CN105918311A - 一种畜禽精液消毒剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种畜禽精液消毒剂及其制备方法和应用，所述消毒剂由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.0～2.0％、苦楝提取物1.0～2.0％、地榆提取物1.0～2.0％、大青叶提取物1.0～2.0％、芦荟提取物1.0～2.0％、葡萄糖/果糖2.0～3.0％、甘油3.0～5.0％、柠檬酸钠2.0～3.0％、维生素0.2～0.3％、余量为蒸馏水，所述维生素为维生素C、维生素A、维生素E中的一种或者两种以上以任意重量比组合。所述消毒剂能够用于猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌病原的抑制或杀灭。本发明的精液消毒剂主方是纯中药制剂，低毒，无残留，安全性能较好，且通过精子活力影响试验，毒性小，安全可靠。

Description

一种畜禽精液消毒剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于消毒剂技术领域，具体涉及精液消毒剂，更具体涉及一种畜禽精液消毒剂，还涉及到畜禽精液消毒剂的制备方法以及其用于猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌病原的抑制或杀灭的应用。
背景技术
在畜牧业养殖中，垂直传播疾病一直给生产造成巨大的经济损失。其中重要环节即是公畜禽通过配种(包括人工授精和自然交配)将精液含有的病原体传给母体，其受孕的过程就是人为病原传播的过程。在实际生产过程中已有大量病例报道，诸如猪蓝耳病、猪瘟、猪圆环病毒病、禽流感、禽白血病、鸡传染性贫血等畜禽主要垂直传播性疾病的发生，给养殖实践造成巨大的死淘经济负担，而且还会干扰其它疫病的免疫效果，更为甚者是上述这些疫病可传播至下一代，造成更大范围的感染。
目前，在畜禽(猪、鸡等)的人工授精中，还没有一种比较合适的能够杀灭精液中病原微生物的产品可以使用，如果精液中带有病毒或细菌，将会通过授精而垂直传播给后代。现今最常用的方法是在精液稀释的过程中添加抗生素来杀灭或抑制细菌的生长，但其对病毒的作用却微乎其微，而且存在因长期应用导致细菌耐药性的问题。
随着畜牧业的发展，养殖规模不断扩大，越来越多的由人工授精代替了传统的自然交配，这也为从精液入手消除通过精液垂直传播的疾病提供了契机。
目前畜禽精液在输精前常采用的抗菌药物或其它化学性消毒剂来杀灭病原微生物，不仅存在着耐药性的问题，而且还对精液精子活力存在极大的伤害，因此，采用抗菌药物和化学性消毒剂的方法并不是最佳的处理方法。
而且目前对于能够应用于精液，杀灭其中的病原微生物，同时又能保证精子活力的药物的研究报道还较少，市场也未见有类似产品。因为精液的特殊性及精子较脆弱，所以绝大部分的能够有效抑制或杀灭病原微生物的药物都因为安全问题很难在种公畜禽精液中应用。因此，研究和开发一种能够安全有效的应用于杀灭精液中病原微生物的产品，在将来势必会给畜牧业带来巨大的变化。
发明内容
针对现状，本发明主要解决的技术问题是提供一种畜禽精液消毒剂，能够有效的应用于种公猪、鸡等精液的杀菌消毒，不仅杀菌消毒效果良好，而且还有效确保了畜禽精液精子的活力，延长了精液保存时间，无毒无害。
本发明还提供了一种畜禽精液消毒剂的制备方法，该方法简单，制得的消毒剂保存时间长，效果好。
本发明还提供了畜禽精液消毒剂的应用，所述消毒剂能够有效的抑制或杀灭猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌的病原。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种畜禽精液消毒剂，所述消毒剂由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.0～2.0％、苦楝提取物1.0～2.0％、地榆提取物1.0～2.0％、大青叶提取物1.0～2.0％、芦荟提取物1.0～2.0％、葡萄糖/果糖2.0～3.0％、甘油3.0～5.0％、柠檬酸钠2.0～3.0％、维生素0.2～0.3％、余量为蒸馏水，所述维生素为维生素C、维生素A、维生素E中的一种或者两种以上以任意重量比组合。
优选地，本发明所述的畜禽精液消毒剂由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.5％、苦楝提取物1.5％、地榆提取物1.5％、大青叶提取物1.5％、芦荟提取物1.5％、葡萄糖/果糖3.0％、甘油4.0％、柠檬酸钠2.5％、维生素0.3％、余量为蒸馏水。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将板蓝根提取物、苦楝提取物、地榆提取物、大青叶提取物、芦荟提取物按照所述的重量百分比配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取葡萄糖/果糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和葡萄糖/果糖粉剂按照所述的重量百分比进行混合，得混合粉剂；
(3)将维生素加入蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中按所述重量百分比加入柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.0～8.0，制成消毒剂成品。
优选地，步骤(3)中所述低俗搅拌的条件为：温度为30℃～37℃、转速为20～25转/分的条件下搅拌30分钟。
另一方面，本发明还公开了上述畜禽精液消毒剂的应用，对大肠杆菌和沙门氏菌具有较好的杀灭效果，还用于猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌病原的抑制或杀灭。
本发明所采用的主要成分具有以下功效：
本发明中选用的板蓝根、苦楝、地榆、大青叶、芦荟等纯中草药提取物，具有清热解毒、杀菌消炎等实际功效，能够杀灭多种病毒和有害菌；葡萄糖/果糖能营养精子，提供能量；甘油是常用的抗冻保护剂，防止精原细胞脱水，延迟精液保存时间；柠檬酸钠能够调节精液的pH值，起到缓冲保护作用；维生素选择水溶性维生素C、维生素A和维生素E中的一种或者两种以上任意重量比组合，主要功能是抗氧化和营养精子。并且各种成分之间功效相互增益，具有协同增效的作用，相互配合使用，对于精液具有较好的消毒作用。
本发明的有益效果是：
1、本发明中选用的消毒剂原材料均购自国内质量可靠的生产厂家，选用的板蓝根、苦楝、地榆、大青叶、芦荟等提取物均是粉状制剂，选用的维生素包括维生素C、维生素A和维生素E为水溶性的，本发明对精液消毒剂的制备方法严格控制，按以上提供的消毒剂配备方法，逐次添加或配置各组分，生产工艺简单、成熟，易于产业化生产。得到澄清、浅黄色且呈透明状的产品，在±25℃放置三个月后，性能稳定，不产生沉淀，不分层，不起泡。
2、本发明的精液消毒剂中，选用的板蓝根、大青叶、苦楝等纯中药提取物，作为主方设计，具有良好的抗毒、杀菌效果，同时辅以维生素、甘油、果糖和柠檬酸钠等，对精液中精子有较好的营养调控和电解质平衡作用，同时还能延长精液的保存时间；
3、本发明的精液消毒剂是针对猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌等几种主要垂直传播性疫病病原的致病机理，精心设计组方，通过国内近20家的养猪企业和养禽企业推广应用，普遍反映生产性能较以前提高20％左右，发病率显著降低，经济效益明显。
4、本发明的精液消毒剂主方是纯中药制剂，低毒，无残留，安全性能较好，且通过精子活力影响试验，毒性小，安全可靠。
附图说明
图1是本发明消毒剂不同浓度和作用时间对种公鸡精液精子活力影响。
具体实施方式
下面将通过具体实施例对本发明进行详细的描述。提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明，并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。
如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
如无特殊说明，本发明所采用的各种试剂、原料和菌液等均购买自市场。
实施例1
一种畜禽精液消毒剂，由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.5％、苦楝提取物1.5％、地榆提取物1.5％、大青叶提取物1.5％、芦荟提取物1.5％、葡萄糖3.0％、甘油4.0％、柠檬酸钠2.5％、维生素C 0.3％、余量为蒸馏水。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将15g板蓝根提取物、15g苦楝提取物、15g地榆提取物、15g大青叶提取物、15g芦荟提取物配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取30g葡萄糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和葡萄糖粉剂进行混合，得混合粉剂；
(3)将3g维生素C加入到827g蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入40g甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；低俗搅拌的条件为：温度为30℃、转速为25转/分的条件下搅拌30分钟；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中加入25g柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.0，制成消毒剂成品。
实施例2
一种畜禽精液消毒剂，由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.0％、苦楝提取物1.0％、地榆提取物1.0％、大青叶提取物1.0％、芦荟提取物1.0％、果糖2.0％、甘油3.0％、柠檬酸钠2.0％、维生素A 0.2％、余量为蒸馏水。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将10g板蓝根提取物、10g苦楝提取物、10g地榆提取物、10g大青叶提取物、10g芦荟提取物配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后配制20g果糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和果糖粉剂进行混合，得混合粉剂；
(3)将2g维生素A加入到878g蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入30g甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；低俗搅拌的条件为：温度为35℃、转速为22转/分的条件下搅拌30分钟；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中加入20g柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.3，制成消毒剂成品。
实施例3
一种畜禽精液消毒剂，由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物2.0％、苦楝提取物2.0％、地榆提取物2.0％、大青叶提取物2.0％、芦荟提取物2.0％、葡萄糖3.0％、甘油5.0％、柠檬酸钠3.0％、维生素E 0.3％、余量为蒸馏水。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将20g板蓝根提取物、20g苦楝提取物、20g地榆提取物、20g大青叶提取物、20g芦荟提取物配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取30g葡萄糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和葡萄糖粉剂进行混合，得混合粉剂；
(3)将3g维生素E加入到787g蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入50g甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；低俗搅拌的条件为：温度为37℃、转速为20转/分的条件下搅拌30分钟；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中加入30g柠檬酸钠，调制溶液的pH值为8.0，制成消毒剂成品。
实施例4
一种畜禽精液消毒剂，由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物2.0％、苦楝提取物2.0％、地榆提取物2.0％、大青叶提取物2.0％、芦荟提取物2.0％、果糖2.0％、甘油3.0％、柠檬酸钠2.0％、维生素0.2％、余量为蒸馏水，所述维生素为维生素A和维生素C以重量比为1:1的比例混合。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将20g板蓝根提取物、20g苦楝提取物、20g地榆提取物、20g大青叶提取物、20g芦荟提取物配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取20g果糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和果糖粉剂进行混合，得混合粉剂；
(3)将1g维生素A和1g维生素C加入到848g蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入30g甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；低俗搅拌的条件为：温度为37℃、转速为20转/分的条件下搅拌30分钟；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中加入20g柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.5，制成消毒剂成品。
实施例5
一种畜禽精液消毒剂，由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物2.0％、苦楝提取物2.0％、地榆提取物2.0％、大青叶提取物2.0％、芦荟提取物2.0％、果糖3.0％、甘油5.0％、柠檬酸钠3.0％、维生素0.3％、余量为蒸馏水，所述维生素为维生素A、维生素C和维生素E以重量比为1:1:1的比例混合。
上述畜禽精液消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将20g板蓝根提取物、20g苦楝提取物、20g地榆提取物、20g大青叶提取物、20g芦荟提取物配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取20g果糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和果糖粉剂进行混合，得混合粉剂；
(3)将1g维生素A、1g维生素C和1g维生素E加入到787g蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入50g甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；低俗搅拌的条件为：温度为35℃、转速为25转/分的条件下搅拌30分钟；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中加入30g柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.8，制成消毒剂成品。
为了证明本发明的有效性和安全性，申请人对以上五个实施例的组方分别进行了如下试验：
实验一：消毒剂不同配方对大肠杆菌、沙门氏菌抑菌试验
将大肠杆菌ATCC25922标准株、鸡白痢沙门氏菌CVCC578标准株分别扩菌定容至3.9×108CFU/mL和2.8×109CFU/mL。然后将上述五个实施例中配置的消毒剂原液分别按照1:50、1:100两个稀释浓度与以上四种试验菌作用1h后，检测不同消毒剂配方和不同浓度对这两种菌的杀灭效果。结果分别见表1和表2。
表1不同消毒剂配方对大肠杆菌的杀灭效果
表2不同消毒剂配方对沙门氏菌的杀灭效果
从表1结果的可以看出，五个实施例配置的消毒剂在两个浓度稀释梯度水平，对大肠杆菌和沙门氏菌均具有显著的杀灭效果，杀菌率均在90％以上，符合《消毒技术规范》(2003版)中的相关规定。
实验二：消毒剂不同配方对猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病病毒和鸡马立克氏病病毒等杀灭试验
将五个实施例配置的消毒剂分别接种于四种病毒对应的细胞中，接种方法见表3。通过四种细胞对五种消毒剂的耐受性，确定这五种消毒剂的最大安全浓度分别为2-5、2-6、2-6、2-6、2-6。
表3不同消毒剂对4种细胞耐受性试验设计
根据以上消毒剂最大安全范围，将消毒剂稀释100倍，等量与一定浓度的四种病毒溶液等体积混合，置37℃温度下作用1h，然后接种于对应细胞中，通过观察细胞病变程度判定精液消毒剂对病毒的体外杀灭作用，试验方法见表4。
表4不同消毒剂对4种病毒的杀灭试验设计
按照表4设计的方法，不同消毒剂对这四种病毒的灭杀所需要的最小浓度分别见表5。
表5不同消毒剂对这四种病毒的灭杀所需要的最小浓度
从表5中可以看出，实施例1配置的消毒剂对4种病毒完全杀灭的最小浓度(这里的最小浓度是相对于病毒用量来讲，也就是加入的消毒剂占病毒用量的重量百分比)分别为0.078％、0.078％、0.156％、0.156％；实施例2配置的消毒剂对4种病毒完全杀灭的最小浓度分别为0.156％、0.156％、0.312％、0.312％；实施例3配置的消毒剂对4种病毒完全杀灭的最小浓度分别为0.156％、0.156％、0.312％、0.312％；实施例4配置的消毒剂对4种病毒完全杀灭的最小浓度分别为0.312％、0.312％、0.312％、0.312％；实施例5配置的消毒剂对4种病毒完全杀灭的最小浓度分别为0.312％、0.312％、0.312％、0.312％。综合对实施例1～5进行比较，实施例1配置的消毒剂消毒效果最好。
实验三：消毒剂的毒理学试验
按照实施例1优选配置的消毒剂，100倍稀释后得稀释液，对大鼠和小鼠急性经口灌注，半数致死量LD50均大于5000mg/kg·BW，其稀释液对鼠眼、完整皮肤及破损皮肤无刺激性；给药剂量在1000mg/kg·BW以下，与阴性对照组比较，对大鼠的体重、血常规及血液生物化学指标无显著影响，试验动物各脏器均未见明显病理改变。证明本发明消毒剂在100倍浓度稀释条件下，是安全的。
实验四：消毒剂对种公鸡精液精子活力影响试验
采集种公鸡精液，用实施例1优选配置的消毒剂分别配制浓度为2％、1.5％、1％(稀释后的消毒剂浓度)的精液净化保护剂，将所有稀释液置于37℃水浴锅中温浴，同时设对照组，并在不同时间段用精子自动形态分析仪检测原精液精子的活率。结果见图1，由图1结果显示，三种不同浓度的消毒剂确保50％精子活力保存时间明显优于空白对照组，说明消毒剂由延长精液精子保存时间作用。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (5)

1.一种畜禽精液消毒剂，其特征在于，所述消毒剂由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.0～2.0％、苦楝提取物1.0～2.0％、地榆提取物1.0～2.0％、大青叶提取物1.0～2.0％、芦荟提取物1.0～2.0％、葡萄糖/果糖2.0～3.0％、甘油3.0～5.0％、柠檬酸钠2.0～3.0％、维生素0.2～0.3％、余量为蒸馏水，所述维生素为维生素C、维生素A、维生素E中的一种或者两种以上以任意重量比组合。
2.根据权利要求1所述的畜禽精液消毒剂，其特征在于，所述消毒剂由以下重量百分比的成分组成：板蓝根提取物1.5％、苦楝提取物1.5％、地榆提取物1.5％、大青叶提取物1.5％、芦荟提取物1.5％、葡萄糖/果糖3.0％、甘油4.0％、柠檬酸钠2.5％、维生素0.3％、余量为蒸馏水。
3.一种制备权利要求1或2所述的畜禽精液消毒剂的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)将板蓝根提取物、苦楝提取物、地榆提取物、大青叶提取物、芦荟提取物按照所述的重量百分比混合配制成植物源中药提取物复合粉剂；然后称取葡萄糖/果糖粉剂；
(2)将植物源中药提取物复合粉剂和葡萄糖/果糖粉剂按照所述的重量百分比进行混合，得混合粉剂；
(3)将维生素加入到蒸馏水中低速搅拌使维生素全溶解，然后再加入甘油继续低速搅拌使甘油完全溶解得混合液A；
(4)将步骤(2)得到的混合粉剂加入到步骤(3)得到的混合液A中，低速搅拌直至混合粉剂全溶解，得到混合液B；
(5)最后在混合液B中按所述重量百分比加入柠檬酸钠，调制溶液的pH值为7.0～8.0，制成消毒剂成品。
4.根据权利要求3所述的制备畜禽精液消毒剂的方法，其特征在于，步骤(3)中所述低俗搅拌的条件为：温度为30℃～37℃、转速为20～25转/分的条件下搅拌30分钟。
5.一种如权利要求1或2所述的畜禽精液消毒剂的应用，其特征在于，所述消毒剂用于猪瘟病毒、猪圆环病毒、禽白血病和鸡白痢沙门氏菌病原的抑制或杀灭。
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