CN105962287A - 一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种含紫杉烷提取物的植物盐，包括以下重量份的原料：紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份，所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，所述盐地碱蓬植物盐，Ca含量为2600~2700mg/kg，Fe含量为690~700mg/kg；本发明还提供所述含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，包括层析步骤，所述层析步骤，石油醚‑丙酮体积比1:5~100；本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，具有扩大小鼠对热刺激的痛阈值的作用，对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢的清除率高。
Description
技术领域
本发明涉及一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法，属于植物盐提取工艺技术领域。
背景技术
紫杉又称红豆杉、赤柏松、常绿乔木，全身是宝，地栽高达25米，世界珍稀树种，是世界上天然珍稀抗癌植物，是集观赏和药用于一身的珍贵树种。从植株中提取的紫杉烷提取物具有抗癌作用，价格昂贵。因而，红豆杉也具有“生物黄金”之称。中药紫杉为红豆杉科植物东北红豆杉的枝和叶。
食盐的食用是人类进步的重要阶梯，长期以来人类依靠海水晒盐及井盐、岩盐开采等方法制造食盐，满足自身需求。但人类长期食用的盐类基本上是无机物，只能满足人体自身对无机盐的需求，难以适应由于生活水平提升造成的人类对多种功能食物的需求，特别是目前市场上食盐基本为氯化钠，过高的Na+摄入对人体的血压、血脂等均有明显的负面影响。
基于以上情况，目前印度率先在世界上利用海蓬子生产出植物盐，据报道，这种植物盐富含钾、钙、镁、铁等微量元素，加工过程中无需添加任何化学物质，因此堪称“天然营养盐”。
盐地碱蓬是一年生草本积盐植物，植物学分类为藜科(chenopodiaceae)碱蓬属(suaeda forsk.exscop)，主要生长于海滨、湖边、荒漠等处的盐碱荒地，是一种典型的盐碱地指示植物，在渤海沿岸及新疆、内蒙等地的盐碱地区有着广泛的分布。我国共有碱蓬属植物20种及1个变种，常见种为灰绿碱蓬(suaeda.glanca bunge)和盐地碱蓬(S.salsa(L.)Pall)，产量最大的是灰绿碱蓬。目前对碱蓬属植物的研究主要集中在灰绿碱蓬、盐地碱蓬及翅碱蓬。
盐地碱蓬是世界上含盐量最高的草本植物之一，全盐量高达4.54％。在阴离子中，Cl-占全盐的47.14％，在阳离子中，Mg2+占全盐的20.04％，此外脂肪、蛋白质外，矿物质、微量元素和维生素的含量丰富，适于进行植物盐生产开发，但目前相关部门尚未对这一问题给予充分重视。如天津渤海沿岸地区大部分为高盐碱度的滩涂及湿地，极易适合碱蓬的生长。长期以来，这些碱蓬自生自灭，一直没有引起人们的足够重视。
现有技术存在以下缺陷：
（1）现有技术制备的植物盐，对小鼠对热刺激的痛阈值并没有明显扩大作用；
（2）现有技术制备的植物盐，抗氧化作用不明显；
（3）现有植物盐制备方法的紫杉烷提取物的制备中，紫杉烷的纯度低；
（4）现有植物盐制备方法的紫杉烷提取物的制备中，微生物含量高。
发明内容
本发明为解决以上技术问题，提供一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法，以实现以下发明目的：
（1）本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，具有扩大小鼠对热刺激的痛阈值的作用。
（2）本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢的清除率高。
（3）本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，紫杉烷纯度高。
（4）本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，微生物含量低。
为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种含紫杉烷提取物的植物盐，所述植物盐，原料包括紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐。
以下是对上述技术方案的进一步改进：
所述植物盐，包括以下重量份的原料：紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。
所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%。
所述盐地碱蓬植物盐，Ca含量为2600~2700mg/kg，Fe含量为690~700mg/kg。
一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，所述紫杉烷提取物的制备包括层析步骤，所述层析步骤，吸附树脂柱柱高与直径比为5~10：1。
所述层析步骤，石油醚-丙酮体积比1:5~100。
所述层析步骤，洗脱流速为5.5~11.3mL/min。
所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，用波长270～310nm的紫外灯光源照射30～40min。
所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，温度为-200~-185℃。
所述紫杉烷提取物的制备还包括酶解-超声波提取步骤，所述酶解-超声波提取，酶解时间0.5~5h，酶解温度51~61℃。
采用以上技术方案，本发明的有益效果为：
（1）本发明的含紫杉烷提取物的植物盐，能扩大小鼠对热刺激的痛阈值，给予小鼠含紫杉烷提取物的植物盐1mg/kgbw 7天，痛阈值为42.2~44.0s，对照组痛阈值为15.1s。
（2）本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，对DPPH自由基清除率为61~63%；对超氧阴离子自由基清除率为70~82%；对羟基自由基清除率为52~68%；对过氧化氢清除率为74~88%。
（3）本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，紫杉烷纯度高，纯度为95.5~96.1%。
（4）本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，微生物含量低，微生物含量87~89cfu/g。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1一种含紫杉烷提取物的植物盐
以重量份计，包括以下原料组分：
紫杉烷提取物4份、盐地碱蓬植物盐6份。
所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生物含量87~89cfu/g。
所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%；钾含量为3.4~3.5%；黄酮含量为2.6~2.7mg/g；Ca含量为2600~2700mg/kg；Fe含量为690~700mg/kg。
实施例2一种含紫杉烷提取物的植物盐
以重量份计，包括以下原料组分：
紫杉烷提取物3份、盐地碱蓬植物盐7份。
所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生物含量87~89cfu/g。
所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%；钾含量为3.4~3.5%；黄酮含量为2.6~2.7mg/g；Ca含量为2600~2700mg/kg；Fe含量为690~700mg/kg。
实施例3一种含紫杉烷提取物的植物盐
以重量份计，包括以下原料组分：
紫杉烷提取物2份、盐地碱蓬植物盐8份。
所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生物含量87~89cfu/g。
所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%；钾含量为3.4~3.5%；黄酮含量为2.6~2.7mg/g；Ca含量为2600~2700mg/kg；Fe含量为690~700mg/kg。
实施例4一种紫杉烷提取物的制备方法
包括以下步骤：
（1）超声波粉碎
称取紫杉干燥树皮，切成长度2~3cm的段状，按重量比1∶50的比例用1mmol/L、pH为6.8的PBS缓冲液浸泡40~60min，充分溶胀；
在冰浴中用功率750~820W的超声波超声15~19min进行细胞破碎，破碎至0.5~2.5μm，得粗提物。
所述紫杉干燥树皮的含水量为5.8~10.7%。
（2）破壁
将紫杉粗提物进行细胞破壁，所述低温气流破壁为紫外线辐射处理；
所述紫外灯辐射处理为在温度为-200~-185℃下，用波长270～310nm的紫外灯光源照射30～40min，使得细胞壁中的几丁质材质中的酰胺键吸收能量后断裂。
（3）酶解-超声波提取
将紫杉超微粉加水溶解，然后用复合酶制剂酶解；
加入水和药材质量的1‰~9‰的复合酶制剂进行酶解，酶解时间0.5~5h，酶解温度51~61℃，得紫杉酶解液；
经试验证明，用酶处理后可明显提高提取率，提取率提高了5~7%。
所述复合酶制剂的配比为纤维素酶质量分数50~70%，果胶酶质量分数为15~40%，其余为木聚糖酶；
所述复合酶制剂的平均酶活为10000~30000单位；
对紫杉酶解液进行超声波提取，以水为溶剂，紫杉酶解液与水的料液比为1:2~60，以超声波辅助提取，离心过滤后得提取液。
（4）超滤
所得提取液用截留分子量为5000~10000道尔顿的超滤膜超滤，取滤液。
所述过滤温度为10~15℃，压力为0.051~0.1MPa。
（5）层析
滤液上样到大孔吸附树脂层析柱，除杂、洗脱，收集洗脱液。
所述大孔吸附树脂层析柱的柱体积50mL，柱高与直径比为5:1，柱的使用压力为0.6~0.7MPa。
先用100mL去离子水冲洗除杂，再以体积比1：5的石油醚-丙酮为洗脱液，5.5ml/min的流速进行梯度洗脱。
（6）干燥
将洗脱液在60~80℃，压强为0.08~0.1MPa下减压浓缩干燥至含水量小于等于5%，得紫杉烷提取物。
下述实施例5~实施例10是对实施例4所述紫杉烷提取物制备方法的优化，即：采用实施例4的紫杉烷提取物的制备方法，只改变（5）层析步骤，对吸附树脂柱体积、乙醇浓度和洗脱流速做多因素分析，采用常规方法对提取的紫杉烷提取物进行各项具体物质的含量进行测定。
表1吸附树脂柱柱高与直径比、石油醚-丙酮体积比和洗脱流速的多因素分析（实施例5~实施例10）
表2本发明紫杉烷提取物各项具体物质含量测定结果（实施例4~实施例10）
由上述多因素分析试验可知，实施例6~实施例8是优选实施例，即吸附树脂柱柱高与直径比为7~9：1，石油醚-丙酮体积比1:30~70和洗脱流速为8.8~9.7mL/min。
实施例11一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法
包括以下步骤：
一、紫杉烷提取物的制备
采用实施例4的紫杉烷提取物的制备方法，改变（5）层析步骤中的吸附树脂柱柱高与直径比、石油醚-丙酮体积比和洗脱流速三个参数，改变为吸附树脂柱柱高与直径比为6.5~8:1，石油醚-丙酮体积比1:30~70和洗脱流速为8.8~9.7mL/min，得到紫杉烷提取物。
二、盐地碱蓬植物盐的提取
（1）酶解工艺
按碱蓬粉：水重量比为1:4～10的比例，放置于容器中，25～85℃下搅拌，按碱蓬重量的0.3～1%加入复合酶酶解30～180min，完成后离心分离，收集上清液。
收集的上清液煮沸或调节pH，灭酶，离心收集上清液；
所述灭酶，灭酶方式优选为煮沸10min。
所述复合酶包括枯草芽孢杆菌蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶，重量配比为（6～12）:（2～4）:（1～3）；
优选地，所述复合酶加入量为脱脂植物粕重量的0.4～0.8%，所述提取酶解温度为30℃～80℃，所述浸提时间为60～150min。
（2）脱色
将提取液加热至55～65℃，滴加醋酸调节pH为6.5～7.5，加入絮凝剂，开启搅拌，搅拌速率为180rpm，持续搅拌48～55min；经结晶干燥后，得盐地碱蓬植物盐。
所述絮凝剂加入量为提取液质量的8～11%；
所述絮凝剂为壳聚糖、褐藻多糖、碳酸钙、α-酸性糖蛋白，按重量比5:2:1:1混合而成的粉末；
所述壳聚糖，细度为100目，平均分子量为1225 Da，脱乙酰度为94.28%，粘度为864mpa.s。
三、称量
按照配方称量紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐。
四、混合
将称取好的紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐搅拌、混合均匀，制成混合粉末，得含紫杉烷提取物的植物盐。
本发明含紫杉烷提取物的植物盐的应用效果：
1、本发明含紫杉烷提取物的植物盐对热刺激所致小鼠疼痛的影响
准备km小鼠，挑选热板上5s以后30s以内出现舔足的雌性小鼠80只，体重16~20g，随机分为4组，分别为空白组、本发明实施例1组~实施例3组，每组10只。空白组作喂蒸馏水处理，喂水量为1mg/kgbw，连续喂7天；实施例1组~实施例3组连续喂本发明实施例1~实施例3的含紫杉烷提取物的植物盐7天，喂药量1mg/kgbw，试验时用秒表记录小鼠自放于热板上至出现疼痛反应的时间，作为痛阈的指标。
在喂药前先测定每只小鼠的痛阈值，给药25 min后分别测量小鼠的痛阈值，如小鼠60s 仍无反应将小鼠取出，其痛阈以60s计算。结果见表3。
表3 对热刺激所致小鼠疼痛的影响（±s）
表3结果表明，本发明实施例1组~实施例3组 ，与空白组比较，均能扩大小鼠对热刺激的痛阈值。
、本发明含紫杉烷提取物的植物盐的抗氧化作用
将本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，配制成1mg/ml的溶液，采用常规方法测定对DPPH自由基清除率、对超氧阴离子自由基清除率、对羟基自由基清除率，对过氧化氢的清除率，见表4。
除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为重量百分数，本发明所述的比例，均为质量比例；本发明中所述的给药，均为给本发明含有紫杉烷提取物的植物盐。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述植物盐，原料包括紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐。
2.根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，包括以下重量份的原料：紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。
3.根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%。
4.根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述盐地碱蓬植物盐，Ca含量为2600~2700mg/kg，Fe含量为690~700mg/kg。
5.一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制备包括层析步骤，所述层析步骤，吸附树脂柱柱高与直径比为5~10：1。
6.根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，石油醚-丙酮体积比1:5~100。
7.根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，洗脱流速为5.5~11.3mL/min。
8.根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，用波长270～310nm的紫外灯光源照射30～40min。
9.根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，温度为-200~-185℃。
10.根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制备还包括酶解-超声波提取步骤，所述酶解-超声波提取，酶解时间0.5~5h，酶解温度51~61℃。
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