CN105943572B - 板栗花乙酸乙酯萃取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种板栗花乙酸乙酯萃取物及其制备方法和应用，其中，其制备方法包括：将板栗花粉末分散于体积分数为40‑60％的醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：80‑100，然后于300‑400W的功率下微波提取15‑25min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏；将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，得到板栗花乙酸乙酯萃取物。通过这种方法制备的板栗花乙酸乙酯萃取物具有很好的抑菌活性，这种板栗花乙酸乙酯萃取物来自天然植物，毒副作用小，能够广泛应用于各种抗菌剂中。

Description

板栗花乙酸乙酯萃取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及天然药物化学领域，具体而言，涉及一种板栗花乙酸乙酯萃取物及其制备方法和应用。
背景技术
板栗花为壳斗科(Fagaceae)栗属(Castanea)植物板栗(Castanea mollissima)的雄性柔荑花序。板栗性温，味甘平，入脾、胃、肾经，有补肾、健脾等功效。据《中药大辞典》记载，板栗花具有治疗便血、泻痢、瘰疬、大肠下血、小儿消化不良及腹泻、日久赤白痢疾等功效。研究发现痢疾的病理原因主要有：细菌感染、原虫与寄生虫感染、病毒感染、真菌感染和食物中毒等。
板栗花治疗痢疾的功效在民间被广泛应用。目前国内外学者对板栗花的化学成分及其应用研究取得了一定进展，但还需要系统深入研究黄酮类和多酚类物质的结构和活性。板栗花资源丰富，但长期以来一直未能充分开发利用。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物。这种板栗花的活性提取物对多种细菌均有很好的抑菌作用，如对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠埃希菌均有很好的抑菌作用。这种板栗花乙酸乙酯萃取物来自天然植物，毒副作用小，能够广泛应用于各种抗菌剂中。
本发明的第二目的在于提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法。这种方法操作简单，易于实现，且制得的板栗花乙酸乙酯萃取物中有效成分的含量高，抗菌作用强。
本发明的第三目的在于提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的应用，即将板栗花乙酸乙酯萃取物作为活性成分应用于抗菌剂中。为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
将板栗花粉末分散于体积分数为40-60％的醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：80-100，然后于300-400W的功率下微波提取15-25min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏；
将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.5-2：1，得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
一种由上述制备方法制得的板栗花乙酸乙酯萃取物。
板栗花乙酸乙酯萃取物在制备抗菌剂中的应用。
板栗花，为壳斗科植物栗的花。中医认为，板栗花性味微温、微苦、涩，有健脾止泄、散结消肿之功，适用于泻痢、便血等。本发明以燕山板栗主产区的板栗花为实验原材料，提取分离板栗花中的活性物质，并进行结构表征和抑菌活性研究。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)采用微波提取法对板栗花进行粗提取，这种提取方法的好处在于，微波提取时的温度低，避免板栗花中的热敏性的活性化合物结构被破坏，从而得到的板栗花乙酸乙酯萃取物的活性强、产率高。
(2)由于粗提物浸膏中的活性成分易溶于乙酸乙酯，根据相似相容原理，采用乙酸乙酯对板栗花的粗提物浸膏进行萃取，活性成分在溶于乙酸乙酯的同时，与粗提物浸膏中极性过大或者极性很小的杂质分离，从而使板栗花乙酸乙酯萃取物的纯度得到进一步的提高。
(3)通过这种方法制备的板栗花乙酸乙酯萃取物具有很好的抑菌活性，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠埃希菌均有很好的抑菌作用。这种板栗花乙酸乙酯萃取物来自天然植物，毒副作用小，能够广泛应用于各种抗菌剂中，也可以应用于各种洗护用品中，比如空气清新剂、花露水或者洗手液等。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本实施方式提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
a.提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为40-60％的醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：80-100，然后于300-400W的功率下微波提取15-25min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏；
采用微波提取法对板栗花进行粗提取，这种提取方法的好处在于，微波提取时的温度低，避免板栗花中的热敏性的活性化合物结构被破坏，从而得到的板栗花乙酸乙酯萃取物的活性强、产率高。
上述板栗花粉末为新鲜板栗花于30-40℃下干燥至恒重后粉碎所得。板栗花在30-40℃下干燥，优选为33-38℃，最优为35℃，这种方法有利于保护其中的活性成分不被高温破坏。进一步优选的，新鲜板栗花为采自盛花期的板栗花。采自盛花期的板栗花中的有效成分的含量高，从而提高板栗花乙酸乙酯萃取物中有效成分的含量。
进一步优选的，上述板栗花粉末的粒度为40-80目，优选为50-70目，最优为60目。板栗花粉末的粒度在40-80目的范围内，超声波提取时有效物质的溶出率大，同时又能避免板栗花中的鞣质等杂质成分溶出。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，为了增大板栗花中活性成分的提取率，上述体积分数为40-60％的醇溶液为40-60％的乙醇溶液，进一步优选为45-55％，最优选的为51％。40-60％的乙醇溶液的极性适中，板栗花中的绝大部分有效成分易溶于该溶液中。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，为了增大板栗花中活性成分的提取率，且避免活性成分被破坏，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：80-100，优选为1：85-95，最优选为1：90；然后于300-400W的功率下微波提取15-25min。微波提取的功率优选为335-375W,进一步优选为355W。功率太小，微波的能量不足以破坏植物细胞壁，从而使得有效物质的溶出率底；功率过大，会使得植物细胞中的鞣质、油脂等杂质过多的溶出，使后续的分离纯化步骤难度增大。
微波提取的时间优选为18-22min，进一步优选为20min。微波时间过短，有效成分难以溶出，微波时间过长，也会使更多的杂质成分被提取出来。
为了进一步提高微波提取的效率，使更多的有效活性成分被提取出来，在本发明较佳的实施例中，将板栗花粉末分散于体积分数为40-60％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，然后于355W的功率下微波提取15-25min。进一步的，微波提取的时间优选为20min，乙醇溶液的体积分数优选为51％。
b.纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.5-2：1，得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
由于粗提物浸膏中的活性成分易溶于乙酸乙酯，根据相似相容原理，采用乙酸乙酯对板栗花的粗提物浸膏进行萃取，活性成分在溶于乙酸乙酯的同时，与粗提物浸膏中极性过大或者极性很小的杂质分离，从而使板栗花乙酸乙酯萃取物的纯度得到进一步的提高。
乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.5-2：1，优选为0.8-1.5：1，最优选的为1：1，在这个范围内的乙酸乙酯与粗提液的体积比，有利于提高乙酸乙酯的萃取效率。
在本发明较佳的实施例中，上述粗提液用乙酸乙酯萃取后，分离出有机相，随后将有机相在温度为30-40℃的水浴、转速为80-100转/min、以及真空度为0.07-0.09MPa的条件下旋转蒸发，除去有机相中的乙酸乙酯，得到粉末状的板栗花乙酸乙酯萃取物。
在这种条件下对在有机相中的板栗花乙酸乙酯萃取物进行减压浓缩，有利于在回收溶剂时保护板栗花中的活性成分的结构不被破坏，从而得到抑菌活性很强的板栗花乙酸乙酯萃取物。减压浓缩的条件进一步优选的，水浴温度为33-38℃、转速为85-95转/min、以及真空度为0.07-0.08MPa；进一步优选的，水浴温度为35℃、转速为90转/min、以及真空度为0.075MPa，在这种减压浓缩的条件下，活性提取物的活性以及产率最大。
在本发明较佳的实施例中，上述粗提液在用乙酸乙酯萃取之前，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去粗提液中的杂质。依次用石油醚和氯仿萃取，能够除去易溶于石油醚和氯仿中的杂质，从而使乙酸乙酯提取物的纯度增大。为了提高萃取效率，进一步优选的，石油醚和氯仿与粗提液的体积比均为0.5-2：1，即石油醚与粗提液的体积比为0.5-2：1；氯仿与粗提液的体积比也为0.5-2：1。石油醚和氯仿与粗提液的体积比的范围值相同，但在具体的实施例中，石油醚与粗提液的体积比可以不同于氯仿与粗提液的体积比，当然，也可以相同。
在本发明较佳的实施例中，上述用乙酸乙酯萃取粗提液，至少萃取2次，合并2次萃取后所得的有机相，得到提纯后的板栗花乙酸乙酯萃取物。进一步优选的，萃取3次，有利于提高板栗花乙酸乙酯萃取物的产率。
本发明还提供一种采用上述方法制备的板栗花乙酸乙酯萃取物以及上述制备的板栗花乙酸乙酯萃取物在制备抗菌剂中的应用。通过这种方法制备的板栗花乙酸乙酯萃取物具有很好的抑菌活性，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠埃希菌均有很好的抑菌作用。这种板栗花乙酸乙酯萃取物来自天然植物，毒副作用小，能够广泛应用于各种抗菌剂中，也可以应用于各种洗护用品中，比如空气清新剂、花露水或者洗手液等。
实施例1
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为60％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：100，然后于300W的功率下微波提取15min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.5：1，萃取1次，分离出有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例2
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
预处理步骤：将盛花期采集的新鲜板栗花于30℃下干燥至恒重后，粉碎至40目，得到板栗花粉末。
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为55％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：95，然后于335W的功率下微波提取18min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.8：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例3
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
预处理步骤：将盛花期采集的新鲜板栗花于35℃下干燥至恒重后，粉碎至60目，得到板栗花粉末。
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为51％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，然后于355W的功率下微波提取20min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为1：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例4
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
预处理步骤：将新鲜板栗花于40℃下干燥至恒重后，粉碎至80目，得到板栗花粉末。
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为45％的甲醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：85，然后于375W的功率下微波提取22min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为1.5：1，萃取4次，合并4次萃取后所得的有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例5
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其包括：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为40％的甲醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：80，然后于400W的功率下微波提取25min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为2：1，萃取2次，合并2次萃取后所得的有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例6
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去所述粗提液中的杂质，其中石油醚和氯仿与所述粗提液的体积比均为0.5：1。然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为0.5：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，减压浓缩后得到板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例7
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去所述粗提液中的杂质，其中石油醚和氯仿与所述粗提液的体积比均为1：1。然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为1：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，并将有机相在温度为40℃的水浴、转速为80转/min、以及真空度为0.07MPa的条件下旋转蒸发，除去有机相中的乙酸乙酯，得到粉末状的板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例8
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去所述粗提液中的杂质，其中石油醚和氯仿与所述粗提液的体积比均为1：1。然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为1：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，并将有机相在温度为35℃的水浴、转速为90转/min、以及真空度为0.08MPa的条件下旋转蒸发，除去有机相中的乙酸乙酯，得到粉末状的板栗花乙酸乙酯萃取物。
实施例9
本实施例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
纯化步骤：将粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去所述粗提液中的杂质，其中石油醚和氯仿与所述粗提液的体积比均为2：1。然后用乙酸乙酯对粗提液进行萃取，其中乙酸乙酯与粗提液的体积比为2：1，萃取3次，合并3次萃取后所得的有机相，并将有机相在温度为30℃的水浴、转速为80转/min、以及真空度为0.07MPa的条件下旋转蒸发，除去有机相中的乙酸乙酯，得到粉末状的板栗花乙酸乙酯萃取物。
对比例1
本对比例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为38％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：75，然后于355W的功率下微波提取10min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
对比例2
本对比例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为65％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，然后于450W的功率下微波提取30min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
对比例3
本对比例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为51％的乙醇溶液中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，然后于270W的功率下微波提取20min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
对比例4
本对比例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于采用回流提取法进行提取，具体为：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为51％的乙醇溶液中，其中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，在80℃下进行加热回流，提取3次，每次回流2h，过滤后合并滤液，并除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
对比例5
本对比例提供一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，与实施例3基本一致，不同之处在于采用浸渍法进行提取，具体为：
提取步骤：将板栗花粉末分散于体积分数为51％的乙醇溶液中，其中，板栗花粉末与醇溶液的料液比为1：90，在25℃下浸提2次，每次7天，过滤后合并滤液，并除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏。
实验例
板栗花乙酸乙酯萃取物的抑菌活性测定：
参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准，采用平皿二倍稀释法和多点接种器进行抑菌活性测定实验。在中国医学院生物技术研究所完成了上述实施例1-9以及对比例1-5中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物的抑菌试验，采用的试验菌包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、以及大肠埃希菌。
将试验菌用米勒-海顿肉汤培养基(MH肉汤)或脑心浸液肉汤培养基进行增菌，将上述实施例1-9以及对比例1-5中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物用MH肉汤二倍稀释成各种所需浓度，分别加适量稀释后的板栗花乙酸乙酯萃取物到平皿中。随后，将MH琼脂培养基熔化后定量注入含药液的平皿内混匀，使平皿内药物的终浓度分别为0.03，0.06，0.12……64，128，256μg/ml。接种试验菌(接种量为104CFU/点)后置于35℃恒温培养18h后观察结果，无菌生长的平皿中所含药物的最小浓度即为最低抑菌浓度(MIC)，试验结果如表1所示：
表1板栗花乙酸乙酯萃取物对试验菌的最低抑菌浓度(μg·mL-1)
由表1可以看出：
(1)实验组中实施例1-9中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物对试验菌的MIC(4-64μg·mL-1)明显低于对比例1-5的MIC(＞256μg·mL-1)，这说明本发明提供的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，能够从板栗花中制备出抗菌活性强的组合物，能够将其应用于抗菌剂的制备中，也可以将其应用于洗护用品中。
(2)实验组中实施例1-9中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物对粪肠球菌ATCC 29212和屎肠球菌ATCC 700221、12-1的抑菌活性优于对其它几种菌株的抑菌活性，更明显的优于对比例对粪肠球菌ATCC 29212和屎肠球菌ATCC 700221、12-1的抑菌活性。这说明本发明提供的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，能够从板栗花中制备出对粪肠球菌和屎肠球菌有极强抗菌活性的组合物，能够将其应用于抗菌剂的制备中，这种抗菌剂可专用于治疗由粪肠球菌和屎肠球菌所致的感染性疾病。
(3)对比例4和5对试验菌的最低抑菌浓度均大于512μg·mL-1，远大于实施例3中相应的最低抑菌浓度(小于32μg·mL-1)。由此说明本发明采用的微波提取法，提取到的有效活性物质的含量高，其明显优于回流提取法和浸渍法等传统提取方法。
(4)对比例1-3对试验菌的最低抑菌浓度均大于256μg·mL-1，大于实施例3中相应的最低抑菌浓度(小于32μg·mL-1)。由此说明本发明中的微波提取法中的各项参数，如醇的浓度(40－60％)、料液比(1：80－100)、功率(300－400W)以及提取时间(15－25min)对有效活性物质的溶出有显著的增强作用，有利于提高所制备的乙酸乙酯萃取物的抑菌活性。
(5)对比例3对试验菌的最低抑菌浓度均大于256μg·mL-1，远大于施例3中相应的最低抑菌浓度(小于32μg·mL-1)。由此说明微波提取时，其功率(300－400W)以及提取时间(15－25min)是影响有效活性物质的溶出的关键性因素，控制这两个参数能够协同性的增加板栗花在微波提取时的有效活性物质的溶出率。
(6)实施例6中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物对试验菌的抑菌活性强于实施例1-5的抑菌活性，这主要是由于在纯化步骤中，采用乙酸乙酯进行萃取前，先用石油醚和氯仿进行萃取，使得最后所得的乙酸乙酯萃取物中的活性成分的含量大，且所含的杂质少，与此同时，杂质对活性成分抑菌效果的影响也进一步降低。
(7)实施例7-9中所得的板栗花乙酸乙酯萃取物对试验菌的抑菌活性强于实施例1-6的抑菌活性，这主要是由于在萃取后，在除去乙酸乙酯萃取物中的溶剂时采用更加优化的减压浓缩方式，严格控制减压浓缩时的温度、转速和压力，减少有效活性物质的损失或者结构的破坏，从而提高所得到的板栗花乙酸乙酯萃取物的抑菌活性。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims (8)

1.一种板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，其包括：
将板栗花粉末分散于体积分数为40-60％的醇溶液中，所述板栗花粉末与所述醇溶液的料液比为1：80-100，然后于300-400W的功率下微波提取15-25min，过滤后除去滤液中的溶剂，得粗提物浸膏；
将所述粗提物浸膏用水溶解得到粗提液，然后用乙酸乙酯对所述粗提液进行萃取，其中所述乙酸乙酯与所述粗提液的体积比为0.5-2：1，得到板栗花乙酸乙酯萃取物；
所述粗提液在用所述乙酸乙酯萃取之前，先依次用石油醚和氯仿进行萃取以除去所述粗提液中的杂质，所述石油醚和所述氯仿与所述粗提液的体积比均为0.5-2：1。
2.根据权利要求1所述的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，所述粗提液用所述乙酸乙酯萃取后，分离出有机相，随后将所述有机相在温度为30-40℃的水浴、转速为80-100转/min、以及真空度为0.07-0.09MPa的条件下旋转蒸发，除去所述有机相中的所述乙酸乙酯，得到粉末状的所述板栗花乙酸乙酯萃取物。
3.根据权利要求1所述的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，用所述乙酸乙酯萃取所述粗提液，至少萃取2次，合并萃取后所得的有机相，得到提纯后的所述板栗花乙酸乙酯萃取物。
4.根据权利要求1所述的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，所述板栗花粉末的粒度为40-80目。
5.根据权利要求1所述的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，所述板栗花粉末为新鲜板栗花于30-40℃下干燥至恒重后粉碎所得。
6.根据权利要求5所述的板栗花乙酸乙酯萃取物的制备方法，其特征在于，所述新鲜板栗花为采自盛花期的板栗花。
7.一种根据权利要求1-6任一项所述的制备方法制得的板栗花乙酸乙酯萃取物。
8.根据权利要求7所述的板栗花乙酸乙酯萃取物在制备抗菌剂中的应用。
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