CN105917958B - 一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法 - Google Patents

Abstract

本发明主要属于植物种子萌发技术领域，具体涉及一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法。所述方法首先制备阿魏菇菌块以及阿魏菇菌液，对阿魏种子进行除菌预处理，然后以所述阿魏菇菌块、阿魏菇菌液以及预处理后的阿魏种子为试验材料，以阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率为指标，从以下两个方面研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作，所述两个方面分别为：研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作以及研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作。本发明所提供的方法可以用于研究阿魏植物种子萌发与阿魏菇真菌的互作关系，对基于揭示阿魏菇真菌与阿魏植物共生的过程和本质有十分重要的意义。

Description

一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的 方法

技术领域

本发明主要属于植物种子萌发技术领域，具体涉及一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法。

背景技术

阿魏植物隶属于伞形科(Apiaceae Lindley或Umbelliferae Jussieu)芹亚科(Apioideae Drude)前胡族(Peucedaneae Drude)阿魏亚族(Ferulinae Drude)阿魏属(Ferula Linne)，全球有150～170余种，主要分布在欧洲南部地中海地区、非洲北部、中亚地区和亚洲西南部。《中国植物志》记录我国阿魏有26种，主产新疆20种，主要分布在伊宁、阜康、托里、塔城、乌恰等地。民间根据有无蒜臭味分为香阿魏和臭阿魏，传统用的阿魏属于臭阿魏类，具有消积、杀虫和主治痢疾等药用价值。近年来，因发现阿魏中具有植物雌激素活性成分和抗癌物质而倍受人们关注。研究表明，阿魏提取物能通过保持胰细胞的完整性来防治糖尿病。近年来由于新疆阿魏资源遭过度采挖及生境地的变迁，分布面积极度萎缩，荒漠阿魏滩已经遭到严重破坏。

阿魏菇，又名阿魏侧耳、阿魏蘑，因野生寄生或腐生在中药阿魏植物肥大的根茎部，而得俗名阿魏菇。我国传统中医认为阿魏菇具有与中药阿魏相同的药物功效。

目前对阿魏植物与阿魏菇关系的研究主要集中在添加阿魏植物成分后对阿魏菇菌丝体生长、子实体发育和品质及功效方面的研究，发现其能提高阿魏菇出菇率，促进阿魏菇的生长发育和子实体的形成。但是对阿魏菇与阿魏植物共生的过程和本质，尤其是用于研究阿魏菇与新疆阿魏种子发芽互作的方法未见报道。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法。所述方法以所述阿魏菇菌块、阿魏菇菌液以及预处理后的阿魏种子为试验材料，以阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率为指标，从以下两个方面研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作，所述两个方面分别为：研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作以及研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作。旨在探索阿魏菇与阿魏植物共生的过程和本质。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，所述方法首先制备阿魏菇菌块以及阿魏菇菌液，对阿魏种子进行除菌预处理，然后以所述阿魏菇菌块、阿魏菇菌液以及预处理后的阿魏种子为试验材料，以阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率为指标，从以下两个方面研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作，所述两个方面分别为：研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作以及研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作。

进一步地，所述研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作具体为：以阿魏菇菌块以及阿魏种子为实验材料，采用菌块与种子萌发培养基，在无菌条件下进行，设置5组试验，每组至少设置5个重复组，任意两个重复组中所用阿魏菇菌块来自不同株的阿魏菌；控制所述5组试验的前期试验条件，经过前期试验后，将上述5组试验中的培养皿置于种子4℃沉积温度下培养90d，观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率。

进一步地，所述5组试验的前期试验条件分别为：第一组前期试验条件为：将阿魏菇菌块以及阿魏种子同时植入所述菌块与种子萌发培养基，控制菌丝与种子无接触；第二组前期试验条件为：将阿魏菇菌块植入所述菌块与种子萌发培养基；第三组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，待菌丝至长满培养皿时，再将阿魏种子植入；第四组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，不往上述培养基中植入阿魏种子；第五组前期试验条件为：将阿魏种子直接植入所述菌块与种子萌发培养基。

进一步地，所述研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作具体为：以所述阿魏菇菌液以及阿魏种子为实验材料，设置六个处理组，六个处理组的处理条件分别为：按体积比计，第一到第六处理组分别取原菌液1份、原菌液0.5份、灭活原菌液1份、灭活原菌液0.5份、真菌发酵液体培养基1份、真菌发酵液体培养基0.5份倒入三角瓶的无菌发芽纸上，再植入无菌的阿魏种子，每个处理组7个三角瓶，置于4℃黑暗条件下培养90d，重复3次；观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率。

进一步地，所述阿魏菇菌块的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，在无菌条件下，将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，即获得所述阿魏菇菌块。

进一步地，所述阿魏菇菌液的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，将所述菌块接入装有真菌发酵液体培养基的三角瓶中，置于24℃、120r/min的摇床中，培养30d后，将菌液过滤，收集上清液，即获得所述阿魏菇菌液。

进一步地，所述对阿魏种子进行除菌预处理具体为：将阿魏种子先用质量浓度为75％的酒精冲洗30s，再用质量浓度为30％的H₂O₂溶液浸泡40min，之后用无菌水冲洗3～6次，在无菌水中浸泡24h，备用。

本发明的有益技术效果：

本发明所提供的方法可以用于研究阿魏植物种子萌发与阿魏菇真菌的互作关系，对基于揭示阿魏菇真菌与阿魏植物共生的过程和本质，以及将对阿魏植物和阿魏菇真菌两种资源的保护、道地阿魏药材的可持续开发利用、荒漠生态系统的恢复和稳定有十分重要的意义。

附图说明

图1为4℃下A组(仅接入阿魏菇菌块)阿魏菇的菌丝生长状况；

图2为4℃下D组(接入阿魏菇菌块与阿魏种子)阿魏菇的菌丝生长状况；

图3为B组(阿魏菇菌块长满培养皿后未植入种子)阿魏菇的菌丝体生长状况；

图4为E组(阿魏菇菌块长满培养皿后植入种子)阿魏菇的菌丝体生长状况；

图5为阿魏菇真菌对阿魏种子发芽率的影响(D组)；

图6为阿魏菇真菌对阿魏种子发芽率的影响(E组)；

图7为阿魏种子发芽状况；

图8为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间的影响(H组)；

图9为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间的影响(1/2H组)；

图10为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间的影响(S组)；

图11为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间的影响(1/2S组)；

图12为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率的影响(H组)；

图13为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率的影响(1/2H组)；

图14为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率的影响(S组)；

图15为阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率的影响(1/2S组)。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细描述。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。

相反，本发明涵盖任何由权利要求定义的在本发明的精髓和范围上做的替代、修改、等效方法以及方案。进一步，为了使公众对本发明有更好的了解，在下文对本发明的细节描述中，详尽描述了一些特定的细节部分。对本领域技术人员来说没有这些细节部分的描述也可以完全理解本发明。

实施例1

一种用于研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作的方法，所述方法首先制备阿魏菇菌块以及阿魏菇菌液，对阿魏种子进行除菌预处理，然后以所述阿魏菇菌块、阿魏菇菌液以及预处理后的阿魏种子为试验材料，以阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率为指标，从以下两个方面研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作，所述两个方面分别为：研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作以及研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作。

1材料与方法

1.1材料

本实施例中阿魏种子选取来自新疆的新疆阿魏种子，所述新疆阿魏种子于2013和2014年搜集自伊犁哈萨克自治州伊宁县喀什乡拜什墩山区。5种阿魏菇菌株W1、W2、W3、W4、W5分别采集自新疆塔城地区裕民县、阿勒泰地区富蕴县、市售栽培种1、市售栽培种2和阿勒泰地区青河县。

1.2方法

1.2.1培养基

①真菌活化固体培养基：去皮马铃薯200g/L+葡萄糖20g/L+琼脂16g/L。

②菌块与种子萌发培养基：1/2MS+蔗糖30g/L+马铃薯25g/L+琼脂6g/L。

③真菌发酵液体培养基：去皮马铃薯25g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨3g/L，磷酸二氢钾2g/L，硫酸镁1g/L。

1.2.2阿魏菇菌块以及阿魏菇菌液制备

所述阿魏菇菌块的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，在无菌条件下，将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，即获得所述阿魏菇菌块。

所述阿魏菇菌液的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，在无菌条件下将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，将所述菌块接入装有真菌发酵液体培养基的三角瓶中，置于24℃、120r/min的摇床中，培养30d后，将菌液过滤，收集上清液，即获得所述阿魏菇菌液。

1.2.3新疆阿魏种子除菌预处理

将新疆阿魏种子进行除菌预处理具体为：将阿魏种子先用质量浓度为75％的酒精冲洗30s，再用质量浓度为30％的H₂O₂溶液浸泡40min，之后用无菌水冲洗3～6次，在无菌水中浸泡24h，备用。

1.2.4试验处理

1.2.4.1阿魏种子与阿魏菇菌块互作

以阿魏菇菌块以及阿魏种子为实验材料，采用菌块与种子萌发培养基，在无菌条件下进行，设置5组试验，每组设置5个重复组，任意两个重复组中所用阿魏菇菌块来自不同株的阿魏菌；控制所述5组试验的前期试验条件。所述5组试验的前期试验条件分别为：第一组前期试验条件为：将阿魏菇菌块以及阿魏种子同时植入所述菌块与种子萌发培养基，控制菌丝与种子无接触，该组称为试验组D，该组中的重复分别以D-W1～W5表示；第二组前期试验条件为：将阿魏菇菌块植入所述菌块与种子萌发培养基，该组称为试验组A，该组中的重复分别以A-W1～W5表示；第三组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，待菌丝至长满培养皿时，再将阿魏种子植，该组称为试验组E，该组中的重复分别以E-W1～W5表示；第四组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，不往上述培养基中植入阿魏种子,该组称为试验组B，该组中的重复分别以B-W1～W5表示；第五组前期试验条件为：将阿魏种子直接植入所述菌块与种子萌发培养基,该组称为试验组CK，该组中的重复分别以CK-W1～W5表示。

经过前期试验后，将上述5组试验中的培养皿置于4℃沉积温度下培养90d，观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率。

1.2.4.2阿魏种子与阿魏菇菌液互作

所述研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作具体为：以所述阿魏菇菌液以及阿魏种子为实验材料，设置六个处理组，六个处理组的处理条件分别为：按体积比计，第一到第六处理组分别取原菌液1份(H组)、原菌液0.5份(1/2H组)、灭活原菌液1份(S组)、灭活原菌液0.5份(1/2S组)、真菌发酵液体培养基1份(CK组)、真菌发酵液体培养基0.5份(1/2CK组)倒入三角瓶的无菌发芽纸上，再植入无菌的阿魏种子，每个处理组7个三角瓶，置于4℃黑暗条件下培养90d，重复3次；观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率。

1.3统计指标：

(1)发芽率＝第90d的发芽种子数/总播种数×100％

(2)菌丝生长速率(cm/10d)＝菌落生长半径(cm)/菌丝生长天数(10d)

2结果与分析

采用Microsoft Excel 2010软件和SPSS11.0软件对数据进行分析处理。

2.1无接触条件下，阿魏种子对阿魏菇菌块生长的影响

在接入阿魏菇菌块的培养皿中，植入新疆阿魏种子(D组)和未植入种子(A组)，4℃低温下共培养90d后，菌丝生长状况是完全不一样。由表1可知，未植入种子(A组)，5个阿魏菇菌株菌丝在低温下都能够生长，只是生长速率有差异，依次排序为W1＞W3＞W2＞W4＞W5(见图1)。其中：W1菌株的菌丝生长速率最快(0.747cm/10d)，与其它菌株生长速率达极显著差异，并且表现为早期生长的快；W5菌株的生长速率最慢(0.276cm/10d)；W2与W5、W3与W4和W5菌株之间呈极显著差异，其它各菌株之间均没有显著差异。实验中发现，当培养到60d时，W1菌株的菌丝已经长满至整个培养皿，其它四个菌株的菌丝在培养90d时还未长满培养皿。但是，当接入菌块的同时，将种子植入(D组)，5个菌株的菌丝均没有生长(见图2)，表明阿魏种子对阿魏菇菌丝生长产生了抑制作用，推测应该是种子在萌发过程中释放出某种物质阻碍了菌丝的生长。

表1 4℃下5株阿魏菇菌丝体生长速率

注：小写字母表示差异显著(P﹤0.05)，大写字母表示差异极显著(P﹤0.01)，“—”表示菌丝体未生长

2.2有接触条件下，阿魏种子对阿魏菇菌丝体生长的影响

在长满阿魏菇菌丝体的培养皿中，植入新疆阿魏种子(E组)和未植入种子(B组)，4℃低温下培养90d后，菌丝体长势有明显的差异。由表2可知，未植入种子的5个阿魏菇菌株菌丝体都有生长，且菌丝体均为白色，分枝较多，呈现蓬松状；从生长量来看，W1菌株的分枝密度及生长量最大，其余依次为：W2＝W3＞W4＞W5(见图3)。然而，在植入种子后(E组)，5个菌株的菌丝体生长量明显地增大，种子周围菌丝体呈白色且浓密，其中W1生长量最大，且几乎覆盖阿魏植物种子的表面，其余菌株的生长量依次为：W2＝W3＞W4＞W5(见图4)。实验表明：阿魏植物种子存在有利于阿魏菇的菌丝体生长，推测可能是阿魏菇菌丝体接触到种子后，吸收其营养的缘故。

表2菌块至长满培养皿后植入和未植入种子的菌丝体长势

注：“+”和“-”分别为1倍生长量和0.5倍生长量

2.3阿魏菇对阿魏种子发芽率的影响

4℃低温下，同时分别将5株阿魏菇菌块和阿魏种子接种于所述菌块与种子萌发培养基上，90d后，阿魏种子均不同程度可以萌发，但种子发芽率都较对照低，由高到低依次为CK＞W5＞W1＞W4＞W3＞W2(见图5、图7)。另分别将5株阿魏菇菌块在24℃暗培养待至培养皿中长满菌丝，再植入阿魏种子置4℃低温下共培养90d后，种子发芽率也都较对照更低，由高到低依次为：CK＞W1＞W5＞W2＞W3＞W4(见图6、图7)。方差分析：在D试验组中，CK与各菌株之间均呈显著差异，W5与其它菌株呈显著差异，其它菌株之间没有显著性差异；在E试验组中，CK与各菌株之间差异也都呈显著水平，W1与W2、W3、W4菌株之间差异呈显著水平，与W5差异不显著。统计得出：阿魏种子发芽率为CK组＞D试验组＞E试验组，且种子发芽率均未达到60％(见图5、6、7)。实验结果表明：无论阿魏菇与阿魏植物种子是否接触，它的存在都对种子发芽有抑制的作用，尤其是从接触到的阿魏种子上阿魏菇菌丝体能够吸取营养提供自身快速生长，致使种子发芽受到的抑制作用更加强烈。

2.4阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间的影响

在阿魏菇发酵菌液对阿魏种子萌动时间影响的试验中，对照(CK1、CK2)种子萌动所需时间最短，35d种子就可萌动，而4个试验组(H、1/2H、S、1/2S)中不同处理种子所需萌动时间都比CK长了5～15d(见图8-11)。这些表明阿魏菇菌液对阿魏种子萌动有延迟的效应，从而可以认为阿魏菇在阿魏种子萌发的起始阶段就已经产生了明显地抑制作用。

2.5阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率的影响

在阿魏菇发酵菌液对阿魏种子发芽率影响的试验组中，在H试验组里CK1种子发芽率最高，为51.39％；其次W3菌液处理的为27.78％；W4菌液处理的最低，为12.96％；且W3与W5、W1、W2和W4菌液处理之间差异不显著，其它菌液处理之间差异呈显著水平。在1/2H试验组里CK2种子发芽率最高，为55.56％；其次W5菌液处理的为35.18％；W2菌液处理的最低，为14.81％；且CK与其它菌液处理之间、W2与其它菌液处理之间差异都呈显著水平，其它菌液处理之间差异不显著。在S试验组里CK1种子发芽率最高，为51.39％；其次W2菌液处理的为26.30％；W4菌液处理的最低，为16.67％；且CK与其它菌液处理、W2与W4菌液处理之间差异都呈显著水平，其它菌液处理之间差异不显著。在1/2S试验组里CK2种子发芽率最高，为55.56％；其次W1菌液处理的为48.70％；W2菌液处理的最低，为31.48％；且CK与W1、W1与W5、W2、W3和W4之间都差异不显著，其它菌液处理之间差异呈显著水平。统计结果：阿魏种子发芽率基本呈现CK组>1/2S试验组>1/2H试验组>S试验组>H试验组(见图12-15)。这些揭示对阿魏种子发芽的抑制物质是在阿魏菇培养时产生，在其发酵过程中将该物质分泌到培养液里，该物质耐高温高压。除此之外，实验还表明发酵菌液中未灭活真菌在碰到阿魏种子时可以吸收营养提供自身迅速生长，致使阿魏种子发芽率降得更低。

通过人工接菌进行阿魏菇真菌与荒漠植物新疆阿魏种子发芽影响的研究，这是微生物与植物互作研究的传统经典方法。为排除其它微生物的干扰，首先对宿主植物新疆阿魏种子表面消毒获得无菌种子，这个预处理致使种子发芽率比通常状况下大大降低，阿魏种子吸胀直接4℃沉积发芽率可达80％以上，无菌预处理后的不到60％，应该是消毒过程所用药剂对种子毒害造成的。野生阿魏菇专一性地寄生或腐生在阿魏植物的根茎部，这种关系表明，阿魏植物一定对阿魏菇产生了重要的影响，也有许多研究表明阿魏植物对阿魏菇生长有较明显的促进作用。本研究则证实并揭示阿魏植物种子萌发与阿魏菇真菌生长两者互有影响，当阿魏菇与阿魏种子有接触时，能够从种子里汲取营养供给自身迅速生长，菌株W1在4℃下生长增加近13倍。然而，在两者无接触的情况下，由于新疆阿魏种子具有散发蒜臭味的含硫化合物，通过这些挥发性物质作用于阿魏菇真菌，阻止其生长、定殖。真核生物的寄生就是一种以牺牲寄主为代价的特殊共生关系，采取平衡生存策略，通过低成本达到调节种群密度的目的，即寄生共生体繁殖的自我控制，以及寄主在个体生活史中适应性降低的间接控制，与性行为(繁殖)联结完成寄主更换，实现生态系统的稳定和长期进化的停滞。在这个关系中一般是寄生物从宿主上得到的营养较多，包括水分、无机盐和有机物质等。本实验中，当5株阿魏菇真菌菌丝体在接触到阿魏种子时，明显看出它能从阿魏种子上吸取营养供自己快速生长。当两者无接触的情况下，阿魏种子发芽率依然比对照低，可能是阿魏菇真菌也能够产生某种物质抑制阿魏种子发芽。进一步实验，无论是否灭活阿魏菇真菌发酵菌液都使得荒漠植物新疆阿魏种子所需萌动时间更长、发芽率降低，这表明阿魏菇真菌在培养过程中能够分泌耐高温高压的某种物质，其能够抑制阿魏种子萌发。在共生关系中，宿主(寄主)通常指较大的成员，较小者称为“共生体”。与宿主世代共生依赖于共生体的传递，共生体有两种传递方式：①水平传递是每一代宿主重新从周围环境获得共生体，发生在后代散布和休眠之后；②垂直传递是共生体从上一代传递到下一代，或卵上，发生在后代离开母体前。意味着垂直传递选择为与共生体合作，这是由于共生体适应性与宿主繁殖关联；而水平传递与来自寄主的共生体适应性耦合，特别有利于寄生共生体迅速传播，在对寄主伤害和共生体适应性之间权衡折衷。综上所述，在荒漠环境条件下新疆阿魏种子发芽期间不宜与阿魏菇真菌生活在一起，这一结论正好与野外实际观察到的情况一致，阿魏菇仅能够在开花结果期的阿魏植物根茎部上采摘得到，并无在苗期阿魏植物上的采集记录，这也从另一个侧面反映阿魏菇真菌是采取水平传递方式到宿主阿魏植物上的，保持迅速传播优势，有利于大面积阿魏滩形成，而不是通过种子携带进行垂直传递的。

本研究证实并揭示阿魏植物种子发芽与阿魏菇真菌生长两者互有影响。首先，在阿魏菇真菌与阿魏种子未直接接触的情况下，阿魏种子通过挥发性物质对阿魏菇真菌生长产生阻碍作用。其次，5株阿魏菇真菌的存在均对药用荒漠植物新疆阿魏的种子发芽有抑制作用。一是阿魏菇真菌能够分泌耐高温、高压某种物质，其不仅推迟种子萌动并对种子发芽有抑制的作用，具体有待于进一步分析鉴定。二是在阿魏菇真菌与阿魏种子接触的情况下，阿魏菇真菌能够直接从种子里汲取营养提供自身生长，从而使得阿魏植物种子发芽率降得更低。综上所述，在荒漠环境条件下，阿魏菇真菌的存在对阿魏植物的种子发芽是不利的，为野生抚育和人工栽培保护阿魏植物资源、道地药材的可持续开发利用、荒漠生态系统的恢复和建设提供了科学依据。

Claims (5)

1.一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，其特征在于，所述方法首先制备阿魏菇菌块以及阿魏菇菌液，对阿魏种子进行除菌预处理，然后以所述阿魏菇菌块、阿魏菇菌液以及预处理后的阿魏种子为试验材料，以阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率为指标，从以下两个方面研究阿魏菇与阿魏种子发芽互作，所述两个方面分别为：研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作以及研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作；

所述研究阿魏种子与阿魏菇菌块互作具体为：以阿魏菇菌块以及阿魏种子为实验材料，采用菌块与种子萌发培养基，在无菌条件下进行，设置5组试验，每组至少设置5个重复组，任意两个重复组中所用阿魏菇菌块来自不同株的阿魏菌；控制所述5组试验的前期试验条件，经过前期试验后，将上述5组试验中的培养皿置于种子4℃沉积温度下培养90d，观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率；

所述5组试验的前期试验条件分别为：第一组前期试验条件为：将阿魏菇菌块以及阿魏种子同时植入所述菌块与种子萌发培养基，控制菌丝与种子无接触；第二组前期试验条件为：将阿魏菇菌块植入所述菌块与种子萌发培养基；第三组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，待菌丝至长满培养皿时，再将阿魏种子植入；第四组前期试验条件为：将阿魏菇菌块接入所述菌块与种子萌发培养基中，置于24℃黑暗条件下培养，不往上述培养基中植入阿魏种子；第五组前期试验条件为：将阿魏种子直接植入所述菌块与种子萌发培养基。

2.根据权利要求1所述一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，其特征在于，所述研究阿魏种子与阿魏菇菌液互作具体为：以所述阿魏菇菌液以及阿魏种子为实验材料，设置六个处理组，六个处理组的处理条件分别为：按体积比计，第一到第六处理组分别取原菌液1份、原菌液0.5份、灭活原菌液1份、灭活原菌液0.5份、真菌发酵液体培养基1份、真菌发酵液体培养基0.5份倒入三角瓶的无菌发芽纸上，再植入无菌的阿魏种子，每个处理组7个三角瓶，置于4℃黑暗条件下培养90d，重复3次；观察和统计阿魏种子的发芽率以及菌丝生长率。

3.根据权利要求1所述一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，其特征在于，所述阿魏菇菌块的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，在无菌条件下，将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，即获得所述阿魏菇菌块。

4.根据权利要求1所述一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，其特征在于，所述阿魏菇菌液的制备方法为：在真菌活化固体培养基上培养阿魏菇菌株至阿魏菇长满培养皿，将长满培养皿的阿魏菇菌株用打孔器取直径为0.6cm菌块，将所述菌块接入装有真菌发酵液体培养基的三角瓶中，置于24℃、120r/min的摇床中，培养30d后，将菌液过滤，收集上清液，即获得所述阿魏菇菌液。

5.根据权利要求1所述一种用于研究阿魏菇真菌与荒漠植物阿魏种子发芽互作的方法，其特征在于，所述对阿魏种子进行除菌预处理具体为：将阿魏种子先用质量浓度为75％的酒精冲洗30s，再用质量浓度为30％的H₂O₂溶液浸泡40min，之后用无菌水冲洗3～6次，在无菌水中浸泡24h，备用。