CN106047740A - 一株l‑丙氨酸高产菌株 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物工程技术领域，提供了一株L‑丙氨酸高产菌株，命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)EcQLS1，保藏编号为CGMCC No.11764。本发明采用常温常压等离子体诱变并结合高通量筛选方法获得上述L‑丙氨酸高产菌株肠埃希氏菌(Escherichia coli)EcQLS1，可大幅度提高L‑丙氨酸的产量，且稳定性较好，菌株连续传代5次后L‑丙氨酸的产量无明显变化。利用摇瓶实验，L‑丙氨酸的产量达120g/L。本技术发明完全符合工业L‑丙氨酸菌株的诱变和筛选需要，并可应用于工业化发酵生产，具有重大的经济价值。

Description

一株L-丙氨酸高产菌株
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，提供了一株L-丙氨酸高产菌株。
背景技术
L-丙氨酸，又称α-氨基丙酸，是一种α-氨基酸的左旋异构体，为白色结晶，具有特殊的甜味。广泛应用于生物、医药、化工、食品、高分子材料等领域，用于制备药物化合物合成甜味剂、测定肝功等，是一种应用范围广且具有巨大发展潜力的重要化工产品，越来越受到人们的欢迎和重视。
目前，L-丙氨酸可以采用化学合成法、酶法和发酵法生产。通过不同的化学合成途径来生产各种氨基酸是化工行业常见的办法，但是合成方法的产品质量差、回收率低、成本高和环境污染等，所以这种方法基本处于淘汰边缘。酶法转化，即通过富有L-天冬氨酸-β-脱羧酶活力的微生物(如德阿昆哈假单胞Pseudomonas dacunhae等)细胞催化L-天冬氨酸而得到。这种转化工艺的特点是酶活力高、设备投资小，提取工艺简单；但是其原材料L-天冬氨酸价格较贵，使该方法的生产成本较高。微生物发酵法与酶催化工艺相比有诸多优点：主要原料葡萄糖廉价易得，并且属于可再生资源，成本可以保持稳定水平，培养成分简单，厌氧发酵动力消耗低，产品收率高、成本低。
微生物发酵常用的菌株选育技术主要分为随机选育和定向选育。虽然以分子生物学为基础的基因工程、代谢工程以及由各种组学组成的系统生物学研究为定向构建功能细胞株提供了广阔的前景，但是真正实现以这些功能细胞培养来达到改造目标却很困难。由于微生物体内代谢网络复杂性和多节点性，基因操作后菌株的代谢流往往并不朝着与其设计的方向转移。因此，在一个复杂的代谢体系中，想要得到优良的生产菌株，主要还是采用随机选育技术。长期以来针对菌株改良的随机选育技术中主要采用的是紫外诱变和LiCl诱变等传统的育种手段，且已经取得了一定的效果。高理所等报道了利用紫外线和激光灯组合诱变的方法筛选L-丙氨酸的高产菌株(安徽工程科技学院学报，2008，,23(1)19-24)，但是由于紫外线对各种微生物的诱变效应不同，加上紫外的剂量大小很难把握，并且突变后存在光修复作用，所以紫外线诱变的效果不佳，正突变率效率较低，死亡率较高。
发明内容
本发明针对上述技术存在的不足，提供了一株L-丙氨酸高产菌株，命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)EcQLS1，保藏编号为CGMCC No.11764。本发明采用常温常压等离子体诱变并结合高通量筛选方法获得上述L-丙氨酸高产菌株肠埃希氏菌(Escherichiacoli)EcQLS1，可大幅度提高L-丙氨酸的产量，且稳定性较好，菌株连续传代5次后L-丙氨酸的产量无明显变化。利用摇瓶实验，L-丙氨酸的产量达120g/L。本技术发明完全符合工业L-丙氨酸菌株的诱变和筛选需要，并可应用于工业化发酵生产，具有重大的经济价值。
本发明提供的一株L-丙氨酸高产菌株，其保藏号为CGMCC No.11764；其分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)EcQLS1；
该菌株是以市场上直接购得的MG1655为出发菌株获得的，其主要步骤是：先经过常压常温等离子体(ARTP)诱变处理获得突变株，然后通过高通量筛选技术得到高产突变株，最后通过摇瓶验证、传代培养获得遗传性稳定的L-丙氨酸高产菌株并进行生物保藏；
更为具体的获得方法如下：
(1)利用常温常压等离子体诱变出发菌株
以MG1655作为出发菌株培养至对数后期，加无菌水稀释至细胞密度OD600mm值大于1，在无菌风下吹干，然后置于ARTP诱变系统进行等离子体照射0.5-6min；将样品用生理盐水洗下，常规梯度稀释后涂布在平板LB固体培养基上，37℃培养15h；
(2)突变株高通量初筛
挑取上述步骤所得的单菌落突变菌株，并接种于分别含有0.5ml LB固体培养基的96孔板和0.5ml LB液体发酵培养基的96孔板中，前者置于35～37℃静置培养10～18h，后者置于35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后检测各孔发酵液中L-丙氨酸的含量，挑出产量高于出发菌株MG1655产量40％的突变菌株，即为初筛高产菌株；
发明人采用这种方法，含有0.5ml LB固体培养基的96孔板和0.5ml LB液体发酵培养基的96孔板中同一个位置的菌是同一株，而LB固体培养基用于保存菌株，LB液体发酵培养基则用于检测产量，这样经过LB液体发酵培养基培养筛选出的菌株，可以从同一个位置的LB固体培养基中直接获得；
(3)突变株高通量复筛
将步骤(2)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以10％的接种量转接到装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后，检测各孔中发酵液的L-丙氨酸的含量，挑取L-丙氨酸的含量高于出发菌株MG1655产量40％的突变株，即为复筛高产菌株；
(4)突变株摇瓶验证
将步骤(3)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以10％的接种量转接到装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min继续震荡培养12～20h；
(5)突变株遗传稳定性验证
将经摇瓶验证过的高产菌株经步骤(4)中250ml摇瓶连续培养5代，检测高产菌株的遗传稳定性，选取稳定性好且L-丙氨酸产量最高的菌株进行保藏。
其中检测各孔发酵液中L-丙氨酸含量的方法，采用常规HPLC检测方法，发明人在此不再赘述；
综上所述本发明采用常温常压等离子体诱变并结合高通量筛选方法获得上述L-丙氨酸高产菌株肠埃希氏菌(Escherichia coli)EcQLS1，可大幅度提高L-丙氨酸的产量，且稳定性较好，菌株连续传代5次后L-丙氨酸的产量无明显变化。利用摇瓶实验，L-丙氨酸的产量达120g/L，较出发菌株MG1655提高了75％。本技术发明完全符合工业L-丙氨酸菌株的诱变和筛选需要，并可应用于工业化发酵生产，具有重大的经济价值。
发明人对L-丙氨酸高产菌株肠埃希氏菌EcQLS1进行了生物保藏，保藏信息如下：
保藏信息
保藏时间：2015年11月30日
保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)
保藏编号：CGMCC No.11764
保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
分类命名:大肠埃希氏细菌(Escherichia coli)
附图说明
图1为L-丙氨酸产生菌的菌落形态；
可见本发明所获得的L-丙氨酸产生菌菌落形态，与常规无显著变化。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1利用常温常压等离子体(ARTP)诱变出发菌株
以MG1655作为出发菌株培养至对数后期，加无菌水稀释至细胞密度OD600mm值大于1，在无菌风下吹干，然后置于ARTP诱变系统进行等离子体照射0.5-6min；将样品用生理盐水洗下，常规梯度稀释后涂布在平板LB固体培养基上，37℃培养15h。
实施例2突变株高通量初筛
挑取上述步骤所得的单菌落突变菌株，并接种于分别含有0.5ml LB固体培养基的96孔板和0.5ml LB液体发酵培养基的96孔板中，前者置于35～37℃静置培养10～18h，后者置于35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后检测各孔发酵液中L-丙氨酸的含量，挑出产量高于出发菌株MG1655产量40％的突变菌株，即为初筛高产菌株。
实施例3突变株高通量复筛
将步骤(2)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以0.05ml的接种量转接到装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后，检测各孔中发酵液的L-丙氨酸的含量，挑取L-丙氨酸的含量高于出发菌株MG1655产量40％的突变株，即为复筛高产菌株。
实施例4突变株摇瓶验证
将步骤(3)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以10％的接种量转接到装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min继续震荡培养12～20h。
实施例5突变株遗传稳定性验证
将经摇瓶验证过的高产菌株经步骤(4)中250ml摇瓶连续培养5代，检测高产菌株的遗传稳定性，选取稳定性好且L-丙氨酸产量最高的菌株进行保藏，保藏编号为CGMCCNo.11764。
实施例6利用突变株EcQLS1在100L发酵罐中发酵生产L-丙氨酸
将本发明中保藏号为CGMCC No.11764的大肠埃希氏细菌(Escherichia coli)活化后制成菌悬液接入种子培养基中，于36℃，200r/min摇床中培养16h,
再以3vt％接种量接至100L发酵罐中培养，发酵温度为36℃，转数200r/min，发酵过程pH会下降，故而流加浓度10％的尿素水溶液，维持发酵液的pH在6～7；发酵36h后停止发酵，HPLC检测发酵液中L-丙氨酸浓度为120g/L。
可见利用该保藏菌株生产L-丙氨酸，可大幅度提高L-丙氨酸的产量，且稳定性较好，菌株连续传代5次后L-丙氨酸的产量无明显变化；利用摇瓶实验，L-丙氨酸的产量达120g/L，较出发菌株MG1655提高了75％；本技术发明完全符合工业L-丙氨酸菌株的诱变和筛选需要，并可应用于工业化发酵生产，具有重大的经济价值。

Claims (2)

1.一株L-丙氨酸高产菌株，命名为大肠埃希氏菌EcQLS1，保藏编号为CGMCC No.11764。
2.权利要求1所述的L-丙氨酸高产菌株的获得方法，其特征在于：具体步骤如下：
(1)利用常温常压等离子体诱变出发菌株
以MG1655作为出发菌株培养至对数后期，加无菌水稀释至细胞密度OD600mm值大于1，在无菌风下吹干，然后置于ARTP诱变系统进行等离子体照射0.5-6min；将样品用生理盐水洗下，常规梯度稀释后涂布在平板LB固体培养基上，37℃培养15h；
(2)突变株高通量初筛
挑取上述步骤所得的单菌落突变菌株，并接种于分别含有0.5ml LB固体培养基的96孔板和0.5ml LB液体发酵培养基的96孔板中，前者置于35～37℃静置培养10～18h，后者置于35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后检测各孔发酵液中L-丙氨酸的含量，挑出产量高于出发菌株MG1655产量40％的突变菌株，即为初筛高产菌株；
(3)突变株高通量复筛
将步骤(2)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以10％的接种量转接到装有0.5mlLB液体发酵培养基的96孔板中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；培养后，检测各孔中发酵液的L-丙氨酸的含量，挑取L-丙氨酸的含量高于出发菌株MG1655产量40％的突变株，即为复筛高产菌株；
(4)突变株摇瓶验证
将步骤(3)所得的高产突变株的LB固体培养基上的固体培养物接种于装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min震荡培养12～20h；以10％的接种量转接到装有30～50mlLB液体发酵培养基的250ml摇瓶中，35～37℃、200～300r/min继续震荡培养12～20h；
(5)突变株遗传稳定性验证
将经摇瓶验证过的高产菌株经步骤(4)中250ml摇瓶连续培养5代，检测高产菌株的遗传稳定性，选取稳定性好且L-丙氨酸产量最高的菌株进行保藏。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107164420A (zh) * 2017-07-07 2017-09-15 精晶药业股份有限公司 一种l‑丙氨酸半连续发酵的方法
CN108085290A (zh) * 2018-01-04 2018-05-29 哈尔滨瀚邦医疗科技有限公司 一种戊型肝炎病毒遗传稳定性的检测方法及应用
CN108642041A (zh) * 2018-06-20 2018-10-12 秦皇岛华恒生物工程有限公司 一种提高重组大肠杆菌发酵生产l-丙氨酸能力的方法
CN110438039A (zh) * 2019-07-19 2019-11-12 郑州大学 一株丙氨酸发酵用菌株

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101665813A (zh) * 2009-09-14 2010-03-10 安徽华恒生物工程有限公司 一种l-丙氨酸的微生物发酵生产方法
CN101974476A (zh) * 2010-08-31 2011-02-16 安徽华恒生物工程有限公司 一种高产l-丙氨酸的xz-a26菌株及构建方法与应用
CN104774790A (zh) * 2015-04-03 2015-07-15 江南大学 一种高效发酵生产l-丙氨酸的大肠杆菌

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101665813A (zh) * 2009-09-14 2010-03-10 安徽华恒生物工程有限公司 一种l-丙氨酸的微生物发酵生产方法
CN101974476A (zh) * 2010-08-31 2011-02-16 安徽华恒生物工程有限公司 一种高产l-丙氨酸的xz-a26菌株及构建方法与应用
CN104774790A (zh) * 2015-04-03 2015-07-15 江南大学 一种高效发酵生产l-丙氨酸的大肠杆菌

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107164420A (zh) * 2017-07-07 2017-09-15 精晶药业股份有限公司 一种l‑丙氨酸半连续发酵的方法
CN108085290A (zh) * 2018-01-04 2018-05-29 哈尔滨瀚邦医疗科技有限公司 一种戊型肝炎病毒遗传稳定性的检测方法及应用
CN108642041A (zh) * 2018-06-20 2018-10-12 秦皇岛华恒生物工程有限公司 一种提高重组大肠杆菌发酵生产l-丙氨酸能力的方法
CN108642041B (zh) * 2018-06-20 2022-04-19 秦皇岛华恒生物工程有限公司 一种提高重组大肠杆菌发酵生产l-丙氨酸能力的方法
CN110438039A (zh) * 2019-07-19 2019-11-12 郑州大学 一株丙氨酸发酵用菌株
CN110438039B (zh) * 2019-07-19 2022-01-28 郑州大学 一株丙氨酸发酵用菌株

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