CN106140110B8 - 一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于高分子领域，具体涉及一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法，其中低密度脂蛋白吸附剂包括作为基质的高分子载体和化学共价键合在载体表面的磷酸基团，吸附剂是采用悬浮聚合法制备粒径在100μm－500μm的多孔环氧树脂，再用无水乙二胺与环氧树脂混合，加热搅拌得到胺基树脂，随后把胺基树脂与甲醛、亚磷酸和盐酸混合，加热反应后得到低密度脂蛋白吸附剂。本发明所述的低密度脂蛋白吸附的高分子微球对LDL致病因子具有良好的清除效果。

Description

一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法

技术领域

[0001]本发明属于高分子领域，具体涉及一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法。

背景技术

[0002]高分子吸附材料是指多孔性的、高度交联的高分子聚合物吸附树脂，该类材料具 有较大的比表面积和适当的孔径，对某些特定离子或分子有选择性亲和作用，己经成为重 要的有机功能材料之一。高分子微球的制备方法有多种，经典方法包括悬浮聚合法、分散聚 合法、乳液聚合发法、沉淀聚合法等等，各种方法制备的微球的直径尺寸、孔径分布和比表 面积大小各不相同，微球直径的分散度也存在差异。

[0003] 尚脂血症(hypercholesterolemia)是引起动脉硬化以及冠心病和心肌梗塞的重 要因素，有研宄证明，人体血液中低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL)的升高及 由此而产生的氧化态低密度脂蛋白是致病的关键因素，相反高密度脂蛋白（high densitylipoprotein，HDL)有抑制动脉硬化的作用。对于严重的高脂血症患者，特别是家族 性高脂血症患者，常规的疗法(饮食控制、药物治疗)效果不理想，需要借助血液净化疗法。 血液净化清除LDL的方法有血浆置换、血液滤过、体外肝素诱导沉淀和血液灌流吸附法，其 中吸附法具有选择性高、副作用较少和成本低等优点。血液灌流的核心组成是血液净化吸 附剂。临床上应用的LDL吸附剂从作用原理可分为两类：免疫吸附剂和亲和吸附剂。德国 Baxter公司将抗LDL的抗体偶联到琼脂糖凝胶上，制成免疫吸附剂；日本Kaneka公司的 Liposorber系列LDL吸附剂，是以磺化葡聚糖为配基、球形纤维素为载体的亲和吸附剂，粒 径大于l7〇Mi的吸附剂用于血浆灌流，粒径小于240mi的吸附剂可用于全血灌流。德国 Fresenius公司的DALI产品，是以聚丙烯酰胺为载体、包被聚丙烯酸盐而制得的羧酸型LDL 亲和吸附剂。以上国外吸附剂产品的价格昂贵，一般每个吸附柱在6000元人民币以上。我国 目前还没有可以临床应用的LDL吸附剂产品，但有不少学者进行了相关的研究工作，所报道 的LDL吸附剂在体外试验中对LDL具有较好的选择吸附性。在亲和型低密度脂蛋白（LDL)吸 附剂中，所采用的亲和基团主要是阴离子，以磺酸为最多，其次为羧酸，未见以磷酸为配基 的吸附剂研究报道。与磺酸相比，磷酸是较弱的酸，与羧酸相似，对血液成分的不良影响比 磺酸要小，而且人体内缓冲体系也含有磷酸成分，预计磷酸盐型LDL吸附剂会有较好的吸附 性能和更好的血液相容性。南开大学的孔德领以磷酸盐为亲和配基，以生物相容性良好的 壳聚糖和纤维素为载体，制备了新型的LDL吸附剂并进行了体外吸附试验，对其吸附性能进 行考察。

[0004] 本发明采用悬浮聚合方法以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，三羟甲基丙烷三甲基 丙烯酸酯为交联剂，制备得到易于衍生、交联度高、机械强度大及亲水性好的环氧树脂，并 在其上衍生磷酸基团得到低密度脂蛋白吸附高分子微球。

发明内容

[0005] 本发明采用悬浮聚合方法以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，三羟甲基丙烷三甲基 丙烯酸酯为交联剂，在致孔剂的存在下制备得到粒径在IOOmi—500mi范围的多孔微球树 脂。用无水乙二胺与树脂上的环氧基团反应引入氨基。随后把胺基树脂与甲醛、亚磷酸和盐 酸混合，加热反应后得到磷酸基团功能化的树脂，即低密度脂蛋白吸附剂。

[0006] 本发明的技术方案为：

[0007] 1.多孔环氧树脂的制备

[0008] 配制含有分散剂的水溶液，将甲基丙烯酸缩水甘油酯、三羟甲基丙烷三甲基丙烯 酸酯、引发剂和致孔剂的混合油相加入水溶液中，加热搅拌得到多孔微球树脂。

[0009] 2.低密度脂蛋白吸附树脂的制备

[0010] 首先用无水乙二胺与环氧树脂混合，加热搅拌得到胺基树脂，随后把胺基树脂与 甲醛、亚磷酸和盐酸混合，加热反应后得到磷酸基团功能化的树脂得到低密度脂蛋白吸附 高分子微球。

[0011] 上述反应中所述引发剂为过氧化苯甲酰，引发剂相对于单体的质量百分数为 0.5一10% 〇

[0012] 所述致孔剂可选用甲苯、乙苯、正己烷、正庚烷、正辛烷、正庚醇、邻苯二甲酸酯类 或上述致孔剂之间不同体积比的混合物，致孔剂相对于单体的质量比例在50-200 %。

[0013] 所述分散剂为聚乙烯醇和明胶，两者之间的质量比例1:1-8,分散剂与水的比例为 0.卜8%。

[0014] 盐酸浓度为37%以上的浓盐酸。

[0015] 所述加热搅拌，反应温度通常在70-80°C，搅拌器转速通常在150-400r.p_m.。

[0016] 所述无水乙二胺与环氧树脂的反应在室温下进行，两者之间的质量数为1 _5:1。

[0017] 所述的胺基化反应的温度为60-90°C，反应时间为8-12小时，磷酸化反应的温度为 80-120 °C，反应时间为12-36小时。

[0018] 本发明的有益效果

[0019] 1.本发明提供了一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法，制备得到的吸附剂对I gG 致病因子具有良好的清除效果。

[0020] 2.本发明所制备得到的吸附剂具备高度特异选择性、良好血液相容性、无毒性、无 致敏性、良好机械强度及灭菌稳定性等特性，而且无补体激活，配体从载体上泄漏少，方便 储存等优点。

[0021] 3.本发明提供的低密度脂蛋白吸附剂制备方法简单，配体衍生步骤少，制备成本 低。

附图说明

[0022] 图1为低密度脂蛋白吸附高分子微球扫描电镜图片。

具体实施方式

[0023] 实施例1

[0024] 1.多孔环氧树脂的制备

[0025] 配制含聚乙烯醇为10g/L和明胶为20g/L的水溶液1L作为悬浮聚合法制备环氧树 脂反应体系的水相溶液。将12〇mg过氧化苯甲酰溶于含有12mL甲基丙烯酸缩水甘油酯、3mL 三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯和18mL正庚烷的混合溶液中，将该油性混合溶液加入到60mL 水相溶液中，得到的油水两相分层的混合体系在室温下以300r. p.m.的机械搅拌速度下搅 拌1小时，然后将温度升高至8〇°C，聚合反应20小时，得到的产物环氧树脂依次用丙酮和乙 醇洗涤三次后于60°C下真空干燥12小时后备用。

[0026] 2.低密度脂蛋白吸附树脂的制备

[0027] 把100mL乙二胺加入10g环氧树脂里，在80°C下反应5小时。得到的产物胺基树脂与 150mL的含有10ml甲醛、12ml浓盐酸和18ml亚磷酸水溶液混合，在100°C搅拌反应18小时得 到低密度脂蛋白吸附树脂，即低密度脂蛋白吸附剂。

[0028] 所制备的吸附剂对20mL浓度为100mg/L的LDL溶液中LDL去除率为45• 6%。

[0029] 实施例2

[0030] 1.多孔环氧树脂的制备

[0031] 配制含聚乙烯醇为8g/L和明胶为12g/L的水溶液1L作为悬浮聚合法制备环氧树脂 反应体系的水相溶液。将120mg过氧化苯甲酰溶于含有12mL甲基丙烯酸缩水甘油酯、3mL三 羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯和18mL正己烷的混合溶液中，将该油性混合溶液加入到60mL水 溶液中，得到的油水两相分层的混合体系在室温下以3〇〇r.p.m•的机械搅拌速度下搅拌1小 时，然后将温度升高至80°C，聚合反应20小时，得到的产物环氧树脂依次用丙酮和乙醇洗涤 三次后于60°C下真空干燥丨2小时后备用。

[0032] 2.低密度脂蛋白吸附树脂的制备

[0033] 把150mL乙二胺加入10g环氧树脂里，在80°C下反应1〇小时。得到的产物胺基树脂 与150mL的含有15ml甲醛、12ml浓盐酸和15ml亚磷酸水溶液混合，在l〇〇°C搅拌反应24小时 得到低密度脂蛋白吸附树脂，即低密度脂蛋白吸附剂。

[0034] 所制备的吸附剂对20mL浓度为1 〇〇mg/L的LDL溶液中LDL去除率为55 • 9 %。

Claims (8)

1. 一种低密度脂蛋白吸附剂的制备方法，其特征在于：吸附剂是采用悬浮聚合法制备 的多孔环氧树脂，再用无水乙二胺与多孔环氧树脂混合，其中无水乙二胺用量为多孔环氧 树脂质量的1-5倍，加热搅拌得到胺基树脂，随后把胺基树脂与甲醛、亚磷酸和盐酸混合，其 中甲醛、亚磷酸和盐酸的质量比例1-2:1:1-3,加热反应后得到低密度脂蛋白吸附剂； 所述的低密度脂蛋白吸附剂是以高分子微球为载体，吸附配基是磷酸基团。

2. 按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述的载体组成包括甲基丙烯酸缩水 甘油酯和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸醋，载体的粒径为l〇〇M—500um，比表面积为20-120 m2/g，磷酸基团作为配基化学共价键合在载体表面。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于： 具体制备过程为： 1) 采用悬浮聚合法制备粒径在100W1—500wn的多孔环氧树脂，得到的产物环氧树脂经 洗涤、真空干燥，备用； 2) 用无水乙二胺与环氧树脂混合，加热搅拌得到胺基树脂； 3) 随后于水中，将胺基树脂与甲醛、亚磷酸和盐酸混合，加热反应后得到磷酸基团功能 化的树脂，即低密度脂蛋白吸附剂。

4. 按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于： 步骤1)中悬浮聚合法的具体过程为:配制含有分散剂的水溶液，将聚合单体甲基丙烯 酸缩水甘油酯、交联剂三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、引发剂和致孔剂的混合油相加入水 溶液中，加热搅拌得到多孔环氧树脂； 加热温度在70-80°C; 油相与水溶液的体积比1:1-10; 油相中甲基丙烯酸缩水甘油酯、三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯的质量比为1-10:1。

5. 按照权利要求4所述的制备方法，其特征在于:所述引发剂为过氧化苯甲酰，引发剂 质量为甲基丙烯酸缩水甘油酯单体与交联剂总质量的0.5 —10%;所述致孔剂选自甲苯、乙 苯、正己烷、正庚烷、正辛烷、正庚醇、邻苯二甲酸酯中的一种或二种以上，致孔剂质量为甲 基丙烯酸缩水甘油酯单体与交联剂总质量的50-200%; 所述分散剂为聚乙烯醇和明胶，聚乙烯醇和明胶的质量比为1:1-8,分散剂与水的比例 为0.卜8%〇

6. 按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于：引发剂质量为甲基丙烯酸缩水甘油酯 单体与交联剂总质量的〇. 7-4%;致孔剂质量为甲基丙烯酸缩水甘油酯单体与交联剂总质量 的90-150%。

7. 按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤2)的胺基化反应的温度为60-90 °C，反应时间为8-12小时，使用的搅拌器的转速在150-400r.p.m.。

8. 按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤3)的反应温度为80-120°C，反应 时间为12-36小时。