CN105837668A - 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法 - Google Patents

一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105837668A
CN105837668A CN201610174605.1A CN201610174605A CN105837668A CN 105837668 A CN105837668 A CN 105837668A CN 201610174605 A CN201610174605 A CN 201610174605A CN 105837668 A CN105837668 A CN 105837668A
Authority
CN
China
Prior art keywords
preparation
glycosylation
herba silybi
silybi mariani
silybum marianum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201610174605.1A
Other languages
English (en)
Inventor
岳静
柏杰麟
闫铭
李娇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenyang University of Chemical Technology
Original Assignee
Shenyang University of Chemical Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenyang University of Chemical Technology filed Critical Shenyang University of Chemical Technology
Priority to CN201610174605.1A priority Critical patent/CN105837668A/zh
Publication of CN105837668A publication Critical patent/CN105837668A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，涉及一种蛋白的制备方法，所述方法包括以下过程：取水飞蓟分离蛋白，溶于去离子水，使其质量浓度为1.2g/100mL；用0.1mol/L NaOH调（1）的pH值至11，然后加热到50℃，磁力搅拌30min，于室温下冷却；按配比加入糖，搅拌30min后用0.1mol/L HCl溶液调体系pH值，直至产生沉淀；再磁力搅拌30min后，离心，去上清的沉淀进行冷冻干燥，得到水飞蓟蛋白与糖混合物冻干粉；将冻干粉置于干燥器内，干燥器内装有饱和KI溶液，反应后取样，即为水飞蓟蛋白糖基化复合物。本发明具有操作简单、反应条件温和，蛋白质与糖接枝效果明显等特点。该发明可以增加水飞蓟蛋白质的附加值、提高资源综合利用率、减少浪费。

Description

一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法
技术领域
本发明涉及一种蛋白质制备方法，特别是涉及一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法。
背景技术
水飞蓟，Silybum marianum(L.)Gaertn，别名水飞雉、奶蓟，为菊科一至二年生草本植物。水飞蓟蛋白是一种优质植物蛋白，不仅蛋白质含量高且氨基酸种类齐全，具有较高的营养价值，其效价介于大豆蛋白和小麦蛋白之间。研究中发现，水飞蓟蛋白质的部分功能性质表现不是特别优秀，如溶解性、起泡性等。基于此点，拟对水飞蓟蛋白质进行改性，以期改善其部分功能性质，使其更好地应用与推广。
糖基化改性蛋白质是基于美拉德反应，将碳水化合物以共价键与蛋白质分子上的a-或ɛ-氨基相连接而形成糖基化蛋白的化学反应，属于化学改性范畴，但反应中不需添加任何化学试剂，仅加热反应就能自发进行，属于“绿色加工工艺”。蛋白质-糖的接枝物对于外部条件具有较高的稳定性，与蛋白质-糖非共价复合物相比，接枝物不受热或pH值的变化而破坏。因糖链的引入，整个分子的功能性质得到显著提高。
本发明主要是对水飞蓟分离蛋白进行糖基化改性，通过测定接枝度和褐变指数，研究物料比、反应时间、反应温度对糖基化改性的影响，进而用响应面法优化制备糖基化水飞蓟分离蛋白的工艺。
发明内容
本发明的目的在于提供一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，该方法通过单因素及响应面实验，优化糖基化水飞蓟分离蛋白的制备工艺；该制备方法为干法糖基化制备工艺，操作简单、反应条件温和，蛋白质与糖接枝效果明显。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，所述方法包括以下过程：
（1）取水飞蓟分离蛋白，溶于去离子水，使其质量浓度为1.2g/100mL；
（2）用0.1mol/L NaOH调（1）的pH值至11，然后加热到50℃，磁力搅拌30min，于室温下冷却；
（3）按配比加入糖，搅拌30min后用0.1mol/L HCl溶液调体系pH值，直至产生沉淀；
（4）再磁力搅拌30min后，离心，去上清的沉淀进行冷冻干燥，得到水飞蓟蛋白与糖混合物冻干粉；
（5）将冻干粉置于干燥器内，干燥器内装有饱和KI溶液，反应后取样，即为水飞蓟蛋白糖基化复合物。
所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，所述步骤（1）中的水飞蓟分离蛋白为纯化后产品。
所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，所述步骤（3）中糖为单糖、双糖和多糖中的一种或一种以上。
所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，所述单糖为葡萄糖、果糖或半乳糖；双糖为乳糖；多糖为葡聚糖、卡拉胶和可溶性淀粉中的一种或一种以上。
所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，步骤（4）中的离心条件为低温（4℃）冷冻离心4000r/min，离心20min。
所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，提取过程中浸泡原料用水、缓冲液的配置用水均为去离子水。
本发明的优点与效果是：
1.本发明对水飞蓟分离蛋白进行糖基化改性，以接枝度和褐变指数为指标，研究物料比、反应时间、反应温度等因素对糖基化改性的影响，进而用响应面法优化制备糖基化水飞蓟分离蛋白的工艺。
2.本发明方法，具有操作简单、反应条件温和，蛋白质与糖接枝效果明显等特点。该发明可以增加水飞蓟蛋白质的附加值、提高资源综合利用率、减少浪费。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细说明。
一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，采用以下步骤制备 ：
（1）取水飞蓟蛋白，溶于去离子水，使其质量浓度为1.2g/100mL。
（2）用0.1mol/L NaOH调（1）的pH值至11，然后加热到50℃，磁力搅拌30min，于室温下冷却。
（3）按配比加入糖，搅拌30min后用0.1mol/L HCl溶液调体系pH值，直至产生沉淀。
（4）再磁力搅拌30min后，离心，去上清的沉淀进行冷冻干燥，得到水飞蓟蛋白与糖混合物冻干粉。
（5）将冻干粉置于干燥器内（装有饱和KI溶液），反应一段时间后取样，即为水飞蓟蛋白糖基化复合物。
步骤（1）中所述的水飞蓟分离蛋白为纯化后产品。
步骤（3）中所述的糖为单糖、双糖和多糖中的一种或一种以上。
单糖为葡萄糖、果糖或半乳糖；所述双糖为乳糖；所述多糖为葡聚糖、卡拉胶和可溶性淀粉中的一种或一种以上。
步骤（4）中所述的离心条件为低温（4℃）冷冻离心4000r/min，离心20min。
提取过程中浸泡原料用水、缓冲液的配置用水均为去离子水。
本发明可以用于按上述方法制备糖基化水飞蓟分离蛋白，也可用于提供上述糖基化水飞蓟蛋白的应用领域。
以下实施例中所用糖类物质为葡聚糖。
实施例1
将温度定为60℃、物料质量比（水飞蓟蛋白/葡聚糖）为1:3、反应时间为30h的条件下，按照权利要求1-7中所述方法制备糖基化水飞蓟分离蛋白。所得产品外观色泽较好，复合物接枝度最高。
实施例2
结合单因素试验，通过响应面分析，得到了糖基化水飞蓟蛋白优化制备条件为：物料质量比（水飞蓟蛋白/葡聚糖）为1:3.02、反应时间42.98h、反应温度59.82℃，在此条件下所得的糖基化复合物接枝度为42.55%，褐变指数为0.931。

Claims (6)

1.一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下过程：
（1）取水飞蓟分离蛋白，溶于去离子水，使其质量浓度为1.2g/100mL；
（2）用0.1mol/L NaOH调（1）的pH值至11，然后加热到50℃，磁力搅拌30min，于室温下冷却；
（3）按配比加入糖，搅拌30min后用0.1mol/L HCl溶液调体系pH值，直至产生沉淀；
（4）再磁力搅拌30min后，离心，去上清的沉淀进行冷冻干燥，得到水飞蓟蛋白与糖混合物冻干粉；
（5）将冻干粉置于干燥器内，干燥器内装有饱和KI溶液，反应后取样，即为水飞蓟蛋白糖基化复合物。
2.根据权利要求1所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的水飞蓟分离蛋白为纯化后产品。
3.根据权利要求1所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中糖为单糖、双糖和多糖中的一种或一种以上。
4.根据权利要求1所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述单糖为葡萄糖、果糖或半乳糖；双糖为乳糖；多糖为葡聚糖、卡拉胶和可溶性淀粉中的一种或一种以上。
5.根据权利要求1所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，步骤（4）中的离心条件为低温（4℃）冷冻离心4000r/min，离心20min。
6.根据权利要求1所述的一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法，其特征在于，提取过程中浸泡原料用水、缓冲液的配置用水均为去离子水。
CN201610174605.1A 2016-03-25 2016-03-25 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法 Withdrawn CN105837668A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610174605.1A CN105837668A (zh) 2016-03-25 2016-03-25 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610174605.1A CN105837668A (zh) 2016-03-25 2016-03-25 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105837668A true CN105837668A (zh) 2016-08-10

Family

ID=56583314

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610174605.1A Withdrawn CN105837668A (zh) 2016-03-25 2016-03-25 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105837668A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110679724A (zh) * 2019-09-16 2020-01-14 天津科技大学 一种易于吸收的糖化麦谷蛋白的制备方法
CN110720544A (zh) * 2019-09-16 2020-01-24 天津科技大学 一种糖基化麦谷蛋白的制备方法
CN111171110A (zh) * 2020-02-26 2020-05-19 大连理工大学 一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法
CN111269285A (zh) * 2020-02-26 2020-06-12 大连理工大学 一种从水飞蓟籽仁中提取植物蛋白的方法
CN112359085A (zh) * 2020-11-06 2021-02-12 江苏大学 一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104621339A (zh) * 2015-01-23 2015-05-20 沈阳化工大学 一种提取水飞蓟分离蛋白的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104621339A (zh) * 2015-01-23 2015-05-20 沈阳化工大学 一种提取水飞蓟分离蛋白的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
那治国 等: "米糠谷蛋白干法糖基化改性的研究", 《食品科学》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110679724A (zh) * 2019-09-16 2020-01-14 天津科技大学 一种易于吸收的糖化麦谷蛋白的制备方法
CN110720544A (zh) * 2019-09-16 2020-01-24 天津科技大学 一种糖基化麦谷蛋白的制备方法
CN111171110A (zh) * 2020-02-26 2020-05-19 大连理工大学 一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法
CN111269285A (zh) * 2020-02-26 2020-06-12 大连理工大学 一种从水飞蓟籽仁中提取植物蛋白的方法
CN111171110B (zh) * 2020-02-26 2022-09-16 大连理工大学 一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法
CN112359085A (zh) * 2020-11-06 2021-02-12 江苏大学 一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105837668A (zh) 一种糖基化水飞蓟分离蛋白的制备方法
CN102907558B (zh) 一种海参多肽的加工方法
US4042575A (en) Extraction of glycoproteins and sialic acid from whey
CN103931874B (zh) 一种糖基化与酶解改性复合制备低敏性大豆蛋白粉的方法
DK148358B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af n-acetylneuraminsyre ud fra maelkeserum fra oste- og/eller caseinfremstilling
CN101654478A (zh) 一种大豆蛋白的糖基化接枝改性方法
CN105725170A (zh) 一种甜菜果胶和蛋白质复合乳化剂及其制备方法
CN104877035B (zh) 一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法
CN107232388A (zh) 一种提高核桃蛋白加工特性的制备方法
CN104004812A (zh) 一种米渣蛋白的糖基化改性方法
CN107637768A (zh) 一种红豆薏米粉的加工方法
CN1255455C (zh) 一种大豆蛋白－糖接枝改性的方法
CN105475608A (zh) 挤压-超声联用制备糖基化玉米醇溶蛋白的方法、产品及应用
CN104757138B (zh) 一种以益生元和乳清浓缩蛋白为壁材的微胶囊化乳清蛋白水解物的制备及其方法
CN101361532B (zh) 一种复合蛋白起泡剂的制备方法
CN104686809B (zh) 一种甘草多糖‑大豆分离蛋白偶合物及其制备方法和应用
CN111333746A (zh) 一种猴头菇多糖的提取方法
CN104855671A (zh) 一种复合改性牛血清白蛋白乳化性的方法
Cavada et al. cDNA cloning and 1.75 Å crystal structure determination of PPL2, an endochitinase and N‐acetylglucosamine‐binding hemagglutinin from Parkia platycephala seeds
Lin et al. Protein Hydrolysate from Brewer’s Spent Grain and its Inhibitory Ability of α-glucosidase
CN104745657B (zh) 瓜尔胶溶液制备低聚半乳甘露糖酶解液的方法
CN112679752A (zh) 一种基于低共熔溶剂的糖基化蛋白制备方法
CN103833868A (zh) 一种巨寡糖的快速制备方法
Dawson et al. Two pectic polysaccharides from kiwifruit cell walls
RU2345543C1 (ru) Способ получения молочно-растительного экстракта из клубней якона

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20160810

WW01 Invention patent application withdrawn after publication