CN105861600A - 一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法 - Google Patents

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侯银臣
冯军伟
李向力
关炳峰
章建军
任钊
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/22—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group aromatic

Abstract

本发明属生物技术领域，具体公开了一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法，所述制备方法，包括以下步骤：（1）红景天超微粉碎；（2）在红景天粉中添加水、葡萄糖、蛋白胨、玉米浆配制发酵液，然后灭菌；（3）接种米曲霉和黑曲霉进行好氧发酵，然后接种粪链球菌、凝结芽孢杆菌进行厌氧发酵；（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸进行代谢调控；（5）对发酵液进行离心、喷雾干燥得到红景天提取物。本发明利用多种微生物对红景天进行发酵，并通过添加苯丙氨酸、酪氨酸进行代谢调控，通过微生物发酵，显著提高了红景天中苷和酪醇的含量。

Description

一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法
技术领域
本发明属食品生物技术领域，具体涉及一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法。
背景技术
红景天，别名：蔷薇红景天，扫罗玛布尔（藏名）等；为多年生草本植物，高10-20厘米。根粗壮，圆锥形，肉质，褐黄色，根颈部具多数须根，根茎短，粗状，圆柱形，被多数覆瓦状排列的鳞片状的叶。生长在海拔1800—2500米高寒无污染地带，其生长环境恶劣，因而具有很强的生命力和特殊的适应性。我国红景天资源大多分布在高寒地区。其有效成分主要是红景天苷及其苷元—酪醇, 二者均具有抗缺氧、抗疲劳、抗微波辐射、抗病毒、抗肿瘤等作用。红景天制品是抗高原反应的必备品。随着红景天产品广泛开发和应用，过度采挖使天然资源日趋枯竭，对高原藏区生态环境的破坏严重。因此，保护性开发野生资源, 提高红景天有效利用率显得更加重要。在其他一些植物药材中，苷是从无活性的苷元脱去糖基获得的, 可以采用酸解或酶法来水解糖基, 简便易行。与之不同, 红景天苷和苷元生成是合成代谢，提高其有效成分研究的难度较大。红景天有效成分的提高是目前较多研究者研究的方向之一，但目前尚无产业化应用。
发明内容
本发明的目的在于通过发酵法提高红景天中的有效成分，提供一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法。经检测，多菌株发酵使红景天原药材中红景天苷提高50%以上，具有很强的应用前景。
本发明所述的一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法，包括如下步骤：
（1）对红景天进行超微粉碎，粉碎粒度≥100目，得到红景天粉；
（2）在红景天粉中添加一定重量的水、葡萄糖、蛋白胨、玉米浆配制发酵液，然后121℃灭菌20分钟；
（3）接种米曲霉和黑曲霉进行好氧发酵，然后接种粪链球菌、凝结芽孢杆菌进行厌氧发酵；
（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸进行代谢调控；
（5）对发酵液进行离心，取上清液进行喷雾干燥得到红景天提取物。
所述步骤（2）中，1份重量的红景天粉添加6-8份重量的水、0.1-0.15份重量的葡萄糖、0.08-0.1份重量的蛋白胨、0.02-0.05份重量的玉米浆。
所述步骤（3）中，按菌液有效活菌数3:1～2比例接种米曲霉和黑曲霉好氧发酵36h，种子液重量为发酵液重量的1%；按菌液有效活菌数3: 2比例接种粪链球菌和凝结芽孢杆菌厌氧发酵24h，种子液重量为发酵液重量的2%。
所述步骤（4）中，发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸，使得发酵液中的苯丙氨酸与酪氨酸浓度分别保持在0.1-0.2g/L和0.15-0.3g/L。
本发明通过多种微生物对红景天原药材进行发酵, 可以显著增加红景天苷和酪醇的含量。微生物具有丰富的代谢多样性和很强的代谢能力, 高等植物体内所有的代谢途径, 在微生物中都有可能存在并且活性更强。在红景天苷合成中, 通过苯丙烷类代谢途径, 为酪醇的合成提供含苯环的碳架结构, 再由转移酶催化尿苷二磷酸葡萄糖与酪醇与合成红景天苷。本发明所用微生物能催化前体转化为红景天苷和酪醇, 可能具有与红景天中类似的部分酶及代谢途径。红景天苷和苷元的合成需要多种酶的催化, 而单一菌株很难在多个环节上同时提高中间代谢物的量。多菌株发酵中，酶系比例相对协调，形成代谢协同作用, 使红景天苷和酪醇含量大大提高。经初步测算，在发酵培养基中添加苯丙氨酸与酪氨酸，通过多菌株发酵使红景天原药材中红景天苷提高50%以上，具有很强的应用前景。
具体实施方式
以下提供本发明的一些实施例，以助于进一步理解本发明。
实施例 1
（1）对红景天进行超微粉碎，粉碎粒度120目，得到红景天粉；
（2）取1Kg重量的红景天粉，添加一定6Kg水、0.1Kg葡萄糖、0.08Kg蛋白胨、0.02Kg玉米浆配制发酵液，然后121℃灭菌20分钟；
（3）按菌液有效活菌数3:1比例接种米曲霉和黑曲霉好氧发酵36h，种子液重量为发酵液重量的1%；按菌液有效活菌数3: 2比例接种粪链球菌和凝结芽孢杆菌厌氧发酵24h，种子液重量为发酵液重量的2%。；
（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸，使得发酵液中的苯丙氨酸与酪氨酸浓度分别保持在0.1g/L和0.15g/L；
（5）对发酵液进行离心，取上清液进行喷雾干燥得到红景天提取物。
经检测，发酵后，红景天原药材中红景天苷含量提高80%。
实施例 2
（1）对红景天进行超微粉碎，粉碎粒度100目，得到红景天粉；
（2）取1Kg重量的红景天粉，添加一定7Kg水、0.13Kg葡萄糖、0.09Kg蛋白胨、0.03Kg玉米浆配制发酵液，然后121℃灭菌20分钟；
（3）按菌液有效活菌数2:1比例接种米曲霉和黑曲霉好氧发酵36h，种子液重量为发酵液重量的1%；按菌液有效活菌数3: 2比例接种粪链球菌和凝结芽孢杆菌厌氧发酵24h，种子液重量为发酵液重量的2%。；
（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸，使得发酵液中的苯丙氨酸与酪氨酸浓度分别保持在0.15g/L和0.2g/L；
（5）对发酵液进行离心，取上清液进行喷雾干燥得到红景天提取物。
经检测，发酵后，红景天原药材中红景天苷含量提高60%。
实施例 3
（1）对红景天进行超微粉碎，粉碎粒度110目，得到红景天粉；
（2）取1Kg重量的红景天粉，添加一定8Kg水、0.15Kg葡萄糖、0.1Kg蛋白胨、0.05Kg玉米浆配制发酵液，然后121℃灭菌20分钟；
（3）按菌液有效活菌数3:2比例接种米曲霉和黑曲霉好氧发酵36h，种子液重量为发酵液重量的1%；按菌液有效活菌数3: 2比例接种粪链球菌和凝结芽孢杆菌厌氧发酵24h，种子液重量为发酵液重量的2%。；
（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸，使得发酵液中的苯丙氨酸与酪氨酸浓度分别保持在0.2g/L和0.3g/L；
（5）对发酵液进行离心，取上清液进行喷雾干燥得到红景天提取物。
经检测，发酵后，红景天原药材中红景天苷含量提高90%。

Claims (3)

1.一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法，其特征是，包括以下步骤：
（1）对红景天进行超微粉碎，粉碎粒度≥100目，得到红景天粉；
（2）1份重量的红景天粉添加6-8份重量的水、0.1-0.15份重量的葡萄糖、0.08-0.1份重量的蛋白胨、0.02-0.05份重量的玉米浆，配制发酵液，然后121℃灭菌20分钟；
（3）接种米曲霉和黑曲霉进行好氧发酵，然后接种粪链球菌、凝结芽孢杆菌进行厌氧发酵；
（4）发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸进行代谢调控；
（5）对发酵液进行离心，取上清液进行喷雾干燥得到红景天提取物。
2.根据权利要求 1 所述的一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法，其特征是，所述步骤（3）中，按菌液有效活菌数3:1～2比例接种米曲霉和黑曲霉好氧发酵36h，种子液重量为发酵液重量的1%；按菌液有效活菌数3: 2比例接种粪链球菌和凝结芽孢杆菌厌氧发酵24h，种子液重量为发酵液重量的2%。
3.根据权利要求 1 所述的一种有效促进睡眠、提高免疫力的红景天提取物的制备方法，其特征是，所述步骤（4）中，发酵过程中流加苯丙氨酸与酪氨酸，使得发酵液中的苯丙氨酸与酪氨酸浓度分别保持在0.1-0.2g/L和0.15-0.3g/L。
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