CN105733945A - 一种用于提取虾青素菌液的制备方法 - Google Patents

一种用于提取虾青素菌液的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种用于提取虾青素菌液的制备方法，属于虾青素菌液制备技术领域。本发明首先利用雨生红球藻，酒糟以及处理过的虾壳进行发酵，收集发酵液，再将收集的发酵液与诱变剂丹参酮和光引发剂金丝桃素混合，并置于X射线下进行光照，从而使菌液得以改性变异。本发明制备的用于提取虾青素菌液无毒，在生产过程及产品中不存在安全隐患；且有利于提高虾青素的提取率，提高了10～15％。

Description

一种用于提取虾青素菌液的制备方法
技术领域
本发明涉及一种用于提取虾青素菌液的制备方法，属于虾青素菌液制备技术领域。
背景技术
虾青素是目前具有最强抗氧化活性的类胡萝卜素，其抗氧化活性是维生素E、β～胡萝卜素的500倍以上。虾青素还具有抗肿瘤、降血脂、延缓衰老等功能，在食品、化妆品以及其他行业具有广泛用途，市场前景广阔。同时，作为脂溶性的鲜红色色素，在食品工业中可为多种食品着色，增加食品的色泽美感；用于观赏性鱼虾的养殖中，也可增加色泽，增强观感，提高其经济价值。
目前，用于虾青素提取的方法主要有溶剂浸提法。溶剂浸提法中主要溶剂有正己烷、氯仿、二氯甲烷、丙酮等，一般采用1～2种溶剂进行浸提。但这些溶剂大部分是价格较高的有毒试剂，在生产过程中及产品中都存在安全隐患，同时存在提取效率低的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对溶剂浸提法提取虾青素时，采用的溶剂是价格较高的有毒试剂，在生产过程中及产品中存在安全隐患的问题，提供了一种利用雨生红球藻，酒糟以及处理过的虾壳进行发酵，收集发酵液，再将收集的发酵液与诱变剂丹参酮和光引发剂金丝桃素混合，并置于X射线下进行光照，从而使菌液得以改性变异的方法。本发明制备的用于提取虾青素菌液无毒，制备成本低，且用来提取虾青素时，提取效率高。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
（1）按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存4～6h，备用；
（2）按重量份数计，取35～55份蛋白胨、20～25份琼脂、10～15份酵母浸膏、3～6份亮氨酸、10～15份豆粕、1～2份硫酸氢二钾及1～2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.0～6.5，随后将混合物移至高温杀菌机中，在150～180℃下，灭菌20～25min后得发酵营养基；
（3）将步骤（1）保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的50～60％，混合均匀，控制温度为35～40℃，通气量为0.6～0.8，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；
（4）待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在2000～3000r/min下离心分离10～15min，收集上清液，即可得提取菌液基体；
（5）将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至7.5～8.0，再分别向其中加入提取菌液基体质量2～4％的丹参酮及提取菌液基体质量0.5～1.2％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射40～50min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。
本发明的应用方法：称取100～200g雨生红球藻或虾壳，将其置于质量分数为25％盐酸溶液中浸泡20～30min，待浸泡结束后，过滤，用去离子水洗涤过滤物pH至7.0，将洗涤后的过滤物与上述制备的用于提取虾青素菌液按固液比1:2进行搅拌混合40～45min后，过滤，收集过滤液，将过滤液旋转蒸发至原有体积的1/2，在130℃下灭菌，即可得到虾青素，经检测，本发明制备的用于提取虾青素菌液有利于提高虾青素的提取率，提高了10～15％，提取率达到98％以上。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明制备的用于提取虾青素菌液无毒，在生产过程及产品中不存在安全隐患；
（2）本发明制备的用于提取虾青素菌液有利于提高虾青素的提取率，提高了10～15％；
（3）本发明制备步骤简单，所需成本低。
具体实施方式
首先按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存4～6h，备用；再按重量份数计，取35～55份蛋白胨、20～25份琼脂、10～15份酵母浸膏、3～6份亮氨酸、10～15份豆粕、1～2份硫酸氢二钾及1～2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.0～6.5，随后将混合物移至高温杀菌机中，在150～180℃下，灭菌20～25min后得发酵营养基；接着将保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的50～60％，混合均匀，控制温度为35～40℃，通气量为0.6～0.8，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在2000～3000r/min下离心分离10～15min，收集上清液，即可得提取菌液基体；最后将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至7.5～8.0，再分别向其中加入提取菌液基体质量2～4％的丹参酮及提取菌液基体质量0.5～1.2％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射40～50min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。
实例1
首先按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存6h，备用；再按重量份数计，取55份蛋白胨、20份琼脂、10份酵母浸膏、3份亮氨酸、10份豆粕、1份硫酸氢二钾及1份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.5，随后将混合物移至高温杀菌机中，在180℃下，灭菌25min后得发酵营养基；接着将保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的60％，混合均匀，控制温度为40℃，通气量为0.8，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在3000r/min下离心分离15min，收集上清液，即可得提取菌液基体；最后将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至8.0，再分别向其中加入提取菌液基体质量4％的丹参酮及提取菌液基体质量1.2％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射50min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。
称取200g雨生红球藻，将其置于质量分数为25％盐酸溶液中浸泡30min，待浸泡结束后，过滤，用去离子水洗涤过滤物pH至7.0，将洗涤后的过滤物与上述制备的用于提取虾青素菌液按固液比1:2进行搅拌混合45min后，过滤，收集过滤液，将过滤液旋转蒸发至原有体积的1/2，在130℃下灭菌，即可得到虾青素，经检测，本发明制备的用于提取虾青素菌液有利于提高虾青素的提取率，提高了12％，提取率达到98.7％。
实例2
首先按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存4h，备用；再按重量份数计，取35份蛋白胨、25份琼脂、15份酵母浸膏、6份亮氨酸、15份豆粕、2份硫酸氢二钾及2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.0，随后将混合物移至高温杀菌机中，在150℃下，灭菌20min后得发酵营养基；接着将保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的50％，混合均匀，控制温度为35℃，通气量为0.6，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在2000r/min下离心分离10min，收集上清液，即可得提取菌液基体；最后将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至7.5，再分别向其中加入提取菌液基体质量2％的丹参酮及提取菌液基体质量0.5％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射40min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。称取100g虾壳，将其置于质量分数为25％盐酸溶液中浸泡20min，待浸泡结束后，过滤，用去离子水洗涤过滤物pH至7.0，将洗涤后的过滤物与上述制备的用于提取虾青素菌液按固液比1:2进行搅拌混合40min后，过滤，收集过滤液，将过滤液旋转蒸发至原有体积的1/2，在130℃下灭菌，即可得到虾青素，经检测，本发明制备的用于提取虾青素菌液有利于提高虾青素的提取率，提高了10％，提取率达到98.6％。
实例3
首先按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存5h，备用；再按重量份数计，取40份蛋白胨、20份琼脂、15份酵母浸膏、6份亮氨酸、15份豆粕、2份硫酸氢二钾及2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.2，随后将混合物移至高温杀菌机中，在170℃下，灭菌22min后得发酵营养基；接着将保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的55％，混合均匀，控制温度为37℃，通气量为0.7，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在2500r/min下离心分离12min，收集上清液，即可得提取菌液基体；最后将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至7.7，再分别向其中加入提取菌液基体质量3％的丹参酮及提取菌液基体质量0.7％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射45min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。称取150g雨生红球藻，将其置于质量分数为25％盐酸溶液中浸泡25min，待浸泡结束后，过滤，用去离子水洗涤过滤物pH至7.0，将洗涤后的过滤物与上述制备的用于提取虾青素菌液按固液比1:2进行搅拌混合42min后，过滤，收集过滤液，将过滤液旋转蒸发至原有体积的1/2，在130℃下灭菌，即可得到虾青素，经检测，本发明制备的用于提取虾青素菌液有利于提高虾青素的提取率，提高了15％，提取率达到99％。

Claims (1)

1.一种用于提取虾青素菌液的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）按质量比3:1，将雨生红球藻和酒糟混合均匀，得填充物，再取虾壳，用水将其表面清洗干净，去除虾壳内部肉渣，按质量比1:2，将填充物填充至虾壳内部，再使用半透膜将虾壳缝隙密封，将密封后的虾壳放置于20℃的冰箱中，保存4～6h，备用；
（2）按重量份数计，取35～55份蛋白胨、20～25份琼脂、10～15份酵母浸膏、3～6份亮氨酸、10～15份豆粕、1～2份硫酸氢二钾及1～2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，再使用质量分数为10％磷酸溶液调节pH至6.0～6.5，随后将混合物移至高温杀菌机中，在150～180℃下，灭菌20～25min后得发酵营养基；
（3）将步骤（1）保存的虾壳与上述制备的发酵营养基按质量比1:3进行混合均匀后，将混合物放入玻璃发酵罐中，加入量为玻璃发酵罐容积的50～60％，混合均匀，控制温度为35～40℃，通气量为0.6～0.8，以120r/min进行搅拌发酵，直至虾壳完全被菌解；
（4）待上述发酵结束后停止发酵，进行过滤收集发酵液，再将发酵液放置于离心机中，在2000～3000r/min下离心分离10～15min，收集上清液，即可得提取菌液基体；
（5）将上述所得的提取菌液基体放入容器中，使用质量分数为10％氢氧化钠溶液调节pH至7.5～8.0，再分别向其中加入提取菌液基体质量2～4％的丹参酮及提取菌液基体质量0.5～1.2％的金丝桃素，搅拌均匀，再将容器移至X射线下，照射40～50min后，进行过滤，收集过滤液，即可得到提取虾青素菌液。
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