CN105906674B - 一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法 - Google Patents

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Abstract

一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法，包括以下步骤：（1）硅胶拌样：将甜菊糖苷精制母液进行预热处理，趁热加入硅胶，搅拌均匀，烘干，得干燥拌样硅胶；（2）装柱：将干燥拌样硅胶装入层析柱中，压紧；（3）预洗：用乙酸乙酯进行预脱，收集预洗流出液，浓缩，将乙酸乙酯回收干净；（4）洗脱：用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱，收集洗脱流出液，浓缩，将乙酸乙酯和乙醇回收干净，得RC粗品；（5）精制：将RC粗品用有机溶剂加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得RC纯品。本发明在获得高纯度的RC同时，还可以获得大量甜菊糖苷的主要成分ST和RA，资源利用率高，且具有低成本、高收率，适宜于工业化生产等优点。

Description

一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法
技术领域
本发明涉及一种甜菊糖苷的分离方法，特别是涉及一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
背景技术
甜菊糖苷天然零热量，并且对血糖没有影响，因此可以取代超重、肥胖人群和糖尿病患者日常饮食中的甜食和碳水化合物摄入的热量。目前，甜菊糖苷的安全性已得到全球监督机构的认可，包括JECFA、EFSA、FDA和FSANZ，甜菊糖苷作为一种健康、安全的天然甜味剂，未来将广泛应用于食品饮料行业中。根据我国最新的《食品安全国家标准》，甜菊糖苷中的主要糖苷为甜菊苷（ST）和瑞鲍迪苷A（RA），其他已知糖苷包括瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C（Rc）、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。其中关于主要糖苷ST和RA的研究和应用目前已经比较成熟，其他已知糖苷的研究和应用比较少。
瑞鲍迪苷C（Rc）的甜度大约是蔗糖的50倍，并且具有明显的后苦味，其本身虽不作为甜味剂使用，但是可以用作其他甜味剂的风味增强剂。例如，在含糖饮料中添加200-300ppm的Rc时，可减少30-50%的白糖使用量，使饮料保持同样的甜度的同时还增加了饮料的清香口感。最近国外有研究表明，瑞鲍迪苷C（Rc）具有降压、降血脂、抗过敏和预防心血管疾病等保健功能。
CN102321132A公开了一种甜菊糖苷RC粗提物的提纯方法，通过大孔吸附树脂吸附糖液，用乙醇洗脱并分段收集，确定目标产品收集段浓缩干燥，得到含量30%的RC粗提物。该方法虽简单，但是由于大孔吸附树脂吸附选择性的局限，难以制备高纯度的RC。
此外，针对目前甜菊糖生产厂家难以反复结晶的甜菊糖苷精制母液，还没有一种有效的处理方法，不利于工业化生产。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
进一步，本发明所要解决的技术问题是，提供一种低成本、高收率，适宜于工业化生产的从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法，包括以下步骤：
（1）硅胶拌样：将甜菊糖苷精制母液进行预热处理，趁热加入硅胶，搅拌均匀，烘干，得干燥拌样硅胶；
（2）装柱：将干燥拌样硅胶装入层析柱中，压紧；
（3）预洗：用乙酸乙酯进行预洗，收集预洗流出液，浓缩，将乙酸乙酯回收干净，得ST和RA的混合物；
（4）洗脱：用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱，收集洗脱流出液，浓缩，将乙酸乙酯和乙醇回收干净，得RC粗品；
（5）精制：将RC粗品用有机溶剂加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得RC纯品。
进一步，步骤（1）中，预热的温度30～50℃，预热的时间为0.5～2.0小时。
进一步，步骤（1）中，所述硅胶的用量为母液重量的1～2倍。
进一步，步骤（1）中，烘干的温度为70～80℃，烘干的时间为9～10小时。
进一步，步骤（2）中，所述层析柱的高径比为1～20:1，优选8～10:1。
进一步，步骤（3）中，所述乙酸乙酯的用量为2～10BV，1BV=1个柱床体积，预洗的流速为0.5～2BV/小时，浓缩的温度为60～80℃。
进一步，步骤（4）中，所述乙酸乙酯和乙醇的混合物中，乙酸乙酯与乙醇的体积比=50～99:50～1。
进一步，步骤（4）中，所述乙酸乙酯和乙醇混合物的用量为2～10BV，1BV=1个柱床体积，洗脱的流速为0.5～2BV/小时，浓缩的温度为60～90℃。
进一步，步骤（5）中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯、水中的一种或多种。
进一步，步骤（3）中，所得ST和RA的混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA。
研究实践表明，利用本发明，可获得高纯度的RC纯品，纯度达98wt%以上；同时，还可以获得大量甜菊糖苷的主要成分ST和RA，极大的提高了资源的利用率。
本发明打破了现有技术的局限，且具有低成本、高收率，适宜于工业化生产等优点。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例包括以下步骤：
（1）硅胶拌样：取甜菊糖苷精制母液5Kg（ST纯度16.0wt%，RA纯度13.5wt%，RC纯度20.5wt%）进行预热处理（温度为50℃，时间为1小时），趁热加入8Kg硅胶，搅拌均匀，烘干（温度为75℃，时间为9小时），得干燥拌样硅胶；
（2）装柱：将干燥拌样硅胶装入层析柱（高径比10:1）中，压紧；
（3）预洗：用40L乙酸乙酯进行预洗，预洗的流速为1BV/小时，收集预洗流出液，70℃浓缩，将乙酸乙酯回收干净，得ST和RA的混合物1.85Kg（该混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA）；
（4）洗脱：用60L乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱，乙酸乙酯与乙醇的体积比=90:10，洗脱的流速为1BV/小时，收集洗脱流出液，80℃浓缩，将乙酸乙酯和乙醇回收干净，得RC粗品1.3Kg；
（5）精制：将1.3Kg RC粗品用13L乙醇加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得RC纯品0.95Kg，纯度98.5wt%，RC的收率91.2%。
实施例2
本实施例包括以下步骤：
（1）硅胶拌样：取甜菊糖苷精制母液5Kg（ST纯度16.0wt%，RA纯度13.5wt%，RC纯度20.5wt%）进行预热处理（温度为40℃，时间为1.5小时），趁热加入10Kg硅胶，搅拌均匀，烘干（温度为70℃，时间为10小时），得干燥拌样硅胶；
（2）装柱：将干燥拌样硅胶装入层析柱（高径比9:1）中，压紧；
（3）预洗：用60L乙酸乙酯进行预洗，预洗的流速为1.5BV/小时，收集预洗流出液，72℃浓缩，将乙酸乙酯回收干净，得ST和RA的混合物2.1Kg（该混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA）；
（4）洗脱：用75L乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱，乙酸乙酯与乙醇的体积比=92:8，洗脱的流速为1.5BV/小时，收集洗脱流出液，85℃浓缩，将乙酸乙酯和乙醇回收干净，得RC粗品1.25Kg；
（5）精制：将1.25KgRC粗品用125L乙醇（含5%异丙醇）加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得RC纯品0.91Kg，纯度98.9wt%，RC的收率87.8%。

Claims (8)

1.一种从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）硅胶拌样：将甜菊糖苷精制母液进行预热处理，趁热加入硅胶，搅拌均匀，烘干，得干燥拌样硅胶；
（2）装柱：将干燥拌样硅胶装入层析柱中，压紧；
（3）预洗：用乙酸乙酯进行预洗，收集预洗流出液，浓缩，将乙酸乙酯回收干净，得ST和RA的混合物；
（4）洗脱：用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱，收集洗脱流出液，浓缩，将乙酸乙酯和乙醇回收干净，得Rc粗品；
（5）精制：将Rc粗品用有机溶剂加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得Rc纯品；
步骤（1）中，所述硅胶的用量为母液重量的1～2倍；步骤（2）中，所述层析柱的高径比为1～20:1。
2.根据权利要求1所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（1）中，预热的温度30～50℃，预热的时间为0.5～2.0小时。
3.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（1）中，烘干的温度为70～80℃，烘干的时间为9～10小时。
4.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述乙酸乙酯的用量为2～10BV，1BV=1个柱床体积，预洗的流速为0.5～2BV/小时，浓缩的温度为60～80℃。
5.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述乙酸乙酯和乙醇的混合物中，乙酸乙酯与乙醇的体积比=50～99:50～1。
6.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述乙酸乙酯和乙醇混合物的用量为2～10BV，1BV=1个柱床体积，洗脱的流速为0.5～2BV/小时，浓缩的温度为60～90℃。
7.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯中的一种或多种。
8.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法，其特征在于，步骤（3）中，所得ST和RA的混合物通过结晶方法进一步分离ST和RA。
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