CN105724830B - 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105724830B
CN105724830B CN201610104835.0A CN201610104835A CN105724830B CN 105724830 B CN105724830 B CN 105724830B CN 201610104835 A CN201610104835 A CN 201610104835A CN 105724830 B CN105724830 B CN 105724830B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
phagostimulant
feed
fishing
bacillus licheniformis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610104835.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105724830A (zh
Inventor
孙存鑫
张定东
刘文斌
徐维娜
蒋广震
李向飞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Agricultural University
Original Assignee
Nanjing Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Agricultural University filed Critical Nanjing Agricultural University
Priority to CN201610104835.0A priority Critical patent/CN105724830B/zh
Publication of CN105724830A publication Critical patent/CN105724830A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105724830B publication Critical patent/CN105724830B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

本发明公开了一种渔用复合型诱食剂,它包括如下重量份数的组分:甜菜碱15~30份、二甲基‑β‑丙酸噻亭2~6份、5’‑肌苷酸二钠2~6份、牛磺酸20~30份、鱿鱼膏30~50份和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物10~20份。本发明还公开了该渔用复合型诱食剂的制备方法与应用。与现有技术相比,本发明可明显提高鱼类、甲壳类和龟鳖类的摄食量、增重率和饲料转化率,并能显著增强免疫机能和肠道消化酶活性,促进营养物质的吸收和利用。同时,本发明所利用的原料来源稳定、价格低廉且其制作工艺简单,有利于降低生产成本、减少饲料浪费和保护环境。

Description

一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于饲料添加剂领域,具体涉及一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用。
背景技术
随着世界范围内的渔业捕捞量下降,水产养殖业已经成为人类水产品需求的主要来源,据世界粮油组织(2009)统计,水产养殖业所供应水产品的量正以每年9%的速度增长,其已经成为增长最快的食品行业。鱼粉作为渔用饲料行业中不可或缺的优质蛋白源,因其蛋白质含量高、适口性好、氨基酸组成齐全且均衡和未知促生长因子丰富等特点在水产养殖业中被广泛使用,但由于严格的供应和不断上升的需求导致其价格飞涨,以及过度利用自然资源所带来的环境压力迫使水产养殖业不得不开发鱼粉的可持续替代品。
植物蛋白源因其来源广泛、质量稳定、价格便宜等优点在渔用饲料行业中被广泛利用。然而,由于植物蛋白源普遍存在缺乏必需氨基酸(特别是赖氨酸和蛋氨酸)、存在抗营养因子和适口性差等缺点,高比例替代鱼粉时经常会导致水产动物(特别是肉食性水产动物)出现摄食率低、消化率下降和肠道损伤等问题。因此,为弥补植物蛋白源的不足,针对性地开发一种具有广泛诱食活性并具有肠道保健作用的高效诱食剂迫在眉睫。
诱食剂,狭义上来说是指动物对潜在捕获距离、方向明确定位的物质,广义上来说能促进摄食的物质都称为诱食剂。迄今,甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和鱿鱼膏在水产养殖中已有促摄食作用的报道,然而,根据不同种类诱食剂的协同作用将这几种诱食剂进行科学配比并添加具有保健作用的果寡糖和地衣芽孢杆菌配伍使用尚未见报道。因此,本发明研制出一种广泛、高效并能有效促进营养物质消化吸收作用的诱食剂对水产养殖业的可持续发展和自然资源的可持续利用具有重要意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种渔用复合型诱食剂,以解决现有技术存在的摄食率低、消化率下降和肠道损伤等问题。
本发明还要解决的技术问题是提供上述渔用复合型诱食剂的制备方法。
本发明最后要解决的技术问题是提供上述渔用复合型诱食剂的应用。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
一种渔用复合型诱食剂,它包括如下重量份数的组分:
Figure BDA0000929073900000021
其中,优选如下重量份数的组分:
Figure BDA0000929073900000022
其中,所述的果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物中,果寡糖与地衣芽孢杆菌的质量比为1.5~3:1~2;其中,地衣芽孢杆菌的菌落数为5×109~7×109CFU g-1,果寡糖的纯度≧95%(质量分数),其中,果寡糖购自日本明治制果株式会社,地衣芽孢杆菌购自上海碧莱清生物科技有限公司。。
上述渔用复合型诱食剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)取配方量的甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭、5’-肌苷酸二钠、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物混合均匀后备用;
(2)向步骤(1)中所得的混合体系中加入配方量的鱿鱼膏,混合均匀后备用。
步骤(1)中,甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭、5’-肌苷酸二钠、牛磺酸、果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物在混合前均在65℃下干燥至含水量低于12wt%,再经超微粉碎后过180~200目筛。
上述渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂在水产养殖中的应用也在本发明的保护范围之内。
其中,所述水产包括鱼、虾、蟹和龟鳖等。
其中,所述的渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比为0.5~1%。
其中,所述的渔用复合型诱食剂的添加量与养殖动物种类和使用的周期相关。使用周期在8周以上时,添加量为0.5%;使用周期在4~8周时,添加量为0.5~1%;使用周期在4周以内时,添加量为1%。
上述渔用复合型诱食剂在制备提高水产动物摄食量、生产性能和免疫力以及改善肠道健康的饲料中应用也在本发明的保护范围之内。
有益效果:
本发明的渔用复合诱食剂中所包含的甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和鱿鱼膏对水产动物的嗅觉和味觉具有强烈的刺激作用;其中,鱿鱼膏含有多种氨基酸、核苷酸和风味物质,二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)和牛磺酸具有很强的生理诱食机制,甜菜碱与本发明的其余各组分具有协同作用。同时,本发明加入的果寡糖和地衣芽孢杆菌配合物对增强水产动物免疫机能、促进营养物质消化吸收和维持肠道健康具有显著作用。本发明对以上各组分进行科学配伍,与现有技术相比,具有以下优点:
1、本发明从目前水产养殖业中常用的诱食剂和微生态制剂中筛选出甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸、鱿鱼膏以及果寡糖与地衣芽孢杆菌配合物进行科学配比,作为饲料添加剂添加于渔用配合饲料中,添加量仅为0.5%~1%,使用量小,且效果明显优于单一组分和其他复配组合物;
2、通过团头鲂、中华鳖和中华绒螯蟹的养殖实验表明,饲喂本发明的诱食剂可明显提高摄食率。有利于降低生产成本、减少饲料浪费和保护环境;
3、本发明还显著提高了中华鳖的增重率和饲料转化率,增强了中华鳖免疫机能和肠道消化酶活性,促进了营养物质的吸收和利用;
4、本发明所利用的原料来源稳定、价格低廉且其制作工艺简单。
附图说明
图1为实施例4中渔用复合诱食剂及其各组分效果对比图;
图2为实施例5中中华鳖稚鳖肠道绒毛长度实验结果对比图;
图3为实施例6中渔用复合诱食剂对团头鲂的诱食效果示意图;
图4为实施例7中渔用复合诱食剂对中华绒螯蟹的诱食效果示意图。
具体实施方式
根据下述实施例,可以更好地理解本发明。然而,本领域的技术人员容易理解,实施例所描述的内容仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
材料及其份数:甜菜碱150g、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)50g、5’-肌苷酸二钠(IMP)50g、牛磺酸200g、鱿鱼膏350g和果寡糖与地衣芽孢杆菌配合物200g。
制备方法:
(1)将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物均在65℃下干燥处理至含水量低于12%,再经超微粉碎至过180~200目筛网后备用;
(2)将步骤(1)处理后的将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物混合均匀后备用;
(3)向步骤(2)中所得的混合体系中加入鱿鱼膏,混合均匀后得到1kg渔用复合型诱食剂。
实施例2
材料及其份数:甜菜碱100g、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)70g、5’-肌苷酸二钠(IMP)80g、牛磺酸200g、鱿鱼膏400g、果寡糖与地衣芽孢杆菌混合物150g。
制备方法:
(1)将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物均在65℃下干燥处理至含水量低于12%,再经超微粉碎至过180~200目筛网后备用;
(2)将步骤(1)处理后的将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物混合均匀后备用;
(3)向步骤(2)中所得的混合体系中加入鱿鱼膏,混合均匀后得到1kg渔用复合型诱食剂。
实施例3
材料及其份数:甜菜碱200g、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)90g、5’-肌苷酸二钠(IMP)70g、牛磺酸100g、鱿鱼膏440g和果寡糖与地衣芽孢杆菌混合物100g。
制备方法:
(1)将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物均在65℃下干燥处理至含水量低于12%,再经超微粉碎至过180~200目筛网后备用;
(2)将步骤(1)处理后的将甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)、5’-肌苷酸二钠(IMP)、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物混合均匀后备用;
(3)向步骤(2)中所得的混合体系中加入鱿鱼膏,混合均匀后得到1kg渔用复合型诱食剂。
实施例4:渔用复合诱食剂与其他诱食剂效果比较
室外养殖试验在南京市浦口区南京农业大学水产教学科研基地进行,养殖设施为水泥池(规格:2.0m×2.0m×0.8m),实验动物为中华鳖稚鳖。经过暂养后,将1200只体格健壮规格整齐的中华鳖随机分入24个水泥池,每个水泥池50只。养殖试验共设6组,第1组为对照组,2到6组为实验组,每组4个重复。对照组饲喂中华鳖商品配合饲料,实验组饲喂对照组饲料中分别加入实施例1所述诱食剂、L-氨基酸混合物、5’-核苷酸混合物、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)和甜菜碱。所有饲料由南京帅丰饲料有限公司生产。通过为期8周的养殖试验,统计各组摄食量,试验结果见图1。
由图1可知,在商品日粮中添加本发明的一种渔用复合诱食剂可显著提高中华鳖的摄食量,且本发明与其他单一诱食剂或组合物相比具有显著优势(P<0.05)。
实施例5:渔用复合诱食剂在中华鳖配合饲料中的应用
室外养殖试验在南京市浦口区南京农业大学水产教学科研基地进行,养殖设施为水泥池(规格:2.0m×2.0m×0.8m),实验动物为中华鳖稚鳖。经过暂养后,将900只体格健壮规格整齐的中华鳖(初重:30.2±0.4g)随机分入18个水泥池,每个水泥池50只。养殖试验共包括3组:对照组、诱食剂1组和诱食剂2组,每组6个重复。所用饲料见表1:对照组投喂低鱼粉商品饲料(饲料营养组分:粗蛋白>46,粗脂肪>6.5,糖类>25,鱼粉用量占饲料质量份24%);诱食剂1组投喂的饲料为对照组饲料中添加0.5%实施例1中制备的复合诱食剂;诱食剂2组投喂的饲料为对照组饲料中添加0.5%实施例2中制备的复合诱食剂。所有饲料由南京帅丰饲料有限公司生产。养殖时间12周,期间观察记录实验动物摄食和死亡情况。养殖实验结束后,采集样品进行分析测定,实验结果见表2、3、4和图2。
表1试验用中华鳖饲料配方
Figure BDA0000929073900000061
表2各组生长性能实验结果
Figure BDA0000929073900000062
经过12周的室外养殖,中华鳖稚鳖的生产性能如表2所示。各组数据以平均值±标准误表示,下同。由表2可知,在对照组饲料中分别添加实施例1和实施例2中所述的复合诱食剂显著提高了中华鳖稚鳖的增重率和摄食率,降低了饵料系数(P<0.05)。其结果表明,本发明的一种渔用复合诱食剂能显著降低生产成本,减少饲料浪费,有利于保护环境。
表3各组肠道消化酶活性实验结果
Figure BDA0000929073900000071
经过12周的室外养殖,中华鳖稚鳖的肠道消化能力如表3所示。由表3可知,诱食剂组的蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05)。其结果表明,本发明的一种复合渔用诱食剂可显著提高水产动物对低鱼粉饲料的蛋白利用能力,促进其消化吸收。
表4血浆免疫和抗氧化指标实验结果
Figure BDA0000929073900000072
经过12周的室外养殖,中华鳖稚鳖的免疫机能如表4所示。由表4可知,在对照组饲料中加入本发明的诱食剂显著提高了中华鳖稚鳖血浆补体C3和补体C4含量以及超氧化物岐化酶和髓质过氧化物酶的活性(P<0.05),而对酸性磷酸酶活性和一氧化氮含量无显著影响(P>0.05)。其结果表明,本发明的一种渔用诱食剂对水产动物的免疫机能有增强作用。
另外,由图2可知,对照组的肠道绒毛长度显著低于诱食剂组(P<0.05)。其结果表明,本发明的一种渔用复合诱食剂有利于保持水产动物肠道完整性和促进肠道健康。
实施例6:渔用复合诱食剂在团头鲂配合饲料中的应用
养殖试验在南京市浦口区南京农业大学水产教学科研基地进行,养殖设施为室内循环养殖系统。试验动物为团头鲂幼鱼,经过暂养后,将160条体格健壮规格整齐的团头鲂幼鱼(50±1.5g)随机分入8个水族箱,每个水族箱20条。养殖试验共设2组,第1组为对照组,第2组为实验组,每组4个重复。对照组饲喂团头鲂商品配合饲料,实验组饲喂对照组饲料并在其中加入实施例1中制备得到的诱食剂,诱食剂占饲料的质量百分比为0.8%。所有饲料由南京帅丰饲料有限公司生产。通过为期8周的养殖试验,统计各组摄食量,试验结果见图3。
由图3可知,在商品日粮中添加本发明的一种渔用复合诱食剂可显著提高团头鲂幼鱼的摄食量(P<0.05)。
实施例7:渔用复合诱食剂在中华绒螯蟹配合饲料中的应用
室外养殖试验在南京市浦口区南京农业大学水产教学科研基地进行,养殖设施为塑料养殖箱(2.0m×1.5m×2.4m)。试验动物为中华绒螯蟹,经过暂养后,将120只体格健壮规格整齐的中华绒螯蟹(35±0.9g)随机分入8个养殖箱,每个水族箱15只。养殖试验共设2组,第1组为对照组,第2组为实验组,每组4个重复。对照组饲喂中华绒螯蟹商品配合饲料,实验组饲喂对照组饲料并在其中加入实施例1中制备得到的诱食剂,诱食剂占饲料的质量百分比为0.8%。通过为期8周的养殖试验,统计各组摄食量,试验结果见图4。
由图4可知,在商品日粮中添加本发明的一种渔用复合诱食剂可显著提高中华绒螯蟹的摄食量(P<0.05)。

Claims (4)

1.渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂在中华鳖养殖中的应用,其特征在于,所述的渔用复合型诱食剂包括如下重量份数的组分:
Figure FFW0000021175220000011
其中,所述的果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物中,果寡糖与地衣芽孢杆菌的质量比为1.5~3∶1~2;其中,地衣芽孢杆菌的菌落数为5×109~7×109CFUg-1
使用周期在8周以上时,所述的渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比为0.5%;使用周期在4~8周时,所述的渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比0.5~1%;使用周期在4周以内时,所述的渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比为1%。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的渔用复合型诱食剂的制备方法如下:
(1)取配方量的甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭、5’-肌苷酸二钠、牛磺酸和果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物混合均匀后备用;
(2)向步骤(1)中所得的混合体系中加入配方量的鱿鱼膏,混合均匀后备用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,步骤(1)中,甜菜碱、二甲基-β-丙酸噻亭、5’-肌苷酸二钠、牛磺酸、果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物在混合前均在65℃下干燥至含水量低于12wt%,再经超微粉碎后过180~200目筛。
4.渔用复合型诱食剂作为饲料添加剂在制备提高中华鳖摄食量、生产性能和免疫力以及改善肠道健康的饲料中应用,其特征在于,所述的渔用复合型诱食剂包括如下重量份数的组分:
Figure FFW0000021175220000021
其中,所述的果寡糖与地衣芽孢杆菌复合物中,果寡糖与地衣芽孢杆菌的质量比为1.5~3∶1~2;其中,地衣芽孢杆菌的菌落数为5×109~7×109CFUg-1
CN201610104835.0A 2016-02-25 2016-02-25 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用 Active CN105724830B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610104835.0A CN105724830B (zh) 2016-02-25 2016-02-25 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610104835.0A CN105724830B (zh) 2016-02-25 2016-02-25 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105724830A CN105724830A (zh) 2016-07-06
CN105724830B true CN105724830B (zh) 2020-08-25

Family

ID=56249421

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610104835.0A Active CN105724830B (zh) 2016-02-25 2016-02-25 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105724830B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106562115A (zh) * 2016-10-26 2017-04-19 宁波大学 海水鱼微生物制剂组合物及其用途
CN106689806A (zh) * 2016-12-05 2017-05-24 浙江海洋大学 一种具有改善弹涂鱼肠道菌群的饲料添加剂及其应用
CN109645257A (zh) * 2019-01-29 2019-04-19 珠海海龙生物科技有限公司 一种提高卵形鲳鲹摄食的饲料用复合诱食剂及其制备方法
CN111642620A (zh) * 2020-07-08 2020-09-11 漯河医学高等专科学校 一种复合型益生菌制剂及其制备方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120101829A (ko) * 2011-03-07 2012-09-17 강원대학교산학협력단 뱀장어용 ep사료
CN104397379A (zh) * 2014-11-06 2015-03-11 天津市晨辉饲料有限公司 一种用于垂钓的鱼饵膨化配合饲料及其制作方法
CN105230981A (zh) * 2015-09-30 2016-01-13 河南科技大学 一种用于提高团头鲂环境适应能力的饲料

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120101829A (ko) * 2011-03-07 2012-09-17 강원대학교산학협력단 뱀장어용 ep사료
CN104397379A (zh) * 2014-11-06 2015-03-11 天津市晨辉饲料有限公司 一种用于垂钓的鱼饵膨化配合饲料及其制作方法
CN105230981A (zh) * 2015-09-30 2016-01-13 河南科技大学 一种用于提高团头鲂环境适应能力的饲料

Also Published As

Publication number Publication date
CN105724830A (zh) 2016-07-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102648739B (zh) 一种冬棚养殖专用的南美白对虾配合饲料及其制备方法
CN102450518B (zh) 红膏蟹配合饲料及其制备方法
CN101411388B (zh) 凡纳滨对虾三疣梭子蟹混养用生态饵料及其制备方法
CN101611764A (zh) 一种复合水产诱食剂
CN105724830B (zh) 一种渔用复合型诱食剂及其制备方法与应用
CN107529411B (zh) 一种拟穴青蟹软壳蟹的配合饲料及其制备方法
CN103211120A (zh) 胡子鲶生态型饲料
CN104012779A (zh) 一种可增强鱼虾蟹免疫能力的免疫制剂的制备方法及应用
CN101156650A (zh) 黄鳝幼鱼膨化颗粒配合饲料
CN102524578B (zh) 一种龟用饲料及其制备方法
CN101156652B (zh) 黄鳝成鱼膨化颗粒配合饲料
CN108771047A (zh) 一种锦鲤诱食饲料
CN105231095A (zh) 一种青虾幼虾复合诱食剂及其制备方法和青虾配合饲料
CN101480231A (zh) 一种军曹鱼复合诱食剂
CN103875920A (zh) 具有肠道保护功效的大黄鱼饲料添加剂及其制备方法和应用
CN104206822B (zh) 一种高效复合诱食促长添加剂及其制备和应用
CN102524597A (zh) 一种克氏螯虾抗应激饲料及其生产方法
EP3378328B1 (en) Use of animal nutrition fortifying agent
CN104171369A (zh) 一种添加桑叶粉和桑枝灵芝下脚料粉的畜禽饲料及其用途
CN103583918B (zh) 一种斑点鳟鲑鱼膨化饲料的配方及生产方法
CN101156651A (zh) 黄鳝稚鱼膨化颗粒配合饲料
JP4854226B2 (ja) 飼料用添加物
CN103734490B (zh) 一种三疣梭子蟹幼体培育饲料
CN105707468B (zh) 一种提高无鱼粉罗氏沼虾饲料适口性的诱食剂
CN101480229A (zh) 一种卵形鲳鲹用复合诱食剂

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant