてアセトン抽出し、アセトン可溶分をろ過し、５０〜１００ｍｍＨｇの範囲内の減圧下にて濃縮させ、緑色を帯びたアセトン抽出物を得る工程と、
（ii）ｐｅｔエーテル中のアセトンを極性１０〜５０％に高めて勾配を持たせたカラムクロマトグラフィ（ＣＣ）を用いて、ステップ（ｉ）の抽出物を分離させ、１１個の留出物（ＬＳ−１〜ＬＳ−１１）を得る工程と、
（iii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ７に、クロロホルム中のアセトニトリルを１％〜
３％まで勾配を持たせたＣＣを行い、１８個の副留出物（ＬＳ７ａ〜ｒ）を得る工程と、
（iv）ステップ（iii）の副留出物ＬＳ７ｉに、石油エーテル中のアセトン１５％のＣ
Ｃを行い、化合物１及び４を得る工程と、
（ｖ）ステップ（ii）の留出物ＬＳ４に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣ
を行い、１０個（ＬＳ４ａ〜ｊ）の副留出物を得る工程と、
（vi）ステップ（ii）の留出物ＬＳ５に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１３個（ＬＳ５ａ〜ｍ）の副留出物を得る工程と、
（vii）ステップ（ｖ）の留出物ＬＳ４ｆ，ＬＳ４ｈ，ＬＳ４ｉとステップ（vi）のＬ
Ｓ５ｊ、ＬＳ５ｋを組み合わせ、アセトン−石油エーテル１５％のＣＣを行い、化合物２を得る工程と、
（viii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ１１に、クロロホルム中のメタノール勾配を５〜２０％としたＣＣを行い、８個の留出物（ＬＳ１１ａ〜ｈ）を得る工程と、
（ix）ステップ（ｖiii）の副留出物ＬＳ１１ｂに、クロロホルム中のメタノール勾配
を１〜３％としたＣＣを行い、６個の副留出物（ＬＳ１１ｂｉ〜ｂｖｉ）を得る工程と、
（ｘ）ステップ（ix）の副留出物ＬＳ１１ｂｖｉに、石油エーテル中のアセトン勾配を５〜５０％としたＣＣを行い、さらに副留出物ＬＳ１１ｂｖｉａを含む副留出物を得る工程と、
（xi）ステップ（ｘ）の副留出物ＬＳ１１ｂｖｉａに、クロロホルム中のアセトニトリル２５％と、クロロホルム中のエチルアセトン３５％の連続的な分取薄層クロマトグラフィ（ＰＴＬＣ）を行い、化合物３を得る工程と、
を含む、一般式１の化合物を抽出するためのプロセスである。
本発明の更に他の実施形態によると、一般式１の群から選択される化合物からなる医薬組成物および薬学的に許容可能なキャリアである。
図１ａは、化合物１の１ＨＮＭＲである。図１ｂは、化合物１のインセット内ＤＥＰＴによる１３ＣＮＭＲである。 図２ａは、化合物２の１ＨＮＭＲである。図２ｂは、化合物２のインセット内ＤＥＰＴによる１３ＣＮＭＲである。 図３ａは、化合物３の１ＨＮＭＲである。図３ｂは、化合物３のインセット内ＤＥＰＴによる１３ＣＮＭＲである。 図４ａは、化合物４の１ＨＮＭＲである。図４ｂは、化合物４のインセット内ＤＥＰＴによる１３ＣＮＭＲである。
［発明の詳細な説明］
Leucas stelligeraの成熟植物は、開花時、２００８年１月３日にプネー，Mulshi地区
の農地で収集された。植物標本集は、プネー，Western Circleのインド植物調査局内に預けられている（voucher番号.SPJ-5）。植物原料は、付着したゴミや不要な植物原料を拭
き落とし、根を取り除き、地上部を陰干しし、切断及び粉砕した。アセトン抽出物を作成するために、粉末の植物原料はアセトンで抽出された。スキーム１に示すように、アセトン抽出物より活性化合物１〜４が単離された。
（スキーム１）
本発明の好ましい一実施形態によると、粉砕されたLeucas stelligeraの地上部に、ア
セトン抽出を行った；留出物の分離、及び、ラブダン系に属するジテルペンを副留出物から単離することについて、上記スキーム１に表す。繰り返し行われたクロマトグラフィにより、L.stelligeraの地上部のアセトン抽出物から単離された４つの化合物が得られた。そのすべては、ラブダン系に属するジテルペンである。ＮＭＲにより確認された化合物の構造（表１及び２）は、以下式１にて得られる。
前記化合物は、分離、沈殿、結晶化、順相クロマトグラフィ、逆相クロマトグラフィ、サイズ排除クロマトグラフィ及びイオン交換クロマトグラフィ、またはそれらの組合せから選択される分離技術の少なくともひとつを使用することにより、留出物／抽出物から単離される。
単離された全ての化合物１〜４は、ＮＭＲにより特性評価され、その詳細を表１及び２に示す。
本発明の好ましい実施形態において、新規なラブダン系は、それらの抗結核活性を評価された。３つの化合物１，２及び３は、マイコバクテリウム（Mycobacterium）に対して
、特に活性が認められた。前記化合物は、明細書中で実証されているように、細胞毒性に対してもさらに評価され、毒性を示さないことが認められた。化合物４もまた、強力な抗結核活性が認められた。
以下実施例は、本発明の実施形態を説明するために例示されるものであり、当然のことながら、その示された詳細は実施例によるものであり、本発明の好ましい実施形態に係る事例説明を目的とするものである。
（実施例１）
粉砕されたL.stelligera（１．８ｋｇ）の地上部を２５〜３０℃の室温にて、アセトンで抽出（３×３Ｌ，１４時間）する。 その混合物をろ過し、減圧下にて濃縮させ、５７
．０ｇの緑色を帯びたアセトン抽出物を得る。その内の５５．０ｇを、さらに、石油エーテル中のアセトンを極性１０〜５０％に高めて勾配を持たせたカラムクロマトグラフィ（ＣＣ）を用いて精製し、１１個の留出物（ＬＳ１〜ＬＳ１１）を生成する。
留出物ＬＳ７（４．１ｇ）に、さらに、クロロホルム中のアセトニトリル１〜３％のＣＣを行い、１８個の副留出物（ＬＳ７ａ〜ｒ）を得る。副留出物ＬＳ７ｉ（２８７．２ｍｇ）に、さらに、石油エーテル中のアセトン１５％のＣＣを行い、化合物１（１２０ｍｇ）及び化合物４（３５ｍｇ）を生成する。
留出物ＬＳ４（５．５ｇ）及びＬＳ５（２．３ｇ）に、さらに、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１０個（ＬＳ４ａ〜ｊ）の副留出物及び１３個（ＬＳ５ａ〜ｍ）の副留出物を生成する。留出物ＬＳ４ｆ，ＬＳ４ｈ，ＬＳ４ｉ及びＬＳ５ｊ，ＬＳ５ｋを保存し、さらに、アセトン−石油エーテル１５％のＣＣを行い、化合物２（１５０ｍｇ）を生成する。
留出物ＬＳ１１（４．９ｇ）に、さらに、クロロホルム中のメタノール勾配を５〜２０％としたＣＣを行い、８個の留出物（ＬＳ１１ａ〜ｈ）を生成する。副留出物ＬＳ１１ｂ（３ｇ）に、さらに、クロロホルム中のメタノール１〜３％のＣＣを行い、６個（ＬＳ１１ｂｉ〜ｂｖｉ）の副留出物を生成する。
Ｓｕｂ副留出物ＬＳ１１ｂｖｉ（３００ｍｇ）に、さらに、石油エーテル中のアセトン勾配を５〜５０％としたＣＣを行い、ＬＳ１１ｂｖｉａを含む副留出物をさらに得る。副留出物ＬＳ１１ｂｖｉａに、クロロホルム中のアセトニトリル２５％とクロロホルム中のエチルアセトン３５％の連続的な分取薄層クロマトグラフィ（ＰＴＬＣ）を行い、化合物３（２０ｍｇ）を生成する。
（実施例２）
化合物１、２、３及び４の抗抗酸菌活性
全ての単離された化合物及びアセトン抽出物について、試験管内（in vitro）においてヒト型結核菌Ｈ３７Ｒａに対するそれらの効果を検査した。化合物１、２、３及び４は、ヒト型結核菌Ｈ３７Ｒａに対する抑制が顕著であることが示された。同様に、ＩＣ５０及びＩＣ９０値も表３に示す。
これらの化合物の選択性を確認するため、化合物１、２及び３について、室内で維持された培養物を用いてEscherichia coli及びMycobacterium smegmatisに対するＩＣ９０値
も同様に検査した。その抑制割合値を表４に示す。
M.smegmatisに対する活性プロトコル：
培養３日目、封を解いて生存細胞を測定するため、マイクロプレートを取り除いた。ＸＴＴの添加前に、４７０ｎｍにおける光学濃度を測定した。２００μＭ ＸＴＴを添加し、１分間振った後、３７℃で２０分間培養した。２０分間培養した後、６０μＭのメナジオンを添加し、１分間混合し、それからさらに３７℃で２０分間培養した。マイクロプレートリーダを用い、４７０ｎｍにおける光学濃度を測定した。培養７日後の低酸素誘導ＸＴＴ還元マイクロプレートアッセイ（ＨＸＲＭＡ）のためにプレートを取り除き、封を解いた。好気的に成長したM.smegmatisに対して、上述した同様のプロトコルを繰り返した
。
E.coliに対する活性プロトコル：
成長の効果は、６時間培養後の、６２０ｎｍにおける培養物の吸光度を測定することにより算出された。
結果：
これらの化合物において、E.coli及びM.smegmatisに対する顕著な効果は全く現れなか
った。故に、これら化合物は、病原抗酸菌に対する選択性を示している。
上記試験は、３回実施され、結果は、平均値±標準偏差（Ｓ．Ｄ．）であった。
（実施例３）
組成（ｉ）
式１の化合物（すなわち、化合物１または化合物２または化合物３）：１０．０％ ｗ／ｗ
ＦＤＡ認可色：０．３ ｗ／ｗ
ＦＤＡ認可フレーバー：０．７％ ｗ／ｗ
ステアリン酸マグネシウム：２．０％ ｗ／ｗ
マンニトール：適量〜１００．０％ ｗ／ｗ
手段：マンニトールを水に溶解し、それに色とフレーバーを添加する。マンニトールに色とフレーバーを吸収させるために、水を蒸発させる。活性成分とステアリン酸マグネシウムとを混合し、ポーチまたはボトルに入れる。
投与方法
水／抽出液（juice）中で粉を分散させる。
組成（ii）
コロソリン酸 ５．０％ ｗ／ｗ
ＦＤＡ認可色 ０．３ ｗ／ｗ
ＦＤＡ認可フレーバー ０．７％ ｗ／ｗ
ステアリン酸マグネシウム ２．０％ ｗ／ｗ
マンニトール 適量〜１００．０％ ｗ／ｗ
手段：マンニトールを水に溶解し、それに色とフレーバーを添加する。マンニトールに色とフレーバーを吸収させるために、水を蒸発させる。活性成分とステアリン酸マグネシウムとを混合し、適当な大きさのカプセルに入れる。
投与方法：
前記カプセルは、水または抽出液（juice）で投与されてもよい。
[本発明の効果]
本発明の化合物１、２、３及び４の分析後、それらの抗結核特性からヒト型結核菌に対して有効であると分かった。
化合物１、２及び３は、ヒト型結核菌の選択的抑制剤であることが分かった。
本発明の植物は食用であり、同定された抗ＴＢ活性源から、結核治療に使用される見込みがある。
化合物４はｃｉｓ−ラブダンと呼ばれる新規な化合物群に属する。
本発明の一実施形態によると、一般式１の化合物であって、前記化合物は、以下の化合物群で表される。
本発明の実施形態によると、
（ｉ）L.stelligeraの地上部分を粉砕した後、２５〜３０℃の範囲内の室温にてアセトン抽出し、アセトン可溶分をろ過し、５０〜１００ｍｍＨｇの範囲内の減圧下にて濃縮させ、緑色を帯びたアセトン抽出物を得る工程と、
（ii）石油エーテル中のアセトンを極性１０〜５０％に高めて勾配を持たせたカラムクロマトグラフィ（ＣＣ）を用いて、ステップ（ｉ）の抽出物を分離させ、１１個の留出物（ＬＳ−１〜ＬＳ−１１）を得る工程と、
（iii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ７に、クロロホルム中のアセトニトリルを１％〜
３％まで勾配を持たせたＣＣを行い、１８個の副留出物（ＬＳ７ａ〜ｒ）を生成する工程と、
（iv）ステップ（iii）の副留出物ＬＳ７ｉに、石油エーテル中のアセトン１５％のＣ
Ｃを行い、化合物１及び４を生成する工程と、
（ｖ）ステップ（ii）の留出物ＬＳ４に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１０個（Ｌ４ａ〜ｊ）の副留出物を生成する工程と、
（vi）ステップ（ii）の留出物Ｌ５に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１３個（Ｌ５ａ〜ｍ）の副留出物を生成する工程と、
（vii）ステップ（ｖ）の留出物Ｌ４ｆ，Ｌ４ｈ，Ｌ４ｉとステップ（vi）のＬ５ｊ，
Ｌ５ｋを組み合わせ、アセトン−石油エーテル１５％のＣＣを行い、化合物２を生成する工程と、
（viii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ１１に、クロロホルム中のメタノール勾配を５〜２０％としたＣＣを行い、８個の留出物（Ｌ１１ａ〜ｈ）を生成する工程と、
（ix）ステップ（viii）の副留出物ＬＳ１１ｂに、クロロホルム中のメタノール勾配を１〜３％としたＣＣを行い、６個の副留出物（Ｌ１１ｂｉ〜ｂｖｉ）を生成する工程と、
（ｘ）ステップ（ix）の副留出物ＬＳ１１ｂｖｉに、石油エーテル中のアセトン勾配を５〜５０％としたＣＣを行う工程と、
（xi）ステップ（ｘ）の留出物１に、クロロホルム中のアセトニトリル２５％と、クロロホルム中のエチルアセトン３５％の連続的な分取薄層クロマトグラフィ（ＰＴＬＣ）を行い、化合物３を生成する工程と、
を含む、一般式１の化合物を抽出するためのプロセスである。

Claims (8)

  1. 一般式１で表される化合物。
  2. 一般式１で表される化合物であり、前記化合物は、以下の化合物群で表される化合物。
  3. 前記化合物は、Leucas stelligaraから単離された式１で表される請求項１に記載の化
    合物。
  4. 一般式１で表される化合物は、哺乳類における結核活性の予防、治療、抑制または成長と増殖のコントロールに有用である。
  5. ヒト型結核菌に対するＩＣ５０値が５．０２〜９．８μｇ／ｍｌの範囲内である一般式１で表される請求項１に記載の化合物。
  6. ヒト型結核菌に対するＩＣ９０値が１０．７〜４６．５２μｇ／ｍｌの範囲内である一般式１で表される請求項１に記載の化合物。
  7. （ｉ）L.stelligeraの地上部分を粉砕した後、２５〜３０℃の範囲内の室温にてアセトン抽出し、アセトン可溶分をろ過し、５０〜１００ｍｍＨｇの範囲内の減圧下にて濃縮させ、緑色を帯びたアセトン抽出物を得る工程と、
    （ii）ｐｅｔエーテル中のアセトンを極性１０〜５０％に高めて勾配を持たせたカラムクロマトグラフィ（ＣＣ）を用いて、ステップ（ｉ）の抽出物を分離させ、１１個の留出物（ＬＳ−１〜ＬＳ−１１）を得る工程と、
    （iii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ７に、クロロホルム中のアセトニトリルを１％〜
    ３％まで勾配を持たせたＣＣを行い、１８個の副留出物（ＬＳ７ａ〜ｒ）を得る工程と、
    （iv）ステップ（iii）の副留出物ＬＳ７ｉに、石油エーテル中のアセトン１５％のＣ
    Ｃを行い、化合物１及び４を得る工程と、
    （ｖ）ステップ（ii）の留出物ＬＳ４に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１０個（Ｌ４ａ〜ｊ）の副留出物を得る工程と、
    （vi）ステップ（ii）の留出物ＬＳ５に、クロロホルム中のアセトニトリル６％のＣＣを行い、１３個（ＬＳ５ａ〜ｍ）の副留出物を得る工程と、
    （vii）ステップ（ｖ）の留出物ＬＳ４ｆ，ＬＳ４ｈ，ＬＳ４ｉとステップ（vi）のＬ
    Ｓ５ｊ、ＬＳ５ｋを組み合わせ、アセトン−石油エーテル１５％のＣＣを行い、化合物２を得る工程と、
    （viii）ステップ（ii）の留出物ＬＳ１１に、クロロホルム中のメタノール勾配を５〜２０％としたＣＣを行い、８個の留出物（ＬＳ１１ａ〜ｈ）を得る工程と、
    （ix）ステップ（ｖiii）の副留出物ＬＳ１１ｂに、クロロホルム中のメタノール勾配
    を１〜３％としたＣＣを行い、６個（ＬＳ１１ｂｉ〜ｂｖｉ）の副留出物を得る工程と、
    （ｘ）ステップ（ix）の副留出物ＬＳ１１ｂｖｉに、石油エーテル中のアセトン勾配を５〜５０％としたＣＣを行い、さらに副留出物ＬＳ１１ｂｖｉａを含む副留出物を得る工程と、
    （xi）ステップ（ｘ）の副留出物ＬＳ１１ｂｖｉａに、クロロホルム中のアセトニトリル２５％とクロロホルム中のエチルアセトン３５％の連続的な分取薄層クロマトグラフィ（ＰＴＬＣ）を行い、化合物３を得る工程と、
    を含む、請求項１に記載の一般式１の化合物を抽出するためのプロセス。
  8. 請求項１に記載の一般式１の群から選択される化合物からなる医薬組成物および薬学的に許容可能なキャリア。
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