CN106110301A

CN106110301A - 一种改进的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物

Info

Publication number: CN106110301A
Application number: CN201610562732.9A
Authority: CN
Inventors: 李静
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2016-07-17
Filing date: 2016-07-17
Publication date: 2016-11-16

Abstract

本发明公开了一种改进的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物，该药物包括rFGF2蛋白和多肽。所述的药物具有较好的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病效果。而且，所述药物具有给药剂量低，给药频率低的优势，具有较好的应用价值。

Description

一种改进的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及一种治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物组合物。

背景技术

支气管哮喘(bronchial asthma,简称哮喘)，是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症；在易感者中此种炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷和/或咳嗽等症状，多在夜间或凌晨发生；此类症状常伴有广泛而多变的呼气流速受限，但可部分地自然缓解或经治疗缓解；此种症状还伴有气道对多种刺激因子反应性增高。

在美国，已经有超过2000万人确诊患有哮喘，在中国，具有更高的哮喘病人人数。哮喘是一种复杂的病症，其特征为阵发性气流限制、支气管高应答性、和气道炎症。气流阻塞典型地可通过给予支气管扩张药逆转；然而，对于长期的疾病而言，由于气道重塑的进程，一部分阻塞可能变得不可逆。气道炎症主要是由于嗜酸性粒细胞和Th2胸腺依赖性细胞引起。

前列环素(PGI2)对于预防哮喘中所见的气道炎症和重塑可能有作用。气道平滑肌细胞的营养过度/过度增生促使哮喘中的气道变窄。PGI2对气道平滑肌具有抗增殖作用(Belvisi，1998)。缺乏前列环素受体(IP受体)的小鼠显示出加强的过敏原诱导的炎症(Takahashi，2002；Nagao，2003)和气道重塑(Nagao，2003)。同样地，在缺乏前列腺素H合酶的小鼠中，过敏性肺反应(气道嗜曙红细胞增多、IgE产生、气道高应答性)有所增加(Gavett，1999)。炎症的Th2模式是哮喘特有的。在过敏性气道炎症的小鼠卵清蛋白模型中，PGI2在气道中产生并且抑制Th2-介导的过敏性炎症(IL-4、IL_5、IL-13)和气道高反应性(Jaffar，2002)。前列环素类似物伊洛前列素已经表现出在哮喘的小鼠模型中具有抗炎作用(Idzko，2007)。伊洛前列素通过妨碍肺髓细胞样树突状细胞的功能而表现出这种作用，所述肺髓细胞样树突状细胞是重要气道的抗原呈递细胞。伊洛前列素妨碍肺树突状细胞的成熟以及向纵隔淋巴结的迁移，由此消除对这些淋巴结中的过敏原特异性Th2反应的诱导。

哮喘的治疗包括使用快速释放的药物，例如支气管扩张药。哮喘的长期控制用药物包括皮质类固醇、吸入的长效β_激动剂、白细胞三烯调节剂、色甘酸钠、奈多罗米、和茶碱。需要开发用于治疗哮喘的另外的疗法。

慢性阻塞性疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)是一种进行性疾病，包括慢性咳嗽、咳痰、劳累性的呼吸困难和明显的可逆或不可逆的气流进行性减少等一系列症状。在工业化国家普遍流行或显著增多。在目前全球导致死亡的疾病中，COPD排第4位，预测到2020年，全球范围内因COPD所造成的经济负担将排到第5位。

吸入性糖皮质激素因能有效控制气道炎症，改善患者的肺功能并减少疾病症状恶化率，已被临床公认为持续性哮喘人群的一线和最有效的长期维持疗法用药。环索奈德为新的吸入皮质激素，具有新型和优异的动力学性状且临床研究证实其治疗哮喘安全和有效。

茚达特罗为新的长效β2受体激动剂，临床试验表明：茚达特罗每天服用一次可以使支气管舒张达24h以上，其舒张支气管时间比沙美特罗和福莫特罗长；起效比沙美特罗更快。

血管内皮生长因子(VEGF)是一种细胞因子，其通过血液毛细管提高血浆蛋白的渗透性，促进细胞分化和迁移，促使重整细胞的蛋白酶分泌。VEGF还通过抑制细胞凋亡参与新生血管的维持，通过抑制神经原抗原参与免疫应答的调节，以及参与细胞的生长和分裂。本发明者表明在IL-13和VEGF之间，存在针对抗原和外界物质的免疫应答有关的正反馈环(Lee等人，Nat.Med.,10:1095_1103，2004)。然而VEGF介导的哮喘的发病机理中，FGF2的作用还尚未阐明。

现有技术中CN 1953765A公开了含有fgf2作为有效成分的治疗或预防哮喘和慢性阻塞性肺病的药剂，该药剂虽然具有一定的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的效果，但是效果并不是非常理解，有待于进一步的完善。

发明内容

本发明提供一种fgf2作为有效成分的治疗或预防哮喘和慢性阻塞性肺病的药剂

本发明另外提供一种fgf2与多肽联合用药用于制备治疗或预防哮喘和慢性阻塞性肺病的药剂。

本发明另外提供一种多肽，其名称为BA-1～23，其序列如SEQ ID NO：1-23所示。

本发明的多肽可以为人工合成，也可以通过常规的原核表达或真核表达的方法进行相应的表达，这都是本领域常规的实验技术。

本发明另外提供所述多肽的作用机理，该多肽能够显著的降低气道阻力，具有协同增加fgf2蛋白的功效。

本发明的fgf2蛋白可以采用本领域常规的方法进行相应的蛋白的缺失或取代，所述缺失或取代后的蛋白活性不变或者提高均可以实现本发明的技术效果。

以下采用具体的实施方式来验证本发明的效果，所述具体实施方式不能局限限定本发明的保护范围。

具体实施方式

实施例1 具体药物的制备

将10ug rFGF2蛋白(购买自Phamacia-Upjohn Co)与人工合成的SEQ ID NO：1多肽1ug混合，即得到药物组合物1，命名为BA-FGF2-1。

将SEQ ID NO：2～23多肽分别与10ug rFGF2蛋白制备得到药物组合物2～23，分别命名为BA-FGF2-2～23。

以10ug rFGF2蛋白作为阳性对照例，以pbs溶液作为阴性对照。

实施例2 模型小鼠的制备

将实验所需BALB/c小鼠称重，并用麻醉剂麻醉小鼠；将小鼠四肢用活结固定于简易操作台上，并套牙固定小鼠颈部；将操作台竖立，用消毒后的无菌平镊夹出小鼠舌头，使其歪向一侧，充分暴露口腔；在第1天和第7天从小鼠咽喉壁缓慢滴加含100μg鸡卵蛋白和0.1μg脂多糖的PBS溶液，共50μL，使小鼠慢慢将PBS溶液吸入肺部；将小鼠腹外侧部消毒后,在第1天和第7天向腹腔注射含100μg鸡卵蛋白和100μL氢氧化铝凝胶的PBS溶液，共200μL；将小鼠放回鼠笼中，侧卧，同时刨除小鼠口鼻周围垫料，防止堵塞呼吸道窒息；将小鼠放入密闭容器中，从第13天到第15天连续三天用雾化仪雾化含鸡卵蛋白的PBS溶液。选取体态相似的小鼠，即可得到相应的模型小鼠。

实施例3 效果验证

将实施例2制备得到的药物溶解后，后颈外静脉注射，剂量为11μg/次，2d后，重复给药一次，即为一个疗程，三只作为一组取平均值。测量IFN-γ和IL-4的值。以PBS为对照。结果如下：

从以上结果可以看出，本发明提供的药物具有较好的恢复小鼠哮喘指标的功能。

实施例4 药物对COPD小鼠BALF的作用

按照本领域常规的COPD小鼠BALF制备方法，制备得到相应的小鼠模型。按照实施例3的剂量和给药频率，灌胃给药，测定相应的IL-8测量值。具体数值如下：

IL-8是中性粒细胞趋化、内皮细胞黏附和脱颗粒的重要介质，IL-8可激活中性粒细胞5-脂氧酶，趋化CD8+T细胞，在COPD病理过程中发挥重要作用。从上表的数据可以看出，本发明的药物可以显著的降低小鼠BALF中IL-8的生成，具有较好的治疗COPD疾病的效果。

实施例5：本发明药物的临床观察

全部病例250例，其中男性150例，女性100例，最大年龄65岁，最小15岁，平均年龄45岁。疾病分布：哮喘125例，慢性阻塞性肺病125例。

疗程：3日为1疗程，1日1次，剂量为10:1的rFGF2蛋白：多肽100mg/次。病情轻者，2疗程；重症病人共需3个疗程。

其中给药分布为：每一种BA-FGF2药物分别给药哮喘5例，慢性阻塞性肺病5例；对照为泼尼松组，rFGF2蛋白阳性对照，按照医嘱给药。

治疗效果，即疗效判断标准：

显效：咳喇消失，支气管痉挛得以松弛

有效：哮鸣音明显减轻，粘膜分泌物得以清除，胸隔痞满全部消失。

无效：疗效不明显。

结果统计，本发明的23组药物对应的病人均可以达到有效的治疗效果，有效率达到100％；泼尼松组在哮喘和慢性阻塞性肺病的治疗效率上有效率分别为80％和60％，效果比本发明的要差一些。而rFGF2蛋白在哮喘和慢性阻塞性肺病的治疗效率上有效率分别为60％和80％，也在疗效上比本发明具有一定的差异。

同时，本发明的药物给药量较小，疗程也短，对肾脏的损伤也小。另外，用药前后测量患者血清嗜酸性粒细胞(Eosinophil,EOS)绝对值差异及其显著，用药后，患者的EOS已经趋近与正常参考值，说明本发明的药物效果显著。

本领域技术人员可以理解，可以容易地将上述说明书中公开的构思和具体实施方案用作修改或设计其它实施方案的基础，以实现与本发明的相同的目的。本领域技术人员还可以理解，这些等同的实施方案不会背离如所附权利要求中说提出的本发明的精神和范围。

序列表

〈110〉李静

〈120〉一种改进的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物

〈160〉23

〈210〉1

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-1

EPQQIRQIYNSQQRETEPTQAALPKKS

〈210〉2

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-2

EAGCWHQNAPMAIACSKHRRKRHHFRW

〈210〉3

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-3

SYFDIECDEHIICPMLRRDAPCMLYFM

〈210〉4

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-4

IPFVMDYPNRRIQRNSRTSNFSGFGFL

〈210〉5

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-5

FHLQWGWWAWRPPFDGKRRCGEQYPHD

〈210〉6

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-6

TRSKYWYHHNGFHQHKPQYPSWTINSS

〈210〉7

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-7

PLWPVTDHWITHYRNCHDSHVKWAERK

〈210〉8

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-8

NREWTNFLHQRRQRHMLQQCIQGYRGH

〈210〉9

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-9

DNPAAKCWYRKVSKESNRPSVSKYNQC

〈210〉10

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-10

HHTAWQTRWRWSLTPPWLPDWNEWYWY

〈210〉11

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-11

CVHWYCWHMAMHWERHYNKRYMNPYIP

〈210〉12

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-12

MCAILPLGPPFDNGFQHHPNWCSWYCW

〈210〉13

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-13

WSNDRPVPTFQHFTWWIDQQKRLWFEG

〈210〉14

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-14

MDPMFDWSHWCSKHSIRYWQIYQMAQR

〈210〉15

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-15

DRREYRRAHQHEALGFWHPSDLIGWTD

〈210〉16

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-16

WMRFSKEQQDYPLRYDAVSHKFQWYPQ

〈210〉17

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-17

TEKNQFLYMTWCQNQLKNPSPIELSLE

〈210〉18

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-18

QDDPDHRERSWSYYQIQHVKDDTRLDY

〈210〉19

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-19

WCQSDLMHHSREAKSSVAANLHVWSPF

〈210〉20

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-20

RPPLTQDYHMPPQMRLLRWKKDTWAWV

〈210〉21

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-21

YMQDWPKEMLPHFPNWANQCCWSQPPF

〈210〉22

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-22

HIQEQEPYMYISARKARFMMHSFHWKP

〈210〉23

〈211〉27

〈212〉PRT

〈213〉人工序列

〈400〉BA-23

RRKTWSMQPWSRKWQQMEPEKWWIPPH

Claims

1.一种治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物，所述药物含有rFGF2蛋白及其药学可接受载体。

2.一种治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物，所述药物包括rFGF2蛋白、多肽及其药学可接受载体；rFGF2蛋白与多肽二者的重量比为10:1，所述多肽的序列为SEQ ID NO：1-23任一项所示。

3. rFGF2蛋白和SEQ ID NO：1-23任一多肽的组合在制备用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物中的用途。