CN106008752A - 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法 - Google Patents

一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106008752A
CN106008752A CN201610567999.7A CN201610567999A CN106008752A CN 106008752 A CN106008752 A CN 106008752A CN 201610567999 A CN201610567999 A CN 201610567999A CN 106008752 A CN106008752 A CN 106008752A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chitosan
agar
agarose
solution
prepared
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610567999.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106008752B (zh
Inventor
傅天保
杨耀聪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xiamen Sun Horse Biological Engineering Co Ltd
Original Assignee
Xiamen Sun Horse Biological Engineering Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xiamen Sun Horse Biological Engineering Co Ltd filed Critical Xiamen Sun Horse Biological Engineering Co Ltd
Priority to CN201610567999.7A priority Critical patent/CN106008752B/zh
Publication of CN106008752A publication Critical patent/CN106008752A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106008752B publication Critical patent/CN106008752B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0036—Galactans; Derivatives thereof
    • C08B37/0039—Agar; Agarose, i.e. D-galactose, 3,6-anhydro-D-galactose, methylated, sulfated, e.g. from the red algae Gelidium and Gracilaria; Agaropectin; Derivatives thereof, e.g. Sepharose, i.e. crosslinked agarose

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，包括以下步骤：1、配制一定浓度的琼脂溶液，搅拌，加热溶解；2、配制适宜浓度的壳聚糖溶液，搅拌，溶解；3、琼脂溶液加入壳聚糖溶液，搅拌；4、用氢氧化钠溶液调节反应溶液PH，使壳聚糖絮凝；5、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；6、让滤液降温，使其凝胶，将凝胶冷冻脱水，烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖。本发明所使用的制备方法简单，经济，环保，制备的琼脂糖凝胶性能好，强度高，电内渗低，可以低于0.1，稳定性好，室温下可以保存5年。

Description

一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法
技术领域
本发明涉及生化领域，具体涉及一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的生产工艺。
背景技术
琼脂（Agar）是从大型海藻石花菜、江蓠等提取制成，广泛应用于食品和生化等行业。琼脂包含两个主要组分，一个组分是电中性的琼脂糖，另一个组分是含有硫酸基、丙酮酸基等带负电荷基团的琼胶酯（Agaropectin）。琼脂糖是由1，3连结的β-D-半乳糖和1，4连结的3，6-脱水α-L-半乳糖相间联结而成的链状多糖，广泛应用于电泳、凝胶扩散和色谱。
在进行琼脂糖凝胶电泳时，琼脂糖中过多的琼胶酯使凝胶在直流电场下产生对流，影响样品的迁移和分离，直接表现为电内渗（electroendosmosis）和蛋白质吸附。从琼脂中制备琼脂糖首要任务是尽可能去除琼脂中的琼胶酯，降低电内渗，商品化低电内渗琼脂糖要求电内渗低于0.13，更好的要求电内渗低于0.10，琼脂糖制备过程中同时去除琼脂中少量的蛋白质、不溶性杂质、可溶性盐和色素，提高琼脂糖纯度、凝胶性能和品质稳定性。
1937年荒木首次从琼脂中分离出琼脂糖（Agarose），直到1961年Hjertin首先发现了琼脂糖优异的使用性能后才引起了越来越多的关注，开始工业化生产琼脂糖，研究开发了多种琼脂糖的制备方法，这些方法存在明显不足，如乙酰化法反应过程中琼脂糖被降解，制得的产品是棕色，季铵盐沉淀法难于把琼胶酯絮凝物从琼脂糖溶液分离，聚乙二醇沉淀法需要多次重复工艺过程，DEAE-纤维素法对不同来源的琼脂适用性差，色谱法所用试剂昂贵，这些方法存在操作繁琐、试剂昂贵和琼脂糖得率低等问题，不是商业化生产的理想工艺。
壳聚糖（Chitosan）是带有正电荷的天然多糖，无毒，无害，主要从蟹壳和虾壳提取制得，壳聚糖不溶于水，溶于稀酸，溶于稀酸的壳聚糖在碱性条件下会再彻底沉淀。通过电中和凝聚和架桥絮凝作用，壳聚糖吸附带负电荷的物质，壳聚糖分子中游离的氨基和羟基与多种金属离子形成稳定的螯合物，壳聚糖广泛应用于污水处理，果汁加工等行业，壳聚糖作为保健食品，用于调节血脂，提高免疫力。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，该方法简单，经济，环保，制得的低电内渗琼脂糖品质优良，凝胶性能优异。
为实现上述目的，本发明的解决方案是：
一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，所述低电内渗琼脂糖，其电内渗值低于0.1，包括如下步骤：
步骤a、配制质量百分比浓度为0.8-4.0％的琼脂溶液，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴锅中恒温；
步骤b、配制质量百分比浓度为0.3%-1.5%壳聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶剂配制壳聚糖溶液，室温搅拌溶解；
步骤c、将步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，两种溶液的体积比为10∶1-5∶1，搅拌混匀，于70-90℃的水浴锅中恒温；
步骤d、用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至7.2-9.0，使壳聚糖絮凝，搅拌0.5-3小时；
步骤e、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤f、让滤液降温，使其凝胶4-6小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，50-60℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖。
所述步骤b中壳聚糖分子量为25，000以上，脱乙酰度75%-95%。
所述步骤a采用的琼脂来源于江蓠、石花菜或鸡毛菜属海洋红藻。
所述低电内渗琼脂糖，其电内渗值为0.06- 0.10。
所述步骤b中室温搅拌溶解1-5小时。
所述琼脂糖对琼脂收率为80%以上，室温下琼脂糖保质期不低于5年。
本发明方法简单，经济，环保，经本发明制得的低电内渗琼脂糖电内渗低于0.1，品质优良，凝胶性能优异，该方法适用于各种来源的海洋红藻琼脂，是理想的商业化生产工艺。
具体实施方式
本发明揭示了一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，所述低电内渗琼脂糖，其电内渗值低于0.1，为0.06- 0.10，包括如下步骤：
步骤a、配制质量百分比浓度为0.8-4.0％的琼脂溶液，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴锅中恒温；采用的琼脂来源于江蓠、石花菜或鸡毛菜属海洋红藻；
步骤b、配制质量百分比浓度为0.3%-1.5%壳聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶剂配制壳聚糖溶液，室温搅拌溶解1-5小时；壳聚糖分子量为25，000以上，脱乙酰度75%-95%；
步骤c、将步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，两种溶液的体积比为10∶1-5∶1，搅拌混匀，于70-90℃的水浴锅中恒温；
步骤d、用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至7.2-9.0，使壳聚糖絮凝，搅拌0.5-3.0小时；
步骤e、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤f、让滤液降温，使其凝胶4-6小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，50-60℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖。
所述琼脂糖对琼脂收率为80%以上，室温下琼脂糖保质期不低于5年。
实施例1：
步骤a、称取10g琼脂粉（石花菜琼脂），加入500ml去离子水，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于85℃的水浴锅中恒温；
步骤b、称取0.3g壳聚糖，加入80ml去离子水，搅拌，加入0.8ml冰醋酸，室温搅拌溶解，其中壳聚糖的分子量为30，000，脱乙酰度88%；
步骤c、步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，搅拌混匀，于75℃的水浴锅中恒温；
步骤d、用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至7.2，使壳聚糖絮凝，搅拌2.5小时；10%氢氧化钠溶液配制方法：称取1g氢氧化钠，加入9ml去离子水，搅拌溶解；
步骤e、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤f、让滤液降温，使其凝胶5小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，50℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖8.25g，得率为82.5%，经测定其电内渗值为0.08，凝胶强度1385 g/cm2 (含1%琼脂糖)。
实施例2：
步骤a、称取4g琼脂粉（江蓠琼脂），加入480ml去离子水，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于75℃的水浴锅中恒温；
步骤b、称取0.5g壳聚糖，加入80ml去离子水，搅拌，加入0.8ml冰醋酸，室温搅拌溶解，其中壳聚糖的分子量为50，000，脱乙酰度76%；
步骤c、步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，搅拌混匀，于80℃的水浴锅中恒温；用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至8.0，使壳聚糖絮凝，搅拌1小时；
步骤d、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤e、让滤液降温，使其凝胶6小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，55℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖3.34g，得率为83.5%，经测定其电内渗值为0.08，凝胶强度1325 g/cm2 (含1%琼脂糖)。
实施例3：
步骤a、称取18g琼脂粉（江蓠琼脂），加入600ml去离子水，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于85℃的水浴锅中恒温；
步骤b、称取1.0g壳聚糖，加入80ml去离子水，搅拌，加入0.8ml冰醋酸，室温搅拌溶解，其中壳聚糖的分子量为100，000，脱乙酰度83%；
步骤c、步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，搅拌混匀，于70-90℃的水浴锅中恒温；用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至9.0，使壳聚糖絮凝，搅拌2小时；
步骤d、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤e、让滤液降温，使其凝胶6小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，55℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖14.69g，得率为81.6%，经测定其电内渗值为0.09，凝胶强度1296 g/cm2(含1%琼脂糖)。
以上所述，仅是本发明实施例而已，并非对本发明的技术范围作任何限制，故凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (6)

1.一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，所述低电内渗琼脂糖，其电内渗值低于0.1，包括如下步骤：
步骤a、配制质量百分比浓度为0.8-4.0％的琼脂溶液，加热搅拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴锅中恒温；
步骤b、配制质量百分比浓度为0.3%-1.5%壳聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶剂配制壳聚糖溶液，室温搅拌溶解；
步骤c、将步骤a所得的琼脂溶液加入步骤b所得的壳聚糖溶液，两种溶液的体积比为10∶1-5∶1，搅拌混匀，于70-90℃的水浴锅中恒温；
步骤d、用10%氢氧化钠溶液调节步骤c所得溶液PH至7.2-9.0，使壳聚糖絮凝，搅拌0.5-3小时；
步骤e、趁热过滤，去滤渣，收集滤液；
步骤f、让滤液降温，使其凝胶4-6小时，将凝胶于-20℃冷冻12小时，脱水，50-60℃烘干，粉碎得低电内渗琼脂糖。
2.如权利要求1所述的一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，其特征在于：所述步骤b中壳聚糖分子量为25，000以上，脱乙酰度75%-95%。
3.如权利要求1所述的一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，其特征在于：所述步骤a采用的琼脂来源于江蓠、石花菜或鸡毛菜属海洋红藻。
4.如权利要求1所述的一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，其特征在于：所述低电内渗琼脂糖，其电内渗值为0.06- 0.10。
5.如权利要求1所述的一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，其特征在于：所述步骤b中室温搅拌溶解1-5小时。
6.如权利要求1所述的种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法，其特征在于：琼脂糖对琼脂收率为80%以上，室温下琼脂糖保质期不低于5年。
CN201610567999.7A 2016-07-19 2016-07-19 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法 Active CN106008752B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610567999.7A CN106008752B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610567999.7A CN106008752B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106008752A true CN106008752A (zh) 2016-10-12
CN106008752B CN106008752B (zh) 2017-05-03

Family

ID=57119610

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610567999.7A Active CN106008752B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106008752B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108129585A (zh) * 2017-11-13 2018-06-08 青岛明月海藻集团有限公司 一种琼脂糖的提纯装置及方法
CN110316935A (zh) * 2019-07-19 2019-10-11 清远市清新区谷城矿业开发投资有限公司 一种废泥处理方法
CN110698573A (zh) * 2019-11-19 2020-01-17 中国科学院海洋研究所 一种高品质琼脂糖的制备方法
CN115260341A (zh) * 2022-07-29 2022-11-01 国药集团化学试剂有限公司 一种高质量琼脂糖及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101891835A (zh) * 2010-07-26 2010-11-24 华侨大学 一种用聚乙二醇沉淀法从琼脂中分离制备琼脂糖的方法
CN103665194A (zh) * 2013-11-27 2014-03-26 华侨大学 一种从琼脂中直接分离琼脂糖和琼胶酯的方法
CN103910811A (zh) * 2014-04-02 2014-07-09 华侨大学 一种低电内渗琼脂糖的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101891835A (zh) * 2010-07-26 2010-11-24 华侨大学 一种用聚乙二醇沉淀法从琼脂中分离制备琼脂糖的方法
CN103665194A (zh) * 2013-11-27 2014-03-26 华侨大学 一种从琼脂中直接分离琼脂糖和琼胶酯的方法
CN103910811A (zh) * 2014-04-02 2014-07-09 华侨大学 一种低电内渗琼脂糖的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
赵永强: "龙须菜琼胶糖的制备及其副产物的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108129585A (zh) * 2017-11-13 2018-06-08 青岛明月海藻集团有限公司 一种琼脂糖的提纯装置及方法
CN110316935A (zh) * 2019-07-19 2019-10-11 清远市清新区谷城矿业开发投资有限公司 一种废泥处理方法
CN110316935B (zh) * 2019-07-19 2022-03-08 清远市清新区谷城矿业开发投资有限公司 一种废泥处理方法
CN110698573A (zh) * 2019-11-19 2020-01-17 中国科学院海洋研究所 一种高品质琼脂糖的制备方法
CN115260341A (zh) * 2022-07-29 2022-11-01 国药集团化学试剂有限公司 一种高质量琼脂糖及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN106008752B (zh) 2017-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106008752A (zh) 一种用壳聚糖絮凝法从琼脂中分离制备低电内渗琼脂糖的方法
CA2756520C (en) Process for the preparation of agarose polymer from seaweed extractive
CN101580555A (zh) 一种不同分子量范围的岩藻多糖的制备方法
CN108125245B (zh) 一种藻蓝蛋白微胶囊的制备方法
KR101721998B1 (ko) 이미, 이취, 및 염분 제거를 위한 반용매 정제기술이 적용된 후코이단 제조 방법
CN112110979B (zh) 一种提取茶皂素的方法
EP3997102A1 (en) Process for isolating a high purity protein preparation from plant material and products thereof
CN112010989B (zh) 一种具有抗氧化活性的竹荪菌托多糖的制备方法
CN104480228A (zh) 一种利用虾蟹壳制取氨糖的方法
CN110606900B (zh) 一种具有抗氧化作用的木枣多糖的分离纯化方法
Jethani et al. Plant-based biopolymers: emerging bio-flocculants for microalgal biomass recovery
CN101775233A (zh) 基于膜分离集成技术生产脱味萝卜红色素的制备方法
CN117362480A (zh) 一种高品质纯化琼脂制备方法
CN109385414B (zh) 菠萝蛋白酶的纯化方法
CN107540757B (zh) 一种酶法辅助卡拉胶脱色的方法
CN108101980B (zh) 一种高纯度藻蓝色素的制备方法
CN115368486A (zh) 一种三元低共熔溶剂及其在克氏原螯虾壳甲壳素提取中的应用
Sugiono et al. Biorefinery sequential extraction of alginate by conventional and hydrothermal fucoidan from the brown alga, Sargassum cristaefolium
CN110698573B (zh) 一种高品质琼脂糖的制备方法
CN106591406B (zh) 一种利用超声波辅助酶法制取骨明胶的方法
CN106905412B (zh) 一种去除富硒茶蛋白中茶多糖、糖蛋白的方法
KR100196679B1 (ko) Edta염을 이용한 고품질 한천의 제조방법
CN107641159B (zh) 一种低粘度增白卡拉胶的生产工艺
CN112029015A (zh) 一种高纯度低分子量肝素钠的生产纯化工艺
CN112028962A (zh) 一种积雪草总苷的提取工艺

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant