CN106036281A - 一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法，所述方法将枸杞混合物粉碎，加去离子水，煮沸浸提，过滤，收集滤液，获得多糖提取液；以多糖提取液为溶剂，添加葡萄糖、大豆分离蛋白、硫酸镁、磷酸氢二钾、维生素B1，pH 6‑7，获得发酵培养基；将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20‑30℃发酵培养抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇，获得蛹虫草发酵饮料。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.16mg/mL以上，虫草酸含量为0.18mg/mL以上。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种发酵饮料，特别涉及一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法。
(二)背景技术
蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，麦角菌科、虫草属的模式种。学名为Cordycepsmilitaris，又名北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值。其中尤以虫草酸、虫草素、虫草多糖、SOD等。
虫草多糖和SOD等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草酸(甘露醇)可以显著地降低颅压，促进机体新陈代谢，因而使脑溢血和脑血栓病症得到缓解。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录mRNA过程中使mRNA成熟障碍，抑制癌细胞的生长。并有降血糖的作用。虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞转化，提高血清IgG的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体自身抗癌抑癌的能力。SOD(超氧化物歧化酶)可以消除机体内超氧自由基，具有抗衰老、抗癌抑癌的作用。
目前，报道的蛹虫草发酵型饮料，都是以普通微生物培养基进行发酵。如用黄豆粉、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏等进行发酵，然后在发酵液中添加一些提取物进行复配，工艺环节较多，不利实际生产，而且口感、风味、外观等均存在一些不足。
因此，现有技术还有待于进一步发展。利用蛹虫草为菌种，对枸杞、红枣、茯苓提取液进行发酵，制备液体饮料，液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效俱佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺，一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种蛹虫草液体发酵饮料的制备方法，旨在弥补现有蛹虫草发酵饮料工艺存在的缺陷，进一步推动其产业化进程。
本发明采用的技术方案是：
本发明提供一种蛹虫草发酵饮料，所述发酵饮料按如下方法制备：(1)将枸杞混合物，粉碎(优选粉碎至20-40目)，加去离子水，煮沸浸提，浸提结束后，过滤，收集滤液，获得多糖提取液；所述枸杞混合物由如下质量配比原料组成：枸杞10-30份、去核红枣10-30份、茯苓1-5份；(2)以步骤(1)多糖提取液为溶剂，添加5-20g/L葡萄糖、1-5g/L大豆分离蛋白、0.1-2g/L硫酸镁、0.5-2g/L磷酸氢二钾、2-5mg/L维生素B1，pH 6-7，获得发酵培养基，115℃高压灭菌30min；(3)将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20-50℃发酵培养8-48h(优选20-45℃培养24-48h)；接着升温至70-80℃(保持20-40min)使菌丝体自溶、活酶失效；然后抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇作为甜味剂，获得蛹虫草发酵饮料。
进一步，步骤(1)所述去离子水的体积用量以枸杞混合物总质量计为5～8ml/g。
进一步，步骤(1)所述枸杞混合物由如下质量配比的原料组成：枸杞15-25份、去核红枣15-25份、茯苓1.5-4.5份。
进一步，步骤(1)所述浸提条件为煮沸浸提20-60min。
进一步，步骤(2)所述溶剂是用去离子水将步骤(1)多糖提取液的多糖含量调整为5-20g/L。
进一步，步骤(2)发酵培养基终浓度组成为：10-15g/L葡萄糖、2-4g/L大豆分离蛋白、0.3-1.5g/L硫酸镁、1-1.5g/L磷酸氢二钾、2-4mg/L维生素B1，溶剂为多糖提取液，pH6.1-6.9。
进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液OD600为1.0-1.6。
进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液接种量以发酵培养基总体积计，按体积浓度2％-6％进行接种。
进一步，步骤(3)所述赤藓糖醇加入量以滤液体积计为5-15g/L。
进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子无菌水悬液制备方法为：将蛹虫草菌种接种至PDA斜面培养基培养，培养条件为20℃，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD600值为1.0-1.6。
与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在：
本发明提供了一种利用蛹虫草为菌种进行液体发酵饮料的制备方法，对枸杞、红枣、茯苓提取液进行发酵，液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效俱佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.16mg/mL以上，虫草酸含量为0.18mg/mL以上。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
本发明实施例所用蛹虫草孢子制备方法为：蛹虫草菌种(购自贵州益生原生物技术有限公司)采用PDA斜面培养基培养，培养条件为20℃，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD600值。
实施例1：
(1)将30g枸杞、10g去核红枣、5g茯苓混合，并一起粉碎至20目；以枸杞、红枣和茯苓总质量计，加5ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为20min；提取后，用4层纱布过滤，收集滤液；斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为5g/L，获得多糖提取液1000mL；
(2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入15g/L的葡萄糖、4g/L的大豆分离蛋白、1.5g/L的硫酸镁、1.5g/L的磷酸氢二钾、4mg/L的维生素B1，pH 6.1，115℃高压灭菌30min，获得发酵培养基1000mL；
(3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度6％的接种量，将60mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD600为1.0)接种至发酵培养基，在20℃发酵培养24h；接着升温至80℃，保持20min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后抽滤，收集滤液1000mL，以滤液体积计加入终浓度为5g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.164mg/mL，虫草酸含量为0.186mg/mL。
实施例2：
(1)将15g枸杞、15g去核红枣、4g茯苓混合，并一起粉碎至30目；以枸杞、去核红枣和茯苓总质量计，加6ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为40min；提取后，用4层纱布过滤，收集滤液；斐林试剂滴定法测定滤液多糖含量，并用去离子水调整为10g/L，获得多糖提取液1000mL；
(2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入终浓度12g/L的葡萄糖、3g/L的大豆分离蛋白、1g/L的硫酸镁、1g/L的磷酸氢二钾、3mg/L的维生素B1，pH 6.5，获得发酵培养基1000mL；115℃高压灭菌30min；
(3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度6％的接种量，将60mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD600为1.5)接种至发酵培养基，在45℃发酵培养8h，使菌丝自溶；接着升温至75℃，保持30min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后固液分离，收集滤液1000mL，以滤液体积计添加入终浓度为10g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，即得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.171mg/mL，虫草酸含量为0.197mg/mL。
实施例3：
(1)将10g枸杞、30g去核红枣、1g茯苓混合，并一起粉碎至40目；以枸杞、去核红枣和茯苓总质量计，加8ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为60min；提取后，用4层纱布过滤，收集滤液；斐林试剂滴定法测定滤液多糖含量，并用去离子水调整为20g/L，获得多糖提取液1000mL；
(2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入终浓度10g/L的葡萄糖、2g/L的大豆分离蛋白、0.3g/L的硫酸镁、1g/L的磷酸氢二钾、2mg/L的维生素B1，pH 6.9，获得发酵培养基1000mL，115℃高压灭菌30min；
(3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度2％的接种量，将20mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD600为1.6)接种至发酵培养基，在30℃发酵培养48h，使菌丝自溶；接着升温至70℃，保持40min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后固液分离，收集滤液1000mL，以滤液体积计添加入终浓度为15g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，即得蛹虫草发酵饮料。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.152mg/mL，虫草酸含量为0.182mg/mL。
对比例1：
(1)将40g枸杞、50g去核红枣、6g茯苓混合，并一起粉碎至10目；以枸杞、去核红枣和茯苓总质量计，加10mL/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为70min；提取后，用4层纱布过滤，收集滤液；斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为25g/L，获得多糖提取液1000mL；
(2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入25g/L的葡萄糖、6g/L的大豆分离蛋白、2.5g/L的硫酸镁、2.5g/L的磷酸氢二钾、6mg/L的维生素B1，pH 5.5，115℃高压灭菌30min，获得发酵培养基1000mL；
(3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度1％的接种量，将10mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD600为1.8)接种至发酵培养基，在18℃发酵培养60h；接着升温至85℃，保持10min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后抽滤，收集滤液1000mL，以滤液体积计加入终浓度为4g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.085mg/mL，虫草酸含量为0.132mg/mL。
对比例2：
(1)将8g枸杞、8g去核红枣、0.5g茯苓混合，并一起粉碎至60目；以枸杞、去核红枣和茯苓总质量计，加4ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为10min；提取后，用4层纱布过滤，收集滤液；斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为25g/L，获得多糖提取液1000mL；
(2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入4g/L的葡萄糖、0.8g/L的大豆分离蛋白、0.08g/L的硫酸镁、0.4g/L的磷酸氢二钾、1mg/L的维生素B1，pH 7.5，115℃高压灭菌30min，获得发酵培养基1000mL；
(3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度7％的接种量，将70mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD600为0.8)接种至发酵培养基，在32℃发酵培养18h；接着升温至65℃，保持10min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后抽滤，收集滤液1000mL，以滤液体积计加入终浓度为18g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.103mg/mL，虫草酸含量为0.118mg/mL。利用蛹虫草为菌种发酵制备液体饮料方法，饮料液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效俱佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述实例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应该属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (10)
1.一种蛹虫草发酵饮料，其特征在于所述发酵饮料按如下方法制备：(1)将枸杞混合物粉碎，加去离子水，煮沸浸提，浸提结束后，过滤，收集滤液，获得多糖提取液；所述枸杞混合物由如下质量配比原料组成：枸杞10-30份、去核红枣10-30份、茯苓1-5份；(2)以步骤(1)多糖提取液为溶剂，添加5-20g/L葡萄糖、1-5g/L大豆分离蛋白、0.1-2g/L硫酸镁、0.5-2g/L磷酸氢二钾、2-5mg/L维生素B1，pH 6-7，获得发酵培养基；(3)将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20-50℃发酵培养8-48h；接着升温至70-80℃，保持20-40min，使菌丝体自溶、活酶失效；然后抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇作为甜味剂，获得蛹虫草发酵饮料。
2.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(1)所述去离子水的体积用量以枸杞混合物质量计为5-8ml/g。
3.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(1)所述枸杞混合物由如下质量配比的原料组成：枸杞15-25份、去核红枣15-25份、茯苓1.5-4.5份。
4.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(1)所述浸提条件为煮沸浸提20-60min。
5.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(2)所述溶剂是用去离子水将步骤(1)多糖提取液的多糖含量调整为5-20g/L。
6.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(2)发酵培养基终浓度组成为：10-15g/L葡萄糖、2-4g/L大豆分离蛋白、0.3-1.5g/L硫酸镁、1-1.5g/L磷酸氢二钾、2-4mg/L维生素B1，溶剂为多糖含量5-20g/L的多糖提取液，pH 6.1-6.9。
7.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液OD600为1.0-1.6。
8.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液接种量以发酵培养基总体积计，按体积浓度2％-6％进行接种。
9.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述赤藓糖醇加入量以滤液体积计为5-15g/L。
10.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子无菌水悬液制备方法为：将蛹虫草菌种接种至PDA斜面培养基培养，培养条件为20℃，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD600值为1.0-1.6。
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