CN105906674B - 一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法 - Google Patents

一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法 Download PDF

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Abstract

一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法,包括以下步骤:(1)硅胶拌样:将甜菊糖苷精制母液进行预热处理,趁热加入硅胶,搅拌均匀,烘干,得干燥拌样硅胶;(2)装柱:将干燥拌样硅胶装入层析柱中,压紧;(3)预洗:用乙酸乙酯进行预脱,收集预洗流出液,浓缩,将乙酸乙酯回收干净;(4)洗脱:用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱,收集洗脱流出液,浓缩,将乙酸乙酯和乙醇回收干净,得RC粗品;(5)精制:将RC粗品用有机溶剂加热溶解,冷却,析晶,过滤,干燥,得RC纯品。本发明在获得高纯度的RC同时,还可以获得大量甜菊糖苷的主要成分ST和RA,资源利用率高,且具有低成本、高收率,适宜于工业化生产等优点。

Description

一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法
技术领域
本发明涉及一种甜菊糖苷的分离方法,特别是涉及一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
背景技术
甜菊糖苷天然零热量,并且对血糖没有影响,因此可以取代超重、肥胖人群和糖尿病患者日常饮食中的甜食和碳水化合物摄入的热量。目前,甜菊糖苷的安全性已得到全球监督机构的认可,包括JECFA、EFSA、FDA和FSANZ,甜菊糖苷作为一种健康、安全的天然甜味剂,未来将广泛应用于食品饮料行业中。根据我国最新的《食品安全国家标准》,甜菊糖苷中的主要糖苷为甜菊苷(ST)和瑞鲍迪苷A(RA),其他已知糖苷包括瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C(Rc)、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。其中关于主要糖苷ST和RA的研究和应用目前已经比较成熟,其他已知糖苷的研究和应用比较少。
瑞鲍迪苷C(Rc)的甜度大约是蔗糖的50倍,并且具有明显的后苦味,其本身虽不作为甜味剂使用,但是可以用作其他甜味剂的风味增强剂。例如,在含糖饮料中添加200-300ppm的Rc时,可减少30-50%的白糖使用量,使饮料保持同样的甜度的同时还增加了饮料的清香口感。最近国外有研究表明,瑞鲍迪苷C(Rc)具有降压、降血脂、抗过敏和预防心血管疾病等保健功能。
CN102321132A公开了一种甜菊糖苷RC粗提物的提纯方法,通过大孔吸附树脂吸附糖液,用乙醇洗脱并分段收集,确定目标产品收集段浓缩干燥,得到含量30%的RC粗提物。该方法虽简单,但是由于大孔吸附树脂吸附选择性的局限,难以制备高纯度的RC。
此外,针对目前甜菊糖生产厂家难以反复结晶的甜菊糖苷精制母液,还没有一种有效的处理方法,不利于工业化生产。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,提供一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
进一步,本发明所要解决的技术问题是,提供一种低成本、高收率,适宜于工业化生产的从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种从甜菊糖苷精制母液中分离高纯度Rc的方法,包括以下步骤:
(1)硅胶拌样:将甜菊糖苷精制母液进行预热处理,趁热加入硅胶,搅拌均匀,烘干,得干燥拌样硅胶;
(2)装柱:将干燥拌样硅胶装入层析柱中,压紧;
(3)预洗:用乙酸乙酯进行预洗,收集预洗流出液,浓缩,将乙酸乙酯回收干净,得ST和RA的混合物;
(4)洗脱:用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱,收集洗脱流出液,浓缩,将乙酸乙酯和乙醇回收干净,得RC粗品;
(5)精制:将RC粗品用有机溶剂加热溶解,冷却,析晶,过滤,干燥,得RC纯品。
进一步,步骤(1)中,预热的温度30~50℃,预热的时间为0.5~2.0小时。
进一步,步骤(1)中,所述硅胶的用量为母液重量的1~2倍。
进一步,步骤(1)中,烘干的温度为70~80℃,烘干的时间为9~10小时。
进一步,步骤(2)中,所述层析柱的高径比为1~20:1,优选8~10:1。
进一步,步骤(3)中,所述乙酸乙酯的用量为2~10BV,1BV=1个柱床体积,预洗的流速为0.5~2BV/小时,浓缩的温度为60~80℃。
进一步,步骤(4)中,所述乙酸乙酯和乙醇的混合物中,乙酸乙酯与乙醇的体积比=50~99:50~1。
进一步,步骤(4)中,所述乙酸乙酯和乙醇混合物的用量为2~10BV,1BV=1个柱床体积,洗脱的流速为0.5~2BV/小时,浓缩的温度为60~90℃。
进一步,步骤(5)中,所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯、水中的一种或多种。
进一步,步骤(3)中,所得ST和RA的混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA。
研究实践表明,利用本发明,可获得高纯度的RC纯品,纯度达98wt%以上;同时,还可以获得大量甜菊糖苷的主要成分ST和RA,极大的提高了资源的利用率。
本发明打破了现有技术的局限,且具有低成本、高收率,适宜于工业化生产等优点。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例包括以下步骤:
(1)硅胶拌样:取甜菊糖苷精制母液5Kg(ST纯度16.0wt%,RA纯度13.5wt%,RC纯度20.5wt%)进行预热处理(温度为50℃,时间为1小时),趁热加入8Kg硅胶,搅拌均匀,烘干(温度为75℃,时间为9小时),得干燥拌样硅胶;
(2)装柱:将干燥拌样硅胶装入层析柱(高径比10:1)中,压紧;
(3)预洗:用40L乙酸乙酯进行预洗,预洗的流速为1BV/小时,收集预洗流出液,70℃浓缩,将乙酸乙酯回收干净,得ST和RA的混合物1.85Kg(该混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA);
(4)洗脱:用60L乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱,乙酸乙酯与乙醇的体积比=90:10,洗脱的流速为1BV/小时,收集洗脱流出液,80℃浓缩,将乙酸乙酯和乙醇回收干净,得RC粗品1.3Kg;
(5)精制:将1.3Kg RC粗品用13L乙醇加热溶解,冷却,析晶,过滤,干燥,得RC纯品0.95Kg,纯度98.5wt%,RC的收率91.2%。
实施例2
本实施例包括以下步骤:
(1)硅胶拌样:取甜菊糖苷精制母液5Kg(ST纯度16.0wt%,RA纯度13.5wt%,RC纯度20.5wt%)进行预热处理(温度为40℃,时间为1.5小时),趁热加入10Kg硅胶,搅拌均匀,烘干(温度为70℃,时间为10小时),得干燥拌样硅胶;
(2)装柱:将干燥拌样硅胶装入层析柱(高径比9:1)中,压紧;
(3)预洗:用60L乙酸乙酯进行预洗,预洗的流速为1.5BV/小时,收集预洗流出液,72℃浓缩,将乙酸乙酯回收干净,得ST和RA的混合物2.1Kg(该混合物可通过结晶方法进一步分离ST和RA);
(4)洗脱:用75L乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱,乙酸乙酯与乙醇的体积比=92:8,洗脱的流速为1.5BV/小时,收集洗脱流出液,85℃浓缩,将乙酸乙酯和乙醇回收干净,得RC粗品1.25Kg;
(5)精制:将1.25KgRC粗品用125L乙醇(含5%异丙醇)加热溶解,冷却,析晶,过滤,干燥,得RC纯品0.91Kg,纯度98.9wt%,RC的收率87.8%。

Claims (8)

1.一种从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)硅胶拌样:将甜菊糖苷精制母液进行预热处理,趁热加入硅胶,搅拌均匀,烘干,得干燥拌样硅胶;
(2)装柱:将干燥拌样硅胶装入层析柱中,压紧;
(3)预洗:用乙酸乙酯进行预洗,收集预洗流出液,浓缩,将乙酸乙酯回收干净,得ST和RA的混合物;
(4)洗脱:用乙酸乙酯和乙醇的混合物进行洗脱,收集洗脱流出液,浓缩,将乙酸乙酯和乙醇回收干净,得Rc粗品;
(5)精制:将Rc粗品用有机溶剂加热溶解,冷却,析晶,过滤,干燥,得Rc纯品;
步骤(1)中,所述硅胶的用量为母液重量的1~2倍;步骤(2)中,所述层析柱的高径比为1~20:1。
2.根据权利要求1所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(1)中,预热的温度30~50℃,预热的时间为0.5~2.0小时。
3.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(1)中,烘干的温度为70~80℃,烘干的时间为9~10小时。
4.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述乙酸乙酯的用量为2~10BV,1BV=1个柱床体积,预洗的流速为0.5~2BV/小时,浓缩的温度为60~80℃。
5.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述乙酸乙酯和乙醇的混合物中,乙酸乙酯与乙醇的体积比=50~99:50~1。
6.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述乙酸乙酯和乙醇混合物的用量为2~10BV,1BV=1个柱床体积,洗脱的流速为0.5~2BV/小时,浓缩的温度为60~90℃。
7.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯中的一种或多种。
8.根据权利要求1或2所述的从甜菊糖苷精制母液中分离Rc的方法,其特征在于,步骤(3)中,所得ST和RA的混合物通过结晶方法进一步分离ST和RA。
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