CN106266032A - 一种木瓜叶氨基酸的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及农作物深加工领域，尤其涉及一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其中包括以下步骤：1) 粉碎浸泡；2) 过滤浓缩；3) 醇浸；4) 提取；5)交换洗脱。通过本发明的方法步骤将木瓜叶磨成粉并浸泡利于将淀粉等物质浸泡出来，进行二次处理有益将木瓜叶浸泡液中的杂质给过滤掉，将压强控制在一定范围内将木瓜叶中的营养物质很好地浓缩在浓缩液中，然后经过冷浸醇稀为了让浓缩液中的必需氨基酸成分完成稀释在乙醇溶液中进行提取，步骤精准，不仅能够将木瓜叶中的氨基酸成分给提取出来，而且提取充分，具有很广阔的发展前景。
Description
技术领域
本发明涉及农作物深加工领域，尤其涉及一种木瓜叶氨基酸的提取方法。
背景技术
近年来美国和日本研究人员发现，木瓜叶提取物具有抗癌作用，对一系列实验室培养的人类肿瘤细胞有效，其中包括子宫颈癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌等，提取物浓度越高，抗癌效果越明显，但其抗癌原理和发挥抗癌作用的具体成分还有待进一步研究。然而，国内外对木瓜植物的研究主要集中在木瓜果实，对木瓜叶的功能性成分的研究少有报道。
我国木瓜广有栽培，但人们仅对木瓜的保健价值有所认识，而对于具有重要药用价值的茎叶没有重视，果实采收后茎叶大多直接丢弃，造成极大浪费，因此对木瓜叶的开发利用十分必要。本发明以木瓜叶为原料，对其中的氨基酸进行提取，并采用HPLC 法分析木瓜叶氨基酸的组成，以期为木瓜叶功能性成分的研究开发提供参考。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足，提供了一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，是通过以下步骤实现的：
1) 粉碎浸泡：将木瓜叶清洗干净，打磨成粗粉并用清水常温下浸泡12-16 小时，得木瓜叶粗粉浸泡液，将木瓜叶磨成粉并浸泡利于将淀粉等物质浸泡出来，便于后边步骤的提取；
2) 过滤浓缩：将步骤1) 中得到的木瓜叶粗粉浸泡液进行二次过滤处理，取过滤液置于浓缩装置中进行减压浓缩，进行二次处理有益将木瓜叶浸泡液中的杂质给过滤掉，将压强控制在一定范围内将木瓜叶中的营养物质很好地浓缩在浓缩液中；
3) 醇浸：在步骤2) 中的浓缩液加入质量百分比浓度为78％ -80％的乙醇进行搅拌处理，然后进行一次冷浸处理，冷浸时间为40-60 分钟，然后取上清液再加入质量百分比为80％ -85％的乙醇进行二次冷浸处理，冷浸时间为40-60 分钟，冷浸醇稀为了让浓缩液中的必需氨基酸成分完成稀释在乙醇溶液中；
4) 提取：将步骤3) 中的醇浸液置于回流装置中先进行乙醇回流处理，然后再进行沸水回流提取，将醇浸液先进行醇提取再进行水提取，步骤精准，提取充分；5) 交换洗脱：将步骤4) 中的回流提取液置于强酸性阳离子交换树脂中进行交换处理然后用碱性溶液进行洗脱，收集到的液体为从木瓜叶中提取的必需氨基酸，在酸性条件下，带正电荷的氨基与树枝上的-SO3H 交换，可以将氨基酸交换出来。
6)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重。
优选的是，所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤1) 中粗粉的粒径为30-50目，粗粉与清水的料液比为1:10-1:15。
优选的是，所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤2) 中浓缩的压力控制在50-60kpa。
优选的是，所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤3) 中一次冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1:10-1:20，二次冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1:8-1:15，冷浸的温度控制在15-20℃。
优选的是，所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤4) 中乙醇回流提取中乙醇的浓度为78％-90％。
本发明的有益效果，通过本发明的方法步骤将木瓜叶磨成粉并浸泡利于将淀粉等物质浸泡出来，进行二次处理有益将木瓜叶浸泡液中的杂质给过滤掉，将压强控制在一定范围内将木瓜叶中的营养物质很好地浓缩在浓缩液中，然后经过冷浸醇稀为了让浓缩液中的必需氨基酸成分完成稀释在乙醇溶液中进行提取，步骤精准，不仅能够将木瓜叶中的氨基酸成分给提取出来，而且提取充分，具有很广阔的发展前景。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝对不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，这些都包括在本发明的范围内。
实施例1
1) 粉碎浸泡：取500克木瓜叶清洗干净，打磨成粗粉，粗粉的粒径为30-50 目，加入清水，粗粉与清水的料液比为1:10，常温下浸泡12 小时，得木瓜叶粗粉浸泡液，将木瓜叶磨成粉并浸泡利于将淀粉等物质浸泡出来，便于后边步骤的提取；
2) 过滤浓缩：将步骤1) 中得到的木瓜叶粗粉浸泡液进行二次过滤处理，取过滤液置于浓缩装置中进行减压浓缩，压强控制在50kpa，进行二次处理有益将木瓜叶浸泡液中的杂质给过滤掉，将压强控制在一定范围内将木瓜叶中的营养物质很好地浓缩在浓缩液中；
3) 醇浸：在步骤2) 中的浓缩液加入质量百分比浓度为78％的乙醇进行搅拌处理，冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1:10，冷浸的温度控制在15℃，冷浸时间为60 分钟，然后取上清液再加入质量百分比为85％的乙醇进行二次冷浸处理，二次冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1:15，冷浸时间为60分钟，冷浸醇稀为了让浓缩液中的必需氨基酸成分完成稀释在乙醇溶液中；
4) 提取：将步骤3) 中的醇浸液置于回流装置中先进行乙醇回流处理，然后再进行沸水回流提取，乙醇回流提取中乙醇的浓度为78％，将醇浸液先进行醇提取再进行水提取，步骤精准，提取充分；
5) 交换洗脱：将步骤4) 中的回流提取液置于强酸性阳离子交换树脂中进行交换处理然后用碱性溶液进行洗脱，收集到的液体为从木瓜叶中提取的必需氨基酸，在酸性条件下，带正电荷的氨基与树枝上的-SO3H 交换，可以将氨基酸交换出来；
6)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到木瓜叶氨基酸成品。
本发明得到的木瓜叶氨基酸成品检测结果如下：
表1 木瓜叶中氨基酸的组成及含量
本发明氨基酸提取率3.67%，HPLC分析结果表明，木瓜叶中含有13种氨基酸，总含量为4.66 mg/g，其中必需氨基酸7种，占总氨基酸含量的22.96%；非必需氨基酸6种，占总氨基酸含量的77.04%。在各种氨基酸中，精氨酸含量最多，占总氨基酸含量的43.78%； 其次是苏氨酸和丙氨酸。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (5)
1.一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1) 粉碎浸泡：将木瓜叶清洗干净，打磨成粗粉并用清水常温下浸泡12-16 小时，得木瓜叶粗粉浸泡液；
2) 过滤浓缩：将步骤1) 中得到的木瓜叶粗粉浸泡液进行二次过滤处理，取过滤液置于浓缩装置中进行减压浓缩；
3) 醇浸：在步骤2) 中的浓缩液加入质量百分比浓度为78％ -80％的乙醇进行搅拌处理，然后进行一次冷浸处理，冷浸时间为40-60 分钟，然后取上清液再加入质量百分比为80％ -85％的乙醇进行二次冷浸处理，冷浸时间为40-60 分钟；
4) 提取：将步骤3) 中的醇浸液置于回流装置中先进行乙醇回流处理，然后再进行沸水回流提取；
5) 交换洗脱：将步骤4) 中的回流提取液置于强酸性阳离子交换树脂中进行交换处理然后用碱性溶液进行洗脱，收集到的液体为木瓜叶中提取的氨基酸；
6)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重。
2.根据权利要求1 所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤1) 中粗粉的粒径为30-50 目，粗粉与清水的料液比为1∶10-1∶15。
3.根据权利要求1 所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤2) 中浓缩的压力控制在50-60kpa。
4.根据权利要求1 所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤3) 中一次冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1∶10-1∶20，二次冷浸处理中浓缩液和加入乙醇的比例为1∶8-1∶15，冷浸的温度控制在15-20℃。
5.根据权利要求1 所述的一种木瓜叶氨基酸的提取方法，其特征在于，步骤4) 中乙醇回流提取中乙醇的浓度为78％-90％。
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|---|---|---|---|---|
| CN108159283A (zh) * | 2018-01-29 | 2018-06-15 | 赵国娟 | 石斛叶片复合游离氨基酸的提取方法及用途 |
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