CN106074630A - 一种银杏叶中黄酮类化合物提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种银杏叶中黄酮类化合物提取方法，属于中药原料药提取技术领域。本发明以银杏叶为原料，首先经加热回流后，再用柠檬酸溶液调节pH,用氯仿萃取后再进行减压浓缩，最后用制备的凹凸棒土滤槽纯化提取，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法，解决了纯化率低、生产成本高等问题。实例证明，该方法以含有黄酮类化合物的银杏叶为原料，不仅原料获得途径简单，并且操作过程简单，且操作条件易于控制，最终使得黄酮类化合物提取得率达到40～50％，黄酮化合物纯度达到90%以上，适合大规模生产应用。

Description

一种银杏叶中黄酮类化合物提取方法

技术领域

本发明公开了一种银杏叶中黄酮类化合物提取方法，属于中药原料药提取技术领域。

背景技术

黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子 相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。黄酮类化合物对治疗冠心病、心绞痛、高血压和支气管哮喘等有显著效果，能够调节生理功能，延缓衰老，增强免疫力，防治由于血管老化和脑血管供血不足所致的疾病，引起了国内外学者的浓厚兴趣。因此从银杏叶中提取黄酮类化合物，并且对其提取的工艺条件进行优化至关重要。

黄酮类化合物在银杏叶中以两种形态存在，一是脂溶性成分如黄酮苷元类物质，二是水溶性成分如黄酮苷成分。黄酮类化合物可以通过煎煮、加热回流、超声提取、冷浸、渗漉、微波提取、高压提取等方法。为了充分提取不同极性的黄酮化合物，在实际生产中要采用极性低的有机溶剂或水提等方法提取。由于对医药产品和保健品的安全要求，醇水多成为常用提取溶剂，避免对机体有害的其他有机溶剂。而目前生产提取过程中效率偏低、提取时间长。为了解决这些问题，需要确立高教清洁的植物提取技术。近年，酶法提取药用植物已成为中药提取研究的重要方法，需要从基础和应用上深入研究酶反应在植物成分转化和提取过程的作用。专利CN201110189400.8公开了榛叶黄酮提取物及其药物组成，用酶解法提取黄酮类化合物，存在生产成本高，导致残留形成新的杂质。由于所述银杏时总黄酮在植物细胞中以苷元和苷的形式存在，在醇水体系中苷元由于其极性低不易被提取，黄酮苷元以90～95％高浓度乙醇提取，黄酮苷以60％左右乙醇才能进行提取，专利CN201210341952.0公开了枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法用无水乙醇提取存在纯化率低等诸多问题。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前用单一酶液提取成本高和无水乙醇提取纯化率低、产率低等问题，本发明公开了一种银杏叶中黄酮类化合物提取方法，属于中药原料药提取技术领域。本发明以银杏叶为原料，首先经加热回流后，再用柠檬酸溶液调节pH,用氯仿萃取后再进行减压浓缩，最后用制备的凹凸棒土滤槽纯化提取，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法，解决了纯化率低、生产成本高等问题。实例证明，该方法以含有黄酮类化合物的银杏叶为原料，不仅原料获得途径简单，并且操作过程简单，且操作条件易于控制，最终使得黄酮类化合物提取得率达到40～50％，黄酮化合物纯度达到90%以上，适合大规模生产应用。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）称取2～3kg银杏叶将其洗净，于55～65℃烘干过夜放入粉碎机中以5000～6000r/min的转速粉碎后过50～60目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为60～70%乙醇溶液按质量比为1：10～1：13置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次2～3h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为5～7，在回流温度为50～60℃条件下提取10～30h，得浸膏；

（2）按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在60～80℃下，搅拌萃取30～90min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；

（3）称取1～2kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为2～3m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；

（4）使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽3～5次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。

本发明的应用方法是：将本发明制得的黄酮类化合物成品与2g糊精和2g淀粉混合均匀后再通过压片机进行压片，制成黄酮类化合物片剂，其中每个片剂含有1.5～2.5g黄酮类化合物，食用时，配以200～300mL温水送服，每日早晚饭后服用一次，每次服用1～3粒，坚持服用7～14天，可以感觉人体内分泌水平得到调节，心血管问题得到改善，还可以有效的防止癌症的发生。

本发明的有益效果是：

（1）本发明方法简单易于操作，以银杏叶为原料，不仅原料获得途径简单，并且操作过程简单，且操作条件易于控制；

（2）最终使得黄酮类化合物提取得率达到40～50％，黄酮化合物纯度达到90%以上，且适合大规模生产应用。

具体实施方式

称取2～3kg银杏叶将其洗净，于55～65℃烘干过夜放入粉碎机中以5000～6000r/min的转速粉碎后过50～60目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为60～70%乙醇溶液按质量比为1：10～1：13置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次2～3h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为5～7，在回流温度为50～60℃条件下提取10～30h，得浸膏；按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在60～80℃下，搅拌萃取30～90min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；称取1～2kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为2～3m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽3～5次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。

实例1

称取2kg银杏叶将其洗净，于55℃烘干过夜放入粉碎机中以5000r/min的转速粉碎后过50目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为60%乙醇溶液按质量比为1：10置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次2h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为5，在回流温度为50℃条件下提取10h，得浸膏；按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在60℃下，搅拌萃取30min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；称取1kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为2m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽3次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。

本发明的应用方法是：将本发明制得的黄酮类化合物成品与2g糊精和2g淀粉混合均匀后再通过压片机进行压片，制成黄酮类化合物片剂，其中每个片剂含有1.5g黄酮类化合物，食用时，配以200mL温水送服，每日早晚饭后服用一次，每次服用1粒，坚持服用7天，可以感觉人体内分泌水平得到调节，心血管问题得到改善，还可以有效的防止癌症的发生。

实例2

称取2.5kg银杏叶将其洗净，于60℃烘干过夜放入粉碎机中以5500r/min的转速粉碎后过55目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为65%乙醇溶液按质量比为1：12置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次2.5h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为6，在回流温度为55℃条件下提取20h，得浸膏；按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在70℃下，搅拌萃取60min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；称取1.5kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为2.5m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽4次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。

本发明的应用方法是：将本发明制得的黄酮类化合物成品与2g糊精和2g淀粉混合均匀后再通过压片机进行压片，制成黄酮类化合物片剂，其中每个片剂含有2.0g黄酮类化合物，食用时，配以250mL温水送服，每日早晚饭后服用一次，每次服用2粒，坚持服用10天，可以感觉人体内分泌水平得到调节，心血管问题得到改善，还可以有效的防止癌症的发生。

实例3

称取3kg银杏叶将其洗净，于65℃烘干过夜放入粉碎机中以6000r/min的转速粉碎后过60目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为70%乙醇溶液按质量比为1：13置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次3h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为7，在回流温度为60℃条件下提取30h，得浸膏；按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在80℃下，搅拌萃取90min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；称取2kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为3m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽5次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。

本发明的应用方法是：将本发明制得的黄酮类化合物成品与2g糊精和2g淀粉混合均匀后再通过压片机进行压片，制成黄酮类化合物片剂，其中每个片剂含有2.5g黄酮类化合物，食用时，配以300mL温水送服，每日早晚饭后服用一次，每次服用3粒，坚持服用14天，可以感觉人体内分泌水平得到调节，心血管问题得到改善，还可以有效的防止癌症的发生。

Claims (1)

1.一种从银杏叶中黄酮类化合物提取方法，其特征在于具体提取步骤为：

（1）称取2～3kg银杏叶将其洗净，于55～65℃烘干过夜放入粉碎机中以5000～6000r/min的转速粉碎后过50～60目标准筛，得到银杏叶粉末，再将银杏叶粉末与体积浓度为60～70%乙醇溶液按质量比为1：10～1：13置于索氏提取器中进行混合，加热回流提取2次，每次2～3h，提取滤液，合并滤液，再用0.5mol/L柠檬酸溶液调节pH为5～7，在回流温度为50～60℃条件下提取10～30h，得浸膏；

（2）按固液比1:14，将上述浸膏和去离子水混合均匀，形成混合液，再用萃取剂氯仿在60～80℃下，搅拌萃取30～90min，萃取完全后冷却至35℃，静置分层，得上层液和下层液，将上层液置于旋转蒸发仪中在真空度为0.09MPa， 60℃条件下进行减压浓缩，即得银杏叶总黄酮粗品提取液；

（3）称取1～2kg的凹凸棒土与石油醚按固液比2:1混合均匀，并使用其制成高为2～3m的过滤槽，将上述银杏叶总黄酮粗品提取液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出的液体，并加入流出液体积60％的无水乙醇混合均匀后放入蒸馏装置中去除石油醚，收集蒸馏剩余液；

（4）使用三氯甲烷淋洗上述过滤后的过滤槽3～5次，再将上述收集蒸馏剩余液从过滤槽顶部流入，收集过滤槽底部流出液，加入无水乙醇混合均匀后进行回流提纯，去除洗脱剂回收溶剂、减压过滤、浓缩、干燥，即得银杏叶总黄酮提取物。