CN105850739B - 一种独脚金的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:1)取独脚金的蒴果,消毒,用无菌水清洗;2)从步骤1)的蒴果中取出合子胚;3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,进行诱导培养;所述诱导培养基为含有水解酪蛋白、0.1‑0.3mg/L的6‑BA和0.03‑0.06mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.5‑6.5。本发明利用低浓度的6‑BA和IBA诱导独脚金合子胚的萌发,先形成地上部分,然后基部慢慢长出根,形成完整的植株。该方法可快速、高成活率地繁殖和培养独脚金,具有较大的商业应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培育领域,具体一种独脚金的培育方法。
背景技术
独脚金(Strigaasiatica(L.)O.Kuntze)又名独脚柑、疳积草、消米虫等,玄参科独脚金属植物,一年生半寄生草本,多分布在低海拔的荒山草地、田边等处,常寄生在禾本科等草本植物的根部。独脚金具有清热消积的功效,是传统的民间药用植物。在我国广东、广西一带被用作儿科常用药,广泛应用于治疗小儿疳积、肝火盛、肝炎、小儿腹泻、夜盲、厌食症、抗炎等,主要药效成分有黄酮类等化合物,多糖等,其多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、抗放射、抗衰老、抗疲劳、抗突变、抗血栓、抗血糖、抗血脂等重要功。目前独脚金主产于广西、广东的平原和丘陵荒坡地区,仍处于自然野生状态。由于受到长期无节制采挖、其生长地被大面积开荒,除草剂的大量使用,使独脚金生态环境恶化,分布地域不断缩小,加之寄生植物数量和种类的减少,导致原有的野生独脚金资源已经濒临枯竭。近年独脚金上市量逐渐减少,市场上往往供不应求,价格也不断上升。
合子胚是由植物的雌雄配子融合形成的合子继而发育形成的胚状体。根寄生性植物种子的胚大多发育不完全,大多没有胚根、胚轴、子叶及胚芽的分化,有的仅仅为几十个细胞组成的一团胚性细胞,其萌发需要经过胚后熟过程或休眠期。根寄生植物种子完成胚后熟后,还必须在一定条件下经过外界的诱导培养,才能萌发形成完整植株。合子胚具有高萌发率,低变异率,形态固定的优点,在植物组织培养上有着重要的应用。
目前,还没有关于独脚金的商业化种植的报道,而成活率高、繁殖快的独脚金培育技术,具有较大的商业应用前景。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种成活率高的独脚金的培育方法。
为解决上述问题,本发明所采用的技术方案如下:
一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:
1)取独脚金的蒴果,消毒,用无菌水清洗;
2)从步骤1)的蒴果中取出合子胚;
3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,进行诱导培养;
所述诱导培养基为含有水解酪蛋白、0.1-0.3mg/L的6-BA和0.03-0.06mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.5-6.5。
作为优选,步骤1)中,所述消毒的具体步骤为:采用0.1%升汞溶液消毒3-8min。
作为优选,步骤2)中,用无菌镊子将蒴果的果皮夹碎,释放合子胚。
作为优选,步骤3)中,所述诱导培养基为含有0.4-0.6g/L水解酪蛋白、0.15-0.25mg/L 6-BA和0.04-0.06mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.8±0.1。
作为优选,步骤3)中,所述诱导培养基为含有0.5g/L水解酪蛋白、0.2mg/L6-BA和0.05mg/L IBA的MS培养基。
作为优选,步骤3)中,进行诱导培养的条件为:采用1500-2500Lx光强的人工光照,培育温度为20-35℃。
作为优选,步骤3)中,进行诱导培养的条件为:采用2000Lx光强的人工光照,培育温度为28±2℃。
作为优选,步骤3)后,培育得到的植株在株高为10-20cm时进行移栽。
相比现有技术,本发明的有益效果在于:
本发明提供了一种独脚金的培育方法,其中利用低浓度的6-BA和IBA诱导独脚金合子胚的萌发,先形成地上部分,然后基部慢慢长出根,形成完整的植株。该方法可快速、高成活率地繁殖和培养独脚金,具有较大的商业应用前景。
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
附图说明
图1为实施例1诱导培养3-4周后的生长示意图;
图2为实施例1诱导培养7-8周后的生长示意图;
图3为实施例1诱导培养10-11周后的生长示意图。
具体实施方式
本发明提供一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:
1)取独脚金的蒴果,消毒,用无菌水清洗;
2)从步骤1)的蒴果中取出合子胚;
3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,进行诱导培养;
所述诱导培养基为含有水解酪蛋白、0.1-0.3mg/L的6-BA和0.03-0.06mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.5-6.5。
本发明利用低浓度的6-BA和IBA诱导独脚金合子胚的萌发,先形成地上部分,然后基部慢慢长出根,形成完整的植株。该方法可快速、高成活率地繁殖和培养独脚金,具有较大的商业应用前景。
以下具体实施例中,如未特殊说明,所涉及的装置或仪器均可通过市售途径获得。
实施例1
一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:
1)取独脚金的不成熟蒴果,将蒴果放入0.1%升汞溶液消毒4min,用无菌水清洗三次,每次2min;本步骤中,所述不成熟蒴果为形态饱满但种皮仍为绿色的蒴果;
2)在超次工作台上,用无菌镊子将步骤1)的蒴果的果皮夹碎,释放合子胚;
3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,在光强为2000Lx的人工光照下,于28±2℃进行诱导培养;
所述诱导培养基为含有0.5g/L水解酪蛋白、0.2mg/L的6-BA和0.05mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.8±0.1。
本实施例1培养的独脚金发育良好,图1为实施例1诱导培养3周后的生长示意图,从图1中可明显看出,合子胚已部分发育;图2为实施例1诱导培养7周后的生长示意图,从图2中可看出,独脚金的地上部分已经大体形成;图3为实施例1诱导培养10周后的生长示意图,由图3可看出,独脚金已经长生繁茂的根系。
实施例2
一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:
1)取独脚金的成熟蒴果,将蒴果放入0.1%升汞溶液消毒6min,用无菌水清洗三次,每次3min;本步骤中,所述成熟蒴果为形态饱满种皮为棕黄色的即将裂开的蒴果;
2)在超次工作台上,用无菌镊子将步骤1)的蒴果的果皮夹碎,释放合子胚;
3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,在光强为1500Lx的人工光照下,于20℃进行诱导培养;
所述诱导培养基为含有0.8g/L水解酪蛋白、0.1mg/L的6-BA和0.06mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.5-6.0。
本实施例的独脚金在诱导培养11周后长出完整的植株。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式,不能以此来限定本发明保护的范围,本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (1)
1.一种独脚金的培育方法,包括以下步骤:
1)取独脚金的不成熟蒴果,将蒴果放入0.1%升汞溶液消毒4min,用无菌水清洗三次,每次2min;本步骤中,所述不成熟蒴果为形态饱满但种皮仍为绿色的蒴果;
2)在超净工作台上,用无菌镊子将步骤1)的蒴果的果皮夹碎,释放合子胚;
3)将步骤2)的合子胚接种至诱导培养基,在光强为2000Lx的人工光照下,于28±2℃进行诱导培养;
所述诱导培养基为含有0.5g/L水解酪蛋白、0.2mg/L的6-BA和0.05mg/L IBA的MS培养基,所述诱导培养基的pH为5.8±0.1;
4)诱导培养后,培育得到的植株在株高为10-20cm时进行移栽。
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