CN105907832B - 一种酶法拆分艾沙康唑中间体的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种艾沙康唑中间体的酶法拆分方法。采用腈水解酶(2R,3S)‑艾沙康唑中间体Ⅰ中的对映异构体杂质水解为(2S,3S)‑羧酸副产物，经分离纯化得光学纯(2S,3R)‑艾沙康唑中间体Ⅰ。

Description

一种酶法拆分艾沙康唑中间体的方法
技术领域
本发明涉及一种酶法制备艾沙康唑中间体的方法。
背景技术
艾沙康唑是一种新的三唑类广谱抗真菌药，美国FDA2015年批准上市。研究显示，艾沙康唑具有广谱抗真菌作用，包括酵母菌(如念珠菌属)和霉菌(如曲霉属、毛霉属)。
临床要求具有光学异构体的药物，必须以光学纯的形态上市。艾沙康唑具有两个光学手心中心，因此，式Ⅳ所示结构的化合物((2S,3R)-中间体Ⅰ，手性纯)的制备是艾沙康唑制备工艺的关键与难点。
宋婷婷等(《抗真菌药物艾沙康唑研究进展》)对艾沙康唑手性中心构建进行了综述。艾沙康唑手性构建现有技术包括不对称合成、化学拆分，存在收率不高、手性纯度低、过程繁杂等缺点。
不对称合成法：专利US6300353报道,艾沙康唑中间体合成路线1，以R-乳酸甲酯为起始原料，引入第1个手性中心,第2个手性中心通过不对称环氧化反应合成。具体合成路线如下：
该反应步骤较多，总收率不高(16％)。另有专利US6133485报道，以价格低廉的天然S-乳酸为起始原料合成艾沙康唑，原料成本降低，但反应涉及构型翻转，更为复杂。
专利US 2004/0176432报道，艾沙康唑中间体合成路线2，以R-3丁炔-2-醇为起始原料，引入第1个手性中心，经甲基磺酰氯取代成酯后，在Pd(II)催化剂和二乙基锌的催化下不对称合成第2个手性中心。具体合成路线如下：
原料R-3-丁炔-2-醇的价格较高。有研究人员采用价格较低的R-4-苯基-3-丁炔-2-醇代替R-3-丁炔-2-醇，但研究发现，不对称合成反应选择性较差，获得的手性中间体纯度较低。另外，反应后要去除苯环，增加了反应和处理步骤，也增加了成本。
化学法手性拆分法：专利US8207352报道了更为高效和低成本手性拆分法，艾沙康唑中间体合成路线3。制备方法包括多个路径，首先以廉价原料合成消旋中间体，中间体可以为化合物a或b或c。在关键工艺中加入拆分试剂(R-10-樟脑磺酸或S-10-樟脑磺酸)，结晶后获得纯的光学异构体中间体或终产物。具体合成路线如下：
但实际实验发现，该方法重现性差，不能结晶。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种经济环保、质量稳定、操作简便的酶法拆分艾沙康唑中间体的方法。
本发明提供了一种酶法拆分艾沙康唑中间体的方法，其特征包括如下步骤：
a、将式Ⅰ所示结构化合物(艾沙康唑中间体Ⅰ，消旋)与1.5～5倍重量乙酸乙酯混合，加热至60～80℃搅拌，冷却后过滤,得滤液A；
b、将腈水解酶与水混合，再与滤液A混合，在25～40℃下搅拌反应，加碱控制pH值在7.5～9,将式Ⅱ所示结构化合物((2R,3S)-中间体Ⅰ对映异构体)水解为式Ⅲ所示结构化合物((2S,3S)-羧酸副产物)，分液，有机层过滤，浓缩，得式Ⅳ所示结构化合物((2S,3R)-中间体Ⅰ)粗品。
其中，b步骤所述的式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品使用甲基叔丁基醚打浆，过滤，干燥，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品。所述的甲基叔丁基醚使用异丙醚、乙醚替代。
其中，b步骤所述碱为氢氧化钠或碳酸钠溶液。
其中，b步骤所述的式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品，与异丙醇混合，加热至40℃～80℃，冷却至0～30℃结晶，过滤，干燥得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品。结晶时，可加入1～4倍异丙醇体积的水。所述的异丙醇可使用乙醇、甲醇、丙酮替代。
本发明具有以下优点：拆分收率高；由于使用具有空间选择性的酶，产品手性纯度高；酶法拆分条件温和、操作简便。
具体实施方式
实施例1
500ml烧瓶中加入100.0g式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ,再加入400ml乙酸乙酯，加热至60℃搅拌20分钟，冷却至室温，过滤，得滤液A。将10g市售AK226腈水解酶与300ml水加入1000ml烧杯中，机械搅拌，将滤液A慢慢倒入酶解液中，于32℃慢速搅拌，维持两相分层状态，滴加5％氢氧化钠溶液，控制pH值8～8.5。待pH稳定，不再消耗氢氧化钠溶液后，分液，有机层过滤，50℃减压蒸除溶剂，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品。式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品加入60ml甲基叔丁基醚打浆，过滤，60℃鼓风干燥，得(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品33.8g,99.6％ee。
实施例2
5000ml烧瓶中加入1.00kg式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ,再加入3.0L乙酸乙酯，加热至70℃搅拌10分钟，冷却至室温，过滤，得滤液A。将120g市售AK226腈水解酶与2.0L水混合，机械搅拌，将滤液A慢慢倒入酶解液中，于35℃慢速搅拌，维持两相分层状态，滴加饱和碳酸钠溶液，控制pH值7.5～8.0。待pH稳定，不再消耗碳酸钠溶液后，分液，1.0L乙酸乙酯反萃取水层，合并有机层过滤，水层去酶回收，55℃减压蒸除溶剂，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品。式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品加入1.5L异丙醇，搅拌，加热至50℃，加入3.0L水，冷却至0～5℃，搅拌1小时。过滤，水洗，70℃减压干燥，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品32.4g,99.9％ee。
酶回收：分液所得水层过滤，酶滤饼使用300ml水洗两次，酶滤饼浸泡于0.1M磷酸钾缓冲液(pH＝8.5)中存储，待下次重复使用。
实施例3
5000ml烧瓶中加入1.00kg式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ,再加入5.0L乙酸乙酯，加热至50℃搅拌30分钟，冷却至10℃，过滤，得滤液A。将实施例2中在缓冲液中存储的回收的腈水解酶过滤，滤饼与3.0L水混合，机械搅拌，将滤液A慢慢倒入酶解液中，于40℃慢速搅拌，维持两相分层状态，滴加饱和5％氢氧化钾溶液，控制pH值8.4～8.6。HPLC监控式Ⅳ所示结构化合物(2R,3S)-中间体Ⅰ对映异构体已水解剩余≤0.2％(面积归一法)，分液，2.0L乙酸乙酯反萃取水层，合并有机层过滤，水层去酶回收，50℃减压蒸除溶剂，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品。式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品加入2.5L乙醇，搅拌，加热至50℃，加入10L水，冷却至10～15℃，搅拌1小时。过滤，水洗，70℃鼓风干燥，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品30.0g,100％ee。
水层酶回收：分液的水层过滤，酶滤饼使用300ml水洗两次，酶滤饼浸泡于0.1M磷酸钾缓冲溶液(pH＝8.5)中存储待下次重复使用。
实施例4
5000ml烧瓶中加入1.00kg式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ,再加入5.0L乙酸乙酯，加热至50℃搅拌30分钟，冷却至10℃，过滤，得滤液A。将实施例2中在缓冲液中存储的回收的腈水解酶过滤，滤饼与3.0L水混合，机械搅拌，将滤液A慢慢倒入酶解液中，于25℃慢速搅拌，维持两相分层状态，滴加饱和5％氢氧化钾溶液，控制pH值8.4～8.6。HPLC监控式Ⅳ所示结构化合物(2R,3S)-中间体Ⅰ对映异构体已水解剩余≤0.2％(面积归一法)，分液，2.0L乙酸乙酯反萃取水层，合并有机层过滤，水层去酶回收，50℃减压蒸除溶剂，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品。式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品加入2.5L甲醇，搅拌，加热至50℃，加入5L水，冷却至30～35℃，搅拌1小时。过滤，水洗，60℃鼓风干燥，得(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品29.7g,100％ee。
水层酶回收：分液的水层过滤，酶滤饼使用300ml水洗两次，酶滤饼浸泡于0.1M磷酸钾缓冲溶液(pH＝8.5)中存储待下次重复使用。
实施例5
5000ml烧瓶中加入1.00kg将式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ,再加入5.0L乙酸乙酯，加热至50℃搅拌30分钟，冷却至10℃，过滤，得滤液A。将实施例2中在缓冲液中存储的回收的腈水解酶过滤，滤饼与3.0L水混合，机械搅拌，将滤液A慢慢倒入酶解液中，于30℃慢速搅拌，维持两相分层状态，滴加饱和5％氢氧化钾溶液，控制pH值8.4～8.6。HPLC监控式Ⅳ所示结构化合物(2R,3S)-中间体Ⅰ对映异构体已水解剩余≤0.2％(面积归一法)，分液，2.0L乙酸乙酯反萃取水层，合并有机层过滤，水层去酶回收，50℃减压蒸除溶剂，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品。式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品加入2.5L异丙醇，搅拌，加热至50℃，加入10L水，冷却至0～5℃，搅拌1小时。过滤，水洗，80℃鼓风干燥，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品30.1g,100％ee。
水层酶回收：分液的水层过滤，酶滤饼使用300ml水洗两次，酶滤饼浸泡于0.1M磷酸钾缓冲溶液(pH＝8.5)中存储待下次重复使用。

Claims (1)

1.一种艾沙康唑中间体的酶法拆分方法，其特征包括如下步骤：
a、将式Ⅰ所示结构化合物消旋艾沙康唑中间体Ⅰ与1.5～5倍重量乙酸乙酯混合，加热至60～80℃搅拌，冷却后过滤,得滤液A；
b、将腈水解酶与水混合，再与滤液A混合，在25～40℃下搅拌反应，加氢氧化钠或碳酸钠溶液控制pH值在7.5～9,将式Ⅱ所示结构化合物水解为式Ⅲ所示结构化合物，分液，有机层过滤，浓缩，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品；
所述的式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品使用甲基叔丁基醚打浆，过滤，干燥，得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品；
或所述的式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ粗品，与异丙醇、乙醇和甲醇中的一种混合，加热至40℃～80℃，接着加入1～4倍所述的异丙醇、所述的乙醇或所述的甲醇体积的水，冷却至0～30℃结晶，过滤，干燥得式Ⅳ所示结构化合物(2S,3R)-中间体Ⅰ精制品
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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