CN106018827B - 一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法，本发明提供的一组血清差异蛋白可用于阿尔茨海默症检测，用于阿尔茨海默症检测时，能提高检测的特异性和准确性，同时具有一定的客观性，优于单一疾病标志物。本发明采用高通量蛋白组学方法，通过对阿尔茨海默症患者血清与健康对照血清进行比较分析，获得了二者血清差异蛋白26个，与对照相比，表达上调蛋白6个，表达下调蛋白20个。并通过酶联免疫技术对这些蛋白进行逐个检测，或采用蛋白芯片技术对这些蛋白进行逐个检测或同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化，可作为阿尔茨海默症诊断的依据，与现有的阿尔茨海默症检测量表相比，本发明检测方法特异性、灵敏度和准确性高。
Description
技术领域
本发明涉及疾病检测技术领域，尤其涉及一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法。
背景技术
阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)，俗称老年痴呆，是一种起病隐匿、进行性发展的神经系统退行性疾病，临床表现为认知和记忆功能下降，日常生活能力减退，并伴有各种神经精神症状和行为障碍。该病病因迄今尚未阐明，发病率逐年增高，成为严重威胁老年人身心健康的主要疾病之一。目前，阿尔茨海默症的诊断主要依据神经心理评定量表、临床症状、临床医生的临床经验等，具有一定的主观性，确诊只能通过病人死亡后尸检脑内的老年斑(SPs)和神经纤维缠结(NFTs)来判断。尽管AD的诊断在影像学、脑脊液诊断标志物方面已取得一定进展，但影像学检查价格普遍偏贵、往往还需要使用造影剂，脑脊液检查需要穿刺，难以大面积推广。
因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法，旨在解决现有检测方法具有一定的主观性，易造成检测延迟或误诊的问题。
本发明的技术方案如下：
一种阿尔茨海默症检测标志物，其中，所述阿尔茨海默症检测标志物为阿尔茨海默症患者与健康对照的血清差异蛋白，所述血清差异蛋白为α-1-糜蛋白酶、α-1-抗胰蛋白酶、α白蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白B-100、脑源性神经营养因子、铜蓝蛋白、丛生蛋白、补体因子B、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原β链、纤维蛋白原γ链、纤维连接蛋白、纤蛋白-1、凝溶胶蛋白、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H2、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4、血浆蛋白酶C1抑制剂、血小板碱性蛋白、S100钙结合蛋白A8、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1、血管性血友病因子和锌-α-2-糖蛋白中的任意3种或3种以上蛋白的组合。
所述阿尔茨海默症检测标志物的检测方法，其中，采集血清，通过高通量蛋白质组学方法确定血清中是否存在权利要求1所述的血清差异蛋白。
所述阿尔茨海默症检测标志物的检测方法，其中，确定血清中存在血清差异蛋白后还包括：采用酶联免疫技术对血清差异蛋白进行逐个检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。
所述阿尔茨海默症检测标志物的检测方法，其中，确定血清中存在血清差异蛋白后还包括：采用蛋白芯片技术对血清差异蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。
有益效果：本发明确定了可用于检测阿尔茨海默症的血清差异蛋白，以提高检测的客观性、特异性和准确性。
具体实施方式
本发明提供一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供一种阿尔茨海默症检测标志物，其中，所述阿尔茨海默症检测标志物为阿尔茨海默症患者与健康对照的血清差异蛋白，所述血清差异蛋白为α-1-糜蛋白酶、α-1-抗胰蛋白酶、α白蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白B-100、脑源性神经营养因子、铜蓝蛋白、丛生蛋白、补体因子B、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原β链、纤维蛋白原γ链、纤维连接蛋白、纤蛋白-1、凝溶胶蛋白、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H2、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4、血浆蛋白酶C1抑制剂、血小板碱性蛋白、S100钙结合蛋白A8、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1、血管性血友病因子和锌-α-2-糖蛋白中的任意3种或者3种以上蛋白的组合。
血液由于采样方便且能较好反映机体病理生理过程而成为疾病标志物的最好来源之一。但要寻找到特异性和准确性高，能用于临床检测的血液蛋白标志物，有一定难度。既往研究表明阿尔茨海默症属于多因素相关疾病，使得在寻找阿尔茨海默症检测标志物时，很难寻找到单一的蛋白标志物。因此，本发明提供上述血清差异蛋白用于阿尔茨海默症检测，上述血清差异蛋白可作为一组(或称系列)血清差异蛋白用于阿尔茨海默症检测，采取该组合标志物的方式能提高检测的特异性和准确性，同时具有一定的客观性，优于单一疾病标志物。本发明上述血清差异蛋白(共计26个)中的任意3种或3种以上蛋白即可作为阿尔茨海默症检测标志物，上述血清差异蛋白(共计26个)中的任意3种或3种以上蛋白作为阿尔茨海默症检测标志物用于检测阿尔茨海默症时，具有一定的客观性、特异性和准确性。需说明的是，本发明阿尔茨海默症检测标志物的来源除血清外，阿尔茨海默症检测标志物还可以来自血浆。
作为本发明优选实施例，本发明上述血清差异蛋白中的α-1-糜蛋白酶、α白蛋白和补体因子B，可用作阿尔茨海默症检测标志物。该组合蛋白用作阿尔茨海默症检测标志物时具有一定的客观性、特异性和准确性。
作为本发明优选实施例，本发明上述血清差异蛋白中的α-1-抗胰蛋白酶、载脂蛋白A-1、脑源性神经营养因子、纤维蛋白原γ链、纤维连接蛋白和血管性血友病因子，可用作阿尔茨海默症检测标志物。该组合蛋白用作阿尔茨海默症检测标志物时同样具有一定的客观性、特异性和准确性。
作为本发明优选实施例，本发明上述血清差异蛋白中的载脂蛋白B-100、铜蓝蛋白、丛生蛋白、纤维蛋白原β链、纤维连接蛋白、凝溶胶蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4、血浆蛋白酶C1抑制剂、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1和锌-α-2-糖蛋白，可用作阿尔茨海默症检测标志物。该组合蛋白用作阿尔茨海默症检测标志物时同样具有一定的客观性、特异性和准确性。
作为本发明优选实施例，本发明上述血清差异蛋白中的α-1-糜蛋白酶、α白蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白B-100、铜蓝蛋白、补体因子B、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原γ链、纤蛋白-1、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H2、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1、血管性血友病因子和锌-α-2-糖蛋白，可用作阿尔茨海默症检测标志物。该组合蛋白用作阿尔茨海默症检测标志物时同样具有一定的客观性、特异性和准确性。
作为本发明优选实施例，本发明的α-1-糜蛋白酶、α-1-抗胰蛋白酶、α白蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白B-100、脑源性神经营养因子、铜蓝蛋白、丛生蛋白、补体因子B、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原β链、纤维蛋白原γ链、纤维连接蛋白、纤蛋白-1、凝溶胶蛋白、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H2、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4、血浆蛋白酶C1抑制剂、血小板碱性蛋白、S100钙结合蛋白A8、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1、血管性血友病因子和锌-α-2-糖蛋白，可用作阿尔茨海默症检测标志物。该26个组合蛋白用作阿尔茨海默症检测标志物时具有一定的客观性、特异性和准确性。
基于上述阿尔茨海默症检测标志物，本发明还提供一种基于如上所述阿尔茨海默症检测标志物的检测方法，其中，采集血清，通过高通量蛋白质组学方法确定血清中是否存在如上所述的血清差异蛋白。本发明采用高通量蛋白质组学方法确定血清中是否存在上述血清差异蛋白中的任意3种或3种以上蛋白。本发明上述26个血清差异蛋白中有表达上调蛋白6个，表达下调蛋白20个。
进一步地，确定血清中存在血清差异蛋白还包括：采用酶联免疫技术对血清差异蛋白进行逐个检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。与现有的阿尔茨海默症检测方法相比，本发明根据检测到的血清差异蛋白的浓度变化，可进一步提高检测的特异性、灵敏度和准确性。
进一步地，本发明确定血清中存在差异蛋白还包括：采用蛋白芯片技术对血清差异蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。与现有的阿尔茨海默症检测方法相比，本发明根据检测到的血清差异蛋白的浓度变化，可进一步提高检测的特异性、灵敏度和准确性。
下面通过具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
分别采集阿尔茨海默症患者血清和健康对照血清，然后通过高通量蛋白组学方法对阿尔茨海默症患者血清和健康对照血清进行比较分析。结果得到：与对照健康血清相比，在阿尔茨海默症患者血清中获得了血清差异蛋白26个，其中6个表达蛋白上调，20个表达蛋白下调。然后采用酶联免疫技术对26个血清差异蛋白进行逐个检测，或者采用蛋白芯片技术对26个血清差异蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。本发明通过高通量蛋白组学方法，通过对阿尔茨海默症患者血清与健康对照血清进行比较分析，与对照相比，获得了血清差异蛋白26个，表达上调蛋白6个，表达下调蛋白20个，并通过酶联免疫技术对这些蛋白进行逐个检测或采用蛋白芯片技术对这些蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。与现有的检测方法(阿尔茨海默症检测量表)相比，本发明检测方法特异性、灵敏度和准确性高。血清差异蛋白详见表1。
表1、阿尔茨海默症患者与健康对照的血清差异蛋白
综上所述，本发明提供一种阿尔茨海默症检测标志物及其检测方法，本发明提供的一组血清差异蛋白可用于阿尔茨海默症检测，用于阿尔茨海默症检测时，能提高检测的特异性和准确性，同时具有一定的客观性，优于单一疾病标志物。本发明采用高通量蛋白组学方法，通过对阿尔茨海默症患者血清与健康对照血清进行比较分析，获得了二者血清差异蛋白26个，与对照相比，表达上调蛋白6个，表达下调蛋白20个，并通过酶联免疫技术对这些蛋白进行逐个检测或采用蛋白芯片技术对这些蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化，与现有的检测方法(阿尔茨海默症检测量表)相比，本发明检测方法特异性、灵敏度和准确性高。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (4)
1.一组血清差异蛋白在制备用于检测阿尔茨海默症的试剂中的应用，其特征在于，所述血清差异蛋白为ɑ-1-糜蛋白酶、α-1-抗胰蛋白酶、α白蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白B-100、脑源性神经营养因子、铜蓝蛋白、丛生蛋白、补体因子B、纤维蛋白原ɑ链、纤维蛋白原ß链、纤维蛋白原γ链、纤维连接蛋白、纤蛋白-1、凝溶胶蛋白、结合珠蛋白、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H2、间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4、血浆蛋白酶C1抑制剂、血小板碱性蛋白、S100钙结合蛋白A8、S100钙结合蛋白A9、血小板反应素-1、血管性血友病因子和锌-ɑ-2-糖蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采集血清，通过高通量蛋白质组学方法确定血清中是否存在权利要求1所述的血清差异蛋白。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，确定血清中存在血清差异蛋白后还包括：采用酶联免疫技术对血清差异蛋白进行逐个检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，确定血清中存在血清差异蛋白后还包括：采用蛋白芯片技术对血清差异蛋白进行同时检测，确定检测到的血清差异蛋白的浓度变化。
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