CN106172129A - 一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 - Google Patents
一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106172129A CN106172129A CN201610575050.1A CN201610575050A CN106172129A CN 106172129 A CN106172129 A CN 106172129A CN 201610575050 A CN201610575050 A CN 201610575050A CN 106172129 A CN106172129 A CN 106172129A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fish
- growth
- parent
- experiment
- breeding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 title claims abstract description 92
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title claims abstract description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000012795 verification Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 26
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 58
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 30
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 claims description 21
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 101150047844 F1 gene Proteins 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 claims description 9
- 238000007403 mPCR Methods 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 208000020442 loss of weight Diseases 0.000 claims description 6
- 108091092878 Microsatellite Proteins 0.000 claims description 5
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000037351 starvation Effects 0.000 claims description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 4
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 230000027326 copulation Effects 0.000 claims description 3
- 230000002196 ecbolic effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 claims description 3
- 210000000006 pectoral fin Anatomy 0.000 claims description 3
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 3
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 claims 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 abstract 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 12
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 3
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- 241000607528 Aeromonas hydrophila Species 0.000 description 2
- 241000252230 Ctenopharyngodon idella Species 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 208000031448 Genomic Instability Diseases 0.000 description 2
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000009318 large scale farming Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002972 pentoses Chemical class 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004153 renaturation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
Abstract
本发明公开了一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，通过对选育鱼种的亲本、亲本后代和杂交后获得的家系鱼种进行亲子鉴定，选育优良出品种，同时，还公开了一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育的验证方法，对选育的优良品种进行进一步验证确定，获得生长性能和抗逆性稳定的鱼种，解决现有的鱼苗选育容易导致鱼种对不同环境下的耐氧性、耐寒性、耐热性等适应能力差而导致生长性能不好甚至死亡的问题。
Description
技术领域
本发明涉及鱼类养殖领域，尤其涉及鱼类养殖中的鱼苗选育领域，具体的说，是一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法。
背景技术
我国已成为世界农业大国。水产养殖已成为我国农业发展的重要组成部分，同时也带动了地区经济发展，养殖鱼类的选育是水产养殖业可持续发展的重要组成部分。现在大多不具规模的水产养殖均采用鱼种结合的养殖方法，对鱼苗的密度进行有效计算，对鱼苗本身的选育工作研究及较少，如此以来，投放的鱼苗并非全优状态，即出现一些耐氧性、耐热性不强的鱼在环境骤变的情况下发生死亡的情况或者在同样的养殖条件下生长性能差，导致成本投入和产量不成正比的问题。大规模养殖或水产研究机构现有的选育方法多是依据形态特征来进行选育的，其选育过程费时费力、选育效果不稳定性、选育的周期长，一般将在20年以上、地域限制性大、验证选育效果较难等特征。随着分子生物技术的快速发展，现已有细胞、生化、分子等多方面涉及于鱼类选育工作，但多集中于对鱼类生长性能能的选育。由于不同地域水域环境不尽相同，现有选育过程并没有将鱼类对各种水域环境的耐受能力作为选育的目标，因此，将不同鱼类自身的选育结合养殖水域、环境耐受能力进行综合选育养殖鱼种鱼苗对于可持续发展养殖具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法，用于解决现有的鱼苗选育容易导致鱼种对不同环境下的水域适应性差，例如：耐氧性、耐寒性、耐热性等适应能力差而导致生长性能不好甚至死亡的问题。本发明能够综合基于鱼种本身的特性和水域环境的特点进行综合选育并提供一种对所述选育方法的验证方法。
本发明通过下述技术方案实现：
一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，是根据不同鱼种和不同水域环境的特性，从普通鱼苗中选育出对环境抗逆性强，生长快且具有优良基因的鱼苗个体，包括以下步骤：
1.1建立亲鱼基础群亲本F0，通过亲鱼基础群F0培育出一龄种鱼F1并制作亲本F0基因库；
1.2选取一定数量的6-8月龄的种鱼F1分别建立实验群进行培育；
1.3培育完毕后，建立各实验群中优良基因鱼苗个体F1基因库；
1.4通过对种鱼F1基因库与亲本F0基因库进行对比确定实验群中优良基因鱼苗个体对应的亲鱼基础群亲本F0。
优选地，所述步骤1.1具体如下：
1.11对所述亲鱼基础群亲本F0进行选育，选育的标准为：体型均匀、无畸形，游动活泼，个体体重高于群平均体重10％-20％，雌雄搭配比为2:3-2:4之间；
1.12亲鱼基础群亲本F0养殖区域标准为：单个养殖池面积为3-4亩，水深1.5-2米，池底平坦；
1.13亲鱼基础群亲本F0投放密度标准为：按照重量计算每亩投放100-130千克亲鱼；
1.14通过采用PIT电子标记为每条亲鱼设置不同的编号并剪取部分鳍条，用无水乙醇保存备用；
1.15在交配期间采用注射或投放催产激素，通过人工受精获得不同家系受精卵，卵膜破裂4天后，各家系取20000尾混合统一池塘培育，并孵化获得不同家系鱼苗，将各家系鱼苗培育至夏花阶段后，平均分配到多个池塘进行种鱼F1培育。
优选地，所述步骤1.2具体如下：
1.21将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能优良，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的20％-30％、健康无病、无畸形的个体，对生长数据进行统计，剪取鱼种F1-A的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.22将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同温度的耐受实验，实验结束后剪取高温耐受实验存活下来鱼种F1-B的部分胸鳍和低温耐受实验存活下来的鱼种F1-b，无水乙醇保存备用；
1.23将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行高盐度的耐受实验，实验结束后剪取高盐耐受实验存活下来鱼种F1-C的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.24将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同溶氧的耐受实验，实验结束后剪取高溶氧耐受实验存活下来育种F1-D的部分鳍条和低溶氧耐受实验存活下来育种F1-d的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.25将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行水体PH的耐受实验，实验结束后剪取耐酸性PH实验存活下来育种F1-E的部分鳍条和耐碱性PH实验存活下来育种F1-e的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.26将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行饥饿耐受实验，实验结束后对实验鱼进行形态测量和体重称量，剪取存活下来减重低于平均减重15-20％的鱼种F1-F的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.27将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行抗病能力实验，实验结束后剪取抗病能力实验存活下来鱼种F1-G的部分鳍条，无水乙醇保存备用。值得说明的是：多数鱼类常见病多由嗜水气单胞菌引起，固大多数抗病能力实验以嗜水气单胞菌进行抗病能力实验，目的是为了选择抗病能力好的个体，以保留抗病能力强的亲本进行优选。
优选地，所述步骤1.3具体包括：将所述步骤1.21-1.27步骤中获得的F1基因实验数据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G作为优良基因鱼苗个体F1基因库。
优选地，所述步骤1.4具体包括：通过鱼种亲子鉴定的多重PCR微卫星序列和Cervus3.0软件根据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G确定对应的亲本个体基因F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G，确定优质亲本鱼苗，其余未被选择的亲本标记为F0-remain。所述Cervus3.0软件为推断亲缘关系的软件，属于现有技术，在此对于Cervus3.0软件确定亲本F0与亲本后代F1的对应关系步骤和原理不做详细阐述。
值得说明的是：多重PCR技术和Cervus3.0软件均属于现有技术。
一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育的验证方法，包括以下步骤：
6.1第二年将F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G分别与F0-remain进行人工受精，建立对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain；
6.2从步骤6.1所述的对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain中选取6-8月龄鱼种各2000尾进行生长数据测量，并进行抗逆性实验，按照所述步骤1.21-1.27进行，对比选择培育的亲本后代与非选育亲本后代的生长性能能，抗病性能和抗逆性能，以验证确定选育亲本的后代较非选育后代之间存在明显的生长和抗逆性差异。
6.3所述步骤6.2中生长稳定、抗逆性好的品系对应亲本F0为目标选育种鱼，淘汰生长慢抗逆性不好的品系。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
(1)本发明通过对亲本标记再采用人工受精的方式获得亲本后代F1，利用F1的交叉人工受精获得亲本中的一切优质品种家系，再通过多重PCR微卫星序列和Cervus3.0软件技术获得优质品种的亲本，在投放鱼苗时根据养殖水域的特点选择适合的各亲本在该养殖水域养殖具有生长快、抗病性强和抗逆特性好的特点，避免了现有技术选育鱼种对于环境抗逆性差，生长缓慢，易病甚至死亡的问题。
(2)本发明的选育的时间周期短，因不同养殖水域和鱼种生长特点不同，一般周期为2-4年即可完成优质鱼种的选育，与现有技术相比，在时间周期上得到了明显的缩短。
(3)本发明还提供了对选育优质鱼种进行验证的方法，能够将选育得到的优质鱼种进行进一步的验证，能够剔除和淘汰掉因偶然机会和遗传不稳定的优质鱼种，确保投放鱼种均具有较好的生长性能和对环境的抗逆性。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
首先对本发明中涉及的相关名词及现有技术解释如下：
一龄种鱼：将夏花经过3～5个月的饲养，体长达到10cm以上，称为一龄鱼种或仔口鱼种。
夏花：鱼苗下池后，经20—30天的饲养，体长达3厘米左右的稚鱼，因出塘正值夏季，故称夏花。
PCR：PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右)，DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
多重PCR：多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定。
PIT电子标记：PIT鱼类射频标记是市场主流的用于鱼类和野生动物研究的标记，这些标记被压缩装入玻璃胶囊，每个标记具有唯一性。
实施例：
为了更进一步的解释和说明本发明，下面以我国水产养殖中最为常见的鱼种草鱼为例对本发明进行详细说明。
一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，是根据不同鱼种和不同水域环境的特性，从普通鱼苗中选育出对环境抗逆性强，生长快且具有优良基因的鱼苗个体，包括以下步骤：
1.1建立亲鱼基础群亲本F0，通过亲鱼基础群F0培育出一龄种鱼F1并制作亲本F0基因库；
1.2选取一定数量的6-8月龄的种鱼F1分别建立实验群进行培育；
1.3培育完毕后，建立各实验群中优良基因鱼苗个体F1基因库；
1.4通过对种鱼F1基因库与亲本F0基因库进行对比确定实验群中优良基因鱼苗个体对应的亲鱼基础群亲本F0。
本实施例中，所述步骤1.1具体如下：
1.11对所述亲鱼基础群亲本F0进行选育，选育的标准为：体型均匀、无畸形，游动活泼，个体体重高于群平均体重10％-20％，雌雄搭配比为2:3-2:4之间；
1.12亲鱼基础群亲本F0养殖区域标准为：单个养殖池面积为3-4亩，水深1.5-2米，池底平坦；
1.13亲鱼基础群亲本F0投放密度标准为：按照重量计算每亩投放100-130千克亲鱼；
1.14通过采用PIT电子标记为每条亲鱼设置不同的编号并剪取部分鳍条，用无水乙醇保存备用；
1.15在交配期间采用注射或投放催产激素，通过人工受精获得不同家系受精卵，卵膜破裂4天后，各家系取20000尾混合统一池塘培育，并孵化获得不同家系鱼苗，将各家系鱼苗培育至夏花阶段后，平均分配到多个池塘进行种鱼F1培育。
本实施例中，所述步骤1.2具体如下：
1.21将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能优良，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的20％-30％、健康无病、无畸形的个体，对生长数据进行统计，剪取鱼种F1-A的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.22将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同温度的耐受实验，实验结束后剪取高温耐受实验存活下来鱼种F1-B的部分胸鳍和低温耐受实验存活下来的鱼种F1-b，无水乙醇保存备用；
1.23将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行高盐度的耐受实验，实验结束后剪取高盐耐受实验存活下来鱼种F1-C的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.24将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同溶氧的耐受实验，实验结束后剪取高溶氧耐受实验存活下来育种F1-D的部分鳍条和低溶氧耐受实验存活下来育种F1-d的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.25将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行水体PH的耐受实验，实验结束后剪取耐酸性PH实验存活下来育种F1-E的部分鳍条和耐碱性PH实验存活下来育种F1-e的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.26将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行饥饿耐受实验，实验结束后对实验鱼进行形态测量和体重称量，剪取存活下来减重低于平均减重15-20％的鱼种F1-F的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.27将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行抗病能力实验，实验结束后剪取抗病能力实验存活下来鱼种F1-G的部分鳍条，无水乙醇保存备用。
本实施例中，所述步骤1.3具体包括：将所述步骤1.21-1.27步骤中获得的F1基因实验数据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G作为优良基因鱼苗个体F1基因库。
本实施例中，所述步骤1.4具体包括：通过鱼种亲子鉴定的多重PCR微卫星序列和Cervus3.0软件根据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G确定对应的亲本个体基因F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G，确定优质亲本鱼苗，其余未被选择的亲本标记为F0-remain。
所述用于草鱼亲子鉴定的多重PCR微卫星序列如表1所示：
表1
值得特别说明的是，通过多重PCR技术根据上述表1所述内容获得F1对应亲本的方法及步骤属于现有技术，故而，在此不再详述。
将上述获得的优质品种F1的亲本F0选出，作为饲养优质亲本，依然通过人工受精的方式获得养殖水域所需鱼种进行定数养殖，经过反复验证得知，其优质鱼种的生长较普通鱼种生长平均快10％以上的(重量比)占投放数量的90％-92％之间，体现出良好的生长性能和抗逆性。
一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育的验证方法，包括以下步骤：
6.1第二年将F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G分别与F0-remain进行人工受精，建立对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain；
6.2从步骤6.1所述的对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain中选取6-8月龄鱼种各2000尾进行生长数据测量，并进行抗逆性实验，按照所述步骤1.21-1.27进行，对比选择培育的亲本后代与非选育亲本后代的生长性能能，抗病性能和抗逆性能，以验证确定选育亲本的后代较非选育后代之间存在明显的生长和抗逆性差异。
6.3所述步骤6.2中生长稳定、抗逆性好的品系对应亲本F0为目标选育种鱼，淘汰生长慢抗逆性不好的品系。
值得说明的是，通过本发明中所述选育方法得出的优质鱼种的准确率在90％以上，经过所述验证方法验证后将遗传不稳定(隔代遗传变异或偏差较大)的鱼种进行进一步淘汰，获得的鱼种优质率达到95％以上，大大提高了鱼的单位产量，同时因环境因素导致的死亡明显降低，提高了养殖的安全性，降低了养殖的技术要求。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，是根据不同鱼种和不同水域环境的特性，从普通鱼苗中选育出对环境抗逆性强，生长快且具有优良基因的鱼苗个体，其特征在于，包括以下步骤：
1.1建立亲鱼基础群亲本F0，通过亲鱼基础群F0培育出一龄种鱼F1并制作亲本F0基因库；
1.2选取一定数量的6-8月龄的种鱼F1分别建立实验群进行培育,所述实验群包括生长性能、温度耐受、盐度耐受、溶氧耐受、PH值耐受、饥饿耐受或抗病能力耐受中的一种或多种；
1.3培育完毕后，建立各实验群中优良基因鱼苗个体F1基因库；
1.4通过对种鱼F1基因库与亲本F0基因库进行对比确定实验群中优良基因鱼苗个体对应的亲鱼基础群亲本F0。
2.根据权利要求1所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于，所述步骤1.1具体如下：
1.11对所述亲鱼基础群亲本F0进行选育，选育的标准为：体型均匀、无畸形，游动活泼，个体体重高于群平均体重10％-20％，雌雄搭配比为2:3-2:4之间；
1.12亲鱼基础群亲本F0养殖区域标准为：单个养殖池面积为3-4亩，水深1.5-2米，池底平坦；
1.13亲鱼基础群亲本F0投放密度标准为：按照重量计算每亩投放100-130千克亲鱼；
1.14通过采用PIT电子标记为每条亲鱼设置不同的编号并剪取部分鳍条，用无水乙醇保存备用；
1.15在交配期间采用注射或投放催产激素，通过人工受精获得不同家系受精卵，卵膜破裂4天后，各家系取20000尾混合统一池塘培育，并孵化获得不同家系鱼苗，将各家系鱼苗培育至夏花阶段后，平均分配到多个池塘进行种鱼F1培育。
3.根据权利要求2所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于，所述步骤1.2中所述生长性能、温度耐受具体如下：
1.21将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能优良，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的20％-30％、健康无病、无畸形的个体，对生长数据进行统计，剪取鱼种F1-A的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.22将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同温度的耐受实验，实验结束后剪取高温耐受实验存活下来鱼种F1-B的部分胸鳍和低温耐受实验存活下来的鱼种F1-b，无水乙醇保存备用。
4.根据权利要求3所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于，所述步骤1.2中所述盐度耐受、溶氧耐受具体如下：
1.23将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行高盐度的耐受实验，实验结束后剪取高盐耐受实验存活下来鱼种F1-C的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.24将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行不同溶氧的耐受实验，实验结束后剪取高溶氧耐受实验存活下来育种F1-D的部分鳍条和低溶氧耐受实验存活下来育种F1-d的部分鳍条，无水乙醇保存备用。
5.根据权利要求4所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于，所述步骤1.2中所述PH值耐受、饥饿耐受具体如下：
1.25将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取4000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行水体PH的耐受实验，实验结束后剪取耐酸性PH实验存活下来育种F1-E的部分鳍条和耐碱性PH实验存活下来育种F1-e的部分鳍条，无水乙醇保存备用；
1.26将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行饥饿耐受实验，实验结束后对实验鱼进行形态测量和体重称量，剪取存活下来减重低于平均减重15-20％的鱼种F1-F的部分鳍条，无水乙醇保存备用。
6.根据权利要求5所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于，所述步骤1.2中所述抗病能力耐受具体如下：
1.27将步骤1.15中所述的种鱼F1培育6-8个月后选取2000尾生长性能能良好，体型匀称、游动活泼、体重高于平均体重的10-20％、健康无病、无畸形、生长数据差异小于5％的个体进行抗病能力实验，实验结束后剪取抗病能力实验存活下来鱼种F1-G的部分鳍条，无水乙醇保存备用。
7.根据权利要求6所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于所述步骤1.3具体包括：将所述步骤1.21-1.27步骤中获得的F1基因实验数据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G作为优良基因鱼苗个体F1基因库。
8.根据权利要求4所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法，其特征在于所述步骤1.4具体包括：通过鱼种亲子鉴定的多重PCR微卫星序列和Cervus3.0软件根据F1-A、F1-B、F1-b、F1-C、F1-D、F1-d、F1-E、F1-e、F1-F、F1-G确定对应的亲本个体基因F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G，确定优质亲本鱼苗，其余未被选择的亲本标记为F0-remain。
9.根据权利要求5所述的一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育方法的验证方法，其特征在于包括以下步骤：
6.1第二年将F0-A、F0-B、F0-b、F0-C、F0-D、F0-d、F0-E、F0-e、F0-F、F0-G分别与F0-remain进行人工受精，建立对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain；
6.2从步骤6.1所述的对照群体f1-A、f1-B、f1-b、f1-C、f1-D、f1-d、f1-E、f1-e、f1-F、f1-G和f1-remain中选取6-8月龄鱼种各2000尾进行生长数据测量，并进行抗逆性实验，按照所述步骤1.21-1.27进行，对比选择培育的亲本后代与非选育亲本后代的生长性能能，抗病性能和抗逆性能，以验证确定选育亲本的后代较非选育后代之间存在明显的生长和抗逆性差异；
6.3所述步骤6.2中生长稳定、抗逆性好的品系对应亲本F0为目标选育种鱼，淘汰生长慢抗逆性不好的品系。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610575050.1A CN106172129A (zh) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | 一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610575050.1A CN106172129A (zh) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | 一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106172129A true CN106172129A (zh) | 2016-12-07 |
Family
ID=57490941
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610575050.1A Pending CN106172129A (zh) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | 一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106172129A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106912408A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-07-04 | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 | 一种鲑鳟鱼抗水霉病新品系构建方法 |
| CN108849650A (zh) * | 2018-09-13 | 2018-11-23 | 广西壮族自治区水产引育种中心 | 一种适宜于不同养殖模式的鲤鱼高效选育方法 |
| CN110426510A (zh) * | 2019-07-23 | 2019-11-08 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种硬骨鱼类耐碱性能的评价方法 |
| CN113940294A (zh) * | 2021-10-13 | 2022-01-18 | 上海海洋大学 | 一种鱼类负相关性状的选育方法 |
| CN114128650A (zh) * | 2021-12-15 | 2022-03-04 | 上海海洋大学 | 一种综合抗逆浮游鱼的筛选方法 |
| CN115553234A (zh) * | 2022-03-17 | 2023-01-03 | 南通龙洋水产有限公司 | 一种广谱抗菌罗非鱼优良品种的选育方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104488759A (zh) * | 2014-11-20 | 2015-04-08 | 上海海洋大学 | 一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法 |
-
2016
- 2016-07-20 CN CN201610575050.1A patent/CN106172129A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104488759A (zh) * | 2014-11-20 | 2015-04-08 | 上海海洋大学 | 一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法 |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106912408A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-07-04 | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 | 一种鲑鳟鱼抗水霉病新品系构建方法 |
| CN106912408B (zh) * | 2017-03-03 | 2020-04-21 | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 | 一种鲑鳟鱼抗水霉病新品系构建方法 |
| CN108849650A (zh) * | 2018-09-13 | 2018-11-23 | 广西壮族自治区水产引育种中心 | 一种适宜于不同养殖模式的鲤鱼高效选育方法 |
| CN110426510A (zh) * | 2019-07-23 | 2019-11-08 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种硬骨鱼类耐碱性能的评价方法 |
| CN110426510B (zh) * | 2019-07-23 | 2022-09-16 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种硬骨鱼类耐碱性能的评价方法 |
| CN113940294A (zh) * | 2021-10-13 | 2022-01-18 | 上海海洋大学 | 一种鱼类负相关性状的选育方法 |
| CN113940294B (zh) * | 2021-10-13 | 2022-09-20 | 上海海洋大学 | 一种鱼类负相关性状的选育方法 |
| CN114128650A (zh) * | 2021-12-15 | 2022-03-04 | 上海海洋大学 | 一种综合抗逆浮游鱼的筛选方法 |
| CN115553234A (zh) * | 2022-03-17 | 2023-01-03 | 南通龙洋水产有限公司 | 一种广谱抗菌罗非鱼优良品种的选育方法 |
| CN115553234B (zh) * | 2022-03-17 | 2023-09-29 | 南通龙洋水产有限公司 | 一种广谱抗菌罗非鱼优良品种的选育方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106172129A (zh) | 一种鱼类生长和多个抗逆性能综合选育及验证方法 | |
| CN102318571B (zh) | 海紫杂交扇贝新品种的培育方法 | |
| CN102776189B (zh) | 一种细胞色素P450基因dsRNA及其在抑制蚜虫生长中的应用 | |
| CN105980567A (zh) | 用于控制叶甲属的组合物和方法 | |
| CN103088023B (zh) | dsRNA及其组合在控制蚜虫危害中的应用 | |
| CN103088024B (zh) | 两种dsRNA及其组合在控制蚜虫危害中的应用 | |
| CN109694872A (zh) | 调控基因表达的方法 | |
| Steinwand et al. | Brachypodium sylvaticum, a model for perennial grasses: transformation and inbred line development | |
| CN102533782B (zh) | 一种控制水稻籽粒粒宽和粒重基因OsAGSW1的克隆及应用 | |
| Murphy | Plants, biotechnology and agriculture | |
| CN102349462A (zh) | 鱼类良种选育方法 | |
| CN105230575B (zh) | 一种提高萝卜蚜繁殖效率的方法 | |
| CN102342264A (zh) | 一种优质抗螨蜜蜂蜂种的选育方法 | |
| CN108064288A (zh) | 用于控制叶甲属的组合物和方法 | |
| CN108496790A (zh) | 一种培育水稻抗稻瘟病两系不育系的方法 | |
| CN105248384B (zh) | 一种利用水杨酸提高萝卜蚜繁殖效率的方法 | |
| CN104770294A (zh) | 一种基于蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的育种方法 | |
| CN102487860B (zh) | 一种筛选团头鲂群体杂交优势组合的方法 | |
| CN112048520B (zh) | 一种转基因抗虫豇豆的培育方法 | |
| CN110663541B (zh) | 一种直接获得刚果野芝麻与栽培种远缘杂种的方法和栽培方法 | |
| CN103665131B (zh) | 棉铃虫和烟夜蛾的npf神经肽及其编码基因和应用 | |
| CN110036908A (zh) | 一种加速玉米自交系选育的方法 | |
| Kim et al. | Amount and time course of ingestion of plant subcellular fractions by two thrips and one reference mite species | |
| CN102676576B (zh) | 一种甘蓝型油菜耐湿性改良的方法 | |
| CN107988225A (zh) | 一种玉米籽粒发育相关基因miR169o及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161207 |