CN106106175A - 百香果组培快繁方法 - Google Patents

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    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
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Abstract

本发明公开了一种百香果组培快繁方法，涉及植物组织培养技术领域；本发明以腋芽为外植体，依次经过外植体消毒、芽诱导培养、生根培养、壮苗培养阶段，具有诱发时间短、出苗快、增殖频率高、出苗齐等优点，易于操作，可进行大规模生产。

Description

百香果组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其是一种百香果组培快繁方法。
背景技术
百香果学名西番莲，又名鸡蛋果，属百香果科热带、亚热带多年生常绿藤本植物，其果实为典型的热带、亚热带浆果。果汁香味独特、味道鲜美，富含各种营养成分，且根、茎、叶、花还可入药。百香果属蔓性果树，适宜在温暖、全年无冻害天气的北纬24度以南的地区种植。百香果的繁殖方法主要有两种，一是用种子直接播种繁殖，二是用蔓条扦插繁殖；用种子直接播种繁殖易引起杂种分离，存在着品质偏酸、甜度不够、产量不高的问题；而不加选择地随意扦插繁殖，加快了品种的退化，病害增加，特别容易感染茎腐病，产量大大降低。
发明内容
本发明的目的是提供一种百香果组培快繁方法，这种方法培养的百香果能够保持自身杂种优势，而且诱发时间短、出苗快。
为了解决上述问题，本发明采用的技术方案是：
这种百香果组培快繁方法包括以下步骤：
A、外植体消毒灭菌：选取百香果腋芽作为外植体，用水洗干净，采用75％酒精消毒，然后在0.2%升汞溶液液浸泡20分钟～30分钟，取出后用无菌水冲洗5次～8次；
B、芽诱导培养：接种至芽诱导培养基，培养至长出新芽；培养时光照为2300LUX～2450LUX，温度为23℃～25℃；
C、生根培养：转入生根培养基至长出1厘米～3厘米的根；培养时光照为2300LUX～2500LUX，温度为23℃～25℃；
D、壮苗培养：转入壮苗培养基，培养至苗高2厘米～5厘米；其中，壮苗培养时光照为2200 Lux～2300 Lux，温度为24℃～28℃；
其中，芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸和0.35毫克/升～0.5毫克/升6-苄氨基腺嘌呤；
生根养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸以及0.1毫克/升～0.2毫克/升赤霉素；
壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸。
上述技术方案中，更具体的技术方案还可以是：腋芽长1.5厘米～3厘米。
MS培养基成分为：硝酸钾1.9克/升、硝酸铵1.65克/升、磷酸二氢钾170毫克/升、硫酸镁370毫克/升、氯化钙440毫克/升、碘化钾0.83毫克/升、硼酸6.2毫克/升、硫酸锰22.3毫克/升、硫酸锌8.6毫克/升、钼酸钠0.25毫克/升、硫酸铜0.25毫克/升、氯化钴0.025毫克/升、乙二胺四乙酸二钠37.25毫克/升、硫酸亚铁27.85毫克/升、肌醇100毫克/升、甘氨酸2毫克/升、盐酸硫胺素0.1毫克/升、盐酸吡哆醇0.5毫克/升、烟酸0.5毫克/升、蔗糖30毫克/升、琼脂7 毫克/升。
由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比具有如下有益效果：
本发明方法可在短期内获得大量优质种苗，保持百香果杂种优势，具有诱发时间短、出苗快、增殖频率高、出苗齐的特点，腋芽的萌发率均达90％以上，生根率可达 92.7％以上。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详述：
实施例1
本实施例百香果组培快繁方法为：
A、选取长1.5厘米的百香果腋芽作为外植体，用水洗干净，采用75％酒精消毒，然后在0.2%升汞溶液液浸泡20分钟，取出后用无菌水冲洗5次；
B、接种至芽诱导培养基，培养至长出新芽；培养时光照为2450LUX，温度为23℃～25℃；芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升萘乙酸和0.5毫克/升6-苄氨基腺嘌呤；
C、转入生根培养基至长出1厘米～3厘米的根；培养时光照为2400LUX，温度为23℃～25℃；生根养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升萘乙酸以及0.2毫克/升赤霉素；
D、转入壮苗培养基，培养至苗高2厘米～5厘米；其中，壮苗培养时光照为2200 Lux，温度为24℃～28℃；壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.27毫克/升萘乙酸。
本实施例腋芽的萌发率为90.7％，生根率为93.2％。
实施例2
本实施例百香果组培快繁方法为：
A、选取长3厘米的百香果腋芽作为外植体，用水洗干净，采用75％酒精消毒，然后在0.2%升汞溶液液浸泡25分钟，取出后用无菌水冲洗6次；
B、接种至芽诱导培养基，培养至长出新芽；培养时光照为2400LUX，温度为23℃～25℃；芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.3毫克/升萘乙酸和0.4毫克/升6-苄氨基腺嘌呤；
C、转入生根培养基至长出1厘米～3厘米的根；培养时光照为2500LUX，温度为23℃～25℃；生根养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～.3毫克/升萘乙酸以及0.15毫克/升赤霉素；
D、转入壮苗培养基，培养至苗高2厘米～5厘米；其中，壮苗培养时光照为2250 Lux，温度为24℃～28℃；壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.3毫克/升萘乙酸。
本实施例腋芽的萌发率为91％，生根率为92.7％。
实施例3
本实施例百香果组培快繁方法为：
A、选取长2厘米的百香果腋芽作为外植体，用水洗干净，采用75％酒精消毒，然后在0.2%升汞溶液液浸泡30分钟，取出后用无菌水冲洗8次；
B、接种至芽诱导培养基，培养至长出新芽；培养时光照为2300LUX，温度为23℃～25℃；芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.27毫克/升萘乙酸和0.35毫克/升/升6-苄氨基腺嘌呤；
C、转入生根培养基至长出1厘米～3厘米的根；培养时光照为2300LUX～2500LUX，温度为23℃～25℃；生根养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升萘乙酸以及0.1毫克/升赤霉素；
D、转入壮苗培养基，培养至苗高2厘米～5厘米；其中，壮苗培养时光照为2300 Lux，温度为24℃～28℃；壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升。
本实施例腋芽的萌发率为91.5％，生根率为93％。

Claims (2)

1.一种百香果组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：
A、外植体消毒灭菌：选取百香果腋芽作为外植体，用水洗干净，采用75％酒精消毒，然后在0.2%升汞溶液中浸泡20分钟～30分钟，取出后用无菌水冲洗5次～8次；
B、芽诱导培养：接种至芽诱导培养基，培养至长出新芽；培养时光照为2300LUX～2450LUX，温度为23℃～25℃；
C、生根培养：转入生根培养基至长出1厘米～3厘米的根；培养时光照为2300LUX～2500LUX，温度为23℃～25℃；
D、壮苗培养：转入壮苗培养基，培养至苗高2厘米～5厘米；其中，壮苗培养时光照为2200 Lux～2300 Lux，温度为24℃～28℃；
其中，所述芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸和0.35毫克/升～0.5毫克/升6-苄氨基腺嘌呤；
所述生根养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸以及0.1毫克/升～0.2毫克/升赤霉素；
所述壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.25毫克/升～0.3毫克/升萘乙酸。
2.根据权利要求1所述的百香果组培快繁方法，其特征在于所述腋芽长1.5厘米～3厘米。
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