CN106086000B - 一种复合微生物微球及其制备方法 - Google Patents
一种复合微生物微球及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106086000B CN106086000B CN201610544753.8A CN201610544753A CN106086000B CN 106086000 B CN106086000 B CN 106086000B CN 201610544753 A CN201610544753 A CN 201610544753A CN 106086000 B CN106086000 B CN 106086000B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- immobilization
- pseudomonas
- composite microbe
- microbe microsphere
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
- C02F3/341—Consortia of bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/10—Inorganic compounds
- C02F2101/16—Nitrogen compounds, e.g. ammonia
Abstract
本发明公开一种复合微生物微球及其制备方法,属于污水处理中微生物技术领域,包括以下步骤:1)先将门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌进行一次包埋、交联固定化;2)再将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌混合后进行二次包埋、交联固定化即得,制备方法制得的复合微生物微球包埋有两层微生物,内层为门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌,外层为枯草芽孢杆菌。本发明采用两次包埋法,使得微生物的固定更为牢固,加大菌的密度,提高处理污水的效率;磁铁粉的具有较强的吸附力,加强了混合微生物之间的交联作用,提高混合菌的牢固性。
Description
技术领域
本发明属于污水处理中微生物技术领域,具体涉及一种复合微生物微球及其制备方法。
背景技术
目前,去除污水中氮的方法有物化法和生物法,物化脱氮法,主要有空气吹脱法、折点氯氧化法、气体法、结晶法、化学沉淀法、离子交换、电渗析和反渗透等,具有出水水质好、脱除氮磷效果好、占地面积小、对废水水温水量和浓度变化的适应性较强,但其不足在于,工艺复杂、设备费用和维护运行费用较高,不易推广,且易引起二次污染。而生物脱氮法通过酶催化即可高效脱除污水中的氮,具有脱除方法简单、处理成本低、二次污染少的优点,而且微生物来源广、繁殖快、适应环境能力强,是一种经济有效的脱氮方法。
固定化微生物技术是将筛选出的高效降解菌经固定化后,提高了菌体的密度,同时增强了菌种对毒物的耐受性,微生物的固定化方法主要有吸附法、包埋法、交联法和化学共价法等,针对不同的处理要求,采用不同的固定化方法,以提高处理效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复合微生物微球的制备方法,由制备方法得出的复合微生物微球也是本发明的另一发明目的。
基于以上目的,本发明采取以下技术方案:
一种复合微生物微球的制备方法,包括以下步骤:
1)先将门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌进行一次包埋、交联固定化;
2)再将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌混合后进行二次包埋、交联固定化即得。
步骤1)中先将门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌与磁铁粉按比例混合后,再与包埋载体混合液混合,搅拌条件下,滴加到交联剂中进行一次包埋、交联固定化,然后过滤、清洗,得一次交联固定化产物。
步骤2)中将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌混合后,再与包埋载体混合液混合,搅拌条件下,滴加到交联剂中进行二次包埋、交联固定化,然后过滤、清洗,即得复合微生物微球。
所述枯草芽孢杆菌、门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌三者的用量比为(1~2):(1~1.5):(1~1.5)。
所述包埋载体混合液为聚乙烯醇和海藻酸钠加入到去离子水中,经水浴加热溶解、冷却至室温的溶液,所述交联剂为硼酸-氯化钙溶液。
所述磁铁粉的粒径小于0.06mm。
所述水浴温度为90℃。
所述复合微生物微球包埋的微生物有内、外两层,内层为门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌,外层为枯草芽孢杆菌。
所述包埋载体混合液的配制:将40.5g聚乙烯醇(PVA)和4.05g海藻酸钠加入到300mL无菌去离子水中,于90℃下水浴加热溶解、冷却至室温(25℃)即可。
所述硼酸-氯化钙溶液的配制:先配制饱和硼酸溶液,每升饱和硼酸溶液中加入2g氯化钙,充分溶解后,碳酸氢钠溶液调节溶液pH至6.5-7.0即可。
与现有技术相比,本发明具有以下优点:
1、本发明采用两次包埋法,使得微生物的固定更为牢固,加大菌的密度,提高处理污水的效率;
2、磁铁粉具有较强的吸附力,加强了混合微生物之间的交联作用,提高混合菌的稳定性。
附图说明
图1为本发明专利复合微生物微球示意图。
具体实施方式
实施例1
包埋载体混合液的配制:将40.5g聚乙烯醇(PVA)和4.05g海藻酸钠加入到300mL无菌去离子水中,于90℃下水浴加热溶解、冷却至室温(25℃)即可。
硼酸-氯化钙溶液的配制:先配制饱和硼酸溶液,每升饱和硼酸溶液中加入2g氯化钙,充分溶解后,碳酸氢钠溶液调节溶液pH至6.5-7.0即可。
一种复合微生物微球的制备方法,包括以下步骤:
1)将活化后的门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌分别接种于LB液体培养基中,于30 ℃、150r/min下培养24h,在转速为5000r/min下分别离心10min,弃上清,得菌体,用无菌去离子水分别洗涤菌体2次后,按两者重量比为1: 1混合,配制成复合微生物;每0.6×109cfu/mL的复合微生物与1g磁铁粉混合均匀,静置吸附5min,得磁铁粉—复合微生物菌悬液;用灭菌注射器吸取磁铁粉—复合微生物菌悬液加入包埋载体混合液中,其中菌浓度为0.6×109cfu/mL,混合后,得PVA-海藻酸钠-磁铁粉-复合微生物混悬液;在玻璃棒搅拌下,用灭菌注射器吸取上述混悬液滴入含2g/L CaCL2的饱和硼酸溶液中,于4℃下静置10h,进行一次包埋、交联固定化,然后过滤,用无菌去离子水洗涤2次,得一次交联固定化产物;
2)将活化后的枯草芽孢杆菌接种于LB液体培养基中,LB液体培养基经湿热灭菌并冷却至常温,于30 ℃、150r/min下培养24h,在转速为5000r/min下离心10min,弃上清,得菌体,用无菌去离子水洗涤2次后,再将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌的菌体沉淀混合,且枯草芽孢杆菌、门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌三者的用量比为1:1.5:1.5,制得新复合微生物,每1.0×109cfu/mL的新复合微生物与1g磁铁粉混合均匀后,静置吸附5min,得磁铁粉—新复合微生物菌悬液;用灭菌注射器吸取磁铁粉—新复合微生物菌悬液加入包埋载体混合液中,菌浓度为1.0×109cfu/mL,充分混匀后得PVA-海藻酸钠-磁铁粉-新复合微生物混悬液;用灭菌注射器吸取上述混悬液滴入含2g/L CaCL2的饱和硼酸溶液中,于4 ℃下静置10h,以进行二次包埋、交联固定化,过滤后,用无菌去离子水洗涤2次保存,即得复合微生物微球。
由上述制备方法制出的复合微生物微球包埋的微生物有内、外两层,如图1所示,内层为门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌,外层为枯草芽孢杆菌。
实施例2 效果试验
将均为500ml人工配制的质量浓度均为100mg/l氨氮污水、硝态氮污水分别置于锥形瓶中,标记为试验组1和试验组2,取100粒实施例1制得的复合微生物微球分别置于试验组1和试验组2的锥形瓶中,于25℃、转速为100r/min下培养120h,培养期间,定时取培养液在8000r/min下离心5min,分别取上清液,对上清液中的氨氮和硝态氮进行检测分析,结果如下表1:
从表1中可知,本发明的复合微生物微球,对污水中氨氮及硝态氮均有比较好的去除效果,尤其是对硝态氮的去除效果更佳,同时,本发明在30-32h的时间段内都能维持较好的去除效果,这也说明,本发明经过二次包埋、交联固定化得到的复合微生物微球具有较好的稳定性。
Claims (5)
1.一种复合微生物微球的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)先将门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌进行一次包埋、交联固定化;
2)再将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌混合后进行二次包埋、交联固定化即得;
步骤1)中先将门多萨假单胞菌、类产碱假单胞菌与磁铁粉按比例混合后,再与包埋载体混合液混合,搅拌条件下,滴加到交联剂中进行一次包埋、交联固定化,然后过滤、清洗,得一次交联固定化产物;
所述枯草芽孢杆菌、门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌三者的用量比为(1~2):(1~1.5):(1~1.5);
所述包埋载体混合液为聚乙烯醇和海藻酸钠加入到去离子水中,经水浴加热溶解、冷却至室温的溶液,所述交联剂为硼酸-氯化钙溶液。
2.根据权利要求1所述的复合微生物微球的制备方法,其特征在于,步骤2)中将步骤1)的一次交联固定化产物与枯草芽孢杆菌混合后,再与包埋载体混合液混合,搅拌条件下,滴加到交联剂中进行二次包埋、交联固定化,然后过滤、清洗,即得复合微生物微球。
3.根据权利要求1所述的复合微生物微球的制备方法,其特征在于,所述磁铁粉的粒径小于0.06mm。
4.根据权利要求3所述的复合微生物微球的制备方法,其特征在于,所述水浴温度为90℃。
5.由权利要求1、2、3或4所述的制备方法制得的复合微生物微球,其特征在于,所述复合微生物微球包埋的微生物有内、外两层,内层为门多萨假单胞菌和类产碱假单胞菌,外层为枯草芽孢杆菌。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610544753.8A CN106086000B (zh) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | 一种复合微生物微球及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610544753.8A CN106086000B (zh) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | 一种复合微生物微球及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106086000A CN106086000A (zh) | 2016-11-09 |
CN106086000B true CN106086000B (zh) | 2019-04-12 |
Family
ID=57219835
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610544753.8A Active CN106086000B (zh) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | 一种复合微生物微球及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106086000B (zh) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108113000A (zh) * | 2017-11-16 | 2018-06-05 | 青岛青杰生物科技有限公司 | 一种微藻营养褐藻凝胶的制备方法 |
CN108477149A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-09-04 | 浦江县欧立生物技术有限公司 | 一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法 |
CN109182193B (zh) * | 2018-09-26 | 2023-07-14 | 陕西赛恩农业科技股份有限公司 | 微生物菌剂及其制备方法和应用 |
CN110342640A (zh) * | 2019-08-12 | 2019-10-18 | 苏州方元生态科技有限公司 | 包埋装置及固定化微生物载体的制作方法 |
CN111072132A (zh) * | 2020-01-09 | 2020-04-28 | 北京恩菲环保股份有限公司 | 一种硫铁自养反硝化悬浮填料及其制备方法 |
CN112010431B (zh) * | 2020-08-22 | 2023-01-31 | 山东尚科环境工程有限公司 | 一种包埋法固定化微生物颗粒流化床污水处理方法 |
CN113998788A (zh) * | 2020-12-25 | 2022-02-01 | 江门市澳保生物科技有限公司 | 一种池塘底质改良剂和制备方法及其应用 |
CN114394679B (zh) * | 2022-01-19 | 2023-05-23 | 江苏利然环保科技有限公司 | 一种用于工业废水的微生物吸附剂及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103205412A (zh) * | 2013-04-25 | 2013-07-17 | 西华大学 | 固定化微生物制剂及采用该制剂处理肉制品加工废水的方法 |
-
2016
- 2016-07-12 CN CN201610544753.8A patent/CN106086000B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103205412A (zh) * | 2013-04-25 | 2013-07-17 | 西华大学 | 固定化微生物制剂及采用该制剂处理肉制品加工废水的方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
固定化芽孢杆菌修复油污染地表水的研究;张辉;《中国给水排水》;20070430;第23卷(第7期);摘要,1.2.1部分,2.1部分 |
氮循环菌群的构建鉴定及其脱氮性能研究;肖晶晶 等;《农业环境科学学报》;20091231;第28 卷(第12 期);摘要 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106086000A (zh) | 2016-11-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106086000B (zh) | 一种复合微生物微球及其制备方法 | |
CN103667168B (zh) | 一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用 | |
CN103695412A (zh) | 一种用于水体原位净化的包埋微生物菌剂及其制备方法 | |
CN109593751B (zh) | 一种菌藻改性活性炭微胶囊制备方法 | |
CN103598179B (zh) | 一种复配抗菌凝胶及其制备方法和应用 | |
CN104745566A (zh) | 一种乳酸菌的固定化胶囊及其制备方法和应用 | |
CN110921850B (zh) | 一种利用微生物处理污水的方法 | |
CN110592066A (zh) | 生物炭载纳米零价铁耦合解磷菌固定化小球及其制备方法与应用 | |
CN106006998A (zh) | 一种凹土/脱氮菌复合型废水处理剂及其制备方法 | |
CN107653209A (zh) | 苯酚降解微生物菌剂、固定化小球及制备方法 | |
CN107032505A (zh) | 用于修复含铅废水的复合菌剂 | |
CN108849974A (zh) | 氧化石墨烯-氯化壳聚糖复合抗菌材料的制备方法及应用 | |
CN207699406U (zh) | 一种新型去除水中硝酸盐的处理设备 | |
CN107083345A (zh) | 用于处理含铅污水的微生物制剂的制备工艺 | |
CN114958817B (zh) | 一种双核壳负载微生物材料及其制备方法和应用 | |
CN106244502B (zh) | 一株高效除磷和降解卵磷脂的假单胞菌 | |
CN107099483A (zh) | 一种复合生物制剂及其在处理含汞废水中的应用 | |
CN110204059A (zh) | 一种耐热不易变质的污水处理试剂 | |
CN105176965A (zh) | 一种菌剂的制备方法以及采用该菌剂制备的粒状复合土壤改良剂 | |
CN109607828A (zh) | 一种高效生物净水剂及其制备方法和应用 | |
CN106929453A (zh) | 处理味精发酵母液的生物制剂及其制备方法 | |
CN106745450A (zh) | 一种污水中环丙沙星的吸附处理方法 | |
CN107162342B (zh) | 一种利用生化技术修复印染废水的方法 | |
CN102464407A (zh) | 一种去除饮用水中铁离子的方法 | |
CN110937694A (zh) | 一种用于治理氨基酸发酵废水的生化制剂 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |